Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Absztrakt:A szőlővessző a szőlőtermesztés hulladékbiomassza, amely bioaktív polifenolokat és értékes kozmetikumokat tartalmaz. Míg számos tanulmány számolt be az E-resveratrol kozmetikai hatásairól, csak néhányan írták le az E-ε-vinifera, a szőlőcukorkivonatok (GCE) második fő alkotóelemének potenciálját, és egyikük sem vizsgálta a GCE-t mint polifenolok természetes keverékét kozmetikai alkalmazásokhoz. . Ebben a tanulmányban a polifenolban gazdag szőlőfajtákból származó GCE-ben rejlő lehetőségeket vizsgáltuk többfunkciós kozmetikai összetevőként. HPLC analízist végeztek a főbb polifenolok mennyiségi meghatározására a GCE-ben, azaz a katechin, epikatechin, E-resveratrol, E-piceatannol, ampelopsin A, E-ε-vinifera, hopeafenol, izohopeafenol, E-miyabenol C és E-vitamin kiválasztott fajtákból. . Bőrfehérítéskeresztül lehetségestirozinázgátlási assay-t és a GCE sejt longevity protein (SIRT1) aktiválási kapacitását tiszta E-resveratrol és E-ε-vinifera értékekkel hasonlították össze. Kiszámították a GCE polifenolok gyógyszerszerűségét, ami lehetővé tette a bőr permeabilitásának és biohasznosulásának előrejelzését. Végül, a jelen adatok lehetővé tették a polifenolban gazdag fajtákból származó GCE multifunkcionális kozmetikai összetevőkként való figyelembevételét a zöldkémiai gyakorlatnak megfelelően.

Kulcsszavak:szőlőnád-kivonatok; természetes hozzávalók; polifenolok; E-resveratrol; E-ε-vinifera; sirtuinaktiválás;tirozinázgátlás; drogszerűség

A cistanche egy tirozináz inhibitor

1. Bemutatkozás

A kozmetikai iparban kulcskérdéssé vált a természetes összetevőkön alapuló új bőrápoló készítmények tudatos tervezése, a környezetvédelmi felelősségvállalás betartásával. A növényi kivonatokat összetételük, biológiai aktivitásuk, stabilitásuk és bőráteresztő képességük alapján választják ki. Ezek a tényezők határozzák meg az összetevő általános hatékonyságát és kozmetikai potenciálját. Napjainkban egyre nagyobb az igény olyan új természeti erőforrások iránt, amelyek hatékony bőrápoló összetevőket tartalmaznak, amelyek megvédenek a stresszforrásoktól, beleértve a környezetszennyezést, a káros sugárzást, valamint a helytelen táplálkozást és a stresszes életmódot [1]. Ezenkívül az ügyfelek környezetbarát natúrkozmetikumokat keresnek, és a növényi maradványokból újrahasznosított biomolekulák új perspektívákat kínálnak a fenntartható beszerzés felé.

A szőlészet (és a borágazat) a világ egyik legrégebbi és legfejlettebb iparága, ahol a grapefruit körülbelül 80 százalékát borkészítésre használják [2]. Köztudott, hogy a szőlő gazdag forrása az egészségre jótékony hatású, értékes vegyületeknek, például antocianinoknak, fenolsavaknak, flavan-3-oloknak, flavonoloknak, proantocianidinek, sztilbenoidoknak, melaninnak, zsírsavaknak, ásványi anyagoknak, valamint vitaminoknak [2]. A borkészítés során különböző biomolekulákban gazdag melléktermékek keletkeznek, beleértve a törkölyt (bőr és magvak), seprőt, valamint egyéb szilárd hulladékokat, például szőlővesszőt [3]. Ezek közül a szőlőfabiomassza, amelyet a téli metszés után kidobnak, nagy potenciállal rendelkezik új természetes kozmetikai összetevők kifejlesztésében a nagy mennyiségben és a polifenolok, köztük a sztilbenoidok jelenléte miatt [2,4]. Korábbi tanulmányok arról számoltak be, hogy a szőlőfajta-választás meghatározó a polifenolban gazdag GCE kifejlesztésében [4–6].

Az E-resveratrol, egy jól ismert szőlővédő vegyület, számos biológiai aktivitást mutat, köztük antioxidáns [7], rákellenes [8,9], gombaellenes [10] és gyulladáscsökkentő tulajdonságokat [11]. Jelentős hatást fejt ki a bőr ellen is. öregedési folyamaton keresztültirozinázgátlás [12,13], amely a bőr elszíneződésének gátlásának kulcsmechanizmusa. A bőr pigmentációjának folyamata a melanin és a lipofuscin jelenlétével függ össze, amelyek feleslege és abnormális eloszlása ​​a bőrben sötét foltokat okoz. Az egyenetlen bőrtónus az öregedési folyamat egyik fő tünete. A melanin hatása alatt képződiktirozináza melanogenezis során szabályozza a D3-vitamin bioszintézisét, és növeli a bőr ellenálló képességét a leégéssel és daganatokkal szemben [13,14]. Ha lokális hiperpigmentáció lép fel, az esztétikai problémák mellett a melanoma kockázatát is növelheti. Ezért a tirozináz inhibitorok, mint az E-resveratrol, vonzóak lehetnek a kozmetikai és gyógyászati ​​iparban, mint depigmentációs szerek [15].

Emellett a bőr öregedési folyamatainak lelassulása is bekövetkezhet a természetes sejtjavító mechanizmusok aktiválása révén. Sirtuin-aktiváló vegyületek alkalmazásával érhető el [1]. A SIRT1 aktivitás stimulálása, amely fenntartja a sejt élettartamát, a transzkripciós faktorokat és más DNS-javító fehérjéket [16], döntő fontosságú az oxidatív stressz szabályozásában és a az öregedési folyamat szabályozása [17]. A sirtuinokat általában a transzkripció, a transzláció, a fehérje stabilitás és az oxidáció szintjén szabályozzák természetes inhibitorok, például a nikotinamid. Az emlős sirtuinok, mint a SIRT1, a kiválasztott receptorok és DNS-javító fehérjék transzkripciós szabályozójaként működnek. Szabályozzák az energia-anyagcserét, a sejtek túlélését, a DNS-javítást, a szövetek regenerálódását, a gyulladásos mechanizmusokat és a neuronális jelátvitelt is [1].

Az E-resveratrol és származékai szőlővesszőben való jelenléte nagyszerű lehetőséget kínál ennek a természetes kozmetikai összetevőnek a kozmetikai iparban való felhasználására, mint hatékony öregedésgátló viasirtuin-aktiváló éstirozináz-gátló aktivitásokat [1,16].

A modern kozmetikai összetevőkkel szemben támasztott követelmények közé tartozik azok multifunkcionalitása, biztonsága és hatékonysága. Egy aktív molekula megerősített biológiai hatása általában nem elegendő az innovatív kozmetikai készítmény előállításához. A biológiailag aktív vegyület számos fizikai-kémiai tulajdonsága döntő fontosságú a helyi alkalmazás utáni általános hasznosság biztosításához [18]. A biohasznosulás és a bőr áteresztőképessége számos potenciális hatóanyag kozmetikai felhasználását korlátozó tényező [19]. A természetes vegyületek kozmetikai összetevőként való alkalmazása új értelmet nyer a természetes kivonatok esetében, amelyek különböző fizikai-kémiai tulajdonságokkal rendelkező molekulák keverékét tartalmazzák. e tényhez még mindig kérdéses a tiszta vegyületek, mint az E-resveratrol vagy az E-ε-vinifera bőrfelszívódásának összehasonlítása a sztilbenoidokban gazdag keverékekkel (pl. GCE). A tiszta anyag fizikai-kémiai tulajdonságai a döntő jelentőségűek. paraméter, amely korlátozhatja annak permeabilitását. Más szempontból az ilyen keverékek alkalmazása a biológiai aktivitások széles skáláját biztosítaná a stratum corneum felszínétől az epidermiszen át a dermisz mély rétegeiig.

Ebben a tanulmányban értékeltük a korábban kiválasztott polifenolban gazdag kultúrákból származó GCE kozmetikai potenciálját [20], mint többfunkciós fiatalító szert, két különböző mechanizmuson keresztül; (1) bőrfehérítéskeresztültirozinázgátlás enzimatikus tesztekkel és dokkolási adatokkal, (2) sejtek öregedésének késleltetése sirtuin aktiválási vizsgálati eljárásokkal. A GCE tiszta összetevőinek, mint például az E-resveratrol és az E-ε-vinifera aktivitását a GCE-vel, a sztilbenoidok természetes bioforrásból származó keverékével hasonlítottuk össze. Végül értékeltük a GCE fő összetevőinek elérhetőségét és a bőrgáton való áthatolási képességüket.

2. Eredmények és megbeszélés

2.1. Polifenolok koncentrációja GCE-ben

A GCE-ben jelenlévő főbb polifenolok koncentrációját öt, korábban kiválasztott fajtából HPLC analízissel határoztuk meg (1. táblázat) [20]. Tíz fő vegyületet azonosítottak: két flavonoidot (katekin, epikatekin), valamint nyolc sztilbenoidot (ampelopsin A, E-resveratrol, E-piceatannol, hopeafenol, izohopeafenol, E-ε-vinifera, E-miyabenol C és E-vitamin). ). A vegyületek kémiai szerkezetét az 1. ábra mutatja be.

Nyolc polifenolt azonosítottak a tiszta standardokkal, azaz az E-resveratrol, E-piceatannol, katechin, epicatechin, E-ε-vinifera, hopeafenol, ampelopsin A és E-vitisin B összehasonlításával. Két vegyület (izohopeafenol és E-miyabenol C) az elúciós sorrend, az UV-spektrumok és az irodalomból származó MS adatok szerint kerültek besorolásra [21]. A HPLC-elemzések a GCE-ben nagyon magas össz-polifenol-koncentrációt mutattak ki az öt kiválasztott fajta esetében, a Sauvignon esetében 16,8 ± 7,4 százaléktól a Villard Noir esetében 39,4 százalék ± 3 százalékig. A Savagnin blanc GCE tartalmazta a legmagasabb E-resveratrol-koncentrációt (12.0 százalék ± 4,4 százalék ), míg a Villard Noir GCE-t jellemezte a legmagasabb E-ε-vinifera-tartalom (3,6 százalék ± 0). ,2 százalék ) és E-vitisin B (17,2 százalék ± 1 százalék ). Ezek a fajtaspecifikus polifenol kompozíciók a kozmetikai aktivitások különböző szintjeit hajthatják végre.

2.2. Sirtuin aktiválása

Első lépésként értékeltük az öt fajta (Villard Noir, Sauvignon, Savagnin, Riesling és Magdeleine Noire des Charentes) GCE öregedésgátló hatását. A 2A. ábra bemutatja a két tiszta sztilbenoid (E-resveratrol és E-ε-viniferin) által 1–100 µM koncentrációtartományban végzett szirtuinaktiválás eredményeit, összehasonlítva a negatív kontrollként használt nikotinamiddal.

A 2A. ábrán látható, hogy a kontrollmintához képest mindkét sirtuinaktivátor (E-resveratrol és E-ε-viniferin) hatékony koncentrációja legalább 5 µM volt, és 3--szeres növekedést ért el 100 µM-nál.E- A rezveratrol enyhén magasabb SIRT1 aktivációt mutatott (130 százalék ± 13 százalék 5 µM esetén 307 százalék ± 30 százalék 100 µM esetén), mint az E-ε-viniferin (95 százalék ± 15 százalék és 280 százalék ± 24 százalék).

Már ismert, hogy az E-resveratrol a SIRT1 aktiválása révén jótékony hatással van az emberi szervezetre. Horwitz és mtsai, 2003 [16] arról számoltak be, hogy az E-resveratrol csökkenti a SIRT1 MichaelisMenten-állandóját, és növeli a sejtek túlélését azáltal, hogy stimulálja a p53 SIRT1-függő dezacetilációját. Az élesztőben az E-resveratrol a SIR2 stimulálásával utánozza a kalóriakorlátozást, növeli a DNS stabilitását és 70 százalékkal meghosszabbítja az élettartamot. Stacchiotti et al. (2016) [22] megerősítette, hogy az E-resveratrol első funkciója a gyulladás csökkentése és az oxidatív károsodások korlátozása a szövetekben. Az E-resveratrol öregedésgátló tulajdonságai a SIRT1 aktiválása révén az oxidatív anyagcsere javulásával is összefüggésbe hozhatók olyan kulcsfontosságú szervekben, mint a szív, az erek, az izmok és a vesék [22]. Más vizsgálatokban SIRT1-inhibitor, például nikotinamid jelenlétében az E-resveratrol stimulálta a SIRT1-et [16]. Ezen túlmenően koncentrációfüggő hatásokat figyeltek meg aktivitásában. Ráadásul a p53 SIRT1-függő dezacetilációjának stimulálásával az E-resveratrol molekula kedvezőtlen körülmények között növeli a sejtek túlélését [16]. Azt is kimutatták, hogy az E-resveratrol képes megvédeni az emberi sejteket a lipidkárosodástól, ami jelentős lehet a lipofil bőrgát-szerkezetek lebomlásának megelőzésében. Noha az E-resveratrol aktivitásának teljes mechanizmusát további tanulmányok még nem magyarázzák meg, a sirtuin aktiválása az E-resveratrol fő tevékenysége az E-resveratrol különböző egészségügyi előnyeinek megállapításában [23]. Az E-resveratrol által jól leírt sirtuin aktiválás ellenére [1,16], még mindig nagyon keveset tudunk az E-ε-viniferin hatásáról. Az E-ε-viniferin védő szerepét Fu et al. (2012) [24] a Huntington's Disease sejtmodellekben. Kimutatták, hogy az E-ε-viniferin csökkenti a reaktív oxigénfajták (ROS) szintjét, és megakadályozza a mitokondriális membránpotenciál elvesztését a mutáns Huntington fehérjét expresszáló sejtekben. Ennek a fehérjének a kifejeződése a SIRT3 csökkent deacetiláz aktivitását eredményezi, és ennek eredményeként a celluláris NAD( plus ) szintjének és a sejtekben a mitokondriális biogenezis csökkenéséhez vezet. A vizsgálatok szerint az E-ε-viniferin aktiválja az AMP-aktivált kinázt és fokozza a mitokondriális biogenezist [24]. Kutatásunk során kimutattuk, hogy az E-ε-viniferin az E-resveratrolnak megfelelő sirtuin aktivátor. Tovább teszteltük a GCE polifenolokban gazdag természetes kivonat potenciálját a SIRT1 aktiválására. A legtöbb GCE (Riesling, Magdeleine Noire, Villard Noir és Savagnin) viszonylag magas SIRT1 aktivációt mutatott a kontrollmintához képest. A rizling volt a legígéretesebb fajta, 171 százalékos SIRT1 aktiválással, ezt követi a Magdeleine Noire (165 százalék), a Villard Noir (162 százalék) és a Savagnin (142 százalék). Csak a Sauvignon GCE-je nem mutatott indukciós hatást a SIRT1-re. A Magdeleine Noire, Villard Noir és Savagnin GCE általi SIRT1 aktiválása legalább egyenértékű volt az 5 µME-resveratrol aktiválásával. Az első sirtuin aktivátorokat 2003-ban fedezték fel a SIRT1 számára, és a legerősebb az E-resveratrol [1]. Számos tanulmány leírta a SIRT1 botanikai kivonatokkal történő aktiválását is. Corbi és munkatársai (2018) ígéretes eredményekről számoltak be a citromos méhecset (Lippia citriodora), a retek (Raphanus sativus) és a paradicsom (Solanum Lycopersicum) kivonatánál [25]. Wang és mtsai. beszámolt a hagyományos kínai gyógyszerek sirtuin-indukciós aktivitásáról is. Beszámoltak arról, hogy a tejbogyó (Astragalus membranaceus), a kínai ginzeng (Panax ginseng) és a három-hét gyökér (Panax notoginseng) védő hatást fejt ki a mitokondriumokban az oxidatív stressz ellen. Az eredmények azt mutatták, hogy ezek a kivonatok fokozták a SIRT1 dezacetilált aktivitását és gátolták az intracelluláris reaktív oxigénfajták képződését [26]. Ezután a GCE ígéretes természetes összetevőket képvisel a bőrfiatalításban, különösen az erős SIRT1 aktivátorokkal, mint például az E-resveratrol és az E-ε-viniferin összehasonlítva. Kimutatták, hogy az E-resveratrol és származékai által a sirtuin szabályozása komplex közvetlen kölcsönhatásokon keresztül, izoforma-specifikus módon hat [27]. A resveratrol gátolja az emberi SIRT3-at, és stimulálja a SIRT5-öt és a SIRT1-et attól függően, hogy a katalitikus zsebbel komplex kötődik.

2.3. Tirozináz gátlás

2.3.1. Enzim vizsgálat

A 3A ábra mutatja betirozinázkét tiszta sztilbenoid (E-ε-viniferin és E-resveratrol) általi gátlás, és a 3B. ábra a GCE által okozott tirozináz-gátlást mutatja kiválasztott fajtáknál, összehasonlítva a kojsavval, az E-resveratrol-lal és az E-ε-viniferinnel mint pozitív referenciavegyületekkel.

Amint a 3B. ábrán látható, az összes vizsgált GCE, valamint az E-resveratrol, E-ε-viniferin viszonylag aktív tirozináz inhibitor. A legnagyobb potenciált az E-ε-viniferin (76 százalék ±2 százalék) és az E-resveratrol (75 százalék ±4 százalék) mutatta. A GCE különféle gátlási képességeket mutatott betirozináz. A Rieslingand Villard Noir GCE volt a legaktívabb 62,5 százalékos, illetve 58,5 százalékos gátlási szinttel. A Magdeleine Noire des Charente GCE (42,5 százalék) és a Savagnin GCE (39,5 százalék) szintén viszonylag erős volt.tirozinázgátlási aktivitást, míg a Sauvignon GCE kevésbé volt hatékony, azonban meglehetősen hatékony gátlási szinttel (30,4 százalék). A Vitis vinifera L. levélkivonatait már az irodalom is említi a tirozináz inhibitorok természetes forrásaként [28]. Egy E-resveratrol származék, az oxiresveratrol kimutatták, hogy már 0,01 százalékos koncentrációban gátolja a barnulást a zavaros almalevekben. Azt találták, hogy ez a sztilbenoid körülbelül 0,2 százalékkal erősebb, mint a kojsav [29].

Bár a szőlővessző sokkal több stilbenoidot halmoz fel, mint a szőlőlevél, a szőlővesszőn végzett tirozináz gátlási vizsgálatok példátlanok. A GCE tirozináz gátlása összehasonlítva az ismert referenciavegyületekkelfehérítésAz olyan aktivitások, mint az E-resveratrol és az E-ε-viniferin, megerősítették a GCE új kozmetikai hatóanyagként való potenciálját. A jelen tanulmány kimutatta, hogy az összes tesztelt GCE nagyon erős tirozináz-inhibitor volt, ami kulcsfontosságú a bőrfehérítő szerek potenciáljának mérlegeléséhez.

2.3.2. IC50 meghatározása

A gomba kinetikai viselkedésetirozinázE-resveratrol és E-ε-viniferin gátlása során vizsgálták. A gomba tirozináz kinetikai paraméterei, amelyeket Lineweaver–Burkplot-ból nyertünk az E-resveratrol gátlására (4A. ábra, 1. sor) azt mutatják, hogy a Km 1.02 (0 µM, kontroll)– 3,43 (100 µM) mM és Vmax 74,63 µM/perc (0 µM, kontroll), szemben a 66,38 ± 6,44 µM/perc átlaggal a különböző vizsgált E-resveratrol esetében. koncentrációk. Az E-ε-viniferin gátlására vonatkozó Lineweaver–Burk diagram (4B. ábra, 2. sor) azt mutatja, hogy a Km 1,02 (0 µM, kontroll) és 7,63 (100 µM) mM, a Vmax pedig 74,63 µM/perc (0) volt. µM, kontroll) a 73,01 ± 1,14 µM/perc átlaghoz képest a különböző vizsgált E-resveratrol koncentrációk esetén. A 4. ábrán bemutatott eredmények azt mutatták, hogy mind az E-resveratrol, mind az E-ε-viniferin kompetitív inhibitorok, mivel a vegyületek koncentrációjának növelése az 1/v tengelyen közös metszésvonalat eredményezett, de eltérő meredekséggel. Az egyes inhibitorok gátlási állandóit, a szabad enzimhez való kötődés KI-jét (az EI-komplex kialakításához), és a KIS-t az enzim-szubsztrát komplexhez (az ESI-komplex kialakításához) a másodlagos diagram és a másodlagos replot segítségével határoztuk meg (4. illetőleg. A kettős reciprok görbék lejtőit (Km/Vmax) ábrázoló másodlagos diagramok az inhibitorkoncentráció függvényében lehetővé tették az E-Resveratroland E-ε-viniferin 46,25 és 24,22 µM EI disszociációs állandójának (KI) kiszámítását. A másodlagos replotok, amelyek az inhibitorkoncentrációkkal szembeni kettős reciprokreláció metszetét reprezentálják, lehetővé tették, hogy 364.86 ESI disszociációs állandót (KIS) 2355,73 µM E-resveratrol és E-ε-viniferin esetén számoljunk ki. Ezért, ha ezek a számítások feltételezett kötődést javasolnak, amely akár a szabad tirozináz enzimhez, akár a szubsztrátjához kapcsolódó tirozinszenzimhez fordulhat elő (a jelenlegi eredmények 7.{59}} és 97.3-szer magasabb KIS-értékekkel az E-re vonatkozóan -resveratrol és E-ε-viniferin), ezek az eredmények erősen arra utalnak, hogy a tirozináz enzim-szubsztrát komplexhez képest sokkal gyengébb kötődési affinitás van, nem pedig a szabad tirozináz enzimhez, ami azt jelzi, hogy az egyes inhibitorok domináns gátlási mechanizmusa kompetitív.

Az IC50 értéket 52,93 µM az E-ε-viniferin és 60,75 µM az E-resveratrol esetében számítottuk. Ezek az IC50-értékek az irodalomban közölt értékeken belül voltak [13].

A jelen tanulmány megállapította, hogy az E-resveratrol és az E-ε-viniferin nagyon hatékonyan gátolja az enzimet. A GCE is kiállítotttirozinázviszonylag magas szintű gátlás. Korábbi jelentések azt mutatták, hogy az E-ε-viniferin a legaktívabb tirozináz inhibitor, IC50=4,1 µM értékkel. Négyszer erősebb a tirozináz gátlásában, mint a kojsav (IC50=16.9 µM), és 62-szer aktívabb, mint az aszkorbinsav (IC50=255 µM). Az E-resveratrol mérsékelt gátló hatású (IC50=52.8 µM), és nagyon hasonló a toarbutinhoz (IC50=55.1 µM) [12].

2.4. Molekuláris dokkolás az E-resveratrol és az E-ε-viniferin tirozinázzal való kötésére2.4. Molekuláris dokkolás az E-resveratrol és az E-ε-viniferin tirozinázzal való megkötéséhez

Az 5. ábra az E-resveratrol és az E-ε-viniferin dokkolási adatait mutatja be. A dokkolási adatok egyértelműen azt mutatják, hogy az E-resveratrol és az E-ε-viniferin tirozináz gátlási potenciált mutatott. Az E-ε-viniferin iránti affinitás azonban valamivel magasabb, a számított affinitás -7,73 versus -5,95 kcal/mol a His85-tel és His244-tel a hidrogénkötéseken és a π-π halmozáson keresztüli kölcsönhatások következtében, szemben a Met280-nal való egyetlen hidrogénkötésű kölcsönhatással. az E-ε-viniferinversus E-resveratrol esetében. Mindkét affinitás erősebb volt ehhez a két stilbenoidhoz, mint a kojsavhoz (-5,7 kcal/mol [30]), valamint a glabridinhez (-7,15 kcal/mol [31]) hasonló dokkolási módszerrel. Az l-DOPA-hoz képest ez a két stilbenoid kötődiktirozinázugyanazon a helyen, megerősítve ezzel kompetitív gátlási mechanizmusukat [31]. A két sztilbenoid iránti affinitás az l-DOPA-nál megfigyelt tartományba esik (azaz –6,98 kcal/mol [31]).

Az eredmények megerősítették a korábbi enzimvizsgálati eredményeket, ahol az E-ε-viniferin erősebb tirozináz inhibitor volt, mint az E-resveratrol.

TirozinázAz életkor előrehaladtával a diszfunkciók előrehaladnak, és rosszindulatú melanomához, valamint aszpigmentációs rendellenességekhez, például szeplőkhöz vagy melizmához vezethetnek [17]. Az E-resveratrol és az E-ε-viniferinben gazdag GCE jó alternatíva ezen stilbenoidok természetes forrásaként egyes pigmentációs betegségek megelőzésében.

2.5. Biológiai hozzáférhetőség és bőráteresztő képesség

A 6. ábra a GCE fő összetevőinek alapvető fizikai-kémiai tulajdonságait mutatja be, amelyek meghatározzák azok általános biológiai hozzáférhetőségét és bőráteresztő képességét.

A permeabilitás értékelése első pillantásra értékeli a molekula bőrön való áthatolási képességét. A 6. ábra radardiagramjain rózsaszín központi zónák jelentik az egyes tulajdonságok optimális hatótávolságát. A logP (lipofilitás) megoszlási hányados logaritmusának −0.7 és plusz 5.0 közötti értékeket kell kapnia, a molekulatömegnek (molekulaméret) 150 és 500 g/M között kell lennie. , a polaritás (topológiai poláris felület, TPSA) 20 és 130 Å2 között kell, hogy legyen, az oldhatóság (log S) ne legyen nagyobb 6-nál, a telítettség (szénfrakció az sp3 hibridizációban) nem lehet kevesebb 0,25-nél és a rugalmasság nem több. mint 9forgatható kötések [32]. Ezen számítások alapján kiértékelték, hogy a szervezetben leginkább felszívódó GCE molekulák a katechin és az epikatekin (azonos fizikai-kémiai jellemzőkkel), az E-resveratrol, az E-piceatannol, valamint az ampelopsin A. Ezeket a molekulákat a megfelelő molekulaméret jellemezte. , elektroneloszlás, polaritás és molekula karakter. A nagyobb molekulatömeggel jellemezhető molekulák, mint az E-miyabenol C, E-vitisin B, valamint a hopeafenol és az izohopeafenol (azonos fizikai-kémiai tulajdonságokkal), fiziko-kémiai szempontból figyelemre méltóak asszimilálhatók, mivel alig győzik le a fizikai akadályokat, mint pl. membránok, valamint a dermis. Az E-ε-vinifera megfelel a bőr jó áteresztőképességéhez szükséges legtöbb szabálynak. A molekulák polaritását, lipofilségét, oldhatatlanságát, rugalmasságát és molekulaméretét matematikai egyenletekkel becsültük meg. Érdemes kiemelni azt a tényt, hogy a számítások csak a teljes bőr áteresztőképességének becslésére szolgálnak, és bőrön keresztüli behatolási tesztekre lesz szükség az előrejelzések megerősítéséhez.

Az elmúlt évtizedek során különböző szabályrendszerek jöttek létre, amelyek elősegítették a gyógyszerfelszívódás megfelelő előrejelzését. A legnépszerűbb kritériumok Lipinski ötös szabálya [33], de számos más megközelítés is elérhető [34–37]. A 2. táblázat a GCE-polifenolok általánosan ismert biohasznosulási szabályainak való megfelelésére vonatkozó információkat tartalmazza: Lipinski (MW < 500,="" logp="">< 4,15,="" nor="" o="" atomok="" száma="">< 10,="" n-="" vagy="" oh-csoportok="" száma="">< 5)="" [="" 33],="" ghose="" (160="">< mw="">< 480,="" −0,4="">< logp="">< 5,6,40="">< mw="">< 130,="" 20="">< atomok="" száma="">< 70)="" [34],="" veber="" (forgatható="" kötések="" száma="">< 10,="">< 140)="" [35],="" egan="" (logp="" <="" 5.88,="" tpsa="" <="" 131.6)="" [36]="" and="" muegge="" (200="" <="" mw="" <="" 600,="" −2="" <="" logp="" <="" 5,="" tpsa="">< 150,="" numbers="" of="" rings="" <="" 7,="" number="" of="" carbons="" >="" 4,="" number="" of="" heteroatoms="" >="" 1,="" number="" of="" rotatable="" bonds="" <="" 15,="" nha="" <="" 10,="" nhd="" <="" 5)="">

Ezen számítások alapján viszonylag nagy valószínűséggel jelezhető, hogy mely struktúrák hatolnak át leginkább a bőrgáton. Az 500 g/mol feletti molekulatömegű GCE polifenolok (hopefenol, izohopeafenol, E-miyabenol C és E-vitisin B) egyszerre túl lipofilek (logP > 5), és nem megfelelő elektroneloszlás (TPSA > 140), valamint hidrogénkötési jellemzők jellemzik őket. (NHD > 5 vagy NHA > 10). Ezen túlmenően ezeknek a molekuláknak a molekulatérfogata korlátozhatja bőrön keresztüli felszívódásukat, és térbeli szempontból molekuláris kötéseik megsértése is korlátozza a képességüket, hogy aktívak legyenek a bőrstruktúrákban. Az ilyen vegyületek helyi felvitel után maradékként a felületen maradnak, vagy a bőr állapotától függően csak a hidrofób stratum corneum külső rétegeibe hatolnak be. A bőr barrier tulajdonságai a lipid kettős rétegeken alapulnak. A sikeres transzdermális gyógyszereket az ötös szabálynál is szigorúbb paraméterküszöbök korlátozták [19]. Ezért az újonnan elérhető statisztikai számítások nagyon pontos szabályokat magyaráznak meg a hatóanyagok bőrön át történő alkalmazására vonatkozóan. Az alap főként a fizikai-kémiai paramétereiken alapul. A jelenlegi transzdermális gyógyszerek új küszöbértékei: MW < 335,="" nhd="" less="" vagy="" egyenlő="" 2,="" nha="" kisebb="" vagy="" egyenlő="" 5="" és="" logp="">< 5="">

Annak ellenére, hogy képtelenek leküzdeni a stratum corneum barriert, a nagy molekulatömegű sztilbenoidok (a rezveratrol trimerei és tetramerei) továbbra is nagy érdeklődésre tartanak számot a bőrre gyakorolt ​​jótékony hatásuk miatt. Amint azt már számos tanulmány kimutatta, ezek a metabolitok erős antioxidáns tulajdonságokat mutatnak [38], és ezzel párhuzamosan – jellegükből adódóan – az intercelluláris komponensek magas kompartmentációja és a bőr lipofil védőgátja jellemzi őket. Káros állapotok és túlszáradt bőr esetén ezek a polifenolok fontos szerepet játszhatnak, mint aktív bőrpuhító, regeneráló és antioxidáns hatásúak a bőr felszínén [39].

Figyelembe véve a fent említett bőrbehatolási szabályokat, a kozmetikai hatóanyagok leghatékonyabb jelöltjei a katechin, az epikatekin, az E-piceatannol, az E-resveratrol és az E-ε-vinifera. Számításaink azt jósolják, hogy ezek a polifenolok képesek legyőzni a bőr akadályait és hatni. a dermis szerkezetében, ami különösen fontos a bőr enzimatikus funkcióira gyakorolt ​​​​aktivitásuk miatt. Megerősített modulációs képességtirozinázA sirtuin és a sirtuin aktivitása, valamint a bőrbe való behatolás jó előrejelzése lehetővé teszi az alacsony molekulatömegű sztilbenoidok (a rezveratrol monomerjei és dimerjei), mint például az E-resveratrol és az E-ε-vinifera fiatalító és fiatalító hatását.fehérítésügynökök. Ezenkívül magas antioxidáns aktivitásuk többszintű hatást biztosít a bőrsejtek számára. A GCE polifenolok keverékei, amelyek különböző biológiai aktivitást mutatnak, és különböző fizikai-kémiai tulajdonságokkal jellemezhetők. Ezért a kivonatok többirányú terápiás hatást, valamint hatékony védelmet biztosítanak az emberi bőr számára.

Ezért elmondható, hogy a polifenolokban gazdag GCE előnyösebb lenne a bőrápoló kezelésekben, mint a kapszulázott tiszta sztilbenoidok [22]. További kísérletekre van szükség a bőrmodelleken, hogy megerősítsük a GCE-ben rejlő potenciált a környezetbarát dermokozmetikumok természetes, többfunkciós összetevőjeként.

3. Anyagok és módszerek

3.1. Vegyszerek és reagensek

Az E-resveratrolt és más standardokat a Sigma-Aldrich-től (St. Louis, MO, USA) vásároltuk. Az E-ε-viniferát szőlővesszőből tisztítottuk a korábban leírtak szerint [40]. Gombatirozinázoldatot és az L-DOPA-t a Sigma-Aldrich-től (St. Louis, MO, USA) szereztük be. Az ultratiszta vizet egy Millipore Milli-Q víztisztító rendszerből nyerték (Merck Millipore, város, Németország).

3.2. Növényi anyag

Öt kiválasztott fajta (Villard Noir, Sauvignon, Savagnin, Riesling és Magdeleine Noire des Charentes) szőlővesszőjét szüretelték 2016 januárjában az INRA "Domaine de Vassal" szőlőraktárában (34340 Marseillan-Plage, Franciaország: http://www. .1.montpellier.inra.fr/vassal).Vieténként huszonöt szőlőszárat szüreteltek öt különböző szőlőtőből öt szár metszése után. A szőlőszárakat 10 cm-es szakaszokra vágtuk, és 10 hétig 20 ◦C-on, sötétben tároltuk, lehetővé téve az E-resveratrol és az E-piceatannol betakarítás utáni felhalmozódását. Ezután a szőlőszárakat először hűtött analitikai darálóval (Ika-Werke, Staufen, Németország), majd vágómalommal (Polymic PX-MFC 90 D, Kinematica AG, Luzern, Svájc) őrölték, hogy 1 mm-es szemcséket kapjanak. A port liofilizáltuk és –20 ◦C-on tároltuk az extrakcióig [41]. Összesen 20 g szárított port 500 ml etanol/víz (60/40; v/v) eleggyel extraháltunk. A mintákat 45 percig visszafolyató hűtő alatt 83 °C-on extraháltuk, majd szűrtük. Ezután a felülúszókat Heidolph 94200 rotációs bepárlóval (Bio blokk, Schwabach, Németország) párologtattuk be, vákuumszivattyúval (Vacuubrand PC500 sorozat, Wertheim, Németország) kapcsolva. A kapott kivonatokat liofilizáltuk, így szárított GCE-t kaptunk további in vitro vizsgálatokhoz.

3.3. HPLC elemzések

A HPLC rendszer egy Waters 717 plus Autosamplerből, egy Waters 996 fotodiódasordetektorból és egy Waters 600 Controllerből (Waters, Milford, MA, USA) szivattyúból állt, és az Empower 2 szoftver (Waters) vezérelte. , Milford, MA, USA). Az analit elválasztását 20 µl kivonat 3 µm-es részecskékkel (250 × 4 mm, Multospher 120 RP18HP; CS-Service, Langerwehe, Németország) töltött oszlopra történő injektálásával értük el 24 ◦C-on. A mozgófázis 0,1%-os foszforsavból (A oldószer) és acetonitrilből (B oldószer) készült, amelyet 0,5 ml percenkénti sebességgel pumpáltak. Lineáris gradienst alkalmaztunk, amely 5 százalék B-nél kezdődött, és 60 perc alatt 72,5 százalékra nőtt. A számszerűsítést tiszta standarddal végeztük, ötpontos kalibrációs görbével (0–100 ppm) Maxplot detektálási módban. Az izohopeafenolt a hopeafenol kalibrációs görbe segítségével határoztuk meg.

3.4. Sirtuin aktiválása

A Sirtuin-aktiváció (SIRT1) értékelését GCE-vel végeztük 50 µg/ml-nél, összehasonlítva 10 µM tiszta E-resveratrol és E-ε-viniferin (mint aktivátor) és nikotinamid (mint inhibitor) értékével. A SIRT1 aktivitást a SIRT1 segítségével határoztuk meg. Assay Kit (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) a gyártó utasításait követve és fluoreszcens spektrométert (Biorad VersaFluor, Marnes-la-Coquette, Franciaország) használva, 340 nm-es gerjesztéssel és 430 nm-es emissziós hullámhosszal. A relatív SIRT1 aktivitást a megfelelő kontrollhoz viszonyított relatív százalékban mutattuk ki (azonos térfogatú extrakciós oldószer hozzáadásával) minden egyes kivonat esetében.

3.5. Tirozináz gátlás

3.5.1. Enzim vizsgálat

A tirozináz gátlási vizsgálatot Neely és mtsai. (2009) [42]. Minden 1 ml-es vizsgálat 100 mM nátrium-foszfátot (pH 6,5) és 2 mM L-DOPA-t tartalmazott. Végül 0,2 mg/ml gomba tirozináz oldatot (Sigma-Aldrich) adtunk a keverékhez. Kontroll, azonos mennyiséggel. A reakciófolyamatokat mikrolemez-leolvasóval (BioTek ELX800; BioTek Instruments Inc., Winooski, VT, USA) követtük nyomon 475 nm hullámhosszon. AztirozinázA gátló hatást a gátlás százalékában fejeztük ki a megfelelő kontrollhoz viszonyítva minden egyes kivonat esetében. Egy vizsgálatban alkalmazott standard vegyületkoncentráció 100 µM, a vizsgált kivonatok koncentrációja pedig 50 µg/ml volt. A kísérleteket háromszor megismételtük, és az átlagos eredményeket szórással a 3B. ábra mutatja.

A Cistanche gátolja a tirozináz expresszióját

3.5.2. IC50 meghatározása

Az IC50-érték kiszámításához szükséges inhibitor mennyiségek tartományának feltételezésére az E-resveratrol és az E-ε-viniferin különböző koncentrációit használtuk. A számításokhoz használt esszéket az 1-100 µM inhibitorok tartományában készítették el. Az aktivitás-idő görbe alakjának szignifikáns változása esetén az arányokat az egyensúlyi ráta régiók alapján számítottuk ki. A tirozináz aktivitás 50 százalékos gátlását okozó inhibitor koncentrációját a százalékos aktivitás-inhibitor görbékből extrapoláltuk [42]. A kísérleteket háromszor megismételtük, és az IC50-értékek átlagát a 4A. és 4B. ábrán mutattuk be.

3.6. Dokkolási adatok az E-resveratrol és az E-ε-viniferin tirozinázzal való kötődéséhez

Az E-resveratrol és az E-ε-viniferin molekuláris dokkolási szimulációját Ligplot plus szoftverrel (European Bioinformatics Institute, Cambridge, Egyesült Királyság), autodock Vina (The Scripps ResearchInstitute, La Jolla, CA, USA) és Pymol v2.1.1 ( Schrodinger, New York, NY, USA), hogy megjósolják e molekula ligandumok konformációját a megfelelő célkötőhelyen belül.tirozináz(EPB: 2Y9X).

3.7. Biológiai hozzáférhetőség és bőráteresztő képesség

A gyógyszerszerűség potenciálja, valamint a bőr permeabilitása, mint az aktív molekula-hatékonyság döntő tényezője, különböző fizikai-kémiai tulajdonságok és szerkezeti jellemzők komplex egyensúlyaként határozható meg, amelyek meghatározzák, hogy a molekula hasonló-e az ismert gyógyszerekhez. Ezek a tulajdonságok, elsősorban a hidrofóbicitás, az elektronikus eloszlás, a hidrogénkötési jellemzők, a molekulaméret, a rugalmasság és a különböző farmakoforikus jellemzők jelenléte, befolyásolják a molekulák viselkedését egy élő szervezetben, beleértve a biológiai hozzáférhetőséget, a szállítási tulajdonságokat, a fehérjékhez való affinitást, a reakciókészséget, a toxicitást, az anyagcsere-képességet. stabilitás és még sok más [43]. Az egyszerű számlálási kritériumok (mint például a molekulatömeg, logP vagy a hidrogénkötés donorok vagy akceptorok számának határértékei) szintén viszonylag korlátozottan alkalmazhatók, és csak arra használhatók, hogy a potenciálisan aktív molekulák egy részét kizárják a további kutatásokból [19]. A TPSA (Molecular Polar Surface Area) értékeit az összes szerkezetre az Ertl és munkatársai által publikált módszertan alapján számítottuk ki. [44] a fragmentum hozzájárulások összegeként a teljes molekulában. Az O- és N-központú poláris fragmenseket is figyelembe vettük. A molekulatérfogat, valamint a megoszlási hányados logaritmus (log) értékek kiszámítására szolgáló módszert SwissADME [32] segítségével fejlesztettem ki. A 3D molekuláris geometriákat egy tréningkészlethez teljesen optimalizáltuk a szemi-empirikus AM1 módszerrel [45,46]. Lipinski „Öt szabálya” kimondja, hogy a legtöbb „gyógyszerszerű” molekula logP kisebb vagy egyenlő, mint 5, molekulatömege 500 vagy annál kisebb, hidrogénkötés-akceptorok száma legfeljebb 10, és a hidrogénkötés donorok száma kevesebb. 5 vagy egyenlő. Azok a molekulák, amelyek e szabályok közül egynél többet megsértenek, nagyon alacsony biológiai hozzáférhetőséggel rendelkeznek, vagy egyáltalán nem [33]. A biológiai aktivitást előrejelző számítások Bayes-statisztikán alapulnak, hogy összehasonlítsák az adott célponton aktív reprezentatív ligandumok szerkezetét az inaktív molekulák szerkezetével, és azonosítsák az aktív molekulákra jellemző szubstruktúra jellemzőket (amelyek viszont meghatározzák a fizikai-kémiai tulajdonságokat) [47].

4. Konklúziók

A polifenollal dúsított GCE hasonló szinten tudta aktiválni a SIRT1-et, mint az 5 µM E-resveratrol vagy az E-ε-viniferin. Bőrfehérítéspotenciális keresztültirozinázgátlási vizsgálat kimutatta, hogy a GCE-kapacitások összehasonlíthatók a tiszta E-resveratrol és E-ε-viniferin kapacitásával. Különösen a Villard Noir és a Riesling GCE lehetnek hasznosak bőrvilágosító szerekként, és a dermokozmetikumok sötét foltjai ellen is használhatók. Ezenkívül a GCE-komponensek gyógyszerszerűsége különböző képességeket mutatott a bőr áteresztőképességében, megfelelő hatékonyságot biztosítva a különböző dermiszstruktúrákban. Az ezekkel az aktív vegyületekkel támogatott bőrfiziológiai folyamatok biztosítják a megfelelő bőrgát funkciót, valamint a bőrszövetek hatékony regenerálódását. Összefoglalva, a GCE lehetséges alkalmazása óriási érdeklődést mutat nemcsak az ipar, hanem a fogyasztók számára is, akik egyre inkább igénylik a természetes összetevőket, amelyekre az úgynevezett "ökokozmetikumokban" van szükség.

Hivatkozások

1. Bonkowski, MS; Sinclair, DA Tervezett öregedés lassítása: A NAD plus és a sirtuin-aktiváló vegyületek térnyerése. Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 2016, 17, 679–690. [CrossRef]

2. Nunes, MA; Rodrigues, F.; Oliveira, MBPP szőlőfeldolgozási melléktermékek, mint aktív összetevők a CosmeticProposes számára. A szőlőfeldolgozás melléktermékeinek kézikönyvében: Fenntartható megoldások; Elsevier Inc.: Bécs, Ausztria, 2017;pp. 267–292. ISBN 9780128098714.

3. Piñeiro, Z.; Guerrero, RF; Fernández-Marin, MI; Cantos-Villar, E.; Palma, M. Stilbenoids ultrahang-assisted extraction from grape stems. J. Agric. Food Chem. 2013, 61, 12549–12556. [CrossRef]

4. Houillé, B.; Besseau, S.; Delanoue, G.; Oudin, A.; Papon, N.; Clastre, M.; Simkin, AJ; Guérin, L.;Courdavault, V.; Giglioli-Guivarc'H, N.; et al. A sztilbenoidin szőlővesszők összetétele és szövetspecifikus eloszlása ​​a szőlőültetvényben a peronoszpóra nyomása által érintett. J. Agric. Food Chem. 2015, 63.[CrossRef]

5. Lambert, C.; Richard, T.; Renouf, E.; Bisson, J.; Waffo-Téguo, P.; Bordenave, L.; Ollat, N.; Mérillon, J.-M.;Cluzet, S. Comparative Analyzes of Stilbenoids in Canes of Major Vitis vinifera L. Cultivars. J. Agric. Food Chem. 2013, 61, 11392–11399. [CrossRef] [PubMed]

6. Çetin, ES; Altinöz, D.; Tarçan, E.; Göktürk Baydar, N. A szőlővesszők kémiai összetétele. Ind. Crops Prod.2011, 34, 994–998. [CrossRef]

7. Torres, P.; Avila, JG; De Vivar, AR; García, AM; Marín, JC; Aranda, E.; Céspedes, CL Antioxidáns és rovarnövekedést szabályozó stilbének és Yucca periculosa kivonatok. Fitokémia 2003,64, 463–473. [CrossRef]

8. Xue, YQ; Di, JM; Luo, Y.; Cheng, KJ; Wei, X.; Shi, Z. Resveratrol oligomers for the prevent and Treatment of cancers. oxid. Med. Sejt. Longev. 2014, 2014. [CrossRef]

9. Jang, M.; Cai, L.; Udeani, GO; Lassítás, KV; Thomas, CF; Beecher, CWW; Fong, HHS; Farnsworth, NR;Kinghorn, AD; Mehta, RG; et al. A szőlőből nyert természetes termék, a resveratrol rák kemopreventív hatása. Tudomány 1997, 275, 218–220. [CrossRef]

10. Adrian, M.; Jeandet, P.; Veneau, J.; Weston, LA; Bessis, R. A Resveratrol biológiai aktivitása, a Grapevinesből származó stilbenic vegyület, a Botrytis cinerea ellen, amely a szürkepenész okozója. J. Chem. Ecol. 1997,23, 1689–1702. [CrossRef]

11. Liu, F.; Tsai, Y.; Tsai, H.; Yu, H. A Resveratrol gyulladásgátló és szervvédő hatásai Trauma-Hemorrhagic Injury esetén. Mediátorok Inflammation 2015, 2015, 38–42. [CrossRef]

12. Morel-Salmi, C.; Julia, A.; Vigor, C.; Vercauteren, J. A resveratrol és az ε-vinifera közötti óriási PVDF-adszorpciós különbség lehetővé teszi ezek mennyiségi tisztítását és anti-tirozináz tulajdonságuk felmérését.Chromatographia 2014, 77, 957–961. [CrossRef] [PubMed]

13. Honisch, C.; Ottó, A.; de Matos, Kr. u. Vincenzi, S.; Ruzza, P. Tirozináz inhibitor izolálása éretlen szőlőléből: spektrofotometriás vizsgálat. Food Chem. 2019, 305, 125506. [CrossRef] [PubMed]

14. Skoczy ´nska, A.; Budzisz, E.; Trznadel-Grodzka, E.; Rotsztejn, H. A melanin és a lipofuscin mint a bőröregedés jellemzői. Postep. Bőrgyógyászat és Alergol. 2017, 34, 97–103. [CrossRef] [PubMed]

15. Zolghadri, S.; Bahrami, A.; Hassan Khan, MT; Munoz-Munoz, J.; Garcia-Molina, F.; Garcia-Canovas, F.; Saboury, AAA átfogó áttekintése a tirozináz inhibitorokról. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2019, 34, 279–309. [CrossRef]

16. Howitz, KT; Bitterman, KJ; Cohen, HY; Lamming, DW; Lavu, S.; Fa, JG; Zipkin, RE; Chung, P.;Kisielewski, A.; Zhang, LL; et al. A sirtuinok kis molekulájú aktivátorai meghosszabbítják a Saccharomyces cerevisia élettartamát. Nature 2003, 425, 191–196. [CrossRef]

17. Abbasi, BH; Siddiquah, A.; Tungmunnithum, D.; Bose, S.; Younas, M.; Garros, L.; Drouet, S.; Giglioli-Guivarc'h, N.; Hano, C. Isodon rugosus (Wall. ex Benth.) tőkehal in vitro tenyészetei: Létrehozás, fitokémiai jellemzés és in vitro antioxidáns és öregedésgátló aktivitás. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20.[CrossRef]

18. Malinowska, M.; Miroslaw, B.; Sikora, E.; Ogonowski, J.; Wojtkiewicz, AM; Szaleniec, M.;Pasikowska-Piwko, M.; Eris, I. Új lupeol-észterek, mint hatóanyagok a bőrkárosodások kezelésében.PLoS ONE 2019, 14, 1–15. [CrossRef]

19. Choy, YB; Prausnitz, MR Az ötös szabály a nem orális gyógyszerbejuttatási módokhoz: Szemészeti, inhalációs és transzdermális. Pharm. Res. 2011, 28, 943–948. [CrossRef]

20. Billet, K.; Dugé de Bernonville, T.; Oudin, A.; Courdavault, V.; Brousseau, S.; Giglioli-Guivarc'h, N.; Lanoue, A. Az európai szőlőfajták nagy gyűjteményéből származó fa biomasszájának betakarítás utáni kezelése: Hatás a polifenolban gazdag melléktermékek kiválasztására. ACS Sustain. Chem. Eng.. benyújtva.

21. Billet, K.; Houillé, B.; Dugé de Bernonville, T.; Besseau, S.; Oudin, A.; Courdavault, V.; Delanoue, G.; Guérin, L.; Clastre, M.; Giglioli-Guivarc'h, N.; et al. A Vitis vinifera L. szárainak terepalapú metabolomikája új betekintést nyújt a genotípus megkülönböztetés és a polifenol metabolizmus strukturálásába. Elülső. Plant Sci.2018, 9, 1–15. [CrossRef]

22. Stacchiotti, A.; Favero, G.; Rezzani, R. Resveratrol és SIRT1 aktivátorok az öregedés és az életkorral összefüggő betegségek kezelésére. In Resveratrol – Életet adunk az évekhez, nem pedig éveket az élethez; IntechOpen: London, Egyesült Királyság, 2019. [CrossRef]

23. Malik, S.; Mohar, D. A Sirtuin rendszer: A Resveratrol Szent Grálja? J. Clin. Exp. Kardiológia. 2012, 3, 216–219.[CrossRef]

24. Fu, J.; Jin, J.; Cichewicz, RH; Hageman, SA; Ellis, TK; Xiang, L.; Peng, Q.; Jiang, M.; Arbez, N.; Hotaling, K.; és munkatársai. A Trans-(-)-ε-vinifera növeli a mitokondriális sirtuin 3 (SIRT3) szintjét, aktiválja az AMP-aktivált protein kinázt (AMPK), és védi a sejteket a Huntington-kór modelljében. J. Biol. Chem. 2012, 287, 24460–24472. [CrossRef] [PubMed]

25. Corbi, G.; Conti, V.; Komici, K.; Manzo, V.; Filippelli, A.; Palazzo, M.; Vizzari, F.; Davinelli, S.; Di Costanzo, A.; Scapagnini, G.; et al. A fenolos növényi kivonatok indukálják a sirt1 aktivitást és növelik az antioxidáns szintet a nyúl szívében és májában. oxid. Med. Sejt. Longev. 2018, 2018. [CrossRef] [PubMed]

26. Wang, Y.; Liang, X.; Chen, Y.; Zhao, X. Gyógynövényekből származó SIRT1 aktivátorok bioaktív vegyületként történő szűrése a mitokondriális funkciók oxidatív károsodása ellen. oxid. Med. Sejt. Longev. 2016, 2016, 1–10.[CrossRef]

27. Gertz, M.; Nguyen, GTT; Fischer, F.; Suenkel, B.; Schlicker, C.; Fränzel, B.; Tomaschewski, J.; Aladini, F.; Becker, C.; Wolters, D.; et al. Molekuláris mechanizmus a resveratrol közvetlen Sirtuin aktiválásához. PLoS ONE2012, 7, 1–12. [CrossRef]

28. Lin, YS; Chen, HJ; Huang, JP; Lee, PC; Tsai, CR; Hsu, TF; Huang, WY A tirozináz gátló aktivitás kinetikája Viti vinifera levélkivonatainak felhasználásával. Biomed Res. Int. 2017, 2017. [CrossRef]

29. Likhitwitayawuid, K. Stilbenes tirozináz gátló aktivitással. Curr. Sci. 2008, 94, 44–52.

30. Ullah, S.; Park, Y.; Ikram, M.; Lee, S.; Park, C.; Kang, D.; Yang, J.; Akter, J.; Yoon, S.; Chun, P.; et al. A cinnamát származékok tervezése, szintézise és anti-melanogén hatása. Bioorganic Med. Chem. 2018, 26, 5672–5681.[CrossRef]

31. Chen, J.; Yu, X.; Huang, Y. A glabridin gátló mechanizmusai a tirozinázon. Spectrochim. Acta-Part A Mol. Biomol. Spectrosc. 2016, 168, 111–117. [CrossRef]

32. Daina, A.; Michielin, O.; Zoete, V. SwissADME: Ingyenes internetes eszköz a kis molekulák farmakokinetikájának, gyógyszerszerűségének és gyógyászati ​​kémiabarátságának értékelésére. Sci. Rep. 2017, 7, 1–13. [CrossRef]

33. Lipinski, CA; Lombardo, F.; Dominy, BW; Feeney, PJ Kísérleti és számítási megközelítések az oldhatóság és permeabilitás becslésére gyógyszerkutatási és -fejlesztési környezetben. Adv. Drug Deliv. Rev.2012, 64, 4–17. [CrossRef]

34. Ghose, AK; Viswanathan, VN; Wendoloski, JJ Tudásalapú megközelítés kombinatorikus vagy gyógyászati ​​kémiai könyvtárak tervezésében gyógyszerkutatáshoz. 1. Ismert gyógyszeradatbázisok kvalitatív és mennyiségi jellemzése. J. Comb. Chem. 1999, 1, 55–68. [CrossRef] [PubMed]

35. Veber, DF; Johnson, SR; Cheng, HY; Smith, BR; Ward, KW; Kopple, KD Molekuláris tulajdonságok, amelyek befolyásolják a gyógyszerjelöltek orális biohasznosulását. J. Med. Chem. 2002, 45, 2615–2623. [CrossRef] [PubMed]

36. Egan, WJ; Merz, KM; Baldwin, JJ A gyógyszerfelszívódás előrejelzése többváltozós statisztika segítségével. J. Med. Chem. 2000, 43, 3867–3877. [CrossRef]

37. Muegge, I.; Heald, SL; Brittelli, D. Egyszerű kiválasztási kritériumok a gyógyszerszerű kémiai anyagokhoz. J. Med. Chem. 2001, 44, 1841–1846. [CrossRef]

38. Soural, I.; Vrchotová, N.; Tˇríska, J.; Balík, J.; Horník, Š.; Cuˇrínová, P.; Sýkora, J. Vitis vinifera L. Molecules 2015, 20, 6093–6112. Különféle extrakciós módszerek a stilbének előállítására a Vitis vinifera L. szőlőcukorból. [CrossRef]

39. Chen, CP; Chen, CC; Huang, CW; Chang, YC A stratum corneumban lévő kis molekulák szállításában szerepet játszó molekuláris tulajdonságok értékelése: A bőr permeabilitásának kvantitatív szerkezete-aktivitása. Molecules 2018, 23. [CrossRef]

40. Houillé, B.; Papon, N.; Boudesocque, L.; Bourdeaud, E.; Besseau, S.; Courdavault, V.; Enguehard-Gueiffier, C.; Delanoue, G.; Guérin, L.; Bouchara, J.-P.; et al. A resveratrol származékok gombaellenes hatása candidaspecies ellen. J. Nat. Prod. 2014, 77, 1658–1662. [CrossRef]

41. Billet, K.; Houillé, B.; Brousseau, S.; Mélin, C.; Oudin, A.; Papon, N.; Courdavault, V.; Castro, M.; Giglioli-Guivarc'h, N.; Lanoue, A. A mechanikai stressz gyorsan indukálja az E-resveratrol és az E-piceatannol bioszintézist a frissen metszett melléktermékként tárolt szőlővesszőben. Food Chem. 2018, 240, 1022–1027.[CrossRef]

42. Neeley, E.; Fritch, G.; Fuller, A.; Wolfe, J.; Wright, J.; Flurkey, W. Változások az IC50-értékekben a gomba tirozináz tisztaságától függően. Int. J. Mol. Sci. 2009, 10, 3811–3823. [CrossRef]

43. Mignani, S.; Rodrigues, J.; Tomas, H.; Jalal, R.; Singh, PP; őrnagy, JP; Vishwakarma, RA Gyógyszerszerűségi szűrők jelennek meg az orvosi kémiában a találat- és ólomoptimalizálási folyamat során: Meddig lehet egyszerűsíteni? Drug Discov. Ma 2018, 23, 605–615. [CrossRef] [PubMed]

44. Ertl, P.; Rohde, B.; Selzer, P. A molekuláris poláris felület gyors kiszámítása a fragmentumalapú hozzájárulások összegeként és alkalmazása a gyógyszertranszport tulajdonságainak előrejelzésében. J. Med. Chem. 2000, 43, 3714–3717. [CrossRef][PubMed]

45. Dewar, MJS; Zoebisch, EG; Healy, EF; Stewart, JJP AM1: Új általános célú kvantummechanikai molekuláris modell1. J. Am. Chem. Soc. 1985, 107, 3902–3909. [CrossRef]

46. ​​Rocha, GB; Freire, RO; Simas, AM; Stewart, JJP RM1: Az AM1 újraparaméterezése H, C, N, O, P, S, F, Cl, Br és IJ Comput. Chem. 2006, 27, 1101–1111. [CrossRef]

47. Rocchetti, G.; Gatti, M.; Bavaresco, L.; Lucini, L. Nem célzott metabolomika különböző eredetű Chardonnay borok fenolos összetételének vizsgálatára. J. Food Compos. Anális. 2018, 71, 87–93. [CrossRef]