Az MRNA-vakcinák fejlődése és előrehaladása a melanoma kezelésében: jövőbeli kilátások
Aug 08, 2023
Absztrakt: A tumorantigéneket kódoló mRNS vakcinák képesek lehetnek érzékenyíteni a gazdaszervezet immunrendszerét a rákos sejtekkel szemben, fokozva az antigénprezentációt és az immunválaszt. A COVID{0}} világjárvány kirobbanása óta az mRNS-oltások iránti érdeklődés felgyorsult, mivel a vírus elleni védőoltás a betegség terjedésének korlátozására szolgáló intézkedésként szolgált. Tekintettel arra, hogy az immunterápia az elmúlt évtizedekben a melanomakezelés sarokköve volt, a veleszületett immunitás célzott mRNS-oltásokkal történő további erősítése lehet a melanoma kezelésének következő kulcsfontosságú eredménye. Az egérrákmodellekből származó preklinikai adatok már bizonyítékot szolgáltattak az mRNS-vakcinák azon képességére, hogy a gazdaszervezetben immunválaszt indukálnak a rák ellen. Ezen túlmenően specifikus immunválaszokat figyeltek meg az mRNS-vakcinát kapott melanómás betegeknél, míg a közelmúltban végzett KEYNOTE-942-vizsgálat lehetővé teheti az mRNS-4157/V940 vakcina beépítését a melanoma kezelési algoritmusába, az immunrendszerrel kombinálva. ellenőrzőpont gátlás. Ahogy a meglévő adatokat tovább tesztelik és felülvizsgálják, a kutatók máris lelkesednek a rákterápia új, ígéretes útja iránt.
Kulcsszavak: mRNS; védőoltások; melanóma; rák; Immun terápia
cistanche kiegészítés előnyei-Tumorellenes
1. Bemutatkozás
Amióta az mRNS-t felfedezték és felismerték, mint egy nélkülözhetetlen és hatékony géntranszkripciós közvetítőt [1], a fehérjeexpresszió mesterséges indukálását sejtkultúrákban és egérmodellekben széles körben alkalmazzák a rákkutatásban [2–4]. Az 1990–2000-es évtized során számos kísérletet tettek mRNS-alapú rákellenes vakcina kifejlesztésére preklinikai szinten, olyan kialakult rákos antigének indukált expressziójával, mint a karcinoembrionális antigén (CEA) és a glikoprotein 100 (gp100). [5–7]. Mindazonáltal az mRNS-alapú vakcinákat a COVID{12}} világjárvány kirobbanásáig nagyrészt nem építették be a klinikai gyakorlatba, főként a megfelelő tudományos és technikai eszközök hiánya miatt az immunogén hatásuk és stabilitásuk biztosítására [8] ,9]. Az elmúlt évtizedekben az mRNS-vakcinák előállításával kapcsolatos szakértelem fokozatosan bővült, ami végül lehetővé tette, hogy az elsődleges védelmi mérföldkővé váljanak a közelmúltbeli világjárvány ellen [8,9]. Valójában a 2020–2021-es években a Pfifizer és a Moderna mRNS vakcinákat klinikai vizsgálatok során tanulmányozták, hivatalosan jóváhagyták, és a nyilvánosság számára beadták annak érdekében, hogy korlátozzák a vírus terjedését és csökkentsék klinikai megnyilvánulásainak súlyosságát fertőzötteknél. egyének [10–12]. Ebben az összefüggésben újjáéledt az mRNS-vakcinák, mint daganatellenes kezelés iránti tudományos érdeklődés. Az mRNS vakcinák közvetítik az antigénprezentációt, mivel dendritikus sejtek építik be őket, amelyek ennek következtében a vakcina által kódolt rákos antigéneket expresszálják a felszínükön, így citotoxikus CD8 plus, valamint segítő CD4 plusz sejtaktivációt indukálnak, miközben növelik a gyulladásos mediátorok felszabadulását [13] . Ennélfogva ígéretes módot jelentenek a genetikai információ eljuttatására az immunsejtekbe anélkül, hogy megzavarnák a nukleáris DNS szerkezetét vagy tartósan befolyásolnák a sejtfehérje expresszióját, mivel az mRNS nem hatol be a sejtmagba, ami veszélyes mutációkat idézhet elő [8,9,14 ,15]. Ezenkívül az mRNS vírus- vagy plazmidvektorok nélkül is átvihető, a gazdasejt természetesen feloldja, és előállítása kevésbé költséges a DNS-hez kapcsolódó terápiákhoz képest, ami lehetővé teszi a még biztonságosabb beadást és a nagy léptékű termelést [8,9,13, 16,17]. Az mRNS vakcinák beadhatók ex vivo; antigénprezentáló sejteket – például dendritikus sejteket – izolálnak a páciensből, inkubálják az mRNS vakcinával az mRNS által kódolt antigének expressziójának indukálása érdekében, és végül visszajuttatják a gazdaszervezetbe. Egy alternatív megközelítés az mRNS vakcina közvetlen beadása a betegnek, és biztonságos vakcinaszerkezetre van szükség, amelyet stabilizáló kationos komplexek, például protamin (gyantaszerű lúgos fehérje) és polimerek, például polietilénimin integrálásával tesz lehetővé [8,9 ,18]. Az újabb technológiai fejlesztések mRNS vektorként használt lipid nanorészecskék kifejlesztéséhez vezettek, amelyek biztonságosan szállítják az mRNS-t a citoplazmába, mivel stabilak és hajlamosak az endocitózisra anélkül, hogy megzavarnák a betöltött mRNS funkciót [8,9,18]. Az elmúlt évtizedekben az mRNS vakcina előállításának folyamatát alaposan vizsgálták és finomították. Az érintett mRNS-molekula transzkripciója in vitro történik, a megcélzott antigént kódoló DNS-szekvencia alapján, amely utóbbi egy linearizált plazmidba épül be [8,9,18]. Miután elkerülte az extracelluláris RNázok (mRNS-t lebontó enzimek) általi lebontást, a beadott mRNS egy része endocitózissal bejut a megcélzott sejt citoplazmájába, hogy a riboszómális gépezet által fehérjékké alakuljon át. A kapott fehérje vagy extracellulárisan felszabadulhat, vagy transzportálható és az extracelluláris felszínen exponálható, MHC (major histocompatibility complex) I. vagy II. osztályú fehérjékhez kapcsolódva [8,9,18]. Mint már említettük, a stabilitás kulcsfontosságú a hatékony mRNS-oltásban, tekintettel az mRNS törékeny természetére és az extracelluláris RNázok hatalmas jelenlétére. Robusztus mRNS vakcina létrehozása 50 és 30 nem lefordított régió beépítésével érhető el, amelyek magukban foglalják a kódoló területet, megakadályozva annak lebomlását. Az 50-es terület metilálásával történő lezárást és a poli(A)-farok (több adenozin-monofoszfát szekvenciája) 30-as területhez történő rögzítését egyaránt alkalmazzák az mRNS-szekvencia további stabilizálására [8,9,18]. Az mRNS-alapú kezelések széles körű potenciállal rendelkeznek; rosszindulatú daganatok, fertőző betegségek és allergiák ellen alkalmazhatók. Az onkológiában az mRNS-oltás célja, függetlenül a beadási módtól vagy a kódolt szekvenciáktól, az immunfelügyelet erősítése és a gazdaszervezet immunrendszerének rákos sejtekkel szembeni aktivitásának megerősítése [8,9,16,18]. Az onkológia területén vizsgált mRNS vakcina szekvenciák által kódolt célfehérjék a három fő kategória egyikébe tartoznak: 1. DNS-elváltozások, alternatív mRNS-splicing vagy poszttranszkripciós változások miatt kizárólag a daganat által expresszált neoantigének vagy mutált fehérjeformák. Jellemzőjük a magas és tumorspecifikus immunogenitás, és összefüggésbe hozhatók a daganat típusával, vagy akár személyre szabott, betegspecifikus antigének is lehetnek [19]. 2. Tumor-asszociált antigének, amelyek normális szöveteken találhatók, expressziójuk mennyiségileg vagy szerkezetileg eltér a normál mintázatoktól, mint például MAGE-A3 (A3 családszámú MAGE), NY-ESO-1 (New York nyelőcsőlaphám) sejtkarcinóma 1), tirozináz, TPTE (tenzinhomológiájú transzmembrán foszfatáz) és gp100 [20]. 3. Gyulladásos mediátorok, vagy extracellulárisan kiválasztódó kemokinek, például IL-12 (interleukin-12) és GM-CSF (granulocita-makrofág kolóniát stimuláló faktor), vagy sejtfelszínen expresszálódnak, például TLR4 (toll). -like receptor 4) [21]. A fenti fehérjék és mRNS szekvenciák izolálása, valamint a legimmunogénebb neoantigének és a megfelelő DNS-elváltozások felismerése lehetővé tette a megfelelő DNS-templátok létrehozását, amelyek felhasználhatók különféle mRNS-vakcinák előállításához, amelyeket különféle típusú vakcinákra lehet alkalmazni. rosszindulatú daganatok [8,9,16,18,21]. Az immunellenőrzési pont inhibitorok olyan monoklonális antitestek, amelyek az immun- vagy rosszindulatú sejtek felszínén lévő specifikus receptorokat célozzák meg, ellehetetlenítve a gazdasejt citotoxikus T-limfocitáinak deaktiválását, amelyeket a tumorsejtek indukálhatnak. Az ilyen szerek (pl. pembrolizumab, nivolumab, ipilimumab) 2010 óta forradalmasították a rákterápiát, növelve a különböző daganatok kezelési valószínűségét, tartós objektív válaszokat indukálva, és jelentősen meghosszabbítva a betegek túlélését [22]. Ennél is fontosabb, hogy az immunterápia vált a nem kemoszenzitív neoplazmában, például melanomában szenvedő betegek elsődleges kezelésévé, tolerálható és hatékony kezelési lehetőségeket biztosítva [22]. Az immunszökés azonban továbbra is előfordulhat; amint azt a klinikai vizsgálatok adatai mutatják, a melanómás betegek 50 százalékánál, még az ipilimumab és nivolumab erős kombinációja esetén is, a betegség progressziója a kezelés megkezdése után 1, illetve 5 évvel [23]. Az immunterápiával szembeni rezisztencia mögött meghúzódó mechanizmusok a következőkben foglalhatók össze:
A célmolekulák, például a PD-L1 (programozott halálligandum 1) csökkent expressziója a rákos sejtek által, ami megzavarja az anti-PD-1 (programozott sejthalál fehérje 1) antitestek hatékonyságát. Az anti-PD-1 szerek, mint például a nivolumab és a pembrolizumab, az immunrendszer és a rosszindulatú sejtek közötti immunszuppresszív kölcsönhatás gátlására szolgálnak, amelyet a T-limfociták által expresszált PD-1 és a PD közötti kapcsolat közvetít. -L1, rosszindulatú sejtek expresszálják. Következésképpen az alacsony PD-L1 expresszió elsődleges rezisztenciát jelez [24,25].
cisztancse gyógynövény-Daganatellenes
2. A rosszindulatú sejtek alacsony neoantigénterhelése. A neoantigének specifikus neoplasztikus antigének, amelyek a daganat által hordozott genetikai elváltozásokból származnak; minél nagyobb a tumor mutációs terhelése, annál szélesebb körben jelennek meg a megváltozott antigének a rákos sejt felszínén. Ezeket a módosított rákantigéneket a gazdaszervezet immunrendszere idegennek ismeri fel, fokozva az immuninfiltrációt és a citotoxicitást. A korlátozott neoantigéneket hordozó daganatok felülmúlhatják az immunrendszer felügyeletét, és kevésbé reagálnak az immunkontroll-gátlókra [26,27].
3. Immunszuppresszió. Azt találták, hogy a rákos sejtek, de a mieloid eredetű sejtek, a tumor stromasejtek és a CD4 plusz szabályozó T-limfociták is immunsejtek inaktiválásához vezethetnek azáltal, hogy elősegítik a szuppresszív citokinek, például az IL-10 (interleukin{{) kiválasztását. 4}}) és más kémiai mediátorok, mint például a TGF-béta (tumor növekedési faktor béta), amelyek gátolják az immunsejtek infiltrációját és amplifikációját, valamint a gyulladásos citokinek termelését [28–30]. Ebben az összefüggésben az mRNS-oltás arra törekszik, hogy az immunkontroll-gátlók értékes kiegészítőjévé váljon, megfordítva a rezisztencia útvonalakat (1. ábra). Az mRNS-vakcinák által kódolt, az immunrendszer stimulációja szempontjából kulcsfontosságú antigének (beleértve a beteg- vagy tumortípus-specifikus neoantigéneket és a tumor-asszociált antigéneket is) expresszálódhatnak az antigénprezentáló sejtek sejtfelszínén, megkönnyítve a tumorfészkek felismerését a gazdaszervezet által. rendszer, függetlenül a veleszületett tumor neoantigéntermelésétől vagy a PD-L1 expressziójától [8,9,16]. Ezzel párhuzamosan az immunaktivációval kapcsolatos molekulákat, például az IL-12-t, az IFN-t (interferon-alfa), a GM-CSF-et és a TLR4-et kódoló mRNS vakcinák képesek lehetnek a rákos sejtek által kiváltott immunszuppresszió ellensúlyozására. az immunsejtek aktivitásának és a gyulladásos mediátor termelésének helyreállításával [8,9,16]. Valójában egy nemrég közzétett kísérletben egy egyláncú IL-12 (az IL-12p40 és IL12p35 alegységek fúziója), IFN-, GM-CSF és IL{{39-ot kódoló mRNS vakcina. A }}sushi (az IL-15 fúziója az IL-15 receptor sushi doménjéhez) sikerült legyőznie az anti-PD-1 kezeléssel szembeni rezisztenciát vastagbél-adenokarcinóma egérmodellben, daganatot indukálva a kezelt egerek zsugorodása és a túlélés meghosszabbítása [31]. Ezt követően az mRNS-vakcinák és az immun-ellenőrzőpont-inhibitorok együttes beadása egy érdekes jövőbeli terápiás stratégiává vált [8,9,16]. A célzott immunterápiát sikeresen alkalmazták a melanómára, egy olyan daganatra, amely jól megalapozott kapcsolatban áll az immunrendszerrel [32]. A metasztatikus melanoma azonban továbbra is halálos betegség a betegek jelentős részénél, ami további kutatásokat tesz szükségessé a döntő kezelés érdekében. Az immunogén mRNS-oltás lehet a következő jelentős lépés e cél felé. Jelen áttekintésünkben megkíséreljük leírni a melanoma kezelésében alkalmazott mRNS vakcinákkal kapcsolatos legújabb preklinikai és klinikai adatokat, valamint a jövőbeni kilátásokat és lehetséges alkalmazásokat.
1. ábra. Az mRNS-vakcina és az immunrendszer közötti interakció sematikus ábrázolása, az immunkontrollpont immunterápia fokozása céljából. TMB: Tumor mutációs teher, ICI-k: Immun checkpoint inhibitorok.
2. Preklinikai bizonyítékok
Az mRNS-vakcinákat preklinikai egérrákmodellekben értékelték különböző kísérletekben (1. táblázat). A lipid kalcium-foszfát nanorészecskék (LCP-k) általi stabilizálásról kimutatták, hogy javítja a gp100-at és a tirozinázzal rokon protein 2-t (TRP-2) kódoló mRNS-vakcina hatékonyságát, amelyet immunkompetens egér B16F10 melanomamodellekben adtak be. A vakcinázás jelentős tumorzsugorodást idézett elő, miközben meghosszabbította a kezelt egerek túlélését [33].
1. táblázat. mRNS vakcinák a melanoma kezelésében: Preklinikai adatok.
2018-ban Wang et al. [34] a dendritikus sejtek sikeres in vitro transzfekciójáról számoltak be olyan LCP-alapú vakcinával, amely a tirozinázzal rokon protein 2-t (TRP-2) kódoló mRNS-t és a PD-L1 expressziót megcélzó RNS-t (siRNS) elhallgattatja. A TRP-2 egy fehérje, amely a melaninszintézist közvetíti a melanocitákban, és arról számoltak be, hogy túlzott expresszió esetén rezisztenciát biztosít a melanomasejtek DNS-károsító ágenseivel szemben [38]. Amikor az egér melanoma modelleket közvetlenül vakcinázták, a CD8 plusz T limfocita képződése a nyirokcsomókban, a tumor tömege és a lép megnövekedett a kezeletlen állatokhoz képest. A T-limfocita-specifikus reakció a TRP-2-ra fokozódott, míg a PD-L1 (programozott halál-ligand 1) expressziója hatékonyan leállt. A daganatnövekedés jelentősen késett a kezelt állatokban, valamint a rákos nyirokcsomók növekedése. Érdekes módon azt találták, hogy a TRP{18}}kódoló mRNS és siRNS kombinációjával történő oltás erősebben késlelteti a daganat növekedését, mint a TRP-2 mRNS vakcina és egy anti-PD{{22} } (programozott sejthalál fehérje 1) monoklonális antitest. Azt is megfigyelték, hogy az LCP-képződmények elősegítik a dendrites sejtek érését a fokozott intracelluláris kalcium felszabadulás révén. Egy másik, szintén TRP-t-2 kódoló, LCP-alapú mRNS-oltásnak sikerült fagocitózissal beszivárognia az antigénprezentáló sejtekbe (APC-kbe), erőteljes T-sejt-aktivációt indukálva, és elősegítette a díjszabású receptor 4 (TLR4) által közvetített jelátvitelt és gyulladásos folyamatokat. citokin felszabadulást szubkután injektálva melanoma egérmodellekben. Ennek eredményeként a vakcinával kezelt egerekben a tumor növekedése jelentősen lelassult a kezeletlen kontrollokhoz képest [35]. Szintetikus foszforotioáttal módosított CpG oligodezoxinukleotidokat (CpG-ODN) tartalmazó kombinált vakcina intratumorális injekciója kimutatták, hogy fokozza az immunválaszt és a specifikus melanoma neoantigéneket kódoló mRNS-t szingén egérmodellekben, gátolja a melanoma növekedését, miközben elősegíti a CD4 immuninfiltrációt és a CD8 infiltrációt. plusz limfociták [36]. Egy nemrégiben közzétett kísérletben a TRP-2-t és az ovalbumint kódoló mRNS-t, egy tojásfehérje fehérjét, amelyről kimutatták, hogy fokozza a citotoxikus limfociták általi neoantigén felismerést [39], amelyet a szingén melanoma egérmodellek nyirokcsomóiba szállítottak, sikerült elősegítenie a citotoxikus sejtválaszt. CD8 plusz T-sejtek által. Ezzel párhuzamosan egy anti-PD-1 inhibitorral kombinálva a kezelt egerek 40 százalékánál teljes választ figyeltek meg. Kimutatták, hogy a vakcinázás hosszú távú immunmemóriát eredményez az újrafertőzési kísérletekben, ahol a metasztatikus tumornövekedés gátolt a vakcinázott állatokban [37].
cistanche tubulosa – erősíti az immunrendszert
3. Klinikai bizonyítékok
MRNS vakcinákat adtak be előrehaladott melanómás betegeknek számos I/II. fázisú klinikai vizsgálat keretében (2. táblázat). Már 2006-ban 22 rosszindulatú melanómás betegbe intranodálisan vagy intradermálisan injektáltak egy autológ monocita eredetű dendritikus sejtekből álló, autológ tumor-mRNS-sel ex vivo feltöltött vakcinát. A T-limfocita expanzióval és interferontermeléssel jellemezhető vakcina-specifikus immunreakciót 19 betegből kilencnél figyelték meg, T-sejt-proliferációs/interferon-ELISPOT tesztekkel, valamint 8/18-ban, amelyet késleltetett túlérzékenységi reakcióval értékeltek. [40]. Az intradermális vagy intranodális adagolás a kezelt betegek 70 százalékában (7/10), illetve 25 százalékában (3/12) váltott ki immunválaszt [40]. Később [41] a vakcina mRNS által kódolt neoantigénekkel szembeni immun-specifikus CD4 plusz és CD8 plusz T-sejt-válaszokat kilenc válaszadó esetében jelentettek; A betegek vakcinázása után izolált T-sejtjei különböző, dendritikus sejtekre specifikusan reagáló T-sejt-klónokat tudtak termelni, miközben a vakcina neoantigén spektrumát tükröző T-sejt-receptorok széles választékát figyelték meg. A melanoma antigéneket (Melan-A, tirozináz, gp100, MAGE-A1, MAGE-A3, Survivin) kódoló, protaminnal stabilizált mRNS közvetlen intradermális beadása 21 áttétes melanómás betegnek [42] jól tolerálható volt, és nem okozott súlyos nemkívánatos eseményeket. 3 vagy magasabb. A szabályozó és mieloid szupresszor sejtek keringése jelentősen korlátozott volt a vakcinázott betegekben. A vakcina antigénjei elleni specifikus T-limfocita immunreakciót négyből két értékelhető betegnél figyelték meg, és teljes választ minden hét mérhető betegségben szenvedő betegnél figyeltek meg.
2. táblázat: mRNS vakcinák a melanoma kezelésében: Klinikai adatok.
A TriMix mRNS vakcina, amely CD40 ligandumot kódoló mRNS-ből (T helper sejt felszíni fehérje, antigén-specifikus reakciót közvetítő), konstitutívan aktív toll-like receptor 4-ből (hematopoietikus és nem hematopoietikus sejtfelszíni antigén, amely exogén és endogén antigének felismerését közvetíti), és A CD70-et (tumor immune checkpoint antigen) különféle kísérletekben tesztelték. Egy kísérleti vizsgálatban [43] autológ TriMix-elektroporált dendritikus sejteket transzfektáltak a melanómához kapcsolódó antigént (MAGE-A3, MAGE-C2, tirozináz vagy gp100) kódoló mRNS-sel, amelyet HLA II. osztályú jellel konjugáltak. A transzfektált dendritikus sejteket biztonságosan beadtuk 35 III/IV. stádiumú inoperábilis melanómás betegnek, de a RECIST kritériumok szerint nem észleltek objektív választ. További IFN- -2b beadása után 1/17 értékelhető beteg tapasztalt részleges választ, míg 5/17 stabil betegséget mutatott. A negyedik TriMix-DCs injekciót követően 21 betegnél végzett bőrbiopszia vakcina neoantigén-specifikus T-limfocitáival való beszűrődést mutatott 12 betegnél. Nevezetesen, a melanoma-asszociált antigénekkel (MAGE-A3, MAGE-C2, tirozináz, gp100) felolvasztott TriMix-DC-kkel végzett autológ vakcinázásról kimutatták, hogy a vakcina neoantigén-irányított T-limfocitáinak növekedését idézi elő, amelyek mindkét perifériás vérmintában megtalálhatók. /14 és bőrbiopsziákban az értékelhető kezelt betegek 12/14-énél [44]. A 14 értékelhető beteg közül két teljes és egy részleges objektív választ észleltek, és további 4/14 betegnél a betegség stabilizálódott. A PFS és az OS 1,8 és 51 hónap között, illetve 6,4 és 51 hónap között változott; de nem figyeltek meg szilárd összefüggést a klinikai kimenetel és az immunológiai válasz között [44]. Az ASCO 2019-ben a TriMix oltás értékelhető immunválaszt indukált 4/10 előrehaladott stádiumú melanomában szenvedő, nagy dózisú kezelésben részesülő betegnél, és 3/9 betegnél, akik alacsony dózisú kezelést kaptak [47].
Superman gyógynövények cistanche-Antitumor
Ugyanezt a TriMix-DC-MEL vakcinát, amely négy melanomával kapcsolatos antigént (tirozináz, gp100, MAGE-A3 és MAGE-C2) kódoló mRNS-en alapul, 30 fejlett betegnél ipilimumab beadásával is kombinálták. melanómás betegek [46]. A bejelentett ötéves teljes és progressziómentes túlélési arány 28 százalék, illetve 18 százalék volt. Az immunválasz értékelése perifériás vér mononukleáris sejtekkel (PBMC) és a melanoma vakcina antigén-dúsításának értékelése 15/30 betegnél volt megvalósítható (4/15, 4/15 és 2/15 CR, PR és SD esetén). A vakcinára adott immunválaszt 15 betegből 12-nél figyelték meg, és szignifikánsan összefüggésbe hozták a klinikai objektív válaszokkal, erősebbek a részleges és teljes válaszreakciókkal rendelkező betegeknél, mint a stabil vagy progresszív betegségben szenvedő betegeknél. Nevezetesen, a teljes túlélés összefüggésben van a CD8 plusz T-sejt-aktiváció százalékos arányával az immunválaszt jelentő betegekben [46]. A melanoma-specifikus antigéneket (MAGE-A1, -A3, -C2, tirozináz, MelanA/MART-1 vagy gp100) kódoló mRNS-sel feltöltött autológ dendritikus sejtekkel és egy HLA II. osztályba tartozó célzó szekvenciával végzett vakcináció 30 reszekált III/IV. stádiumú melanómás betegen is értékelték [45]. A bejelentett medián relapszusmentes túlélés csaknem két év volt (22 hónap; 95 százalékos CI 12-32 hónap). A közzététel időpontjáig tizenkét beteg halt meg, és a négyéves teljes túlélési arány 70 százalék volt. A medián teljes túlélést nem érték el. Ping és mtsai. [48] 471 melanoma szövetmintát hasonlított össze 812 normál bőrmintával. Összesen öt potenciálisan megcélozható tumorantigént azonosítottak (PTPRC, SIGLEC10, CARD11, LILRB1, ADAMDEC1); a magas antigénexpresszió elhúzódó OS-vel és DFS-sel, valamint az antigénprezentáló sejtek nagyobb tumor-infiltrációjával járt. Ennek az öt antigénnek a rákos sejtek általi erőteljes expressziója erősebb tumor-immuninfiltrációval és a betegek általános túlélésével járt együtt, míg az alacsonyabb expressziós szintek és a rövidebb túlélési idő immunogén „hideg” melanómákkal járt. Az ilyen megfigyeléses vizsgálatok hozzájárulhatnak a nagymértékben immunogén antigének felismeréséhez, amelyek alapjául szolgálhatnak az új mRNS vakcina felépítéséhez. Jelenleg hat melanoma klinikai vizsgálatban értékelik az mRNS-oltást, amelyek már most is ígéretes eredményeket mutatnak [49,50]. KEYNOTE-942 (NCT03897881) [33,34], egy folyamatban lévő, nyílt, IIb fázisú vizsgálat, már különösen biztató eredményeket mutatott az adjuváns kezelés beállításával kapcsolatban. Ebben a vizsgálatban egy 20 különböző mutált neoantigént kódoló, személyre szabott mRNS vakcina és az anti-PD-1 gátló pembrolizumab kombinációját adták be teljesen reszekált III/IV. stádiumú melanómában szenvedő betegeknek, összehasonlítva az egyszeres pembrolizumab kezeléssel. A gyártó cég közelmúltbeli sajtóközleménye [51] szerint a pembrolizumab és az mRNS{66}}/V940 vakcinával kombinált adjuváns kezelésben részesülő betegeknél 44 százalékkal kisebb a betegség kiújulásának vagy halálának kockázata, mint az alábbhagyott betegeknél. egyszeres pembrolizumab kezelés (HR=0,56, 95 százalékos CI, 0,31–1,08; egyoldalú p-érték=0,0266). Súlyos, kezeléssel összefüggő nemkívánatos eseményekről 14,4 százalékos, illetve 10 százalékos arányban számoltak be a pembrolizumab kombinációs karon, illetve az egyszeres pembrolizumab karon [51]. Georgina Long professzor, az ausztrál Melanoma Intézet munkatársa, a kutatók KEYNOTE{87}} korai eredményei iránti lelkesedésére reflektálva kijelentette, hogy ez a vizsgálat „penicillin-pillanatot” generálhat a melanomaterápia tekintetében [52]. Ezen túlmenően egy III. fázisú kísérletet is terveznek a következő lépésként [53]. A négy melanoma antigént: NY-ESO-1-t, tirozinázt, MAGE-A3-at és TPTE-t kódoló BNT111 mRNS vakcina biztonságosságát és tolerálhatóságát egy I. fázisú vizsgálatban értékelik (NCT02410733). Ugyanezt a vakcinát egy másik PD-1-gátlóval, a cemiplimabbal együtt adják be egy háromkaros, II. fázisú összehasonlító vizsgálatban (NCT04526899) [50]. A kutatók megpróbálják összehasonlítani a BNT111 vakcinával vagy cemiplimabbal végzett monoterápiát a két szer kombinációjával, mint második vonalbeli kezelést az immunellenőrzési pont inhibitorokkal szemben ellenálló, nem reszekálható melanoma ellen [50]. A Memorial Sloan Kettering Cancer Center I. fázisú vizsgálata jelenleg a TRP-t kódoló mRNS vakcinával elektroporált, autológ humán Langerhans-típusú dendritikus sejteket értékeli IIB-IV stádiumú melanomában szenvedő betegeknek megfelelő sebészeti kezelést követően. (NCT01456104) [50]. A gp100-on, tirozinázon, PRAME-n, MAGE-A3-on, IDO-n és egyéb, dendritikus sejtekre feltöltött tumor-hajtómű-mutációkon alapuló autológ mRNS-oltóanyagot kell beadni uveális melanómás betegeknek, hagyományos kezeléssel kombinálva, egy I. fázisú vizsgálatban. NCT04335890) [33]. Ezen túlmenően egy I. fázisú nyílt vizsgálat (NCT05264974) [50], amely a tervek szerint 2023-ban kezdi meg a betegek toborzását, célja egy autológ tumor mRNS nanorészecskés vakcina tolerálhatóságának feltárása IIIB stádiumú melanoma IV stádiumú betegeknél, a betegség adjuváns ellenére történő visszaesését követően. Immun terápia. A tanulmány várhatóan 2027-ben fejeződik be [50].
4. Következtetések és jövőbeli kilátások
A cistanche-kiegészítő előnyei – hogyan erősíthetjük az immunrendszert
Kattintson ide a Cistanche Enhance Immunity termékek megtekintéséhez
【Kérjen többet】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
A COVID{0}} világjárvány idején alaposan tanulmányozták az mRNS-oltásokat, amelyek feltárták e csúcstechnológiában rejlő lehetőségeket a melanóma kezelésében. Az állatmodell-kísérletek és a klinikai kísérletek ígéretes eredményeket mutattak, szilárd hátteret teremtve az elkövetkező években szisztematikusabb kutatásokhoz. Különösen a KEYNOTE-942 kísérlet, amely egy mRNS-oltást immunellenőrzőpont-gátlóval kombinált, arra törekszik, hogy elérje a következő kulcsfontosságú áttörést a melanoma kezelésében. Az mRNS-alapú rákterápiát vizsgáló jövőbeni laboratóriumi és klinikai kutatások fontos végpontjai ideális esetben a következők:
1. Erősen immunogén fehérjék, akár kemokinek, akár tumorral kapcsolatos antigének azonosítása, amelyek hatékonyabb és specifikusabb immunrendszer-stimulációt tesznek lehetővé anélkül, hogy a normál sejteket befolyásolnák.
2. Szakértelem fejlesztése a tudás és az infrastruktúra terén, hogy stabilabb mRNS vakcinákat állítsanak elő, amelyek képesek elkerülni a korai lebomlást, biztonságosan beadhatók, időben előállíthatók és nagy mennyiségben terjeszthetők.
3. Az mRNS oltás immunkontroll-gátlókkal és akár kemoterápiával vagy sugárterápiával való lehetséges kombinációinak tolerálhatósága; hanem az objektív válaszreakció, a betegség visszaesésének vagy progressziójának megelőzése, az általános túlélés és a betegek életminősége tekintetében mutatott hatékonyságuk is.
4. Az mRNS-alapú oltások klinikai előnyei metasztatikus, adjuváns és neoadjuváns kezelési környezetben, valamint első vagy második vonalbeli kezelésben és azon túl.
Mivel a fenti kérdések még megválaszolásra várnak, a gyakorló orvosoknak tisztában kell lenniük azzal, hogy tanulmányokat toboroznak, hogy tájékoztassák a betegeket, felkínálják számukra a felvételi lehetőséget és a jelenlegi technológián alapuló gyógyszereket.
Hivatkozások
1. Brenner, S.; Jacob, F.; Meselson, M. Egy instabil intermedier, amely információt hordoz a génektől a riboszómákig a fehérjeszintézishez. Természet 1961, 190, 576–581. [CrossRef] [PubMed]
2. Wolff, JA; Malone, RW; Williams, P.; Chong, W.; Acsadi, G.; Jani, A.; Felgner, PL Közvetlen géntranszfer egérizomba in vivo. Science 1990, 247 Pt 1, 1465–1468. [CrossRef]
3. Baklaushev, alelnök; Kilpeläinen, A.; Petkov, S.; Abakumov, MA; Grinenko, NF; Yusubalieva, GM; Latanova, AA; Gubskiy, IL; Zabozlaev, FG; Starodubova, ES; et al. A luciferáz expresszió lehetővé teszi a biolumineszcencia képalkotást, de korlátokat szab a mellrák ortotopikus egér (4T1) modelljének. Sci. Rep. 2017, 7, 7715. [CrossRef] [PubMed]
4. Jenkins, DE; Hornig, YS; Oei, Y.; Dusich, J.; Purchio, T. Biolumineszcens humán emlőrák sejtvonalak, amelyek lehetővé teszik emlődaganatok és többszörös metasztázisok gyors és érzékeny in vivo kimutatását immunhiányos egerekben. Breast Cancer Res. 2005, 7, R444–R454. [CrossRef] [PubMed]
5. Conry, RM; LoBuglio, AF; Wright, M.; Sumerel, L.; Csuka, MJ; Johanning, F.; Benjamin, R.; Lu, D.; Curiel, DT Messenger RNS polinukleotid vakcina vektor jellemzése. Cancer Res. 1995, 55, 1397–1400.
6. Zhou, WZ; Hoon, DS; Huang, SK; Fujii, S.; Hashimoto, K.; Morishita, R.; Kaneda, Y. RNS melanoma vakcina: Tumorellenes immunitás indukciója humán glikoprotein 100 mRNS immunizálással. Zümmögés. Gene Ther. 1999, 10, 2719–2724. [CrossRef]
7. Boczkowski, D.; Nair, SK; Snyder, D.; Gilboa, E. Az RNS-sel pulzált dendritikus sejtek erős antigénprezentáló sejtek in vitro és in vivo. J. Exp. Med. 1996, 184, 465–472. [CrossRef]
8. Sahin, U.; Karikó, K.; Türeci, Ö. mRNS-alapú terápiák – A gyógyszerek új osztályának kifejlesztése. Nat. Rev. Drug Discov. 2014, 13, 759–780. [CrossRef]
9. Pardi, N.; Hogan, MJ; Porter, FW; Weissman, D. mRNS vakcinák – Új korszak a vakcinológiában. Nat. Rev. Drug Discov. 2018, 17, 261–279. [CrossRef]
10. Polack, FP; Thomas, SJ; Kitchin, N.; Absalon, J.; Gurtman, A.; Lockhart, S.; Perez, JL; Pérez Marc, G.; Moreira, ED; Zerbini, C.; et al. A BNT162b2 mRNS COVID-19 vakcina biztonsága és hatékonysága. N. Engl. J. Med. 2020, 383, 2603–2615. [CrossRef]
11. Shroff, RT; Chalasani, P.; Wei, R.; Pennington, D.; Quirk, G.; Schoenle, MV; Peyton, KL; Uhrlaub, JL; Ripperger, TJ; Jergovi'c, M.; et al. Immunválaszok a BNT162b2 mRNS vakcina két és három dózisára szolid daganatos felnőtteknél. Nat. Med. 2021, 27, 2002–2011. [CrossRef]
12. Jackson, LA; Anderson, EJ; Rouphael, NG; Roberts, PC; Makhene, M.; Coler, RN; McCullough, képviselő; Chappell, JD; Denison, MR; Stevens, LJ; et al. A SARS-CoV2d elleni mRNS-oltás előzetes jelentés. N. Engl. J. Med. 2020, 383, 1920–1931. [CrossRef]
13. Iavarone, C.; O'hagan, DT; Yu, D.; Delahaye, NF; Ulmer, JB Az mRNS-alapú vakcinák hatásmechanizmusa. Expert Rev. Vaccines 2017, 16, 871–881. [CrossRef]
14. Tomba'cz, I.; Weissman, D.; Pardi, N. Vaccination with messenger RNS: A DNS vakcináció ígéretes alternatívája. Módszerek Mol. Biol. 2021, 2197, 13–31.
15. Miao, L.; Zhang, Y.; Huang, L. mRNS vakcina rák immunterápiájához. Mol. Rák, 2021, 20, 41. [CrossRef]
16. Barbier, AJ; Jiang, AY; Zhang, P.; Wooster, R.; Anderson, DG Az mRNS-vakcinák és immunterápiák klinikai fejlődése. Nat. Biotechnol. 2022, 40, 840–854. [CrossRef] [PubMed]
17. Van Nuffel, AM; Wilgenhof, S.; Thielemans, K.; Bonehill, A. A HLA-korlátozás leküzdése klinikai vizsgálatokban: Az mRNS-töltött DC-terápia immunmonitorozása. Oncoimmunology 2012, 1, 1392–1394. [CrossRef]
18. Xu, S.; Yang, K.; Li, R.; Zhang, L. mRNS Vaccine Era-Mechanisms, Drug Platform and Clinical Prospection. Int. J. Mol. Sci. 2020, 21, 6582. [CrossRef] [PubMed]
19. Xie, N.; Shen, G.; Gao, W.; Huang, Z.; Huang, C.; Fu, L. Neoantigens: Ígéretes célpontok a rákterápia számára. Jelátvitel. Target Ther. 2023, 8, 9. [CrossRef]
20. Liu, CC; Yang, H.; Zhang, R.; Zhao, JJ; Hao, DJ Tumorral kapcsolatos antigének és rákellenes alkalmazásaik. Eur. J. Cancer Care 2017, 26, e12446. [CrossRef] [PubMed]
21. Cosentino, M.; Marino, F. A COVID{1}} mRNS-oltások farmakológiájának megértése: Kockajáték a tüskével? Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 10881. [CrossRef] [PubMed] 22. Bagchi, S.; Yuan, R.; Engleman, EG Immune Checkpoint Inhibitors for the Treatment of Cancer: Clinical Impact and Mechanisms of Response and Resistance. Ann. Pathol tiszteletes. 2021, 16, 223–249. [CrossRef] [PubMed]
23. Larkin, J.; Chiarion-Sileni, V.; Gonzalez, R.; Grob, JJ; Rutkowski, P.; Lao, CD; Cowey, CL; Schadendorf, D.; Wagstaff, J.; Dummer, R.; et al. Öt éves túlélés a kombinált nivolumabbal és ipilimumabbal előrehaladott melanomában. N. Engl. J. Med. 2019, 381, 1535–1546. [CrossRef] [PubMed]
24. Patel, SP; Kurzrock, R. PD-L1 expresszió prediktív biomarkerként a rák immunterápiájában. Mol. Cancer Ther. 2015, 14, 847–856. [CrossRef]
25. Fundytus, A.; Booth, CM; Tannock, HA Milyen mélyre tudsz menni? PD-L1 expresszió, mint biomarker a rák immunterápiás kísérleteiben. Ann. Oncol. 2021, 32, 833–836. [CrossRef] 26. Jardim, DL; Goodman, A.; de Melo Gagliato, D.; Kurzrock, R. A tumormutációs teher kihívásai, mint immunterápiás biomarker. Cancer Cell 2021, 39, 154–173. [CrossRef]
27. Chan, TA; Yarchoan, M.; Jaffee, E.; Swanton, C.; Quezada, SA; Stenzinger, A.; Peters, S. A tumormutációs teher fejlesztése immunterápiás biomarkerként: Utility for the oncology clinic. Ann. Oncol. 2019, 30, 44–56. [CrossRef]
28. Long, H.; Jia, Q.; Wang, L.; Fang, W.; Wang, Z.; Jiang, T.; Zhou, F.; Jin, Z.; Huang, J.; Zhou, L.; et al. A tumor által kiváltott eritroid prekurzorok által differenciált mieloid sejtek immunszuppressziót közvetítenek, és csökkentik az anti-PD-1/PD-L1 kezelés hatékonyságát. Cancer Cell 2022, 40, 674–693.e7. [CrossRef]
29. Garcia Garcia, CJ; Huang, Y.; Fuentes, NR; Turner, MC; Monberg, ME; Lin, D.; Nguyen, ND; Fujimoto, TN; Zhao, J.; Lee, JJ; et al. A stromális HIF2 szabályozza az immunszuppressziót a hasnyálmirigyrák mikrokörnyezetében. Gasztroenterológia 2022, 162, 2018–2031. [CrossRef]
30. Wu, Y.; Yi, M.; Niu, M.; Mei, Q.; Wu, K. Mieloid eredetű szupresszor sejtek: A rákellenes immunterápia új célpontja. Mol. Rák, 2022, 21, 184. [CrossRef]
31. Bernardo, M.; Tolstyh, T.; Zhang, YA; Bangari, DS; Cao, H.; Heyl, KA; Lee, JS; Malkova, NV; Malley, K.; Marquez, E.; et al. Az anti-PD-1 rezisztencia kísérleti modellje a TGFß és Notch útvonalak aktiválódását mutatja, és érzékeny a helyi mRNS immunterápiára. Oncoimmunology 2021, 10, 1881268. [CrossRef] [PubMed]
32. Tucci, M.; Passarelli, A.; Mannavola, F.; Felici, C.; Stucci, LS; Cives, M.; Silvestris, F. Az immunrendszer kijátszása, mint a melanoma progressziójának előszobája: A dendrites sejtek szerepe. Elülső. Oncol. 2019, 9, 1148. [CrossRef] [PubMed]
33. Oberli, MA; Reichmuth, AM; Dorkin, JR; Mitchell, MJ; Fenton, OS; Jaklenec, A.; Anderson, DG; Langer, R.; Blankschtein, D. Lipid nanorészecskékkel segített mRNS bejuttatás erős rák immunterápiához. Nano Lett. 2017, 17, 1326–1335. [CrossRef] [PubMed]
34. Wang, Y.; Zhang, L.; Xu, Z.; Miao, L.; Huang, L. Az antigén-specifikus ellenőrzőpont blokáddal rendelkező mRNS vakcina fokozott immunválaszt vált ki a kialakult melanoma ellen. Mol. Ott. 2018, 26, 420–434. [CrossRef]
35. Zhang, H.; Te, X.; Wang, X.; Cui, L.; Wang, Z.; Xu, F.; Li, M.; Yang, Z.; Liu, J.; Huang, P.; et al. A lipidszerű anyagot tartalmazó mRNS vakcina bejuttatása a Toll-like receptor 4 jelátvitel révén fokozza a daganatellenes hatékonyságot. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2021, 118, e2005191118. [CrossRef]
36. Li, Q.; Ren, J.; Liu, W.; Jiang, G.; Hu, R. A főemlősök immunválaszának aktiválására kifejlesztett CpG oligodezoxinukleotid daganatellenes hatást vált ki egy neoantigén alapú mRNS rákvakcinával kombinálva. Drug Des. Dev. Ott. 2021, 15, 3953–3963. [CrossRef]
37. Chen, J.; Igen, Z.; Huang, C.; Qiu, M.; Song, D.; Li, Y.; Xu, Q. Lipid nanorészecskék által közvetített nyirokcsomó-célzó mRNS rákvakcina bejuttatása robusztus CD8 plusz T sejt választ vált ki. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2022, 119, e2207841119. [CrossRef] [PubMed]
38. Chu, W.; Pak, BJ; Bani, MR; Kapoor, M.; Lu, SJ; Tamir, A.; Kerbel, RS; Ben-David, Y. A tirozinázzal rokon protein 2, mint a cisz-diamin-diklórplatina(II) elleni melanoma-specifikus rezisztencia mediátora: Terápiás vonatkozások. Oncogene 2000, 19, 395–402. [CrossRef]
39. Ő, M.; Huang, L.; Hou, X.; Zhong, C.; Bachir, ZA; Lan, M.; Chen, R.; Gao, F. Hatékony ovalbumin bejuttatás egy új, multifunkcionális micellás platform segítségével célzott melanoma immunterápiához. Int. J. Pharm. 2019, 560, 1–10. [CrossRef]
40. Kyte, JA; Mu, L.; Aamdal, S.; Kvalheim, G.; Dueland, S.; Hauser, M.; Gullestad, HP; Ryder, T.; Lislerud, K.; Hammerstad, H.; et al. A melanomaterápia I/II. fázisú vizsgálata autológ tumor-mRNS-sel transzfektált dendritikus sejtekkel. Cancer Gene Ther. 2006, 13, 905–918. [CrossRef]
41. Kyte, JA; Kvalheim, G.; Lislerud, K.; Thor Straten, P.; Dueland, S.; Aamdal, S.; Gaudernack, G. T-sejtes válaszok melanómás betegekben tumor-mRNS-sel transzfektált dendritikus sejtekkel végzett vakcinázás után. Cancer Immunol. Immunother. 2007, 56, 659–675. [CrossRef]
42. Weide, B.; Pascolo, S.; Scheel, B.; Derhovanessian, E.; Pflflugfelder, A.; Eigentler, TK; Pawelec, G.; Hoerr, I.; Rammensee, HG; Garbe, C. Protamin-védett mRNS közvetlen befecskendezése: Az 1/2 fázisú vakcinációs vizsgálat eredményei metasztatikus melanoma betegeknél. J. Immunother. 2009, 32, 498–507. [CrossRef] [PubMed]
43. Wilgenhof, S.; Van Nuffel, AM; Corthals, J.; Heirman, C.; Tuyaerts, S.; Benteyn, D.; De Coninck, A.; Van Riet, I.; Verfaillie, G.; Vandeloo, J.; et al. Terápiás oltás autológ mRNS elektroporált dendritesejtes vakcinával előrehaladott melanomában szenvedő betegeknél. J. Immunother. 2011, 34, 448–456. [CrossRef] [PubMed]
44. Benteyn, D.; Van Nuffel, AM; Wilgenhof, S.; Corthals, J.; Herman, C.; Neyns, B.; Thielemans, K.; Bonehill, A. A CD8 plusz T-sejtes válaszok jellemzése mRNS-sel elektroporált autológ dendritikus sejtekkel (TriMixDC-MEL) kezelt melanómás betegek perifériás vérében és bőr injekciós helyén. Biomed Res Int. 2013, 2013, 976383. [CrossRef]
45. Wilgenhof, S.; Corthals, J.; Van Nuffel, AM; Benteyn, D.; Heirman, C.; Bonehill, A.; Thielemans, K.; Neyns, B. Messenger RNS-elektroporált dendritesejtes terápiával kezelt melanómás betegek hosszú távú klinikai kimenetele a metasztázisok teljes reszekcióját követően. Cancer Immunol. Immunother. 2015, 64, 381–388. [CrossRef] [PubMed]
46. De Keersmaecker, B.; Claerhout, S.; Carrasco, J.; Bár, I.; Corthals, J.; Wilgenhof, S.; Neyns, B.; Thielemans, K. TriMix és tumorantigén mRNS elektroporált dendritesejtes vakcináció plusz ipilimumab: Kapcsolat a T-sejt aktiváció és a klinikai válaszok között előrehaladott melanomában. J. Immunother. Rák, 2020, 8, e000329. [CrossRef]
47. Arance Fernandez, AM; Baurain, J.-F.; Vulsteke, C.; Rutten, A.; Soria, A.; Carrasco, J.; Neyns, B.; De Keersmaecker, B.; Van Assche, T.; Lindmark, B. A TriMix-alapú mRNS immunterápia (ECI-006) fázis I. vizsgálata (E011-MEL) reszekált melanómás betegeken: Biztonsági és immunogenitási elemzés. J. Clin. Oncol. 2019, 37, 2641. [CrossRef]
48. Ping, H.; Yu, W.; Gong, X.; Tong, X.; Lin, C.; Chen, Z.; Cai, C.; Guo, K.; Ke, H. Melanoma tumor antigének és immunaltípusok elemzése mRNS vakcina kifejlesztéséhez. Investig. New Drugs 2022, 40, 1173–1184. [CrossRef]
49. Lorentzen, CL; Haanen, JB; Én is.; Svane, IM Klinikai fejlesztések és folyamatban lévő vizsgálatok a rák kezelésére szolgáló mRNS-vakcinákkal kapcsolatban. Lancet Oncol. 2022, 23, e450–e458. [CrossRef]
50. ClinicalTrials.gov. Elérhető online: https://www.clinicaltrials.gov/ (Hozzáférés dátuma: 2023. január 10.).
51. A Moderna és a Merck bejelentette az mRNS-4157/V940-et, egy személyre szabott mRNS-rák elleni védőoltást, a KEYTRUDA®-val (Pembrolizumab) kombinálva, amely a 2b. fázisú KEYNOTE-942 próba elsődleges hatékonysági végpontja. Elérhető online: https://www.merck.com/news/moderna-and-merck-announce-mrna-4157-v940-an-investigational-personalized-mrna cancer-vaccine-in-combination- with-keytruda-pembrolizumab-met-primary-effificacy-endpoint-in-phase-2b-keynote-94/ (Hozzáférés: 2022. december 13.).
52. Áttörés a melanoma elleni mRNS-vakcinákban. Elérhető online: https://www1.racgp.org.au/newsgp/clinical/breakthrough in-mrna-vaccines-for-melanoma (letöltve 2023. január 10-én).
53. mRNS Vaccine Plus KEYTRUDA®Improve Melanoma Survival. Elérhető online: https://www.europeanpharmaceuticalreview. com/news/177505/mrna-vaccine-plus-keytruda-improve-melanoma-survival/ (Hozzáférés: 2023. január 10.).