Ⅰ RÉSZ: Vese-célzott epoxieikozatriénsav analóg, EET-F01, csökkenti a gyulladást, az oxidatív stresszt és a ciszplatin által kiváltott nefrotoxicitást

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

John D. Imig, Md. Abdul Hye Khan és mtsai.

1. Bemutatkozás

A rákos betegek és a túlélők vesebetegsége az egészségügyi ellátás egyik fő problémája lett, és továbbra is élesen eszkalálódik [1–3]. Az újabb rákterápiák megnövelték a gyógyulási arányt és a túlélési időt, de a terápiával összefüggő folyadék- és elektrolit-rendellenességek, valamint a krónikus vesebetegséggé progresszív akut vesekárosodás gyakori következmények [3–5]. A rákellenes szerek, a vaszkuláris endoteliális növekedési faktor receptor tirozin kináz gátlók (VEGFRI) és a platinaszármazékok szintén súlyos vesekárosodást okozhatnak, ami jelentősen veszélyezteti hatékony és biztonságos alkalmazásukat [3–5]. Jelentős klinikai igény van új terápiákra a rákos betegek vesebetegségének hatékony kezelésére és megállítására. Ez az egészségügyi probléma egy szubspecialitás, az Onco Nephrology kifejlesztéséhez, fejlődéséhez és megjelenéséhez vezetett [5]. A jelenlegi kezelések csak lassítják a veseműködés elvesztését, vagy egyáltalán nem hoznak hasznot [2,5,6]. Sürgősen új megközelítésekre van szükség. Folyamatban lévő kutatásaink támadják ezt a feltörekvő rák arénát, és mi az epoxi-eikozatriénsav (EET) analógok kifejlesztésére összpontosítunk, amelyek megvédik a vesét a rákterápiával összefüggő toxicitástól.

bioflavonoid tablettaéscistancheszámáraveseműködés

Az EET-analógok az EET-ek farmakoforikus részén alapulnak, és javított oldhatósággal, valamint az oldható epoxid-hidroláz (sEH) által okozott autooxidációval és metabolizmussal szembeni ellenállással készültek[7,8]. Korábbi tanulmányok kimutatták, hogy a szintetikus EET analógok vesevédő hatásúak számos kóros állapotban, például magas vérnyomásban, gyógyszer-indukáltanefrotoxicitásés lupus nephritis [9-13]. Az EET-analógok értágító, vizelethajtó, gyulladáscsökkentő, antioxidáns és anti-apoptotikus aktivitásuk révén csökkentik a vesekárosodást ezekben a betegségekben[10-13]. Ezek a tanulmányok egyértelműen bebizonyították, hogy az EET-alapú megközelítés különböző etiológiájú patológiás helyzetekben küzd a vesekárosodás ellen. A közelmúltban kísérletek történtek olyan EET-analógok kifejlesztésére, amelyek egyedülálló tulajdonsággal rendelkeznek, hogy megcélozzák a vesét. A vese-célzott EET-analóg új formáját tervezték és szintetizálták az EET-farmakofor folsavval való konjugálásával.EET-F01). Jelen tanulmányban azt a képességet vizsgáltukEET-F01az EET-analóghoz, az EET-A-hoz képest. Az EET-FO1-et és az EET-A-t összehasonlították a ciszplatin által kiváltott vesekárosodás csökkentésére való képességük szempontjából. Végül, ez a tanulmány tovább körvonalazta a vesevédő gyulladásgátló és antioxidáns hatásátEET-F01.

cistanche előnyeiszámáravese

2. Eredmények

2.1. EET-F01A veseszövetet célozza

Az EET-A és az EET-FO1 kémiai szerkezetét az 1. ábra mutatja. Az EET-A és az EET-FO1 tisztaságaEET-F01 was >95% NMR-rel meghatározva. Az akut állatkísérletben egyenlő súlyú EET-A ésEET-F01intravénásan adták be 6 órán keresztül, majd plazma- és veseszövetgyűjtést végeztek. 5-szer magasabb plazmaszintet mutattunk kiEET-F01az EET-A-hoz képest 6-óra folyamatos beadás után (1. ábra). Érdekes módon azt is kimutattuk, hogy 6-óra folyamatos adagolás után a vese EET-A tartalma szinte nem volt kimutatható aEET-F01tartalom a vesében (1. ábra). Ezek az adatok azt mutatjákEET-F01a vesét célozza meg.

1. ábra: A plazma és a vese EET-F01 és EET-A összehasonlítása 6 órás iv. beadást követően.Felső panel: Kémiai szerkezetek EET-A ésEET-F01. Bal oldali panel: EET-FO1 és EET-A plazmakoncentrációja. Jobb panel: Vese szintjeiEET-F01és EET-A. Az adatok átlag±SEM-ben kifejezve, n=3/csoport.

2.2. EET-F01Véd a ciszplatin ellenNefrotoxicitás

Egy külön kísérletsorozatban patkánycsoportokat előkezeltekEET-F01és EET-A-val a ciszplatin nefropátia indukálása előtt két napig, majd további 5 napig kezeltük a tesztvegyületekkel. A vesevédő hatásokEET-F01és az EET-A-t a BUN-szintek, a vizelet NAG-tartalma és a vizelet KIM{1}}-szintjei alapján határozták meg.EET-F01ugyanolyan hatékony volt, mint az EET-A a BUN, NAG, KIM-1 és a vese szövettani sérülésének csökkentésében öt nappal a ciszplatin indukciója utánnefrotoxicitás(2. ábra). Ezt követően szövettani vizsgálatot végeztünk a ciszplatin nefrotoxicitásának további értékelésére. A ciszplatin beadása tubuláris sérülést eredményezett, amely a vese epiteliális sejtjeinek vakuolációjában és hámlásában nyilvánult meg, valamint súlyos intratubuláris fehérjeréteg képződést a vese kérgi és velős régióiban. EET-A ésEET-F01kezelés megvédte a vesét a ciszplatintólnefrotoxicitáspatkányokban (2. ábra).EET-F01hatásos volt napi 20 mg/kg/nap és 10-szer kisebb, 2 mg/kg/nap dózis mellett, annak ellenére, hogy a folsavnak köszönhetően az EET-A-hoz képest majdnem 2-szer nagyobb molekulatömege volt. Ezek az adatok egyértelműen azt mutatjákEET-F01a vesét célozza meg, és alacsonyabb, de mégis hatékony dózist tesz lehetővé. Így kifejlesztettünk egy vese-célzott EET-analógot,EET-F01, amely kiváló lehetőséget mutat a vesebetegségek gyógyításában.

a cistanche deserticola előnyei

2. ábra: A ciszplatin által kiváltott vesekárosodást az EET-F01 és az EET-A kezelés csökkenti.Bal oldali panel: vér karbamid-nitrogén (BUN), középső panel: vizelet N-acetil- -(D)-glükózaminidáz (NAG), jobb panel: vesekárosodás molekula-1 (KIM-1) cisplatinnal kezelt patkányokban, amelyeket hordozóval, EET-FO1-gyel vagy EET-A-val kezeltek. Alsó panel: Reprezentatív mikrofényképek Periodic acid-Schiff (PAS) festésről, amely a vese epiteliális sejtjeinek vakuolációját és hámlását, valamint súlyos intratubuláris fehérjeszerű öntött tubuláris gipszképződést ábrázolja különböző kísérleti csoportok vesemetszeteiben.*p<0.05 vs.="" control-vehicle="" group;t=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.data="" expressed="" as="" mean="" ±sem,="" n="">

2.3. Az EET-F01 és az EET-A csökkenti a vesegyulladást és az oxidációs stresszt a ciszplatinbanNefrotoxicitás

A vese IL-6 és TNFo mRNS expressziós szintje a ciszplatin által kiváltott 4-5--szeres növekedést mutatottnefrotoxicitás. EET-F01és az EET-A kezelés a ciszplatinban 30-50 százalékkal csökkentette az IL{1}} és a TNF vesegyulladásos géneketnefrotoxicitás(3. ábra). Az oxidatív marker gének, a p47phox, p67phox, gp91phox és NOX4 NADPH oxidáz alegységeinek fokozott veseexpresszióját figyelték meg ciszplatinnal kezelt patkányokban. A veseszövet TBARS-szintje megemelkedett a ciszplatin-indukált kezelés soránnefrotoxicitás. Az oxidatív stressz ciszplatin által kiváltott növekedése 60-100 százalékkal csökkentEET-F01és EET-A kezelés (4. és 5. ábra). Ezek az adatok azt mutatják, hogy vese-célzottEET-F01ugyanolyan hatékonyan csökkenti a gyulladást és az oxidatív stresszt a ciszplatinban, mint az EET-Anefrotoxicitás.

3. ábra: A ciszplatin nefrotoxicitásának vesegyulladását az EET-F01 és EET-A kezelés csökkenti.RT-PCR elemzés az IL-6 (bal oldali panel) és a TNF (jobb panel) mRNS-expressziójához.*p<0.05 vs.="" control-vehicle="" group;=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean±sem,="" n="">

2.4. Az EET-A nem fokozza a daganatnövekedést

Az EET analógok alkalmazása elősegítheti a rák áttét kialakulását, ha hosszú ideig alkalmazzák [14,15]. Bár a jelenlegi terápiás megközelítés az EET-analógokat rövid ideig adná be a ciszplatin által kiváltottnefrotoxicitás, értékeltük az EET-A hosszú távú hatásait egy humán emlőrák-sejtvonal, az MBA-MB-231 daganatnövekedésére thymiás egerekben. A tumor térfogata és tömege azonos ütemben nőtt a vivőanyaggal vagy EET-A-val kezelt egerekben három hét alatt (6. ábra). A daganatok szövettani értékelése nem mutatott semmilyen változást a celluláris hiperpláziában vagy proliferációban az EET-A-val kezelt egerekben. Ezek az adatok azt mutatják, hogy az EET-A nem fokozza a daganat növekedését.

4. ábra: A ciszplatin nefrotoxicitásában fellépő renális oxidatív stresszt az EET-F01 és EET-A kezelés csökkenti.RT-PCR elemzés az (a)p47phox, (b)p67phox, (c)gp91phox, (d) NOX4.*p mRNS expressziójára<0.05 vs.control-vehicle=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean="" ±="" sem,="" n="">	5. ábra: A vese tiobarbitursavval reaktív anyagok (TBARS) a ciszplatin nefrotoxicitásában csökkentik az EET-F01 és EET-A kezeléseket.*p<0.05 vs.control-vehicle=""><0.05 vs.="" cisplatin-vehicle="" group.="" data="" expressed="" as="" mean="" ±="" sem,="" n="">

6. ábra: Egy humán emlőrák sejtvonal, MBA-MB-231 tumornövekedése thymus nélküli egerekben az EET-A-kezelés hatására nem változik.Bal oldali panel: tumor térfogata, jobb oldali panel: tumor tömege MBA-MB-231 tumort hordozó egerekben, amelyeket hordozóval (kontroll) vagy EET-A-val kezeltek. Alsó panel: Reprezentatív mikrofényképek a Periodic acid-Schiff (PAS) festésről, amely hasonló tumorhiperpláziát és proliferációt ábrázol humán emlődaganatokban. Az adatok átlag± SEM-ben kifejezve, n=5 egér és n=10 daganat/csoport.

A RÉSZÉHEZ KATTINTSON IDE Ⅱ

cistanche hindi nyelven