Hogyan lehet hatékonyan küzdeni a májrák ellen? A Cistanche Deserticola hatóanyagú fenil-etanol-glikozidok segítenek megoldani a problémát

Absztrakt

Háttér:Cistanche tubulosa(Schenk) R. Wight egy hagyományos kínai orvoslás, amely a Tamarix növény gyökereiben parazitál, és férfi impotencia, sterilitás, testgyengeség kezelésére és tonikként alkalmazták. A hepatocelluláris karcinómára kifejtett daganatellenes hatása azonban még mindig megfoghatatlan. Itt megvizsgáltuk a C daganatellenes hatását.tubulosafeniletanoidglikozidok(CTPG) a H22 hepatocelluláris karcinóma sejteken mind in vitro, mind in vivo, és annak mechanizmusai.

Módszerek: A H22 sejtek morfológiáját, életképességét, apoptózisát, sejtciklusát és mitokondriális membránpotenciálját (Δψm) inverz mikroszkóppal, MTT assay-vel és áramlási citometriával elemeztük. A fehérjék expresszióját és aktivációját az apoptózis útban Western blottal mutattuk ki. Az in vivo daganatellenes hatást hím Kunming egerekkel létrehozott tumoros egérmodellben értékeltük.

Eredmények: A CTPG kezelés dózis- és időfüggő módon szignifikánsan gátolta a H22 sejtnövekedést, ami korrelált a megnövekedett apoptózissal és sejtciklus leállással a G0/G1 és G2/M fázisokban. Ezenkívül kromoszóma-kondenzációt figyeltek meg a CTPG-vel kezelt H22 sejtekben. A CTPG-kezelés szignifikánsan növelte a Bax/Bcl-2 arányt, csökkentette a Δψm-et és fokozta a citokróm c felszabadulását. A hasított kaszpáz-8 és kaszpáz-9 szintje mind a külső, mind a belső jelátviteli útvonalakban szignifikánsan megnőtt, ami szekvenciálisan aktiválta a kaszpázt-7 és -3 a PARP hasítására. Végül a CTPG gátolta a H22 sejtek növekedését egerekben, és javította a daganatos egerek túlélési arányát.

Következtetések: Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a CTPG gátolta a H22 sejtnövekedést mind külső, mind belső apoptózis útján.

Kulcsszavak:Cistanchetubulosa, Fenil-etanolglikozidok, Apoptózis, Jelátviteli útvonal, Tumor egér modell

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

A Cistanche deserticolának számos hatása van, kattintson ide, ha többet szeretne megtudni

Háttér

A májrák világszerte a hatodik helyen áll a rákos megbetegedések és a negyedik helyen a rákos halálozások tekintetében. Ezen túlmenően az alacsony szociodemográfiai indexű országokban a negyedik helyen végzett a rákos megbetegedések és az első helyen a rákos halálozás tekintetében [1]. Kínában 2015-ben a májrák a rákkal összefüggő halálozások harmadik fő oka [2]. Az elsődleges májrákok több mint 90 százaléka hepatocelluláris karcinóma (HCC) a világon [3]. Jelenleg a májreszekció a fő lehetőség a HCC kezelésében. Azonban a HCC-ben szenvedő betegek kevesebb mint 30 százaléka felelt meg a gyógyító májreszekció kritériumainak, és az általános 5-éves túlélési arány még mindig csak 35-50 százalék a magas kiújulási arány miatt [4, 5 ]. A közepes és előrehaladott HCC-ben szenvedő betegek kezelési lehetőségei nagyon korlátozottak. A Sorafenib, egy molekulárisan célzott gyógyszer, az FDA jóváhagyta a fejlett HCC első vonalbeli kezelését. A szorafenib azonban csak körülbelül 3 hónappal hosszabbítja meg a túlélést, és a válaszarány kevesebb, mint 4 százalék [6, 7]. Sürgősen új gyógyszereket vagy stratégiákat kell kidolgozni a HCC ellen. A hagyományos kínai orvoslást (TCM) önmagában vagy más stratégiákkal kombinálva alkalmazták a HCC kezelésére, és kimutatták a klinikai előnyöket, beleértve a hosszabb túlélési időt, a jobb életminőséget, a mellékhatások csökkentését és így tovább [8, 9].Cistanche, egyfajta TCM, különféle biológiai funkciókkal rendelkezik, mint például antioxidáns, gyulladásgátló, öregedésgátló és neuroprotekció [10, 11].Fenil-etanolglikozidokfő aktív összetevőinek tekintikCistanche, amelyek sokrétű hatást fejtenek ki, beleértve az antioxidáns, gyulladásgátló, májvédő és neuroprotekciót [12–15]. Csoportunk arról számolt be, hogy a Cistanche tubulosafeniletanoidglikozidok(CTPG) apoptózist indukálhat a melanoma B16-F10 sejtekben, és gátolta a daganatok növekedését egerekben [16]. Ebben a vizsgálatban a CTPG daganatellenes hatását mértük HCC H22 sejteken in vitro és in vivo is, és vizsgáltuk annak mechanizmusait. Azt találtuk, hogy a CTPG apoptózist indukált H22 sejtekben mind külső, mind belső jelátviteli útvonalakon keresztül, és gátolta a H22 daganatok növekedését egerekben.

Mód

Sejtvonal

Az egér H22 hepatocelluláris karcinóma sejteket a Xinjiangi Egyetem Biológiai Erőforrások és Géntechnológiai Kulcslaboratóriumából (Urumcsi, Xinjiang, Kína) szereztük be, és RPMI 1640 táptalajban (Gibco) tenyésztettük, kiegészítve 100 U/ml penicillinnel és 100 ug/ml-rel. sztreptomicin és 10 százalék hővel inaktivált magzati szarvasmarha szérum (Gibco) 37 fokon, párásított, 5 százalékos CO2 atmoszférában.

MTT vizsgálat

A CTPG-t a Hetian Dichen Biotech Co., Ltd.-től (Hetian, Xinjiang, Kína) vásároltuk, és a CTPG főbb vegyületeit nagy teljesítményű folyadékkromatográfiával minősítették és mennyiségileg meghatározták [16]. A sejtek életképességét 3- (4, 5-dimetil-tiazol-2-il)-2, 5-difenil-tetrazólium-bromid (MTT) (Sigma, St. Louis, MO) segítségével értékeltük , USA) vizsgálat. A H22 sejteket 96-lyuklemezekre oltottuk 2 × 104 sejt sűrűségben 100 ul tápközegben lyukanként, és 37 fokon tenyésztettük. 24 óra elteltével a sejteket különböző koncentrációjú CTPG-vel (0, 100, 200, 300 és 400 ug/ml) vagy 0,3 százalékos DMSO-val (megfelel 400 ug/ml CTPG-ben) kezeltük 24, 48 és 72 órán keresztül. . 1000 fordulat/perc sebességgel 7 percig végzett centrifugálás után a felülúszót elöntöttük, és 100 ul MTT-oldatot (5 mg/ml PBS-ben) adtunk minden egyes lyukba. A lemezeket 37 °C-on 4 órán át inkubáltuk, és 100 ul DMSO-t adtunk hozzá, hogy feloldjuk a képződött formazánkristályokat. Az OD490 értékeket egy 96- lyukú mikrolemez-leolvasó (Bio-Rad Laboratories, CA, USA) detektálta. A sejtek életképességét a következő képlet szerint számítottuk ki: Sejtéletképesség ( százalék )=(OD-kezelt/ODkezeletlen) × 100 százalék.

Apoptózis kimutatása

A H22 sejteket különböző koncentrációjú CTPG-vel (0, 100, 200, 300 és 400 ug/ml) vagy 0,3 százalékos DMSO-val kezeltük 24 órán át, majd Annexin V FITC/-vel festettük. Propidium-jodid (PI) Apoptosis Detection Kit (YEASEN, Kína) a gyártó utasításai szerint. A mintákat áramlási citometriával elemeztük (BD FACSCalibur, USA).

A mitokondriális membránpotenciál kimutatása

A H22 sejteket különböző koncentrációjú CTPG-vel (0, 200 és 400 ug/ml) kezeltük 24 órán át, majd a membránáteresztő JC-1 festékkel (Beyotime, Kína) 20 órán keresztül megfestettük. min 37 fokon. JC-1 pufferrel kétszeri mosás után a mintákat 300 ul JC-1 pufferrel szuszpendáltuk, és áramlási citometriával (BD FACSCalibur, USA) analizáltuk.

A sejtciklus elemzése

A H22 sejteket 60 mm-es tenyészedényekbe oltottuk, és különböző koncentrációjú CTPG-vel (0, 100, 200, 300 és 400 ug/ml) vagy 0,3 százalékos DMSO-val kezeltük. 24 óra. Minden sejtet összegyűjtöttünk, és kétszer mostuk PBS-sel. A sejteket 70%-os jéghideg etanolban -20 fokon 2 órán át fixáltuk, majd kétszer mostuk PBS-sel, majd 300 ul Propidium-jodid/RNáz festőpufferben (BD Biosciences) újraszuszpendáltuk. 10 perc szobahőmérsékleten való tartózkodás után a mintákat áramlási citometriával (BD FACSCalibur, USA) gyűjtöttük, és a sejtciklus-eloszlást a ModFit LT 3.0 szoftverrel elemeztük.

Hoechst 33.258 festés

A H22 sejtmagok morfológiai változásait membránpermeábilis DNS-kötő festék Hoechst 33 258 festéssel elemeztük. A H22 sejteket egy 6-lyukú lemezre oltottuk 1 × 105 sejt/lyuk koncentrációban 2 ml-es tápközegben. 60-70 százalékos összefolyás után a sejteket CTPG-vel (0, 100, 200, 300 és 400 ug/ml) kezeltük 24 órán át. A sejteket összegyűjtöttük, és 4%-os jéghideg paraformaldehiddel fixáltuk 4 fokon 10 percig. PBS-sel történő mosás után a sejteket Hoechst 33 258-cal (Beyotime, Kína) festettük 4 fokon 10 percig. A mintákat fordított fluoreszcens mikroszkóppal (Nikon Eclipse Ti-E, Japán) figyeltük meg.

Western blot

Az anti-kaszpáz-3, a hasítás elleni kaszpáz-3, az Anti-Bcl-2 és az anti-Bax a Beyotime Biotech Co., Ltd.-től (Sanghaj, Kína) vásárolt. Anti-kaspáz-7, anti-kaszpáz-7, anti-kaszpáz-8, anti-kaszpáz-8, anti-kaszpáz-9, anti-kaszpáz -hasított kaszpáz-9, anti-PARP, anti-hasított PARP, anti-egér IgG-HRP és anti-nyúl IgG-HRP a Cell Signaling Technology cégtől vásárolt. Az anti- -aktint a Beijing ComWin Biotech Co., Ltd.-től (Peking, Kína) vásárolták.

A H22 sejteket különböző koncentrációjú CTPG-vel (0, 100, 200, 300 és 400 ug/ml) vagy 0,3 százalékos DMSO-val kezeltük 24 órán keresztül. A sejteket összegyűjtöttük, és a Cell Lysis Solution RIPA-val (Beijing ComWin Biotech Co., Ltd.) 30 percig jégen lizáltuk. A mintákat centrifugáltuk (12,{11}} g 15 percig 4 fokon), hogy összegyűjtsük a felülúszókat, és a fehérjekoncentrációt BCA kittel (Thermo Fisher Scientific, USA) mérjük. Minden mintában azonos mennyiségű fehérjét izoláltunk 12%-os SDS-PAGE-val, és PVDF membránokra vittük át (Biosharp, Kína). 5% zsírmentes tejet tartalmazó TBST pufferrel történő blokkolást követően a membránokat a megfelelő primer antitestekkel, illetve torma-peroxidázhoz (HRP) konjugált másodlagos antitestekkel inkubáltuk. TBST-vel történő mosás után a célfehérjéket ECL assay kittel (Beyotime, Kína) detektáltuk.

Állatok és etikai nyilatkozat

6-8 hetes hím Kunming egereket a Xinjiang Medical University (Urumcsi, Xinjiang, Kína) Animal Laboratory Centertől vásároltunk. Az egereket a Xinjiang Egyetem szabványos hőmérséklet-szabályozott, fényciklusos állatlétesítményében tartották. Minden állatkísérletet a Xinjiang Egyetem Állatgondozási és Felhasználási Bizottságának irányelvei szerint végeztek. A protokollt a Xinjiangi Egyetem, a Xinjiangi Egyetem Biológiai Erőforrások és Géntechnológiai Kulcslaboratóriumának (BRGE-AE001) Állatkísérletek Etikai Bizottsága hagyta jóvá.

Daganatos egér vizsgálat

A daganatos egérmodell indukálásához hím Kunming egereket szubkután injektáltunk 1 × 106 H22 sejttel 100 ul PBS-ben a jobb szárnyba. 3 nap elteltével az egereket véletlenszerűen 3 csoportra osztották (7 egér/csoport). A kontrollcsoportot 0,1 ml DMSO-val injektáltuk szubkután a tumor körül. A CTPG-200 és CTPG- 400 csoportokat szubkután injektálták 200 vagy 400 mg/kg CTPG-vel 0,1 ml DMSO-ban a daganat körül. Az egereket 2 naponta kezeltük 21 napig. A daganatok méretét tolómérővel mértük 25 napig, és a tumor térfogatát a következő képlet szerint számítottuk ki: tumor térfogata (mm3)=(hosszúság × szélesség2)/2. 25 nap elteltével a daganatos egerek túlélését minden nap követtük a vizsgálat végéig.

Statisztikai analízis

A statisztikai szignifikanciát a kezelt és a kontrollcsoportok közötti egytényezős varianciaanalízissel számítottuk ki. Minden adatot átlag ± standard deviációként (SD) adtunk meg. p < 0,05="" volt="" statisztikailag="">

Eredmények

A CTPG csökkentette a H22 sejtek életképességét in vitro

A CTPG HCC-re kifejtett daganatellenes hatásának feltárása érdekében a H22 sejteket különböző koncentrációjú CTPG-vel (0, 100, 200, 300 és 400 ug/ml) kezeltük in vitro. 24 óra elteltével a H22 sejtek morfológiáját fordított mikroszkóppal figyeltük meg. Azt találtuk, hogy a H22 sejtek morfológiája drámaian megváltozott a CTPG kezelés hatására. A CTPG-koncentráció növekedésével a sejtek kicsik és kerekek lettek, és a sejtszám is nagymértékben csökkent (1a. ábra). MTT assay-t használtunk a H22 sejtek életképességének elemzésére 24, 48 és 72 órás CTPG-kezelés után. A CTPG dózis- és időfüggő módon jelentősen csökkentette a H22 sejtek életképességét (1b. ábra). A 300 ug/ml-es CTPG a legjobb gátlási arányt érte el (1c. ábra). A CTPG IC50 értéke H22 sejtekre 236 ug/ml 24 órában és 169,8 ug/ml 48 órában.

A CTPG apoptózist indukált H22 sejtekben

Annak vizsgálatára, hogy a H22 sejtek csökkent életképességét az apoptózis indukálása közvetíti-e, a H22 sejteket különböző koncentrációjú CTPG-vel (0, 100, 200, 300 és 400 ug/ml) kezeltük 24 órán keresztül, és megfestettük. Az áramlási citometria eredményei azt mutatták, hogy a CTPG dózisfüggő módon szignifikánsan indukálta a H22 sejtek apoptózisát (beleértve a korai és késői apoptózist is) (2a. ábra). Bár a CTPG nagy dózisa a H22 sejtek nekrózisát is jelentősen növelte, a nekrózis kisebb szerepet játszik a H22 sejtek növekedésének gátlásában, mivel alacsonyabb arányban (8,3 százalék), mint az apoptózisé (52,6 százalék). Továbbá a H22 sejtek összfehérjét izoláltuk CTPG-kezelést követően, és kimutatták az anti-apoptotikus B-sejtes limfóma 2 (Bcl-2) és a pro-apoptotikus BCL-2--asszociált X-fehérje (Bax) expresszióját. Western blot. A szürkeárnyalatos szkennelési adatok azt mutatták, hogy a Bax és a Bcl-2 expressziós szintje megemelkedett, illetve csökkent. A Bax/Bcl-2 arány jelentősen megnőtt (2b. ábra). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a CTPG apoptózist indukál a H22 sejtekben.

A CTPG kromoszóma-kondenzációt és sejtciklus-leállást indukál a H22 sejtekben

Beszámoltak arról, hogy a gyógyszerek által kiváltott DNS-károsodás és sejtciklus-leállás gátolhatja a tumorsejtek növekedését és apoptózist okozhat a tumorsejtekben [17, 18]. A H22 sejtmagok morfológiájának kimutatására 24 órás CTPG-kezelés után a H22 sejteket Hoechst 33 342-vel megfestettük, és fordított fluoreszcens mikroszkóppal figyeltük meg. A CTPG-vel kezelt sejtekben a magok fényesen kondenzált kromatinja dózisfüggő növekedést mutatott, míg a kezeletlen sejtekben homogén festődésű sejtmagok (3a. ábra). A H22 sejtekben a sejtciklus eloszlását PI-festéssel tovább elemeztük 24 órás CTPG-kezelés után. A 3b. ábrán látható, hogy a CTPG-kezelés jelentősen növelte a G0/G1- és G2/M-fázisú sejtek arányát, és jelentősen csökkentette az S-fázisú sejtek arányát, ami arra utal, hogy a CTPG indukálta a G-t. 0/G1 és G2/M fázisleállás a H22 sejtekben. A CTPG magas dózisa szintén szignifikánsan növelte a sub G1 sejtek arányát.

A CTPG csökkentette a mitokondriális membránpotenciált és növelte a citokróm c

A mitokondriális dependens útvonal fontos szerepet játszik az apoptózis kiváltásában [19, 20]. A mitokondriális membránpotenciál (Δψm) változása JC-1 festéssel követhető, mivel a JC-1 aggregátum (vörös fluoreszcencia) a Δψm csökkenésével monomerré bomlik (zöld fluoreszcencia) [21]. 24 órás CTPG kezelés után a H22 sejteket JC- 1 festékkel megfestettük. Az áramlási citometriai adatok azt mutatták, hogy a vörös fluoreszcencia az FL-2 csatornában és a zöld fluoreszcencia az FL-1 csatornában szignifikánsan csökkent és nőtt a CTPG kezelés hatására. A PE−FITC plusz sejtek aránya szignifikánsan megnőtt (4a. ábra), ami arra utal, hogy a CTPG csökkentette a Δψm-et a H22 sejtekben. Ez összhangban van a megnövekedett Bax/Bcl{13}} aránnyal. Következésképpen azt tapasztaltuk, hogy a citokróm c felszabadulása szignifikánsan megnőtt a CTPG-kezelés hatására (4b. ábra). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a CTPG részben apoptózist indukálhat a H22 sejtekben egy mitokondriális függő (intrinsic) útvonalon keresztül.

A CTPG aktiválta a kaszpáz útvonalat és megakadályozta a DNS javítását

Ezt követően elemeztük a CTPG által indukált kaszpáz aktiválását mind külső, mind belső jelátviteli útvonalakon keresztül. 24 órás CTPG-kezelés után a teljes fehérjét izoláltuk a H22 sejtekből, és Western blot segítségével kimutattuk a pro- és hasított kaszpázok szintjét. A kezeletlen vagy a DMSO-kontrollhoz képest a CTPG-kezelés nemcsak a hasított kaszpáz-8 (külső útvonal), hanem a hasított kaszpáz-9 (intrinsic útvonal) szintjét is jelentősen megnövelte (4. 5). Az aktivált kaszpáz-8 és -9 egymás után hasította a downstream pro-kaszpázt-3 és -7, amelyek az 5. ábrán láthatók. Az aktivált kaszpáz-3 hasította a DNS-t A poli(ADP-ribóz) polimeráz (PARP) javító enzime a DNS-javítás és a DNS-károsodás felhalmozódásának megakadályozása érdekében, amint azt a 3a. ábra mutatja.

Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a CTPG apoptózist indukált H22 sejtekben mind külső, mind belső jelátviteli útvonalakon keresztül.

A CTPG gátolja a H22 HCC növekedését in vivo, és javítja a daganatos egerek túlélési arányát

Végül a CTPG HCC-re kifejtett daganatellenes hatását egy daganatos egérmodellben értékelték, amelyet H22 sejtek szubkután injekciójával állapítottak meg. 3 napos H22 sejtinjekció után a daganatos egereket 8-szor kezeltük CTPG-vel. Az egerek testtömegét és a tumor méretét a megadott időpontokban követtük. Amint a 6a. ábrán látható, az egerek testtömegében az egyes csoportokban nincs szignifikáns különbség, ami arra utal, hogy a CTPG kiválasztott dózisainak nincsenek nyilvánvaló mellékhatásai. Érdekes módon a 200 mg/kg és 400 mg/kg CTPG-vel kezelt egerekben a tumor növekedése jelentősen gátolt (6b. ábra). Ezenkívül a két dózisú CTPG-kezelés nagymértékben javította a daganatos egerek túlélését (3/7, 3/7) a kontrollcsoporthoz (0/7) képest a kísérlet végén (6b. ábra). Azt is megállapítottuk, hogy a CTPG dózisfüggő módon szignifikánsan fokozta a hím Kunming egerekből izolált lépsejtek proliferációját (6c. ábra), ami arra utal, hogy a CTPG immunstimuláló hatással rendelkezik.

Vita

A TCM-et régóta alkalmazzák különféle betegségek, köztük a rák kezelésére. Beszámoltak arról, hogy a TCM különböző típusú tumorsejtekben apoptózist indukálhat mind külső (halálreceptor által közvetített), mind belső (mitokondriumfüggő) jelátviteli útvonalakon, daganatellenes hatások kifejtése érdekében [22–25]. A két útvonal aktiválhatja a kaszpáz-8 és -9 jeleket [24, 26]. Itt azt találtuk, hogy a CTPG szignifikánsan elnyomta a H22 sejtnövekedést az apoptózis indukálásával és a sejtciklus leállásával. A hasított kaszpáz-8 és -9 szintje szignifikánsan megemelkedett a CTPG-kezelés hatására, ami arra utal, hogy mind a külső, mind a belső jelátviteli útvonalak részt vettek az apoptózis kiváltásában. Korábbi vizsgálatunk kimutatta, hogy a CTPG apoptózist indukált melanoma B16-F10 sejtekben a mitokondrium-függő útvonalon keresztül, ami növelte a hasított kaszpáz-9 szintjét, de nem a kaszpáz-8 szintjét [16]. A CTPG különböző jelátviteli útvonalakat aktiválhat különböző típusú tumorsejtekben.

A mitokondriális membrán integritását szigorúan szabályozzák a BCL-2 fehérjecsalád tagjai, köztük a Bax és a Bcl-2 [27, 28]. A Bax és a Bcl{4}} aránya kritikus szerepet játszik a mitokondrium-függő apoptózis folyamatban [29]. A CTPG-vel kezelt H22 sejtekben a Bax/Bcl-2 arány szignifikánsan megemelkedett, ami a Δψm csökkenését és a citokróm c felszabadulását okozhatja ebben a vizsgálatban. Ennek következtében a pro-kaszpáz{11}} hasadt és aktiválódott. Végül az aktív kaszpáz -8 és -9 iniciátorai aktiválták a kaszpáz végrehajtóját-3, hogy hasítsák a PARP-t a DNS-javítás megakadályozása érdekében. Összességében ezek az eredmények arra utalnak, hogy a CTPG apoptózist indukált a H22 sejtekben mind külső, mind belső jelátviteli útvonalakon keresztül.

A daganatos egérmodellben a CTPG szignifikánsan elnyomta a H22 HCC növekedését, és nagymértékben javította a daganatos egerek túlélését. Érdekes módon a CTPG dózisfüggően elősegítette a Kunming egerekből származó lépsejtek proliferációját, ami összhangban van korábbi vizsgálatunkkal [16].

Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a CTPG elnyomhatja a H22 HCC növekedését egerekben mind a közvetlen daganatellenes hatás, mind a közvetett immunerősítés révén.

Következtetések

A CTPG mind in vitro, mind in vivo elnyomta a H22 sejtek növekedését, és apoptózist indukált a H22 sejtekben mind külső, mind belső jelátviteli útvonalakon keresztül. Ezek az adatok azt mutatták, hogy a CTPG potenciális jelölt lehet a HCC kezelésére.

Rövidítések

Bax: BCL{0}}asszociált X fehérje; Bcl-2: B-sejtes limfóma 2; CTPG: Cistanche tubulosa phenylethanoid glikozidok; HCC: hepatocelluláris karcinóma; HRP: torma-peroxidáz; MTT: 3-(4, 5-dimetil-tiazol-2-il)-2, 5--difenil-tetrazólium-bromid; PARP: poli(ADP-ribóz) polimeráz DNS-javító enzim; TCM: hagyományos kínai orvoslás; Δψm: mitokondriális membránpotenciál.

Finanszírozás

Ezt a munkát a Hszincsiangi Ujgur Autonóm Régió magas szintű tehetségbemutató projektje a JL-nek, a Kínai Nemzeti Természettudományi Alapítvány támogatása (31460241) a JL-nek, valamint a Hszincsiangi Egyetem Doktori Start-up Alapja (BS160261-től XW-ig és BS150236-ig) támogatta. YL).

Az adatok és anyagok elérhetősége

A tanulmány nyers adatai ésszerű kérésre a megfelelő szerző rendelkezésére állnak.

A szerzők hozzászólásai

JL és JL tervezte a kísérleteket. PY, JL, AA és YY végezte a kísérleteket. LX, XW és YL elemezte az adatokat. PY, JL és JL írta a kéziratot. Minden szerző hozzájárult és jóváhagyta a végső kéziratot.

Etikai jóváhagyás

Az állatkísérleteket a Xinjiangi Egyetem Biológiai Erőforrások és Géntechnológiai Kulcslaboratóriumának Állatkísérletek Etikai Bizottsága hagyta jóvá.

Versengő érdekek

A szerzők kijelentik, hogy nincsenek egymással versengő érdekeik.

Kiadói megjegyzés

A Springer Nature semleges marad a közzétett térképeken szereplő joghatósági igényeket és az intézményi kapcsolatokat illetően.

A szerző adatai

1 Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, 666 Shengli Road, Urumqi, Xinjiang 830046, China.

2 College of Life Science, Xinjiang Normal University, 102 Xinyi Road, Urumqi 830054, Xinjiang, Kína.

3 A Xinjiang Medical University társult daganatos kórháza, Urumqi 830011, Kína.