Négy fenil-etanol-glikozid neuroprotektív hatása a H2O2-PC12-sejteken a Nrf2/ARE útvonalon keresztül kiváltott apoptózisára

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Maiquan Li 1, Tao Xu 1, Fei Zhou 1, Mengmeng Wang 1, Huaxin Song 1, Xing Xiao és Baiyi Lu 1,*

1. Bemutatkozás

Az oxidatív stressz, amely az antioxidáns homeosztázis egyensúlyhiánya, lipidperoxidációt, fehérje- és DNS-károsodást, sejtöregedést és sejthalált indukál. Ez a folyamat valószínűleg számos neurodegeneratív rendellenességhez járul hozzá, mint például az Alzheimer-kórhoz (AD), a Parkinson-kórhoz (PD) és az ischaemiához/reperfúzióhoz [1]. A hidrogén-peroxid (H2O2), amely az egyik fő reaktív oxigénfaj (ROS), lipid-peroxidációt és DNS-károsodást okoz [2]. Ezenkívül a H2O2 a hidroxil-szabad gyökök endogén forrása, amely hozzájárul a celluláris oxidatív stressz háttérszintjéhez [3,4]. Ezért az oxidatív stressz által kiváltott apoptózis megelőzésére szolgáló terápiás stratégiák potenciállal rendelkeznek a neurodegeneratív betegségek kezelésében.

A nukleáris faktor eritroid 2-kapcsolódó 2. faktora (Nrf2) egy olyan transzkripciós faktor, amely erősen kapcsolódik az oxidatív stresszhez. Az Nrf2 aktiválása számos antioxidáns és méregtelenítő gén transzkripcióját idézi elő, köztük a hem oxigenáz-1 (HO-1), a NAD(P)H kinon-oxidoreduktáz 1, gyulladáscsökkentő [13] és immunmoduláló gén [14]. ] bioaktivitások. Az Osmanthusfragrans számos ázsiai étel gyakori összetevője, és régóta fogyasztják. Korábban kimutattuk, hogy az O. fragrans virágkivonatok javítják a térbeli tanulást és a memóriát, gátolják az oxidatív károsodást, és neuroprotektív aktivitást mutatnak a d-galaktóz által kiváltott öregedésben egy ICR egérmodellben [15]. A szalidrozid, az akteozid és az izoakteozid a fő PhG-válasz az O. fragrans virágkivonatok antioxidáns aktivitására [16].

A PhG-k neuroprotektív hatásával kapcsolatos vizsgálatok kívánatos eredményeket értek el. A szalidrozid szignifikánsan csökkentette az MPP pluszban exponált PC12 sejtek sejtapoptózisát [17,18]. Az akteozid enyhítette az MPP plusz által kiváltott apoptózist és oxidatív stresszt is PC12 sejtekben [19], valamint az A p25-35- által kiváltott SH-SY5Y sejtkárosodást [20]. Az echinakozidot tumor nekrózis faktor-a (TNFa) által kiváltott apoptózison vizsgálták SH-SY5Y sejtekben [21], MPTP-indukálta dopaminerg toxicitáson egerekben [22], glutamáttal károsodott patkány kérgi sejtek primer tenyészeteiben [23] és { {19}}OHDA által kiváltott károsodás PC12 sejtekben [24]. Az eredmények azt mutatták, hogy a PhG-k citoprotektív hatást mutatnak, és potenciális szerek a neurodegeneratív betegségek kezelésében. Tanulmányok kimutatták, hogy a PhG-k antioxidáns tulajdonságai sok más biológiai aktivitás hátterében állnak ezeknek a vegyületeknek [25]. Azonban kevés tanulmány vizsgálta a PhG-k oxidatív toxicitás elleni molekuláris mechanizmusát.

Vizsgálatunkban négy tipikus PhG-t választottunk ki az alábbiak szerint: szalidrozid (feniletanoid-monoszacharidok), akteozid (fenil-etanoid-diszacharidok), izoakteozid (fenil-etanoid-disacharidok) és echinakozid (fenil-etanoid-triszacharidok). Differenciált PC12 sejteket [26] használó neuronhalál modellt alkalmaztunk, hogy megvizsgáljuk a PhG-k védő hatását és molekuláris mechanizmusát a H2O2-indukált PC12 sejtmodellben. Kimutattuk, hogy a PhG-k a Kelch-szerű ECH-asszociált protein 1-hez (Keap1) kötődve aktiválták a Nrf2/ARE útvonalat. Ez a folyamat megnövelte az antioxidáns enzimek működését, és növelte a PC12 sejtek oxidatív stresszel szembeni rezisztenciáját.

A neurodegeneratív betegségek kezelése:PhG-k a cistanche-tól

2. Eredmények

2.1. PhG-k elnyomták a H2O2-indukált citotoxicitást PC12-sejtekben

A H2O2 és a PhG-k (0.1, 1,5 és 10 卩g/mL) PC12 sejtekre gyakorolt ​​citotoxikus hatását teszteltük. Az eredmények azt mutatták, hogy a H2O2 koncentráció- és időfüggő módon csökkentette a PC12 sejtek életképességét (1A. ábra). A PC12-sejtek 200 H2O2-nak való kitétele 2 órán keresztül 57,4 százalékos sejtek életképességét eredményezte. A sejtek 0,1, 1, 5 és 10 昭/ml koncentrációjú PhG-ekkel történő előkezelése nem volt hatással a sejtek életképességére (1B. ábra), és jelentősen megvédte a PC12 sejteket a H2O2-indukált károsodástól azáltal, hogy javította a sejt életképessége 9.549-22.141 százalék , 12.092-25.289 százalék , 1.470-9.289 százalék , illetve 3.411-11.441 százalék ( 1C. ábra). A salidrosid (0,1 μg/ml), izoakteozid (0,1, 1, 5 és 10 μg/ml), echinakozid (0,1, 1 és 5 μg/ml) előkezelés azonban nem mutatott szignifikáns különbséget a HzOz-indukált sejtben sérülés. A sejtek PhG-kkel történő előkezelése szintén javította a H2O2 által kiváltott morfológiai jellemzőket (1D. ábra).

1.ábra.A PhG-k elnyomták a H2O2-indukált citotoxicitást PC12 sejtekben. A sejtek életképességét MTT vizsgálattal mutattuk ki. H2O2 (A) és PhGs (B) citotoxikus hatása különböző koncentrációkban PC12 sejteken. (C) A PhG-k gyengítették a H2O2-sejtek életképességének csökkenését. A PC12 sejteket PhG-vel (0,1 és 10 mg/ml) 24 órán át inkubáltuk, majd további 2 percig 200 pM H2O2-vel inkubáltuk. h a PhG-k eltávolítása után. (D) Morfológiai megfigyelés. A kezelés után a sejteket fáziskontraszt mikroszkóppal figyelték meg (100-szor), CK: normál csoport, H2O2: H2O2-val kezelt csoport, HL: kis dózisú salidroziddal kezelt csoport, HH: nagy dózisú salidroziddal kezelt csoport, ML: alacsony dózisú akteoziddal kezelt csoport, MH: nagy dózisú akteoziddal kezelt csoport, IL: alacsony dózisú izoakteoziddal kezelt csoport, IH: izoakteoziddal nagy dózissal kezelt csoport, SL: alacsony dózisú echinakoziddal kezelt csoport, SH: echinakoziddal nagy dózissal kezelt csoport. ** p < 0,01="" a="" kezeletlen="" csoporthoz="" képest;="" #="" p="">< 0,05,="" szemben="" a="" h2o2-val="" kezelt="" csoporttal;="" ##="" p="">< 0,01,="" szemben="" a="" h2o2-val="" kezelt="">

2.2. A PhG-k elnyomták a H2O2-indukált ROS sejten belüli felhalmozódását, lipid-peroxidációt (MDA) és megnövekedett szuperoxid-diszmutáz (SOD) aktivitást a PC12 sejtekben

A PC12-sejtek 200 pM H2O2-nak való kitétele 2 órán keresztül növelte a ROS-szintet, az MDA-tartalmat és csökkentette az SOD-aktivitást (2. ábra). A PhGs előkezelés gyengítette a ROS szintet, a szalidrozidot és az akteozidot, a magas dózisú izoakteozid és echinakozid előkezelés pedig szignifikánsan csökkentette a ROS szintet (p < 0,01).="" a="" szalidrozid="" előkezelés="" nem="" mutatott="" hatást="" az="" mda-tartalomra,="" de="" az="" akteozidos="" előkezelés="" jelentősen="" csökkentette="" az="" mda-tartalmat="" (p="">< 0,05).="" az="" izoakteozid="" és="" echinakozid="" előkezelés="" jelentősen="" csökkentette="" az="">

2. ábra.A PhG-k blokkolták a ROS és az MDA felhalmozódását, és növelték az SOD aktivitását PC12 sejtekben. A PC12 sejteket PhG-vel (0,1 és 10 4g/ml) 24 órán át inkubáltuk, majd további 200 |^M H2O2-vel inkubáltuk. 2 órával a PhG-k eltávolítása után. (A) A PhG-k blokkolták a ROS és az MDA felhalmozódását. (B) A PhG-k blokkolták az MDA felhalmozódását. (C) A PhG-k növelték az SOD aktivitását. CK: normál csoport, Modell: H2O2 kezelt csoport, Salidroside: salidroside kezelt csoport, Acteozid: akteoziddal kezelt csoport, Izoakteozid: izoakteoziddal kezelt csoport, Echinacoside: echinacoside kezelt csoport. ** p < 0,01="" a="" kezeletlen="" csoporthoz="" képest;="" #="" p="">< 0,05,="" szemben="" a="" h2o2-val="" kezelt="" csoporttal,="" ##="" p="">< 0,01,="" szemben="" a="" h2o2-val="" kezelt="">

2.3. PhGs fordított H2O2-indukált apoptózis PC12 sejtekben

A 2 órás H2O2-kezelés (200 |1M) szignifikánsan növelte az apoptózist a PC12 sejtekben, a teljes apoptózis aránya elérte a 16,02%-ot (3. ábra). Azonban a 24 órás PhG-ekkel (0,1 és 10 卩g/ml) végzett előkezelés koncentrációfüggő módon csökkentette az apoptózis sebességét (p < 0,01).="" a="" szalidrozid,="" az="" akteozid,="" az="" izoakteozid="" és="" az="" echinakozid="" jelentősen="" csökkentette="" a="" sejtapoptózis="" százalékos="" arányát="" 4.750-6.627="" százalékkal="" ,="" 4.413-5.800="" százalékkal="" ,="" 6.593-10.047="" százalékkal="" és="" 1.{26}}.510="" százalék="" ,="">

3. ábra. A PhG-k megfordították a H2O2-indukált apoptózist PC12 sejtekben. A PC12 sejteket PhG-kkel (0.1 és 10 卩g/ml) 24 órán át inkubáltuk, majd a kezelés után további 2 órán át 200 pM H2O2-vel inkubáltuk. A PhG-ket eltávolították. Ezután az apoptózist áramlási citometriával mértük PI/FITC fluoreszcens szondával. CK: normál csoport, Modell: H2O2 kezelt csoport, Salidroside: salidroside kezelt csoport, Acteozid: akteoziddal kezelt csoport, Izoakteozid: izoakteoziddal kezelt csoport, Echinacoside: echinacoside kezelt csoport. ** p < 0,01="" a="" kezeletlen="" csoporthoz="" képest;="" ##="" p="">< 0,01,="" szemben="" a="" h2o2-val="" kezelt="">

2.4. A PhG-k megfordították a HO-1, az NQO1, a GCLC és a GCLM fehérjeexpressziójának H2O2-indukált csökkenését

A HO{{0}}, az NQO1 és a glutamát-cisztein ligáz (GCL) fontos celluláris antioxidáns enzimek, a HO-1, NQO1 és a GCL katalitikus vagy módosító alegységei (GCLC vagy GCLM) pedig Nrf{5}}szabályozott downstream gének [27]. A kezelést követően a HO-1, az NQO1, a GCLC és a GCLM fehérje expresszióját figyelték meg. Nyilvánvaló különbséget találtunk a HO-1 és az NQO1 fehérje expressziója között H2O2-vel vagy anélkül (6A-C. ábra) (p < 0.01).="" a="" phg-k="" (0.1="" és="" 10="" p^g/ml)="" megfordították="" a="" ho-1="" fehérje="" expressziójának="" h2o2-indukálta="" lelassulását="" (kivéve="" a="" salidrozidot="" a="" {{32}="" },1="" pg/ml),="" nqo1="" (kivéve="" az="" akteozidot="" 0,1="" pg/ml-nél)="" (p="">< {{40}}.01).="" a="" h2o2="" a="" gclc="" és="" a="" gclm="" fehérje="" expresszióját="" is="" csökkentette="" (p="">< 0.05)="" (6a,="" d,="" e="" ábra).="" a="" phg-k="" (0.1="" és="" 10="" pg/ml)="" megfordították="" a="" gclc="" fehérjeexpressziójának="" h2o2-="" által="" kiváltott="" csökkenését="" (kivéve="" a="" 0,1="" pg/ml-es="" echinakozidot)="" (p="">< 0,01)="" és="" a="" gclm-et="" (kivéve="" a="" 0,1="" pg/ml-es="" salidrozidot)="" (p="">< 0,01).="" ezután="" a="" ho-1="" kémiai="" inhibitorait="" arra="" használták,="" hogy="" tovább="" értékeljék="" az="" antioxidáns="" enzimek="" szerepét="" a="" phg-k="" h2o2-="" által="" kiváltott="" citotoxicitással="" szembeni="" védelmének="" szabályozásában.="" a="" phg-k="" (0,1="" és="" 10="" pg/ml)="" megakadályozták="" a="" h2o2-="" által="" kiváltott="" citotoxicitást,="" de="" ezt="" a="" védőhatást="" a="" ho-1="" inhibitor="" znpp="" (p="">< 0,01)="" megfordította="" 20="" pm="" mellett="" (6f="" ábra,="" p="">< 0,01).="">

2.5. Keap1 kifejezés és molekuláris dokkolás elemzés

Fiziológiás körülmények között a Keap1 a Nrf2 represszor fehérjeként működik azáltal, hogy kötődik az Nrf2 Neh2 doménjéhez, és az Nrf2-t egy Cul3- alapú E3 ubiquitin ligázhoz irányítja, hogy az ubikvitinációt és ezt követő lebontást a 26S proteaszóma által [28] végezze. A PhG-k Keap1-hez való kötődési kapacitását molekuláris dokkolási analízissel értékelték, hogy megvizsgálják az antioxidáns hatásuk mechanizmusát.

Antioxidáns hatás: CistanchePhGs

3. Megbeszélés

Vizsgáltuk a PhG-k neuroprotekcióját a H2O2 által kiváltott citotoxicitáson PC12 sejtekben. Az eredmények azt mutatják, hogy a PhGs előkezelés jelentősen visszaszorította a HzOz által kiváltott citotoxicitást, gyengítette az intracelluláris ROS szintet, javította az intracelluláris antioxidáns enzimek szintjét, és végül megfordította a H2O2- által kiváltott citotoxicitást a PC12 sejtekben. Ezenkívül a PhG-k növelték az Nrf2 transzkripciós aktiválódását, megfordították a HO-1, az NQO1, a GCLC és a GCLM fehérje expressziójának HzOz által kiváltott lelassulását. Ezenkívül a PhG-k potenciális kölcsönhatást mutattak a Keap1 fehérje Nrf2 kötőhelyével.

A H2O2-indukált PC12 sejtkárosodásban a lipidperoxidáció, amely a lipid oxidatív lebomlására utal, megnövelte a membránok permeabilitását, ami sejtkárosodáshoz vezetett [29]. Az MDA képződését széles körben használják a lipidperoxidáció indexeként [30]. A H2O2 fokozta a ROS termelést és kimerítette az antioxidáns védekező enzimeket, mint például a SOD, a kataláz és a GPx. Ez a folyamat oxidatív stresszhez vezet [31], amely kulcsszerepet játszik a legtöbb neurodegeneratív rendellenesség ok-okozati összefüggésében és progressziójában. A korábbi tanulmányokkal összhangban a H2O2 kezelést követően a ROS szintjének növekedését, az intracelluláris antioxidáns enzimek csökkenését és a PC12 sejtek fokozott apoptózisát figyeltük meg. A PhGs előkezelés jelentősen csökkentette az intracelluláris ROS HzOz által kiváltott növekedését, javította az intracelluláris antioxidáns enzimeket, és végül megfordította a HzOz által kiváltott citotoxicitást a PC12 sejtekben.

Kuang et al. [32] arról számolt be, hogy az echinakozid szignifikáns neuroprotektív hatást mutat a H2O2-indukált citotoxicitásra PC12 sejtekben a mitokondriális apoptotikus útvonalon keresztül. Ebben a tanulmányban azt találtuk, hogy az echinacoside, a salidroside, az acteozid és az izoakteozid neuroprotektív hatást fejtett ki a PC12 sejtek antioxidáns aktivitásának fokozása révén, mivel fokozták az Nrf2 transzkripciós aktivációját és felszabályozták a HO-1, NQO1 downstream fehérje expresszióját. GCLC és GCLM. Számos tanulmány egyértelműen bebizonyította, hogy a Nrf2 célgének, különösen a HO-1 aktiválása asztrocitákban és neuronokban erősen véd a gyulladástól, az oxidatív károsodástól és a sejthaláltól. A HO-1 rendszerről beszámoltak arról, hogy nagyon aktív a központi idegrendszerben, és modulációja láthatóan döntő szerepet játszik a neurodegeneratív rendellenességek patogenezisében [33]. A legújabb tanulmányok azt is tisztázták, hogy az Nrf2 szerepet játszik a PD progressziójában és kockázatában [9], valamint a Keap1, mint hatékony célpont az Nrf2 reaktiválására AD-ben [34]. Az eredmények alátámasztják az új bizonyítékot arra vonatkozóan, hogy az Nrf2 terápiás célpont a neurodegeneratív betegségekben.

A molekuláris dokkolási analízis kimutatta, hogy a PhG-k kötődhetnek a Keap1-hez, a következő kötési kapacitásokkal: echinakozid > izoakteozid > akteozid > salidrozid. Ezekkel az eredményekkel összhangban a PhG-k előkezelése a Nrf2 nukleáris transzlokációjához vezetett, a következő Nrf2 expresszióval a sejtmagban: echinakozid > izoakteozid * akteozid > salidrozid. Feltételeztük, hogy a glikozidok száma befolyásolta a PhG-k és a Keap1 lehetséges kötődési módját, és a kötődési mód tovább okozta a Nrf2 felszabadulását a Keap1-ből. Ez a folyamat az Nrf2 és a downstream gének aktiválását eredményezte, és végső soron megvédi a PC12 sejteket a H2O{9}}indukálta oxidatív stressztől.

A cistanche neuroprotektív hatásaiPhGs

4. Anyagok és módszerek

4.1. Kémiai vegyületek és reagensek

Szalidrozid (CAS-szám: {0}}), akteozid (CAS-szám: 61276-17-3), izoakteozid (CAS-szám: 61303-13-7) és echinakozid (CAS-szám: {{3}). }) a YYuanye Biotechnology Company-tól (Sanghaj, Kína) vásárolták. A PhG-ket feloldottuk PBS-ben, így 10 mg/ml törzsoldatot kaptunk, amelyet -20 fokon tároltunk. A H2O2-t az Aladdin®-tól (Sanghaj, Kína) vásároltuk. Az RPMI-1640 táptalajt és a magzati szarvasmarha-szérumot a Hyclone-tól (Logan, UT, USA), a 0,5 százalékos tripszin EDTA-t, a penicillint és a sztreptomicint pedig a Keyi-től (Hangzhou, Kína) vásároltuk. Az MDA-t, az SOD diagnosztikai készleteket, az MTT-t és a DCFH-DA-t a Beyotime Institute of Biotechnology-tól (Nanjing, Jiangsu, Kína) vásároltuk. Az Annexin V-FITC/PI kettős festőkészletet a Solarbio Life Sciences-től (Peking, Kína) vásároltuk. A Nrf2, Histone H3, Keap1, HO-1, NQO1, GCLC, GCLM és p-aktin, egér-torma-peroxid (HRP) IgG és anti-nyúl-HRP-IgG elleni antitesteket az Abcam cégtől vásároltuk. (London, Egyesült Királyság). A HO-1 és a ZnPP inhibitorait a Sigma Chemical Co.-tól (St. Louis, MO, USA) vásároltuk. Az RNAiso Plus-t, a PrimeScript™RT reagenskészletet gDNA Eraser-rel és a SYBR® Premix Ex Taq™ II-t a Takarától (Shiga, Japán) vásároltuk. A Lipofectamine® RNAiMAX transzfekciós reagenst a Thermo Fisher Scientific-től (Waltham, Egyesült Királyság) vásároltuk. A Nrf2 siRNS szekvenciák a következők voltak: előre, CCGAAUUACAGUGUCUUAA; és hátrafelé, UUAAGACACUGUAAUUCGG. Eközben a kontroll siRNS szekvenciák a következők voltak: előre, UUCUCCGAACGUGUCACGU; és fordítva, ACGUGACACGUUCGGAGAA.

4.2. Sejtkultúra

Az egér mellékvese feokromocitóma vonalát (PC12 sejtek) a Biochemistry and Cell Biology, SIBS Institute of Biochemistry and Cell Biology-tól szereztük be (CAS, Shanghai, Kína). A sejteket RPMI-1640-ban (Hyclone) tartottuk, amely 10% magzati szarvasmarha-szérumot (Hyclone), 100 U/ml penicillint és 0,1 mg/ml sztreptomicint tartalmazott, 37 fokos hőmérsékleten 5% CO2 mellett. A tápközeget minden második napon cserélték.

4.3. Cell ViabilityAssay

A PC12 sejteket 96-lyukú lemezekre oltottuk 2 x 104 sejt/lyuk mennyiségben. A kötődés után a sejteket 20 percig előinkubáltuk inhibitorral vagy anélkül, 24 órán át PhG-vel vagy anélkül, majd a PhG-k eltávolítása után további 2 órán át H2O2-vel inkubáltuk. Inkubálás után a sejteket 5 mg/ml MTT-vel kezeltük 4 órán át 37 °C-on, és a tápközeget óvatosan eltávolítottuk. A túlélő sejtek által képződött formazánkristályokat 150 rL DMSO-ban feloldottuk, hogy kék színt kapjunk [35], és az abszorbanciát 570 nm-en mértük lemezleolvasóval. A kontrollok azonos koncentrációjú táptalajt használtak csak DMSO-val. A sejtek életképességét a kontroll százalékában normalizáltuk.

A PhG-k koncentrációit (0.1, 1,5 és 10 Rg/ml) a PhG-k citotoxicitási analízise és az echinakozid citoprotektív hatása alapján választottuk meg [32]. A jelentés szerint 10 Rg/ml alatt nem mutattak ki citotoxicitást, és az echinakozid citoprotektív hatást mutatott a HzOz-sérült sejtmodellben.

4.4. Apoptózis vizsgálat

Az apoptózist Annexin V-FITC/PI kettős festőkészlettel (Solarbio) mutattuk ki. A PC12 sejteket 6-lyukú lemezekre oltottuk 2 x 105 sejt/lyuk mennyiségben. A kötődés után a sejteket PhG-kkel (0,1 és 10 Rg/ml) kezeltük 24 órán át, majd a PhG-k eltávolítása után további 2 órán át H2O2-vel inkubáltuk. Inkubálás után a sejteket hideg PBS-ben mostuk, kétszer 1500 fordulat/perc sebességgel 10 percig centrifugáltuk, és 500 rL kötőpufferben újraszuszpendáltuk. FITC-jelölésű Annexin V (5 rL) és propidium-jodid.

Rövidítések

GCLC glutamát-cisztein ligáz-katalitikus alegység

GCLM glutamát-cisztein ligáz-katalitikus módosító alegység

H2O2 hidrogén-peroxid

HO-1 hem oxigenáz 1

Keap1 Kelch ECH asszociációs fehérje 1

NQO1 NAD(P)H kinon-oxidoreduktáz 1

Nrf2 nukleáris faktor eritroid 2-kapcsolódó 2. faktor

PhG-k: szalidrozid, akteozid, izoakteozid és echinakozid

ROS reaktív oxigénfajták

ZnPP cink protoporfirin

Cistanche deserticola kivonat: PHG a cistanche

Hivatkozások

1. V, AY; Chen, YM Oxidatív stressz és neurodegeneratív rendellenességek. J. Biomed. Sci. 1998, 5, 401-414. [CrossRef] [PubMed]

2. Maheshwari, A.; Mikro, MM; Aggarwal, A.; Sharma, RK; Nandan, D. A H2O2 által indukált herecsírasejt apoptózisban szerepet játszó útvonalak in vitro. FEBS J. 2009, 276, 870-881. [CrossRef] [PubMed]

3. Halliwell, B. Reaktív oxigénfajták és a központi idegrendszer. J. Neurochem. 1992, 59, 1609-1623. [CrossRef] [PubMed]

4. Richardson, JS; Subbarao, KV; Ang, LC A vas által kiváltott szabadgyök-peroxidáció lehetséges szerepéről az Alzheimer-kór idegi degenerációjában. Ann. NY Acad. Sci. 1992, 648, 326-327. [CrossRef] [PubMed]

5. Zhang, DD A Nrf{1}}Keap1 jelátviteli útvonal mechanikai vizsgálatai. Drug Metab. Rev. 2006, 38, 769-789. [CrossRef] [PubMed]

6. Itoh, K.; Tong, KI; Yamamoto, M. A Nrf{1}}Keap1 útvonalat aktiváló molekuláris mechanizmus az elektrofilekre adott adaptív válasz szabályozásában. Free Radic. Biol. Med. 2004, 36, 1208-1213. [CrossRef] [PubMed]

7. Kong, AN; Owuor, E.; Yu, R.; Hebbar, V.; Chen, C.; Hu, R.; Mandlekar, S. Xenobiotikus enzimek indukciója a map kinase útvonalon és az antioxidáns vagy elektrofil válaszelem által (ARE/EpRE). Drug Metab. Rev. 2001, 33, 255-271. [CrossRef] [PubMed]

8. Buendia, I.; Michalska, P.; Navarro, E.; Gameiro, I.; Egea, J.; Leon, R. Nrf{1}}ARE útvonal: Új célpont az oxidatív stressz és a neurodegeneratív betegségek neurogyulladása ellen. Pharmacol. Ott. 2016, 157, 84-104. [CrossRef] [PubMed]

9. Skibinski, G.; Hwang, V; Ando, ​​DM; Daub, A.; Lee, AK; Ravisankar, A.; Modan, S.; Finucane, MM; Shabby, BA; Finkbeiner, S. Nrf2 a proteosztázis modulálásával enyhíti az LRRK2- és az a-synuclein által kiváltott neurodegenerációt. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2016, 114, 1165-1170. [CrossRef] [PubMed]

10. Jimenez, C.; Riguera, R. Phenylethanoid glikozidok növényekben: szerkezet és biológiai aktivitás. Nat. Prod. Rep. 1994, 11, 591-606. [CrossRef] [PubMed]

11. Georgiev, M.; Alipieva, K.; Orhan, I.; Abrasev, R.; Denev, P.; Angelova, M. A Verbascum xanthophoeniceum Griseb antioxidáns és kolinészteráz gátló hatásai. és fenil-etanol-glikozidjai. Food Chem. 2011, 128, 100-105. [CrossRef] [PubMed]

12. Li, N.; Wang, J.; Ma, J.; Gu, Z.; Jiang, C.; Yu, L.; Fu, X. Neuroprotective Effects ofCistanches HerbaTerápia közepesen súlyos Alzheimer-kórban szenvedő betegeken. Evid.-alapú kiegészítés. Altern. Med. 2015, 2015, 103985. [CrossRef] [PubMed]

13. Liu, YL; Ő, WJ; Mo, L.; Shi, MF; Zhu, YY; Pan, S.; Li, XR; Xu, QM; Yang, SL Monochasma savatieri Franch feniletanoid-glikozidjainak antimikrobiális, gyulladásgátló hatása és toxikológiája. ex Maxim. J. Ethnopharmacol. 2013, 149, 431-437. [CrossRef] [PubMed]

14. Dong, Q.; Yao, J.; Fang, JN; Ding, K. Két hideg vízzel extrahálható poliszacharid szerkezeti jellemzése és immunológiai aktivitásaCistanche deserticola YC Ma. szénhidrát. Res. 2007, 342, 1343-1349. [CrossRef] [PubMed]

15. Xiong, L.; Mao, S.; Lu, B.; Yang, J.; Zhou, F.; Hu, Y.; Jiang, Y.; Shen, C.; Zhao, Y. Osmanthusfragrans virágkivonat és akteozid védelmet nyújt a d-galaktóz által kiváltott öregedés ellen ICR egérmodellben. J. Med. Élelmiszer 2016, 19, 54-61. [CrossRef] [PubMed]

16. Jiang, Y.; Mao, S.; Huang, W.; Lu, B.; Cai, Z.; Zhou, F.; Li, M.; Lou, T.; Zhao, Y. Az Osmanthusfragrans Lour fenil-etanol-glikozid profiljai és antioxidáns hatásai. Virágok UPLC/PDA/MS és szimulált emésztési modell alapján. J. Agric. Food Chem. 2016, 64, 2459-2466. [CrossRef] [PubMed]

17. Li, X.; Igen, X.; Li, X.; Sun, X.; Liang, Q.; Tao, L.; Kang, X.; Chen, J. A Salidroside védelmet nyújt az MPP plusz által kiváltott apoptózis ellen PC12 sejtekben az NO útvonal gátlásával. Brain Res. 2011,1382, 9-18. [CrossRef] [PubMed]

18. Zhang, L.; Ding, W.; Sun, H.; Zhou, Q.; Huang, J.; Li, X.; Xie, Y.; Chen, J. A Salidroside megvédi a PC12 sejteket az MPP plusz által kiváltott apoptózistól a PI3K/Akt útvonal aktiválásával. Food Chem. Toxicol. 2012, 50, 2591-2597. [CrossRef] [PubMed]

19. Sheng, GQ; Zhang, JR; Pu, XP; Ma, J.; Li, CL A verbaszkozid védő hatása a 1-metil-4- fenilpiridinium-ion által kiváltott neurotoxicitásra PC12 sejtekben. Eur. J. Pharmacol. 2002, 451, 119-124. [CrossRef]

20. Wang, H.; Xu, Y.; Yan, J.; Zhao, X.; Sun, X.; Zhang, Y.; Guo, J.; Zhu, C. Az akteozid megvédi az emberi neuroblasztóma SH-SY5Y sejteket a béta-amiloid által kiváltott sejtkárosodástól. Brain Res. 2009, 1283, 139-147. [CrossRef] [PubMed]

21. Min, D.; Jin, YZ; Yong, J.; Zheng, BL; Yao, HW Echinacoside megmenti az SHSY5Y neuronális sejteket a TNFa által kiváltott apoptózistól. Áll. Pharmacol. Bika. 2005, 505, 11-18.

22. Zhao, Q.; Gao, JP; Li, WW; Cai, DF Az echinacoside neurotróf és idegmentő hatásai a Parkinson-kór szubakut MPTP egérmodelljében. Brain Res. 2010,1346, 224-236. [CrossRef] [PubMed]

23. Koo, KA; Sung, SH; Park, JH; Kim, SH; Lee, KY; Kim, YC A Callicarpa dichotoma feniletanoid-glikozidjainak in vitro neuroprotektív hatásai. Planta Med. 2005, 71, 778-780. [CrossRef] [PubMed]

24. Liu, YG; Li, X.; Xiong, C.; Yu, B.; Pu, X.; Igen, XS Szintetikus fenil-etanol-glikozid-származékok, mint potenciális neuroprotektív szerek. Eur. J. Med. Chem. 2015, 95, 313-323. [CrossRef] [PubMed]

25. Fu, G.; Pang, H.; Wong, YH Természetben előforduló feniletanoid-glikozidok: potenciális vezetők új terápiákhoz. Curr. Med. Chem. 2008, 15, 2592-2613. [CrossRef] [PubMed]

26. Greene, LA; Tischler, AS Az idegnövekedési faktorra reagáló patkány mellékvese feochromocytoma sejtek noradrenerg klonális vonalának létrehozása. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1976, 73, 2424-2428. [CrossRef] [PubMed]

27. Liang, QN; Sheng, YC; Jiang, P.; Ji, LL; Xia, YY; Min, Y.; Wang, ZT A glutation antioxidáns rendszer különbsége az újonnan elválasztott és fiatal egerek májában és szerepe az izolin által kiváltott hepatotoxicitásban. Boltív. Toxicol. 2011, 85, 1267-1279. [CrossRef] [PubMed]

28. Kobayashi, A.; Kang, M.; Okawa, H.; Ohtsuji, M.; Zenke, Y; Chiba, T.; Igarashi, K.; Yamamoto, M. A Keap1 oxidatív stressz-érzékelő a Cul3-alapú E3-ligáz adaptereként működik a Nrf2 proteaszómális lebomlásának szabályozására. Mol. Sejt. Biol. 2004, 24, 7130-7139. [CrossRef] [PubMed]

29. Cornelius, C.; Crupi, R.; Calabrese, V; Graziano, A.; Milone, P.; Pennisi, G.; Radak, Z.; Calabrese, EJ; Cuzzocrea, S. Traumás agysérülés: Oxidatív stressz és neuroprotekció. Antioxidáns. Redox jel. 2013, 19, 836-853. [CrossRef] [PubMed]

30. Hou, Z.; Luo, W.; Sun, X.; Hao, S.; Zhang, Y.; Xu, F.; Wang, Z.; Liu, B. A hidrogénben gazdag sóoldat megvéd az oxidatív károsodástól és a kognitív hiányosságoktól enyhe traumás agysérülés után. Brain Res. Bika. 2012, 88, 560-565. [CrossRef] [PubMed]

31. Ansari, MA; Roberts, KN; Scheff, SW A zúzódások által kiváltott oxidatív stressz és a szinaptikus fehérjék időbeli lefutása a kéregben a TBI patkánymodelljében. J. Neurotrauma 2008, 25, 513-526. [CrossRef] [PubMed]

32. Kuang, R.; Sun, Y.; Yuan, W.; Lei, L.; Zheng, X. Az echinacoside, az egyik fenil-etanoid-glikozid védő hatása a H2O2-indukált citotoxicitásra PC12 sejtekben. Planta Med. 2009, 75, 1499-1504. [CrossRef] [PubMed]

33. Scapagnini, G.; Vasto, S.; Ábrahám, NG; Caruso, C.; Zella, D.; Fabio, G. Modulation of Nrf2/ARE pathway by food polyphenols: Táplálkozási neuroprotektív stratégia kognitív és neurodegeneratív rendellenességekre. Mol. Neurobiol. 2011, 44, 192-201. [CrossRef] [PubMed]

34. Kerr, F.; Sofolaadesakin, O.; Ivanov, DK; Gatliff, J.; Gomez, PB; Bertrand, HC; Martinez, P.; Callard, R.; Snoeren, I.; Cochem, HM Direct Keap{1}}Nrf2 zavar, mint az Alzheimer-kór lehetséges terápiás célpontja. PLoS Genet. 2017, 13, e1006593. [CrossRef] [PubMed]

35. Hansen, MB; Nielsen, SE; Berg, K. Egy precíz és gyors festékmódszer újbóli vizsgálata és továbbfejlesztése a sejtnövekedés/sejtpusztulás mérésére. J. Immunol. Methods 1989, 119, 203-210. [CrossRef]

36. Press, C. Virtual Screening in Drug Discovery; Crc Press: Boca Raton, FL, USA, 2005.

37. Muegge, I.; Martin, YC; Hajduk, PJ; Fesik, SW A PMF pontozás értékelése gyenge ligandumoknak az FK506 kötőfehérjéhez való dokkolásában. J. Med. Chem. 1999, 42, 2498-2503. [CrossRef] [PubMed]

38. Kuntz, ID; Blaney, JM; Oatley, SJ; Langridge, R.; Ferrin, TE A makromolekula-ligandum kölcsönhatások geometriai megközelítése. J. Mol. Biol. 1982, 161, 269-288. [CrossRef]

39. MD, E.; Murray, CW; Auton, TR; Paolini, GV; Mee, RP Empirikus pontozási függvények: I. Gyors empirikus pontozási függvény kidolgozása a ligandumok kötési affinitásának becslésére receptorkomplexekben. J. Comput.-Aided Mol. Des. 1997, 11, 425-445.

© 2018 a szerzőktől. License MDPI, Basel, Svájc. Ez a cikk egy nyílt hozzáférésű cikk, amelyet a Creative Commons Attribution (CC BY) licenc (http:ZZcreativecommons.org/licenses/byZ4.0Z) feltételei szerint terjesztenek.