A galangin antimelanogén aktivitásának és mechanizmusának értékelése in Silico és in vivo

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Ki Wung Chung, egy Hyeong Oh Jeong, egy Eun Kyeong Lee, egy Su Jeong Kim, egy Pusoon Chun, bHae Young Chung,*, a és Hyung Ryong Moon*, a

A túlzott melaninszintézis következtében fellépő kóros pigmentáció súlyos problémákat, például szeplőket, öregségi foltokat és melanomát okozhat. A tirozináz inhibitorok érdekes célpontok voltak a hiperpigmentáció kezelésében, mivel a tirozináz a melaninszintézis sebességkorlátozó enzimje. Az erős tirozináz inhibitorok szűrése a flavonoid megtalálásához vezetettgalanin, amely jelentős gátló hatást mutatott a gomba tirozinázra. A galanin IC50 értéke (3,55±0,39 µM) alacsonyabb volt, mint a pozitív kontrollként használt kojsavé (48,55±1,79 µM). Az in silico dokkoló szimuláció és a mechanikai vizsgálatok kimutatták, hogy a galanin kölcsönhatásba lép a tirozináz katalitikus helyeivel, és verseng a tirozinnal. A melanocita stimuláló hormonnal stimulált B16F10 melanoma sejtekben a galanin gátolta a tirozináz aktivitást, valamint a melanin termelést. Bár nagy dózisúgalanincitotoxikusak voltak, alacsony dózisok mellett nem figyeltek meg citotoxikus hatást. Ezenkívül a galanin in vivo hatékonyságát értékelték HRM2 melaninnal rendelkező szőrtelen egerekben. A bőrfehérítési index és a melaninfestés alapján az ismételt UVB-expozíció növelte a bőr melaninszintézisét. A galangin alkalmazása jelentősen csökkentette az UVB expozíció által kiváltott melanogenezist. Adataink összességében ezt mutatjákgalaninerős tirozináz gátló aktivitást mutat, ami arra utal, hogy hatékony bőrfehérítő szer lehet.

Kulcsszavakgalanin; melanogenezis; pigmentáció; tirozináz

cistanche kivonat

A galangin, egy flavonoid vegyület, magas koncentrációban található az Alpinia officinarumban és a Helichrysumban. Korábbi vizsgálatok kimutatták, hogy a galangin különféle farmakológiai hatással rendelkezik, megvédi a növényeket az UV-sugárzástól, a kórokozóktól és a növényevőktől, valamint antibakteriális és vírusellenes hatást fejt ki.2– 4) Ugyanakkor antioxidáns tulajdonságai is vannak, ami jótékony hatásának tulajdonítható.5) A galangin a rákos sejtek növekedésének gátlásán keresztül is rákellenes hatást fejt ki.6,7)

A melanin egy biológiai pigment, amely a legtöbb szervezetben megtalálható. A bőrbiológiában a melanint a tirozin aminosav oxidációjával állítják elő. Normál élettani körülmények között a melanin a káros UV-sugárzás elnyelésével megelőzi a bőrsérülést.8)A bőr melanocitáiban szintetizált melanin a keratinocitákba oszlik el, ahol elsősorban a káros UV-sugárzás elleni védelemben vesz részt.8) Bizonyos előnyök ellenére azonban a melanin túlzott mennyisége esztétikai problémákat és bőrbetegségeket is okozhat.9) A kóros pigmentfoltok, mint a szeplők, öregségi foltok, melasma és időskori lentigines súlyos problémákat okoznak a normál bőrfiziológiában.10,11) Ezért a melanogenezis modulálása fontos stratégia a bőr túlzott pigmentációjának kezelése.Számos enzim vesz részt a melanogenezis folyamataiban. E különféle enzimek közül a tirozináz a legfontosabb, amely az L-tirozin oxidációs folyamatait 3,4-dihidroxifenilalaninná (L-DOPA) és L-DOPA dopakinonná katalizálja.12) Ezek a tirozináz által közvetített folyamatok sebességkorlátozó folyamatok. Rendellenes körülmények között a tirozináz hiperaktivációját mutatták ki megnövekedett teljes melanintermeléssel.13) A melanogenezisben betöltött kulcsszerepe miatt a tirozináz vonzó célpont egy depigmentáló ágens számára.14) Így a különböző tirozináz inhibitorok mind a természetben előforduló, mind a szintetikus anyagokból. forrásokat fejlesztettek ki. Számos tirozináz-inhibitort, köztük a hidroxikinont, a kojinsavat és az arbutint használták korábban a gyógyszer- és kozmetikai iparban. Bár számos tirozináz inhibitort fejlesztettek ki kereskedelmi forgalomban, a citotoxikus mellékhatások nyilvánvalóvá váltak.12) Ezért hatékony és biztonságos bőrfehérítő szerekre van szükség.

A tanulmány célja az volt, hogy a galangint erős tirozináz inhibitorként jellemezzük különböző kísérleti módszerekkel. A természetes forrásból származó tirozináz inhibitorok kutatása során azt találtuk, hogy a galangin nagy hatékonysággal jelentősen csökkentette a tirozináz aktivitást. Mivel a galanin tirozinázra gyakorolt ​​gátló hatásáról már beszámoltak, ezért a sejt- és állatkísérletekben a gátló mechanizmusokra és a hatásosságra összpontosítottunk.1) Különféle in silico, in vitro és in vivo kísérletek segítségével adataink azt mutatták, hogy a galangin erős bőrfehérítő szer a bőr pigmentációjának kezelésére.

A cistanche tubolosa egészségügyi előnyei:bőrfehérítés

ANYAGOK ÉS METÓDUSOK

Anyagok

A galangint, kojinsavat, gomba tirozinázt, L-tirozint, -melanocita-stimuláló hormont (-MSH) és más kémiai reagenseket a Sigma Chemical Co.-tól (St. Louis, MO, USA) vásároltuk.

A tirozináz gátló hatás és a gátló mechanizmus mérése sejtmentes rendszerben

A galangin tirozinázra kifejtett gátló hatékonyságának és mechanizmusainak értékelésére gomba tirozinázt alkalmaztunk a korábban leírtak szerint. Röviden, 1000 egység gomba tirozinázt feloldottunk 20 µl foszfáttal pufferolt sóoldatban (PBS), és hozzáadtuk 170 µl vizsgálati keverékhez, amely 1 mM L-tirozint, 50 mM foszfátpuffert (pH 6,5) és 10 µl foszfátpuffert tartalmazott. a vizsgálati anyag. Az elegyet szobahőmérsékleten (25 °C) 30 percig inkubáltuk. A képződött dopakrom mennyiségét spektrofotometriásan mértük 492 nm-en (OD492) mikrolemez-leolvasóban. Az IC50-et a kísérlet különböző galangindózisokkal végzett ismétléseiből számítottuk ki. A galanin gátló mechanizmusának meghatározására tirozináz kinetikai vizsgálatot végeztünk. Különféle koncentrációjú L-tirozint (1, 2, 4 és 8 mM) alkalmaztunk a gátlási vizsgálathoz. Vizsgálat után az egyes értékeket Lineweaver–Burk grafikonok szerint konvertáltuk reciprokká. Az eredmények az 1/V és az 1/[S] görbét mutatták. Az egyes diagramok metszéspontját használtuk a gátló mechanizmus meghatározására.

Dokkoló szimuláció

Az in silico protein-ligand dokkoló szimulációhoz az AutoDock4.2-t használtuk. Sikeres kötődést értünk el a fehérje és a ligandum között. A kristályszerkezetben használt tirozináz háromdimenziós (3D) szerkezete az Agaricus bisporusból származott (PDB ID: 2Y9X), és dokkolózsebként a tirozin előre meghatározott kötőhelyét használtuk.15) A dokkolási szimulációkat a tirozináz és a galangin között végeztük. /kojic sav. A vegyületeket a következő lépésekkel készítettük elő dokkolási szimulációhoz: (1) 2D struktúrákat alakítottunk 3D struktúrákká; (2) a töltéseket kiszámítottuk, és (3) a hidrogénatomokat hozzáadtuk a ChemOffice program segítségével. A vegyületek és a tirozináz közötti lehetséges hidrogénkötési maradékok előrejelzését és a farmakoforok képződését a LigandScout 3 számította ki.0.

Sejttenyésztő rendszer

Az American Type Culture Collection-től (Rockville, MD, USA) származó egér melanoma B16F10 sejteket használtuk először a galanin tirozináz gátlásra gyakorolt ​​hatásának értékelésére. A sejteket Dulbecco módosított Eagle-tápközegében (DMEM; WELGENE Inc., Korea, LM001-05) tenyésztettük, kiegészítve 10 százalékos magzati szarvasmarha-szérummal (FBS; WELGENE Inc., S101-01) és penicillin/sztreptomicinnel. (100 IU/50 µg/ml; WELGENE Inc., LS202-02) 37 fokon, párásított atmoszférában, amely 5% CO2-t tartalmaz a levegőben. A galangin sejtek életképességére gyakorolt ​​hatásának értékelésére egy kereskedelemben kapható kit (EZ-1000, Dogen Bio, Korea) felhasználásával sejtéletképességi vizsgálatot végeztünk. Röviden: a sejteket 96-lyukú lemezeken tenyésztjük, és különböző koncentrációjú galanginnal kezeljük. A jelzett idő elteltével az abszorbanciát 450 nm-en olvastuk le mikrolemez-leolvasóval. Minden sejtkísérletet legalább háromszor elvégeztünk a reprodukálhatóság biztosítása érdekében.

Tirozináz aktivitás

A B16F10 sejtekben a tirozináz aktivitást az L-DOPA oxidációs sebességének mérésével vizsgáltuk. A sejteket 60π-lyukú edényekbe szélesztettük, 1 µM -MSH jelenlétében vagy hiányában inkubáltuk, majd 24 órán át 5 és 10 µM galanginnal kezeltük. Pozitív kontrollként kojinsavval végzett kezelést alkalmaztunk. A sejteket 500 µl 50 mM nátrium-foszfát pufferben (pH 6,8) lizáltuk, amely 25 µl 1% Triton X-100-ot és 25 µL 0,1 mM fenil-metil-szulfonil-fluoridot tartalmazott, majd -80 fokon 30 percig lefagyasztottuk. Felolvasztás és keverés után a sejtlizátumokat centrifugálással tisztítottuk 12000xg-vel 30 percig 4 fokon. A felülúszókat (80 µL) egy 96- lyukú lemezre helyeztük, 20 µl L-DOPA-t (2 mg/ml) adtunk hozzá, és az abszorbanciát 492 nm-en 10 percenként 1 órán keresztül 37 fokos hőmérsékleten leolvastuk. egy lemezolvasó.

Cistanche kivonat: gátolja a tirozináz expressziót

Melanin tartalom

A jelenlegi tanulmányban a melanin tartalmat használták a melanogenezis indexeként. Röviden, a B16 sejteket 60 π-es csészébe szélesztettük, és 1 µM -MSH jelenlétében vagy hiányában inkubáltuk. A sejteket ezután 24 órán át inkubáltuk 5 és 10 µM galanginnal vagy anélkül. Pozitív kontrollként a kojsavval végzett kezelést alkalmaztuk. Két PBS-es mosás után a mintákat 500 µl 1 NNaOH-ban feloldottuk, 60 fokon 1 órán át inkubáltuk, és összekevertük a melanin szolubilizálására. Az abszorbanciát 405 nm-en mikrolemez-leolvasóval mértük.

In vivo kísérletek

A galangin in vivo depigmentációs hatékonyságát állatkísérletekben értékelték. Az állatkísérleteket az Aging Tissue Bank tervezte, a Pusan ​​National University Institutional Animal Care Committee jóváhagyta, és a Pusan ​​National University állatkísérletekre vonatkozó irányelveinek megfelelően végezték el. A hathetes hím, HRM2 melaninnal rendelkező szőrtelen egereket a Hoshino Laboratory Animals-tól (Yoshino, Saitama, Japán) szereztük be, és ellenőrzött körülmények között tartották őket (23±1 fok, 55% ±5% páratartalom, 12-h fény). /sötét ciklus) vízhez való ingyenes hozzáféréssel és standard laboratóriumi étrenddel. Egy hetes akklimatizációs periódus után az egereket véletlenszerűen négy, hat állatból álló csoportra osztották. A galangint (10 µM) és a kojsavat (50 µM) propilénglikolból és etanolból (3:7) készített oldatban állítottuk elő. Oldott oldatot (200 µl) vagy vivőanyagot helyileg alkalmaztunk az állat háti bőrére naponta egyszer. Az állatokat egy CROSSLINKER (BEX-800, Ultra-Lum Inc., CA, USA) UVB-sugárzással sugározták be 50 mJ/cm2 értékkel az állatkísérleti ütemterv szerint. A bőrfelületek színeit CR-10 spektrofotométerrel (Konica Minolta Sensing, Inc., Sakai, Osaka, Japán) mérték, amelyben a színeket L*, a* és b* értékekkel írták le. a Commission International de L'Eclairage színrendszerének megfelelően. Az állatok leölése után a bőröket összegyűjtöttük, egy éjszakán át szobahőmérsékleten 4%-os paraformaldehidben fixáltuk, és az American Master*Tech Scientific, Inc. (Lodi, CA, USA) Fontana–Masson festőkészletével melaninra festették. a gyártó utasításainak megfelelően. Röviden, a felszeletelt bőröket ammóniás ezüst oldattal festettük 60 percig 60 °C-on, majd 0,1 százalékos arany-kloridban, majd 5 százalékos nátrium-tioszulfátban inkubáltuk.

Statisztikai elemzések

A Student-féle t-próbát a két csoport közötti különbségek elemzésére, az ANOVA-t pedig a csoportok közötti különbségek elemzésére alkalmaztuk. A p<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" the="" analysis="" was="" performed="" using="" graphpad="" prism="" 5="" (graphpad="" software,="" la="" jolla,="" ca,="">

cistanche tubolosa

EREDMÉNYEK

In Silico Docking Simulation of Galangin on Tyrosinase

A galangin egy természetben előforduló fitokemikália, és szerkezetében flavonoid részt tartalmaz (1. ábra). Kezdetben dokkoló szimulációt végeztek a gomba tirozináz (tercier szerkezet) és vegyületek (galangin, kojinsav és tirozin) között. A dokkolóhelyet, amelyhez a galangin és a kojsav kötődött, korábban a tirozináz aktív helyeként határozták meg.15) Ez a szimuláció sikeres volt, és jelentős pontszámot értek el. A galangin és a tirozináz közötti kötési energia –7,67 kcal/mol volt, Autodock4.2-vel végzett analízis szerint. A tirozináz és a kojsav (a pozitív kontroll) közötti kötési energia –4,09 kcal/mol, a tirozináz és az eredeti szubsztrát, a tirozin között pedig –5,13 kcal/mol volt (1. táblázat). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a galangin nagyobb affinitással kötötte a tirozinázt, mint a többi kölcsönhatás. A dokkolási szimulációs eredmények alapján LigandScout programmal kerestük a tirozináz és a vegyületek közötti kölcsönhatásokat. Azt találtuk, hogy a galangin kölcsönhatásba lép az ASN-260, VAL-283, ALA-286 és PHE-292, míg a kojinsav csak az ASN-260 és MET280 ( 2. ábra, 1. táblázat). Ezek a kölcsönhatások ezért az inhibitor aktivitás kulcsfontosságú meghatározói lehetnek, és fontos hatással lehetnek a dokkolási pontszámra.

Anti-melanogén hatások és mechanizmusok meghatározása gomba tirozinázban

Az in silicore és más korábban közölt eredmények alapján gomba tirozináz segítségével értékeltük az antimelanogén hatásokat és mechanizmusokat. A gomba tirozinázzal sejtmentes rendszerben tesztelve a galangin gátló hatékonysága erősebb volt, mint a kojsavé (3A. ábra). Ezenkívül a galangin dózisfüggően csökkentette a tirozináz aktivitást (3B. ábra). A galangin és a kojsav IC50 értékeit kiszámítottuk, és a 2. táblázatban mutatjuk be. A galangin alacsony IC50 értéke (3,55±0,39 µM) azt jelzi, hogy a hatásosság szignifikánsan magasabb, mint a kojic-é. sav (48,55±1,79 uM). A galangin gátló mechanizmusát Lineweaver–Burk kettős-reciprok diagramok segítségével értékelték tovább. Különféle koncentrációjú L-tirozint (1, 2, 4 és 8 mM) és galangint (0, 7,5 és 15 µM) használtunk a gátlási vizsgálathoz. Megmértük az abszorbancia időfüggő változásait, és a kettős-reciprok eredményeket ábrázoltuk (3C. ábra). Az eredmények azt mutatták, hogy az 1/V versus 1/[S] diagram három különböző meredekségű vonalat eredményezett, amelyek ugyanazon a függőleges tengelyen metszették egymást. A vegyület koncentrációjának növekedésével a Km értéke nőtt, de a Vmax értéke változatlan maradt, ami arra utalt, hogy a galangin a tirozinázhoz való kötődés kompetitív gátlója. Ezek az adatok megegyeztek az in silico eredményekkel, amelyek szerint a galangin kötődött a tirozináz aktív helyéhez, és gátolta azt.

1. ábra. A galangin, a kojicsav és a tirozin szerkezete

A galangin depigmentációs aktivitásának értékelése B16F10 egér melanoma sejtekben

Ezt követően a galangin depigmentációs aktivitását B16F10 egér melanomasejtek segítségével értékeltük. Először a galangin B16F10 egér melanomasejtekre gyakorolt ​​citotoxikus hatásait tesztelték. Amint a 4A. ábrán látható, a galangin szignifikánsan csökkentette a sejtek életképességét 25 µM feletti dózisokban. Ezért a citotoxicitás elkerülése érdekében a kísérletekben 5 µM és 10 µM galangint használtunk az antimelanogén hatások értékelésére. A B16F10 sejteket galanginnal kezeltük 1 µM -MSH jelenlétében. Az -MSH-kezelés által okozott teljes melaninszintézis szabad szemmel látható volt, és azt mutatta, hogy a galangin hatékonyan gátolja az -MSH által kiváltott melaninszintézist (4B. ábra). -MSH kezelés szignifikánsan növelte a tirozináz aktivitást és a B16F10 sejtek melanintartalmát (4C., D. ábra). A galangin-kezelés gátolta a celluláris melanogenezist, amelyet -MSH dózisfüggő módon fokozott (4C. és D. ábra). Ezek az eredmények együttesen azt mutatják, hogy a galangin a tirozináz gátlásán keresztül hatékony szer lehet a melanogenezis elnyomásában.

1. táblázat: Dokkolási pontszámok és a vegyületek fő interaktív maradékai

A Galangin hatása az in vivo bőrpigmentációra

A galangin gátló hatását ezt követően melaninnal rendelkező szőrtelen egereken vizsgáltuk, amelyeket az 5A. ábrán leírtak szerint kezeltünk. A bőrfelületek színét spektrofotométerrel pontosan mértük. Az egerek UVB-expozíciója az L*-érték csökkenéséhez vezetett, ami a pigmentációra jellemző (5B. ábra). Az UVB által kiváltott L*-érték csökkenés a galaninnal kezelt állatokban szignifikánsan blokkolt volt, összehasonlítva a vivőanyaggal kezelt kontroll állatokkal, ami a galanin hatékony depigmentáló hatását mutatta (5B. ábra). A ΔL* érték a galangin hatékonyságát is jelezte a kísérleti időszakokban (5C. ábra). Ezenkívül a 14. napon szabad szemmel észlelt bőrszínek a galangin antimelanogén hatását is jelezték (5D. ábra). A Fontana–Mas son festés, amely kiemeli a melanint, igazolta a galangin hatását. Az UVB-besugárzott állatok bőrmintái fokozott melaninfoltokat mutattak (5E. ábra). A spektrofotometriás numerikus adatokkal összhangban a galaninnal kezelt állatok a festett melaninfoltok csökkenését mutatták az UVB-besugárzott kontroll állatokhoz képest (5E. ábra). Ezek az adatok együttesen arra utalnakgalaninhatékony idő angiogén szer volt az UVB-indukált in vivo melanogenezis modellben.

2. ábra: Az in Silico dokkoló szimuláció eredményei a tirozináz és a jelölt vegyületek között

VITA

Korábban beszámoltak arról, hogy a galangin különféle biológiai hatásokat fejt ki, beleértve a citovédelmet is. Bár a galangin anti-tirozináz aktivitását korábban tanulmányozták, a mechanizmusokat és a pontos hatékonyságot sejttenyésztő rendszerekben nem írták le teljesen.1,16) Ezért célul tűztük ki a galangin hatékonyságának és gátló mechanizmusainak feltárását. A galangin gátló hatékonyságát kezdetben in silico dokkoló szimulációval értékelték. A dokkolási szimulációk azt mutatták, hogy a galangin kötődése a tirozináz aktív helyéhez stabilabb, mint az eredeti szubsztráté (tirozin) vagy a kojsavé (pozitív kontroll). A gátló hatást és mechanizmusokat gomba tirozináz segítségével is igazoltuk. Végül a galangin melanogenezis elleni gátló hatékonyságát -MSH-stimulált B16F10 egér melanoma sejtekben értékelték. Összefoglalva, a jelen tanulmány a galanint erős hatóanyagként azonosította.

A számítógépes dokkolás szimulációt hatékony eszközként hozták létre az új farmakológiai szerek szűrésére és értékelésére.17) A dokkoló szimuláció eredményei nemcsak a kötőhelyeket, hanem a kötési affinitást is megadják a vegyület és az enzim között, amely kezdeti információkat nyújt fizikai beavatkozás nélkül. kísérletek.18) Bár az előrejelzések nem mindig pontosak és további kísérleteket igényelnek, a dokkoló szimuláció csökkenti a szükséges anyagokat és erőforrásokat, és alátámasztja a biológiai kísérleti adatokat is. Számítógépes dokkolási szimulációnk azt mutatta, hogy a galangin erősebben tud kötődni a tirozinázhoz, mint a tirozin vagy a kojsav. Ezenkívül a galangin és a tirozináz közötti kölcsönhatásba lépő maradékok száma nagyobb volt a tirozinhoz vagy a kojsavhoz képest. A kezdeti dokkolási adatokat tovább ellenőriztük tirozináz enzimes vizsgálattal, amely azt mutatta, hogy a galangin IC50-értéke alacsonyabb, mint a kojsav; így a galangin tirozinázt gátló hatása erősebb volt, mint a kojsav.

A galangin tirozináz gátló mechanizmusát tovább vizsgáltuk gomba tirozináz segítségével. Mivel a dokkoló szimulációs adatok azt sugallták, hogy a galangin ugyanahhoz az aktív helyhez kötődik, amelyhez a tirozináz kötődik, várható volt, hogy a galangin a tirozináz kompetitív inhibitora lehet. A kísérleti eredmények azt mutatták, hogy a galangin kompetitív módon gátolta a tirozináz megkötését eredeti szubsztrátjához, a tirozinhoz, ami megerősítette a dokkoló szimuláció eredményeit. Az eredmények együttesen bizonyították a számítógépes dokkoló szimuláció megbízhatóságát és potenciálját az inhibitorok szűrésére.

A galangin hatékonyságát B16F10 egér melanoma sejtekben is értékelték. A galangin jelentős citotoxikus hatást mutatott a B16F10 sejtekben, ha nagy dózisban adták be. Ez összhangban volt a galangin rákellenes aktivitásáról szóló korábbi jelentésekkel több rákos sejtvonalban.19,20) A citotoxikus hatások miatt a sejtek anti-melanogén hatásának igazolására irányuló kísérletek a körülmények gondos kiválasztását követelték meg. A galangin IC50 értéke azonban nagyon alacsony volt, ha olyan sejtmentes rendszerben tesztelték, amely nem mutatott citotoxikus hatást. Valójában a galangin hatékonysága a melanogenezis gátlásában elfogadható volt olyan alacsony dózisokban, amelyek nem fejtek ki citotoxicitást. Alacsony dózisú galangin hatékonyan csökkentette a melanintartalmat, valamint a tirozináz aktivitást a sejttenyésztő rendszerben. A sejtmentes rendszer mellettgalaninkimutatták, hogy erős gátló hatást fejt ki a tirozinázra a sejttenyésztő rendszerben.

Végül a galangin antimelanogén hatását egy HRM2 szőrtelen egér segítségével értékeltük. A HRM2 szőrtelen egérmodell hasznos alapot adott az in vivo melanogenezis kísérletekhez, mivel az egér képes melanint termelni, különösen környezeti stressz hatására.21,22) Ebben az egérmodellben a galangin jelentős antimelanogén hatást mutatott az UVB által kiváltott melaninszintézisre. Tudomásunk szerint ez az első olyan tanulmány, amely a galangin antimelanogén hatékonyságát mutatja be in vivo melanogenezis modell segítségével. Fontos az in vivo hatékonyság megállapítása, mivel sok más melanogenezis-gátló nem hat in vivo, mivel nem képesek átjutni a bőr stratum corneumán. Összefoglalva,galaninhatásos állati angiogén ágensként azonosították in vivo. Arra a következtetésre jutottunk, hogy a tirozináz inhibitor galangin új gyógyszerjelöltet kínál a hiperpigmentációs rendellenességek kezelésére.

cistanche kapszulák