A Cistanche fenil-etanol-glikozidok alkoholmentes zsírmájbetegségekre gyakorolt ​​hatásának feltárása hálózati farmakológia és sejtkísérletek alapján

 

Absztrakt

Célkitűzés: A Cistanche-fenil-etanol-glikozidok nem-alkoholos zsírmájbetegségre (NAFLD) gyakorolt ​​​​javító hatásának vizsgálata.

Mód: Hálózati farmakológiát használtak a Cistanche fenil-etanol-glikozidok NAFLD elleni lehetséges mechanizmusainak előrejelzésére. Egy in vitro NAFLD modellt állítottunk fel a HepG2 sejtek szabad zsírsavak (FFA) indukálásával. A sejtek életképességét a CCK-8 vizsgálattal értékeltük; Olajvörös O festést alkalmaztunk a lipid felhalmozódás megfigyelésére; a triglicerid (TG) és az összkoleszterin (TC) szintjét assay kittel mértük; JC-1 festést alkalmaztunk a mitokondriális membránpotenciál felmérésére; az intracelluláris ROS szinteket DCFH-DA fluoreszcens próbával értékeltük; az apoptózist Hoechst 33342 festéssel detektáltuk; és a TNF-, PI3K, Akt és Bax fehérjék expresszióját Western blottal mértük.

Eredmények: Tíz aktív vegyületet és 77 potenciális célpontot azonosítottak az anti-NAFLD hatásokkal kapcsolatban, a fő célpontok közé tartozik a TNF, NFKB1 és TLR4. A vegyületek jó kötési affinitást mutattak a célpontokkal, különösen a TNF-fel. A modellcsoporttal összehasonlítva a Cistanche feniletanoid glikozidok szignifikánsan csökkentették az FFA által kiváltott lipid felhalmozódást a HepG2 sejtekben (P < 0,01), csökkentették az intracelluláris TG, TC és ROS szintet (P < 0,01), helyreállították a mitokondriális membránpotenciált, enyhítették a mitokondriális károsodást, csökkentették a P < és az apoptózist0. csökkentette a TNF-, PI3K és Akt fehérje expresszióját (P < 0,05, P < 0,01).

Következtetés: A Cistanche fenil-etanoid glikozidok anti-NAFLD hatást fejtenek ki azáltal, hogy javítják az FFA által kiváltott lipid felhalmozódást, a mitokondriális diszfunkciót, az oxidatív stresszt és az apoptózist a HepG2 sejtekben. Ezek a hatások a TNF/PI3K/Akt jelátviteli útvonalhoz kapcsolódhatnak.

Kulcsszavak: Cistanche feniletanoid glikozidok; nem alkoholos zsírmájbetegség (NAFLD); lipid anyagcsere; oxidatív stressz;apoptózis; TNF/PI3K/Akt jelátviteli útvonal; hálózati farmakológia; sejtkísérlet

 

Cistanche feniletanoid glikozidok

 

 

 

Magas tartalmú Cistanche kivonat eladó

Vegye fel velünk a kapcsolatot, vásároljon most

 

 

1. Bevezetés

Az alkoholmentes zsírmájbetegség (NAFLD) egy krónikus májbetegség, amelyet túlzott alkoholfogyasztás nélküli májzsugorodás jellemez. Kínában a prevalencia elérte a 32,9%-ot. Patogenezise több mechanizmust foglal magában, beleértve az inzulinrezisztenciát, az oxidatív stresszt és a bél mikrobiota egyensúlyhiányát. A klinikai tünetek közé tartozik a fáradtság, a máj területén fellépő kellemetlen érzés és a hasi fájdalom, súlyos esetekben pedig nem alkoholos steatohepatitis (NASH) kialakulásához vezethet.

Jelenleg az életmódbeli beavatkozások jelentik a NAFLD elsődleges kezelését. Bár az FDA 2024-ben jóváhagyta a NAFLD első gyógyszerét, a Resmetiromot (Rezdiffra), ennek potenciális káros hatásai lehetnek, például májkárosodás és szív- és érrendszeri kockázatok. Ezért sürgősen biztonságos és hatékony kezeléseket kell találni a NAFLD számára.

A hagyományos kínai orvoslás (TCM), több összetevőből, több célpontból és több útvonalból álló jellemzőivel, jól illeszkedik a NAFLD összetett patogeneziséhez, és egyedülálló előnyöket kínál a kezelésében.

Cistanche deserticolaésCistanche tubulosaaz Orobanchaceae családba tartozó gyógynövények, amelyek szerepelnek aShennong Bencao Jing. Húsos, pikkelyekben gazdag szárukat hagyományosan a máj és a vese tonizálására, esszencia- és vérpótlásra, valamint a belek nedvesítésére használják. Az elsődleges hatóanyagok - a fenil-etanoid-glikozidok - gyulladásgátló, lipidszint-csökkentő és májvédő tulajdonságokkal rendelkeznek. Azonban még mindig hiányoznak szisztematikus tanulmányok a NAFLD elleni hatásaikról.

Jelen tanulmány célja a Cistanche fenil-etanol-glikozidok farmakológiai alapjainak és lehetséges mechanizmusainak elemzése a NAFLD kezelésében hálózati farmakológia segítségével, valamint ezek mechanizmusának további feltárása sejtkísérletekkel, elméleti alapot adva új gyógyszerek kifejlesztéséhez.

 

2. Anyagok

2.1 Hálózati farmakológiai eszközök

TCMSP: https://tcmspw.com/tcmsp.php

CNKI: https://www.cnki.net/

PubMed: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/

PubChem: https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/

SwissTargetPrediction: http://www.swisstargetprediction.ch/

NetInfer: http://lmmd.ecust.edu.cn/netinfer/

SuperPred: https://prediction.charite.de/subpages/target_prediction.php

GeneCards: https://www.genecards.org/

DisGeNET: http://www.disgenet.org/

STRING: https://string-db.org/

Bioinformatika: https://www.bioinformatics.com.cn/

UniProt: https://www.uniprot.org/

RCSB EKT: https://www.rcsb.org/

Cytoscape 3.9.1: https://cytoscape.org/

R 4.3.3: https://www.r-project.org/

AutoDock Vina 1.5.7: https://vina.scripps.edu/

2.2 Cell Line

HepG2 humán májráksejtek, a Wuhan Procell Life Science & Technology Co., Ltd.-től vásárolva.

2.3 Reagensek és gyógyszerek

Cisztanche fenil-etanol-glikozidok (Tételszám. 201610, tisztaság 80% vagy annál nagyobb, 44,5% echinakozidot és 16,1% verbakozidot tartalmaz), a Hotan Dechen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd.-től vásárolt törzsoldat 6,40 mg/ml koncentrációban, szűrve és 0 °C-on tárolva.

További reagensek a következők:

Borjúmagzati szérum (FBS), DMEM táptalaj, penicillin-sztreptomicin, Oil Red O festőkészlet, BCA készlet, ROS detektáló készlet, Hoechst 33342, BSA-V, nátrium-oleát, nátrium-palmitát, TG és TC vizsgálati készletek, CCK-8 teszt, mitokondriális antitestek,} kitNF JC-1 PI3K p85, Akt, Bax, -aktin és másodlagos HRP-konjugált antitestek.

2.4 Műszerek

CO₂ inkubátor (Forma 371)

Biológiai biztonsági szekrény (HERASAFE KS18)

Mikrolemez olvasó (Multiskan GO)

Fordított mikroszkóp (Nikon TS2-S-SM)

Vízfürdő, centrifuga (H1750R), analitikai mérleg, kemilumineszcens képalkotó rendszer (Azure 600), fluoreszcens mikroszkóp (Leica DMi8)