A Cistanche Deserticola hatása szepszisben szenvedő patkányok akut tüdősérülésére

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

[Absztrakt]Cél: A hatás vizsgálataCistanche deserticolaakutontüdősérülés(ALI) szepszisben szenvedő patkányokban. Módszerek: A szepszis modelljét vakbéllekötéssel és punkcióval készítettük. Elvégeztük a kórszövettani vizsgálatokat és megmértük az ALI biológiai markereit. Eredmények: Fénymikroszkóp alatt a sós csoportban ödéma volttüdő interspace, nagyszámú eritrocita és neutrofil, valamint plazmafehérje az alveoláris üregekben. AztüdőA nedves/száraz tömeg, a neutrofilek aránya és a pulmonalis alveoláris mosófolyadék fehérjetartalma a pulmonalis vascularis permeabilitás és a pulmonalis alveoláris permeabilitás, valamint az MDA, SOD, valamint MPO ennek megfelelően szignifikánsan megnőtt. A csoportbanCistanche deserticolaEzek az ALI indexek szignifikánsan alacsonyabbak voltak, mint a sóoldattal kezelt csoportban.

Következtetés: Cistanche deserticolanagy hatással van az ALI-ra szepszisben szenvedő patkányokban. A terápiás mechanizmus valószínűleg a neutrofilek és az oxidatív szabad gyökök gátlásán keresztül valósul meg.

【Kulcsszavak】Vérmérgezés; Akut tüdősérülés; Cistanche deserticola

A szepszis klinikai vészhelyzet és kritikus betegség, és a hatékony kezelési gyógyszerek keresése mindig is komoly probléma volt a klinikai és alapkutatásban. A hagyományos kínai orvoslásban a szepszis patogenezise az igazlelkűség hiánya és a gonoszság túláradója. A test gonosz boldogulásának támadó terápiája az egyik hatékony kezelési intézkedés.Cistancheegy hagyományos tonik kínai orvoslás. Farmakológiai vizsgálatok megerősítették, hogy olyan védőfunkciókkal rendelkezik, mint például a sejtes DNS-szintézis sebességének fokozása és az oxigénmentes szabad gyökök elleni ellenállás. A szerző kísérletileg megfigyeli a hatásátCistanche a tüdőproblémákrólszepszisben, a szepszis kezelésének hatékony feltárása érdekében.

A Cistanche Echinacoside a tüdőbetegségek kezelésére szolgál

1 Anyag és módszer

1. 1 ÁllatEgészség A 40 hím, 200-250 g tömegű 5D patkányt a Huazhong University of Science and Technology Kísérleti Állatközpontja biztosította, minőségellenőrzési szám: TJLA-2008-1670, véletlenszerűen 3 csoportra osztottak: 8 normál sóoldat csoport, Ig/ Voltak 12 patkány az ml-es padlizsánpép csoportban és 12 az 5g/ml-es csoportbanCistanchecsoport. A kísérleti állatok a megfelelő gyógyszereket rutinszondán keresztül kapták 15 napon keresztül, naponta kétszer (aCistancheA deserticola kivonatot ennek a kórháznak a hagyományos kínai orvoslás előkészítő helyisége biztosította), és a kísérleti állatoknál a 200mg/kg dózist az irodalom U] módszere szerint alkalmaztuk 12 perccel vakbéllekötés és perforáció után. Példánygyűjtemény.

1.2 Patkánytüdőszövettani vizsgálat.Vegyünk egy kis mennyiséget az állat bal lebenyébőltüdőminden csoportból fixáljuk 10 százalékos formaldehiddel, paraffinba ágyazzuk a metszetet, és HE festjük, közönséges optikai mikroszkóppal megfigyeljük, és ennek alapján vegyük atüdőprobléma 1 mm3-t készíteni 25-ért Százalékos glutáraldehid oldatban rögzítették, majd 1%-os tetroxid oldatban rögzítették, etanollal és acetonnal dehidratálták, Epon 81-be ágyazták, ultravékony metszeteket készítettek, urán-ólommal festették, és transzmissziós elektronnal figyelték meg mikroszkóp.

1.3 Patkánytüdőproblémák nedves/száraz tömegarányának meghatározása, sejtszám arány alveoláris mosófolyadékban és fehérjetartalom Súlyarány meghatározása.A patkányok egy másik csoportján thoracotomiát követően alveoláris mosást végeztek, a mosófolyadékon pedig mikroszkóp alatt sejtszámot és sejtosztályozást végeztek. A fehérjetartalom meghatározására és kiszámítására Coomassie briliánskék módszert alkalmaznaktüdőpermeabilitási index (alveoláris mosófolyadék fehérje/plazmafehérje, LPI).

1.4 A pulmonalis vascularis permeabilitás (PVP) változásai patkányokbanA Zhou és munkatársai által bevezetett módszer szerint. (2) szerint a beadás után az állatokon minden csoportban vakbéllekötést és perforációt végeztünk, és 50 mg/kg lantán femorális vénába adott injekciót alkalmaztunk a mellkas kinyitásához és a tüdő eltávolításához. Távolítsa el a környező problémákat, áztassa be atüdőa formamid oldatban (a formamid mennyisége 20 mg/100 g testtömeg), 45-50T inkubátorban 72 órán át inkubálva, megvárva, amíg a problémás pigmentek mindegyike kimosódik, kiszedjük a problémákat, centrifugáljuk, és vegyük. A felülúszót. Használjon ultraibolya spektrofotométert 620 nm-en végzett kolorimetriás méréshez, és számítsa ki az etanol-tartalmat a standard görbe alapján a PVP változásának meghatározásához.

1.5 Malondialdehid (MDA) meghatározása patkány tüdőproblémábanAz MDA aktivitás meghatározására a tiobarbitursav (TBA) módszert alkalmaztuk. Adjunk hozzá 4 ml 1,67 mol/l-es kénsavat. 0.541% foszfonsav 50 ml próbadarabhoz, jól keverje össze, centrifugálja 3000 fordulat/perc sebességgel 10 percig, és a csapadékot a fentiek szerint még egyszer feldolgozza, majd adjon hozzá 1 ml kétszer desztillált vizet, 1 ml TBA-oldatot, 95% vízmentes fürdő 60 percig, extrakció 5 ml n-butanollal, tetraetoxi-propán mint standard, lnmol/l végső koncentráció, fluoreszcencia spektrofotométer 532 nm-en az abszorbancia mérésére.

1.6 Szuperoxid-diszmutáz (SOD) meghatározása patkánytüdő problémákbanAz irodalomban található módszer szerint [4] az SOD aktivitást a Huangpuyin oxidáz módszerrel határoztuk meg (a Nanjing Jiancheng Institute of Biological Engineering-től vásárolt készlet).

1.7 A mieloperoxidáz (MPO) meghatározása patkánybantüdőprobléma.Tüdőproblémák esetén mossa meg a maradék vért, amennyire csak lehetséges, izotóniás sóoldatban, és helyezze {{0}},5% cetil-trimetil-bromidot (PH6.0) tartalmazó foszfát pufferbe. Készítsen 5% homogenizátumot, és működtesse a készlet utasításai szerint.

1.8 statisztikai módszerekHasználjon SPSS statisztikai szoftvert, és mérje meg az adatokat (x±s) formában, t-teszt és X2 teszt segítségével.

Cistanche

2 eredmény

2.1 A nedves/száraz tömegarány összehasonlításatüdőA problémákat, a sejtszám arányát és az alveoláris mosófolyadék fehérjetartalmát minden csoportban az 1. táblázat tartalmazza.tüdőnedves/száraz tömegarány a sós csoportban szignifikánsan magasabb volt, mint aCistanchecsoport (P<0.05 or="" 0.01).="" the="" cell="" count="" ratio="" and="" protein="" content="" in="" the="" alveolar="" lavage="" fluid="" of="" the="">Cistanchecsoportban szignifikánsan alacsonyabbak voltak, mint a sóoldatos csoportban (P<0.05 or="" 0.01).="" 0.="" 01),="" and="" with="" the="" increase="" of="" the="" dose="" concentration,="" it="" shows="" a="" significant="">

1. táblázat A tüdőproblémák nedves/száraz tömegarányának és a sejtszám arányának és a fehérjetartalomnak az összehasonlítása az egyes csoportokban lévő patkányok alveoláris mosófolyadékában (X ± S)

A normál sóoldat csoporthoz képest P<0.><001. below="" is="" the="">

2.2. A patkányok tüdőproblémák morfológiai változásainak összehasonlítása az egyes csoportokban. Általános észrevétel: Atüdőa sós csoportban jelentősen megnagyobbodtak és sötétvörösek, a felszínen változó mértékű torlódás és ödéma, a szélén pedig nagyszámú tüdőinfarktus; a tüdő aCistanchecsoport világosvörös volt, felületi enyhe pangás és ödéma, nem volt nyilvánvaló tüdőinfarktus. Fénymikroszkópos megfigyelés azt mutatta, hogy a sóoldattal kezelt csoportban alveoláris és pulmonalis intersticiális pangás és ödéma, nagyszámú diffúz neutrofil beszűrődés az alveoláris üregben, némi tályog képződés, valamint különböző fokú atelectasis, necrosis és kompenzációs emphysema. , Thrombus és hasonló átlátszó membrán képződés. A fent említett elváltozások a Cistanche csoportban jelentősen csökkentek. A sós csoportban az alveoláris hámsejtek megduzzadtak, a lamellás vértestek nyilvánvalóan kiürültek, nagy vakuolák képződtek, a kapilláris endothel sejtek megduzzadtak, az endothelsejtek folyamatosan sérültek, az intercelluláris tér kiszélesedett, a kapillárisok és az alveoláris alaphártyák meglazultak és kiszélesedtek. Szabálytalan vastagodás, egyenetlen vastagság. A Cistanche csoportban az alveoláris hámsejtek nem duzzadtak, a lamellás corpusculus kiürülése csökkent, a kialakult vakuolák száma kicsi, a kapilláris endothel sejtek közötti kapcsolat a normálishoz közeli, az alaphártya enyhén laza és szabálytalanul megvastagodott. Az Ig/niL cistanche csoporthoz képest az 5g/ml cistanche csoportban kisebb volt a tüdőproblémák morfológiai elváltozása, és a tüdősérülés mértéke is kisebb volt.

2.3 Az egyes csoportok patkányainak LPI és PVP összehasonlítását a 2. táblázat mutatja. A sóoldattal kezelt csoport LPI és PVP értéke szignifikánsan magasabb volt, mint a Cistanche csoporté (PV0.05 vagy 0,01). ). A Cistanche csoport LPI és PVP értéke alacsonyabb volt, ami szignifikáns dózis-hatás összefüggést mutatott.

2.4 Az MDA.SOD.MPO aktivitásának összehasonlítása atüdőAz egyes csoportok patkányainak problémáit a 3. táblázat mutatja. Az MDA-tartalom atüdőprobléma a sós csoport szignifikánsan magasabb volt, mint aCistanchemíg a Cistanche csoport tüdőproblémájában az SOD aktivitás és az MPO aktivitás szignifikánsan megnőtt (F<0.05 or="">

3 Vita

A szepszis késői stádiumában jelentkező visszafordíthatatlan állapot és magas mortalitás kiváltó oka a többszörös szervi elégtelenség (5). A szepszis magas klinikai mortalitási arányának csökkentésében nagy jelentőséggel bír a szervek működésének védelme. A tüdő a többszörös szervi elégtelenség első szerve. A szepszisben szenvedő betegek 1/3-a az akut tüdőkárosodás (ALI) és az akut légzési distressz szindróma (ARDS) következtében hal meg. Az ALI fő patofiziológiai mechanizmusa a nagyszámú neutrofil felhalmozódása a tüdőproblémában, és aktiválja a vaszkuláris endoteliális sejteket és tapad azokhoz. Ezzel párhuzamosan megnövekszik az egyes elektronokat átadó redukált koenzim-II oxidáz koncentrációja, ami légúti robbanást okoz, nagy mennyiségű oxigén szabadgyököt generál, valamint erős oxidáció révén károsítja a sejtmembránokat és a membránszerkezeteket. Akadályok⑹. A lipid-peroxid az oxigén szabad gyökök változását tükrözi a problémában, és közvetlenül összefügg a tüdőkárosodás mértékével (7). A szervezet enzimatikus és nem enzimatikus gyökellenes oxidációs rendszerében az SOD aktivitása jó korrelációt tart fenn a problémás károsodás mértékével ⑺. A fiziológiás sóoldattal kezelt csoporthoz képest a Cistanche csoport MDA és SOD aktivitása statisztikailag szignifikáns különbséget mutatott. A Cistanche funkciója az immunrendszer működésének fokozása, az öregedésgátló és a sejt DNS szintézisének fokozása. A kísérleti eredmények azt mutatták, hogy a Cistanche csoport tüdőkoefficiense, PLT, alveoláris mosófolyadék neutrofil aránya és pulmonalis vaszkuláris permeabilitása szignifikánsan csökkent, tüdőproblémák MDA aktivitása csökkent, SOD szignifikánsan nőtt és MPO aktivitás csökkent. Ugyanakkor a morfológiai megfigyelések azt mutatták, hogy a tüdőproblémák károsodásának mértéke szignifikánsan csökkent, a neutrofilek infiltrációja csökkent, és az 5g/ml-es Cistanche-csoportban kevesebb volt a tüdősérülés, mint az Ig/ml-es Cistanche-csoportban, és jó dózis-hatás összefüggés. Azt sugallja, hogy a Cistanche jelentős védőhatással rendelkezik az ALI-re. A mechanizmus a következő lehet: (1) Gátolja a gyulladásos sejtek migrációját atüdő, csökkenti a neutrofilek és más aktivált sejtek által termelt oxigén szabad gyököket, így a biofilm védett; (2) Elősegíti a nukleinsav- és fehérjeszintézist, és véd a tüdőkárosodástól. (3) Növeli a fagociták immunfunkcióját és csökkentitüdőendotoxin okozta problémás károsodás. A kísérleti eredmények kísérleti alapot adnak a klinikai szepszisben fellépő akut tüdősérülés kezelésére a szervezet erősítésével és a hiány erősítésével.

hivatkozások

[1] Jin Huiming. Szepszis modell vakbéllekötés és perforáció után [J]. Chinese Journal of Pathophysiology "990, 6 (2): 126-127.

[2] Zhou WG, Mc Collum MO, Levine BA, et al. A vérlemezke-aktiváló faktor szerepe a hasnyálmirigy-gyulladással összefüggő akut tüdőkárosodásban patkányban [J]. Am J. Pathol, 1992, 140: 971 -979.

[3] Wang Qian, Zhu Xiaofeng, Zhao Xilong. A modern orvoslás kísérleti módszerei [M]. Peking: Népi Orvosi Kiadó, 2007:508.

[4] Zhang Xiuming, Li Jianzhai, Wei Mingjing. Modern klinikai biokémiai laboratóriumi tudomány [M]. Peking: Népi katonai orvosi sajtó, 2008: 896.

[5] Luo Zhengyao. Sokkvizsgálatok [M]. Tianjin: Tianjin Science and Technology Press, 2008:345.

[6]Xanthous CA, Hall JB. Samsel RW. Endotoxin emberi betegségekben, 2. rész Az anti-endotoxin terápiák biológiai hatása és klinikai értékelése[J]