Az echinacoside elősegíti az emberi vese tubuláris epiteliális sejtjeinek proliferációját azáltal, hogy blokkolja a HBX / TREM2 által közvetített NF-κB jelátviteli útvonalat

Kapcsolattartó: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

YuFan ZHanG , QinFanG Wu , liMin ZHonG , donGWei GonG

Elvont.

Hepatitis B vírus X (HBX) fehérje szükséges a HBV replikációjához, és szerepet játszik a hepatitis progressziójában az emberekben. A HBX mögöttes funkciója azonban a HBV által kiváltott krónikus glomerulonefritisz (HBV-Gn) során nem ismert. (echinacoside a cistanche-ból)Az ecH) a Cistanche nemzetségből származó fenil-etánoid-glikozid, amely erős antiapoptosissal és neuroprotektív tevékenységgel rendelkezik. ebben a vizsgálatban a HBX funkciója, valamint a HBX és az ecH közötti kapcsolat humán vese tubuláris epiteliális sejtekben (rTecs; HK-2 sejtvonal) feltárták. reverz transzkripciós-kvantitatív Pcr és western blot analíziseket használtunk a HBX mRNS- és fehérjeexpressziós szintjének számszerűsítésére HK-2 sejtekben. A sejtszámláló Kit-8 vizsgálatot a sejtproliferáció elemzésére végeztük. Az áramlási citometriás analízist használtuk az apoptózis sebességének meghatározására. A HBX antiproliferatív és proapoptotikus hatásokat mutatott a HK-2 sejtekben, és pozitívan kapcsolódott a mieloid sejt 2 (TreM2) expresszióján expresszióban expresszálódó receptorhoz. Ezenkívül az ECH megzavarta a HBX működését a HK-2 cellákban, HBX szuppresszorként működve. Ezenkívül egy speciális NF-κB inhibitort, a PdTc-t használtuk a HBX és az nF-κB közötti kapcsolat további vizsgálatára. Az eredmények arra utaltak, hogy az nF-κB részt vett a HBX/TreM2 jelátviteli útvonalban és negatívan szabályozott TreM2 expresszióban az RTECS-ben. Ez a tanulmány újszerű betekintést nyújtott a HBX funkciójába, és jelezte az ECH potenciális értékét is, mint a HBV-Gn terápiás szerét.

Bevezetés

A hepatitis B vírus (HBV) egy Hepadnaviridae vírus, amely akut és krónikus hepatitiszhez vezet az emberekben (1). A HBV nemcsak tartós vagy átmeneti fertőzést okoz a májban, hanem megfertőzi az extrahepatikus szöveteket is, beleértve a hasnyálmirigyet, az epevezetéket, a limfoid rendszert és a veséket (2). Ezenkívül a HBV-fertőzés szorosan kapcsolódik a krónikus glomerulonefritiszhez (HBV-Gn); a HBV molekuláris mechanizmusai azonban a HBV-Gn során nem teljesen ismertek (3,4).

HBV szabályozó hepatitis B vírus X (HBX) fehérje szükséges a HBV replikációhoz (5,6). számos tanulmány számolt be arról, hogy a HBX elősegíti a sejtek proliferációját a HBV fertőzéssel összefüggő hepatokarcinóma (7-9) során. A humán vese tubuláris hámsejtek (rTecs) a vese tubuláris interstitiumának jelentős részét képezik, és aktív szerepet játszanak a vesegyulladásban (10). az rTec apoptózis szorosan kapcsolódik a cső alakú interstitium diszfunkciójához, ami később a HBV-Gn progressziójához vezet (10). A HBX elsősorban rTec sejtekben expresszálódik, és rTec apoptózist és vesecső elváltozásokat okoz HBV-Gn-ben szenvedő betegeknél (11,12). Ezenkívül a HBX-ről azt jelentették, hogy elnyomja a patkány rTec-ek proliferációját (13), és a HBX túlexpresszió felgyorsítja a sejtciklus előrehaladását G1-ről S fázisra primer rTek-ekben, ami sejtciklus-letartóztatáshoz vezet az S fázisban (14). Ezért a HBX-gátló azonosítása új terápiát biztosíthat a HBV-Gn számára. A HBX pontos molekuláris hálózata azonban az emberi rTec-kben nem teljesen ismert.(echinacoside a cistanche-ból)az ecH) egy természetes vegyület, amelyet a következőből vonnak ki:Cistanchenövények, amelyek antiapoptotikus és gyulladáscsökkentő hatásokat mutatnak (15,16). Egy korábbi tanulmány arról számolt be, hogy az ecH indukálja a proliferációt és megakadályozza a bélhámsejtek apoptózisát (17). Továbbá arról számoltak be, hogy az ecH felgyorsítja a csontok regenerálódását azáltal, hogy növeli az osteoblast sejtek proliferációját (18). Az ecH csökkentheti a HBV replikációt, az antigén expressziót és a gyulladást patkánybél epiteliális sejtekben (16,19). Az ecH rTec-re gyakorolt biológiai hatása azonban nem tisztázódott teljesen.

A TreM2 túlexpresszió elősegítette a glioma sejtek proliferációját (22). Ezzel szemben a TreM2 leütés csökkenti az nF-κB transzlokációját a magba a degeneratív emberi mag pulposus sejtekben (23). Ezenkívül a TreM2-t az emberi csigolyák közötti porckorong degeneráció új terápiás célpontjaként azonosították (23). A TreM2 biológiai funkciójáról azonban az emberi rTec-ekben nem számoltak be. ebben a vizsgálatban a HBX túlexpressziót (oeHBX) indukáltuk humán rTek-ekben (HK-2 sejtvonal), majd ezt követően az ecH(echinacoside a cistanche-ból) transzfektált oeHBX sejteket vizsgáltunk. Jelen tanulmány célja a HBX funkcióinak és az ecH mint a HBV-Gn hatékony terápiás szere potenciális értékének vizsgálata volt.

Anyagok és Módszerek

Sejt kultúra.A HK-2 humán rTec sejtvonalat a Shanghai Yaji Biotechnology Co., Ltd.-től vásárolták, a HK-2 sejteket DME /F12 médiában tenyésztették (cat. no. SH30023.01B; Kötőszó; cytiva) 10% magzati szarvasmarha szérummal kiegészítve (kb. 16000-044; Gibco; Thermo Fisher Scientific, Inc.), 2 mM l-glutamin és 1% penicillin/streptomicin (kat. sz. P1400-100; Peking Solarbio Science & Technology co., Ltd.) 37°C-on, 5% CO2-vel.

RNA Izoláció és ellentét transzkripció-kvantitatív PCR (RT-qPCR).Az összes rnát kivontuk a HK-2 sejtekből Trizollal® (kb. 1596 -026; Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, inc.), a gyártó protokollja szerint. A teljes RNS-t fordítottan átírtuk cDNS-be a First-Strand cDNA Synthesis készlet segítségével a gyártó protokolljának megfelelően (cat. no. K1622; Thermo Fisher Scientific, Inc.). A qPCR-t SYBr-Green premix segítségével végeztük a gyártó protokolljának megfelelően (cat. no. K0223; Thermo Fisher Scientific, Inc.) egy ABI-7300 valós idejű detektoron (Applied Biosystems; Thermo Fisher Scientific, Inc.). A PCR feltételei a következők voltak: 95 °C 10 percig, majd 40 ciklus 95 °C-on 15 másodpercig, 60 °C 45 másodpercig. Minden reakcióhoz három ismétlésre volt szükség. A qPCR-hez a következő primer párokat használtuk: HBX előre, 5'-GGcTGcTaGGTTGTGTGTGTG-3' és hátramenetben, 5'-caGaGGTGaaGcGaaGTG -3'; TreM2 előre, 5'-TGGcacTcTcTcaccaTTacG-3' és hátra, 5'-ccTccc aTcaTcTccTtccTcac-3'; és GaPdH előre, 5'-AAT cccaTcaccaTcTTc-3' és fordított, 5'-aGGGcTGTTG TcaTacTTc-3'. Az mRNS szintjét a 2-ΔΔCq módszerrel számszerűsítettük és a belső referenciagénre normalizáltukGAPDH(24).

Túlkifejezés és szétszedhető.A HBX és a TreM2 túlexpressziójának kiváltására a teljes hosszúságú HBX vagy TreM2 cDNS szekvenciákat kettős emésztéssel illesztettük be a plVX-puro vektorba (cleantech laboratories, inc.) (Hátsóiii ésÖkori). Ezt követően a rekombinált plazmidot (1,5 μg) HK-2 sejtekké (2x105) transzfektáltuk. A gúnyos plazmidot (egy üres vektor, 1 μg) átmenetileg transzfektáltuk HK-2 sejtekké (2x105) negatív kontrollként (oenc) lipofectamin® 2000 felhasználásával (kb. 11668-027, Invitrogen, Thermo Fisher Scientific, inc.). ecH(echinacoside a cistanche-ból)(kb. 82854-37-3; Biopurify Phytochemicals, Ltd.) dmso-ban oldódott fel (cat. no. d2650; Szigma-Aldrich; Merck KGaa) 1, 2,5, 5, 10, 20 koncentrációban és

50 mg/l; és hozzáadják a transzfektált oeHBX vagy oeTreM2 sejtek tenyészetéhez. Az ezt követő kísérletezés 48 órával később kezdődött.

A TreM2 expressziójának lerombolására három kis interferáló (si)RNA-t (siTreM2-1, siTreM2-2 és siTreM2-3; 20 μM) szintetizáltak a TreM2-t célzó (Shanghai Majorbio Bio-Pharm Technology co. ltd.), majd a gyártó protokollja szerint (® Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.). Negatív kontrollként egy nem specifikus scrambled siRNS szekvenciát (5'uucuccGaacGuGuGucacGu3, 25 nM) si-negatív kontrollt (nc) használtunk. A TreM2 sirnák célzott helyét és szekvenciáit a Si táblázat tartalmazza. Az ezt követő kísérletezést 48 órával később végeztük.

Nyugati blotting.Az összes fehérjét kivontuk a HK-2 sejtekből

RIPA lízispuffer használatával (cat. no. BYl40825; Jrdun Biotech Co., Ltd.). Az összes fehérjét a bicinkonsav-vizsgálati készlettel számszerűsítettük (cat. no. PICPI23223; Thermo Fisher Scientific, inc.) a gyártó protokollja szerint és a 20 μg fehérjét/sávot SDS-PaGe-n keresztül választották el egy 15%-os gélen. A minták denzitometriáját mikrolemez-olvasóval (dnM-9602, Pulangxin) határoztuk meg. Ezt követően az elválasztott fehérjéket egy PVDF membránra vittük. Miután szobahőmérsékleten 1 órán keresztül 5%-os zsírmentes tejporral blokkoltuk, a membránt egy éjszakán át 4°C-on inkubáltuk primer antitestekkel (SII táblázat), majd újra inkubáltuk a másodlagos anti-egér igG-vel (1:1 000, macskaszám). a0216, Beyotime Biotechnológiai Intézet) 1 órán át 37 °C-on. Az immunreaktív fehérjesávokat ecl rendszerrel (cytiva) vizualizáltuk. A blotokat háromszor végezték el.GAPDHés a H3-at a citoplazmatikus, illetve a nukleáris fehérjék terhelésszabályozásaként használták.

Eredmények

ECH (echinacoside a cistanche-ból)Elnyomja a függvény ból HBX ban HK-2-2-höz Sejtek.Értékelés

a HBX, HBX túlexpresszió függvényét indukáltuk a HK-2 sejtekben. A HBX relatív mrna- és fehérjeszintje szignifikánsan emelkedett az oeHBX sejtekben az oenc sejtekhez képest (1a. és B. ábra). Ezt követően az oeHBX sejteket különböző ecH koncentrációkkal tenyésztettük (1, 2,5, 5, 10, 20 és 50 mg/l; e1, e2,5, e5, e10, e20 és e50). A HBX túlexpresszió jelentősen csökkentette a HK-2 sejtek proliferációját, és ezt a csökkenést az ecH dózisfüggő módon fordította vissza 24 és 48 óra sebességgel (1c. ábra).

Ezenkívül az oeHBX sejtek proliferációs sebessége nem mutatott szignifikáns különbséget az E1-gyel kezelt sejtekhez képest (1c. ábra). Ezzel szemben az e10 kezelés jelentősen megnövelte az oeHBX sejtek proliferációs sebességét az E20 és E50 kezeléshez képest, amely nem mutatott szignifikáns különbséget (1c ábra). Ezért az ecH apoptózisra gyakorolt hatását e2.5, e5 és e10-kezelt sejtekben vizsgáltuk. A HBX over-expresszió szignifikánsan növelte a HK-2 sejtek apoptózisát, és az oeHBX sejtek apoptózisának sebessége csökkent az ecH-kezeléssel dózisfüggő módon (1d. ábra). összességében az eredmények azt sugallták, hogy az ecH dózisfüggő módon gátolta a HBX működését a HK-2 sejtekben.

TREM2 kifejezés van Gátolja mellett ECH(echinacoside a cistanche-ból) ban transzfektált oeHBX

Sejtek.az rT-qPcr-t és a western blottingot használtuk a TreM2 relatív mrna és fehérje expressziós szintjének vizsgálatára az oeHBX sejtekben. A TreM2 mrna és fehérje expresszió szintje jelentősen emelkedett az oeHBX sejtekben az oenc sejtekhez képest (2a. és B ábra). Az ecH azonban dózisfüggő módon csökkentette a TreM2 expressziós szintjét transzfektált oeHBX sejtekben (2a. és B ábra). Ezért az eredmények azt sugallták, hogy a HBX expresszió pozitívan kapcsolódik a TreM2 expresszióhoz, és tovább jelezte az ecH HBX-re gyakorolt szuppresszív hatását a HK-2 sejtekben.

Szétszedhető és túlexpresszió ból TREM2 ban HK-2-2-höz Sejtek.A TreM2 működésének további értékeléséhez TreM2 leütést és túlexpressziót indukáltunk HK-2 sejtekben rns interferencia és lentivirális vektor segítségével. A leütéses vizsgálathoz három, az emberi gént célzó siRNS-t céloz megTREM2(siTreM2-1, siTreM2-2 és siTreM2-3) transzfektáltunk HK-2 sejtekbe, és negatív kontrollként (sinc) egy nem specifikus siRNS-t használtunk. mindhárom TreM2 szirna sikeresen leütötte a TreM2 endogén expresszióját a HK-2 sejtekben (3a. és B ábra). A legalacsonyabb relatív TreM2 mrna és fehérje expressziós szinteket azonban siTreM2-1 és siTreM2-2-transzfektált sejtekben (3a. és B ábra) figyelték meg, ezért a siTreM2-1 és a siTreM2-2-transzfektált sejteket választottuk a későbbi kísérletekhez. A túlexpressziós kísérletekhez egy plazmidot hoztunk létre, amely a teljes hosszúságú humán TreM2cdna szekvenciát tartalmazza, majd HK-2 sejtekké transzfektáltuk (oeTreM2). egy

a gúnyos plazmid negatív kontrollként (oenc) szolgált. A TREM2 expresszió szintje szignifikánsan megemelkedett az oeTREM2 sejtekben az oenc sejtekhez képest (3c. és d ábra). Ezért az oeTreM2 sejteket használtuk a későbbi kísérletekhez.

TREM2 Hangtompító Csökken a apoptózis ból oeHBX Sejtek.A siTREM2-vel vagy sinc-vel transzfektált oeHBX sejtek apoptózis profilját értékeltük. Az oeHBX + sinc sejtek apoptózisának aránya szignifikánsan magasabb volt a nyitott sejtekhez képest. Az apoptózis aránya azonban szignifikánsan csökkent az oeHBX + siTreM2-1 vagy siTreM2-2 sejtekben az oeHBX + sinc sejtekhez képest (4a ábra). Az eredmények arra utaltak, hogy a TreM2 leütés gátolta a HBX működését a HK-2 sejtes apoptózis során.

A survivin egy apoptózis fehérjecsalád inhibitorához tartozik, amely gátolja az apoptotikus aktivitást és elnyomja a sejthalált (25). A Survivin megcélzását a vesesejtes karcinóma kezelésének újszerű megközelítéseként azonosították (26). Az nF-κB szintén apoptózis inhibitor, amely szerepet játszik az antiapoptotikus tumoros folyamatokban (27). Továbbá a kaszpáz3 aktiváció szorosan összefügg az apoptózissal (28). ebben a vizsgálatban számszerűsítettük a TreM2, a Survivin és a hasadt kaszpáz3 fehérjetartalmát hK-2 sejtekben. A TREM2 expresszió szintje szignifikánsan csökkent az oeHBX + siTreM2-1/2 sejtekben az oeHBX + sinc sejtekhez képest (4B ábra). A Survivin expresszió szintje szignifikánsan megemelkedett az oeHBX + siTreM2-1/2 sejtekben az oeHBX sejtekhez képest. ezenkívül a hasított kaszpáz3 expresszió szintje szignifikánsan csökkent az oeHBX + siTreM2-1/2 sejtekben az oeHBX + sinc sejtekhez képest (4B ábra). Ezenkívül az oeHBX jelentősen csökkentette az NF-κB transzlokációját a magba, és a siTREM2-1/2 transzfekció jelentősen növelte az nF-κB nukleáris transzlokációt (4B ábra). Összességében az eredmények azt sugallták, hogy a TreM2 a HBX downstream tényezője a HK-2 sejtekben, ezért a HBX elősegítheti az apoptózist azáltal, hogy szabályozza a TreM2 expresszióját az emberi rTec-kben.

TREM2 túlexpresszió Elnyomja a áthelyezés bólNF-nek-κB hoz a mag ban HK-2-2-höz Sejtek.Az ecH hatása(echinacoside a cistanche-ból)az oeTreM2-transzfektált sejteket elemeztük. A TreM2 túlexpresszió elősegítette a HK-2 sejtek apoptózisát (5a ábra). Az oeTREM2 sejtek apoptózisát jelentősen csökkentették az ECH-kezelés (E10; 5A ábra). Ezenkívül az ECH jelentősen csökkentette a TreM2 expresszióját az oeTreM2 sejtekben. A TREM2 túlexpressziója jelentősen csökkentette a Survivin expressziós szintjét, azonban ezt a kifejezéscsökkenést az ecH fordította meg. ezenkívül a hasított kaszpáz3 fehérje expressziós szintje jelentősen megemelkedett az oeTreM2 sejtekben az oenc sejtekhez képest; olyan hatás, amelyet az ECH-kezelés jelentősen csökkentett. Továbbá az ecH elősegítette az nF-κB transzlokációját az oeTreM2 sejtek magjába (5B ábra). Összességében az eredmények azt mutatták, hogy az ecH elnyomta a TreM2 működését az emberi rTec sejtekben is.

HBX-funkciók van elfojtott mellett a NF-nek-κB Gátló PDTC-kódban emberi RTEC-k.A következők közötti kapcsolat további értékelése:

A HBX és nF-κB, HK-2 sejteket specifikus nF-κB inhibitorral, PdTc-vel (10 μmol/l; P10. pont). Az oeHBX sejtek sejtes apoptózisának sebessége szignifikánsan megnőtt az oenc sejtekhez képest (6a ábra). Az oeHBX + PdTc sejtek azonban szignifikánsan megnövekedett apoptózis arányt mutattak az oeHBX sejtekhez képest. Ezenkívül a TreM2 relatív mRNS- és fehérjeexpressziós szintje csökkent az oeHBX + PdTc sejtekben az oeHBX sejtekhez képest (6B. ábra). Ezért az eredmények

azt javasolta, hogy az nF-κB negatívan szabályozza a TreM2 expressziót az oeHBX-transzfektált sejtekben.

NF-nek-κB Gátló PDTC-kód Elnyomja TREM2 Promoter tevékenység ban oeHBX Sejtek.egy luciferáz riportert (pGl3-enhancer-luc2), amely a TreM2 (pGl3-enhancer-luc2-pTreM2) vad típusú promóter szekvenciáját tartalmazza, felépítettük, majd oenc , oeHBX és oeHBX + P10 tenyésztett sejtekké transzfektáltuk.

A vad típusú TREM2 promotert tartalmazó riportervektor luciferáz aktivitása szignifikánsan megnövekedett az oeHBX sejtekben az oenc sejtekhez képest. A PdTc azonban szignifikánsan elnyomta a riporter luciferáz aktivitását az oeHBX sejtekben (7. ábra). összességében az eredmények azt mutatták, hogy a PdTc gátolta a TreM2 transzkripcióját azáltal, hogy elnyomta a TreM2 promóter aktivitását az oeHBX sejtekben.

Megbeszélés

A HBX elsősorban hBV-Gn-ben szenvedő betegek rTec-jeiben expresszálódik, és a vírus patogenezis meghatározójaként működik (11,29). Ezért a HBX molekulahálózat funkciójával kapcsolatos ismeretek bővítése kritikus lépés a HBV-Gn kezelésére szolgáló új megközelítés kidolgozásában. A jelen tanulmány célja a HBX funkciójának további vizsgálata és az emberi rTek potenciális molekuláris hálózatának feltárása volt.

A HBX gátolja az rTec-ek proliferációját (11). ebben a tanulmányban azonosították a HBX antiproliferációs és pro-apoptosis funkcióit humán RTEC-kben, ami arra utal, hogy a HBX elnyomta a humán rTec-ek fejlődését.egy korábbi tanulmány kimutatta, hogy az ecHX(echinacoside a cistanche-ból)gátolja a HBV replikációt és az antigén expressziót (19). ebben a tanulmányban az ecH(echinacoside a cistanche-ból)a kezelés megzavarta a HBX működését a HK-2 sejtekben, ezért a HK-2 sejtekben az ecH befolyásolhatja a HBX-et.

Molekuláris orvostudomány rePorTS 22: 1137-1144, 2020 1143

Továbbá az eredmények azt sugallták, hogy az ecH(echinacoside a cistanche-ból)potenciális terápiás szerként szolgálhat a HBV-Gn számára.

A TreM2 egy veleszületett immunreceptor, amely szerepet játszik a gyulladásos válaszban (30). Ebben a vizsgálatban a HBX expresszió pozitívan társult a TreM2 expresszióhoz humán RTECS-ben. Ezenkívül a TREM2 leütése jelentősen csökkentette az oeHBX sejtek és az ecH Apoptosis arányát(echinacoside a cistanche-ból)a kezelés csökkentette az oeTreM2 hatását a sejt apoptózisra. Összességében ezek az eredmények azt sugallták, hogy a TreM2-t a HBX célozta meg a HK-2 sejtekben. Ezért az ecH(echinacoside a cistanche-ból)gátolhatja a humán rTec-ek apoptózisát a HBX/TreM2 jelátviteli útvonal aktivitásának blokkolásával.

Egy korábbi jelentés kimutatta, hogy az nF-κB nemcsak a sejt apoptózisban játszik szerepet, hanem az immunválaszok és a gyulladás szabályozásában is részt vesz (31). Ezenkívül a TreM2-t az nF-κB-érzékeny mikroRNS-34a közvetíti Alzheimer-kór és makula degeneráció idején (32,33). ebben a vizsgálatban az oeHBX sejtek apoptotikus sebessége szignifikánsan megnövekedett PdTc jelenlétében . Legjobb tudomásunk szerint ez a tanulmány először javasolta, hogy az NF-κB inhibitor PdTc elnyomta a TreM2 promóter aktivitását. Ezenkívül az eredmények azt sugallták, hogy a TreM2 negatívan szabályozta az nF-κB transzlokációját a HK-2 sejtek magjába, de pozitívan kapcsolódott a hasított kaszpáz3 expressziós szintekhez. A TreM2 ellentétes szerepet játszott a HK-2 sejtekben, mint az emberi degeneratív mag pulposusban és a glioma sejtekben betöltött szerepe (22,23). Ezért ez a tanulmány azt sugallta, hogy a TreM2 különböző funkciókkal rendelkezhet a különböző típusú emberi sejtekben.

Összességében a jelenlegi tanulmány nemcsak azt jelezte, hogy az nF-κB a HBX/TreM2 jelátviteli útvonal új összetevője volt, hanem azt is sugallta, hogy az nF-κB negatívan szabályozza a TreM2 expressziót humán rTec-ekben. A jelen tanulmány fő korlátai azonban a következők hiánya voltak:ban Vivokísérletek és klinikai adatok. Ezért továbbban Vivoés klinikai vizsgálatokra van szükség a jelen vizsgálat eredményeinek megerősítéséhez.

ebben a tanulmányban az ecH funkciója(echinacoside a cistanche-ból)vizsgálták, és az eredmények az ecH lehetséges hatásait sugallták(echinacoside a cistanche-ból)az emberi rTec-ek jelátviteli útvonalain. Ezenkívül ez a tanulmány bővítette az ecH humán rTec sejtekben betöltött biológiai funkciójával kapcsolatos meglévő ismereteket, és azt is felvetette, hogy a HBV-Gn új terápiás szereként rejlik.

Hivatkozások

1. Karayiannis P: Hepatitis B vírus: virológia, molekuláris biológia, életciklus és intrahepatikus terjedés. Hepatológia nemzetközi 11: 1-9, 2017.

2. Seeger c és Mason WS: Hepatitis B vírusbiológia. Microbiol Mol Biol rev 64: 51-68, 2000.

3. Usama e , ana Maria S, W ray K és Fervenza Fc: Hepatitis B vírussal összefüggő nephropathia kezelése. nephron clin Pract 119: c41-c49, 2011.

4. Zhang Y, li J, Peng W, Yu G, Wang l , chen J és Zheng F: HBV-vel társult posztinfektus akut Glomerulonefritisz: 10 esetből álló jelentés. PloS one 11: e0160626, 2016.

5. Slagle Bl és Bouchard MJ: Hepatitis B virus X és a vírusgén expresszió szabályozása. hideg tavasz Harb Perspect Med 6: a021402, 2016.

6. Guerrieri F, Belloni l , d'andrea d, Pediconi n, le Pera l , Testoni B, Scisciani c, Floriot o, Zoulim F, Tramontano a,et al: Közvetlen HBx genomiális célpontok genomiális szintű azonosítása. BMc genomika 18: 184, 2017.

7. Shi T, Hua Q, Ma Z és lv Q: A hepatitis B vírus X (HBx) fehérje által indukált mir-200a-3p leszabályozása elősegíti a sejtek proliferációját és invázióját a HBV-fertőzéssel összefüggő hepato-karcinómában. Pathol res Pract 213: 1464-1469, 2017.

8. Tian Y, Xiao X, Gong X, Peng F, Xu Y, Jiang Y és Gong G: A HBx elősegíti a sejtek proliferációját azáltal, hogy megzavarja a mir-181a és a PTen közötti keresztbeszélgetést. Sci rep 7: 40089, 2017.

9. Idris Me, Hachem H, Koering c , Merle P, Thénoz M, Montreux F és Wattel e: A HBx sejtes öregedést vagy sejtproliferációt vált ki a sejtfenotípustól függően. J Vírusos Hepat 23: 130-138, 2016.

10. Wang X, Wang l , Zhu n, Zhou Y, Gu lJ és Yuan WJ: A Hepatitis B vírus X fehérje modulálja a vese tubuláris epiteliális sejt által kiváltott T-sejt és makrofág válaszokat. Immunol sejt Biol 94: 266-273, 2016.

11. He P, Zhang d, li H, Yang X, li d, Zhai Y, Ma l és Feng G: Hepatitis B vírus X fehérje modulálja az apoptózist az emberi vese proximális tubuláris epiteliális sejtjeiben a JaK2/STaT3 jelátviteli útvonal aktiválásával. int J Mol Med 31: 1017-1029, 2013.

12. Yang Y, Wang X, Zhang Y és Yuan W: Hepatitis B vírus X fehérje és proinflammatorikus citokinek szinergizálnak, hogy fokozzák a vese tubuláris sejtjeinek Trail által kiváltott apoptózisát a dr4 upregulációjával. int J Biochem sejt Biol 97: 62-72, 2018.

13. He P, Zhou G, Qu d, Zhang B, Wang Y és li d: A HBx gátolja a proliferációt és apoptózist indukál a Fas/Fasl upreguláció révén patkány vese csöves epiteliális sejtekben. J nephrol 26: 1033, 2013.

14. Han W, luo M, He M, Zhu Y, Zhong Y, ding H, Hu G, liu l , chen Q és lu Y: A HBx gén transzfekciója befolyásolja az elsődleges vesecső epiteliális sejtek ciklusát a ciklin expresszió szabályozásával. Mol Med rep 18: 1947-1954, 2018.