Az LncRNS szerepének előrejelzése a vese öregedésében az RNS-szekvenálás alapján Ⅱ
Jan 26, 2024
Az lncRNS Gm43360 és potenciális cél-mRNS-ei összefüggése
Az LncRNA Gm43360-at azért választottuk ki vizsgálatra, mert két lncRNS-mRNS koexpressziós hálózatot kapcsolt össze. Az Adra1a expressziós szintje pozitívan korrelált (rho=0.8650, p=0.026) a Gm43360-éval, a Csnk1a1 (kazeinkináz 1A1) pedig negatívan (rho{{12) }}.8084, p=0.0084) (5a. ábra). Az lncRNS Gm43360 és potenciális cél-mRNS-ei, az Adra1a és Csnk1a1 korrelációjának további igazolására ebben a vizsgálatban az lncRNS Gm43360 overexpressziós plazmidját terveztük. A Csnk1a1 expressziója a vártnak megfelelően csökkent, és az Adra1a expressziója is csökkent, de nem szignifikánsan. Ezután az lncRNS Gm43360-at siRNS-sel leütöttük, hogy kiderítsük, érintett-e a cél-mRNS expressziója. Ahogy az várható volt, a Csnk1a1 megnövekedett az lncRNS Gm43360 knockdown sejtekben az siRNS negatív kontrollcsoporthoz képest (5b. ábra). Tíz esetben kimutattuk az lncRNS Gm43360 szerepét a sejtciklusban. A sejtszámláló kit-8 (CCK-8) eredményei azt mutatták, hogy az lncRNS Gm43360 elősegítette a sejtek életképességét (5c. ábra). Az eredmények azt mutatták, hogy az lncRNS Gm43360 növelte az S-fázisú sejtek százalékos arányát és csökkentette a G1-fázisú sejtek százalékos arányát a negatív kontrollhoz képest (5d. ábra). A p53 és p21 fehérjék részt vettek a sejtciklus szabályozásában, így a sejtöregedés jelei voltak. A p53 és p21 expressziós szintjei szignifikánsan csökkentek a túlexpressziós csoportban a kontroll csoporthoz képest. A p53 és p21 expressziós szintje szignifikánsan megemelkedett az siRNS csoportban az siRNS kontrollcsoporthoz képest (5e. ábra). Az lncRNS Gm43360 túlzott expressziója csökkentette az SA- -gal-pozitív sejtek számát, a -gal-pozitív sejtek pedig növekedtek a transzfektált Gm43360 csoportjában (5f. ábra). Összességében ezek az eredmények azt mutatják, hogy az lncRNS Gm43360 gátolta a vese tubuláris epiteliális sejtjeinek öregedését azáltal, hogygátolja a Csnk1a1 expresszióját.
KATTINTSON IDE, HOGY TERMÉSZETES SZERVES CISTANCHE KIVONATOT SZEREZZE MEG 25% ECHINAKOZIDOT ÉS 9% AKTEOZIDOT A VESEMŰKÖDÉSÉRT
Vita
Ebben a tanulmányban értékeltük a fiatal és idős egérvesék mRNS expressziós adatait, és bioinformációs elemzéseket végeztünk, amelyek feltárták az aberránsan expresszált mRNS-ek funkcióit. 347 felszabályozott mRNS-t és 355 leszabályozott mRNS-t, valamint 130 felszabályozott lncRNS-t és 91 leszabályozott lncRNS-t figyeltünk megöreg egérvesék a fiatal egérvesékhez képest. Ezen túlmenően ezekről az mRNS-ekről kimutatták, hogy részt vesznek az öregedéssel kapcsolatos utakban, mint ploxidatív foszforiláció, az AMPK jelátviteli útvonalat, a Wnt jelátviteli útvonalat, a Rap1 jelátviteli útvonalat és az életkorral összefüggő betegségeket, amelyek bemutatták a differenciálisan expresszált mRNS-ek funkcióit a vese öregedésének patogenezisében.
A hosszú, nem kódoló NEAT1 RNS védőfaktor a vesefibrózis progressziójában a vesetubuláris epiteliális sejtekben [21]. Szekvenálási eredményeinkben véletlenül az lncRNS NEAT1 alacsonyabb szinten expresszálódott idős egerek veséjében, mint fiatal egerekben, ami összhangban van a korábbi eredményekkel. A LincRNA-Gm4419 felgyorsítja a gyulladást és a fibrózist az NF-kB/NLRP3 inflammaszóma által közvetített mechanizmusok révén diabéteszes nephropathiában [22]. Szekvenálási eredményeinkben azt is megállapítottuk, hogy a Gm4419 expressziója magasabb volt az idős egerek veséjében, mint a fiatal egerekben, de nem volt szignifikáns különbség. Az LncRNA Gm43360 az 5. kromoszómán található (Chr5:122494022–122 494 908, 2887 bp). Az UCSC Genome Browser szerint a Gm43360 az Atp2a2 fehérjét kódoló gén intronjában található. Mindeddig azonban nem érkezett jelentés az lncRNS Gm43360 betegségekben való részvételéről. Ebben a vizsgálatban az lncRNS Gm43360 leütése elősegítette a vese tubuláris epiteliális sejtjeinek öregedését. Ezen túlmenően a szekvenálási eredményekben számos eltérően expresszálódó lncRNS-t azonosítottunk és megvizsgáltunk.
Az LncRNS-eket cisz-szabályozásra vagy transzregulációra osztályozták az lncRNS szabályozó mechanizmusok alapján. A cisz-hatású lncRNS-ek befolyásolhatják a szomszédos gének expresszióját azáltal, hogy cisz-hatású elemektől függenek, mint például a promóterek, fokozók és szabályozó szekvenciák, amelyek az lncRNS-ek és az mRNS-ek közötti távolságok 100 kb-nál kisebbek. A transz-ható lncRNS-ek olyan lncRNS-ekre utalnak, amelyek elhagyják a transzfekció helyét és távoli helyeken működnek (az lncRNS-ek és az mRNS-ek közötti távolság több mint 100 kb) [23]. Az lncRNS MAAT egy cisz-szabályozó modulon keresztül növeli a szomszédos Mbnl1 gén expresszióját [24]. Az lncRNS Pnky transz-aktiváló szabályozóként játszik szerepet a kortikális fejlődésben [25]. Ebben a vizsgálatban transzregulációs kapcsolat volt az lncRNS Gm43360 és a Csnk1a1 között. A Csnk1a1 egy tumorszuppresszor gén [26], amely a sejtciklusban és a sejtosztódási folyamatban részt vevő fehérjét kódol [27]. A Csnk1a1 leszabályozása indukáljaöregedéssel összefüggő gyulladásnövekedési leállással járó válasz kolorektális daganatokban [26]. A Csnk1a1 leszabályozott volt, amikor a Gm43360 felfelé volt szabályozva; így valószínű, hogy az lncRNS Gm43360 részt veszvese öregedéseáltalszabályozza a Csnk1a1 kifejezést.
Következtetések
Az lncRNS-mRNS koexpressziós hálózat vizsgálata invese öregedésefeltárt egy lncRNS-t, az lncRNS Gm43360-at, amely védő szerepet játszhat a vese öregedésében, és bővítette ismereteinket avese öregedése
Anyagok és metódusok
A fiatal (3-hónapos) és az idős (24-hónapos) hím C57BL/6J egereket a Xiameni Egyetem Kísérleti Állatközpontjától vásároltuk, és normál környezetben neveltük. Minden egér szabadon hozzáfért élelemhez és vízhez. Az egereket egy hónapig hozzászoktatták az új létesítményhez, mielőtt leölték őket. Az egereket uretánnal érzéstelenítettük intraperitoneális injekcióval, 750 mg/kg dózisban a mintavétel előtt. Fiatal és öreg egereket ugyanazon a napon leölték.Maradék egérveseszövetet használtunk a szekvenáláshoz minden egyes vizsgálatban. RNS-seq és szövettani vizsgálatot végeztünkkülön vesékugyanabból az egérből. A veseszövetet egerekből gyűjtöttük össze. Az egyik vesét azonnal 10%-os semleges pufferolt formalinba merítettük a következő metszetbeágyazáshoz, a másik vesét pedig több szövetre osztották, azonnal folyékony nitrogénbe helyezték, majd -80 fokon tárolták. A tanulmányt a Xi'an Jiaotong Egyetem (Shaanxi, Kína) első társkórházának etikai bizottsága támogatta (2018-G-164 szám). Minden módszert az állatetikai irányelvek és előírások szerint hajtottak végre. Ezt a vizsgálatot az ARRIVE irányelveinek megfelelően végeztük.
A vese kórszövettana
Fiatal és idős egerek veseszövetmintáit 10%-os paraformaldehid oldatban rögzítettük egy éjszakán át. A metszetek közül 10 dehidratált, paraffinba ágyazott, és 4-µm vastagságú metszetek lettek. A PAS és a Masson-féle trikromatikus festést standard protokollok alkalmazásával végeztük. A képeket a kamera rögzítette, és megmérte a festődés-pozitív területet. A hisztopatológiai kameraképek területét Image-Pro Plus 6.0-val számítottuk ki.
SA-gal festés
Az SA{{0}}gal aktivitást SA- -gal festőkészlettel (Cell Signaling Technology #9860) elemeztük a gyártó protokollja szerint. Megmértük a pozitív festődés területét, és az SA- -gal-pozitív sejteket Image-Pro Plus 6.0 segítségével számítottuk ki.
RNS extrakciós könyvtár felépítése és szekvenálása
Samples (each 5 mice in young and old mice) were used for lncRNA and mRNA expression analyses. Young mice were numbered 3M1, 3M2, 3M3, 3M4, and 3M5, and old mice were numbered 24M1, 24M2, 24M3, 24M4, and 24M5. Total RNA was extracted using Trizol reagent (thermofsher, 15,596,018) following the manufacturer's instruction. The total RNA quantity and purity were analyzed of Bioanalyzer 2100 and RNA 6000 Nano LabChip Kit (Agilent, CA, USA, 5067−1511), and high-quality RNA samples with RIN number>7.0 egy szekvenáló könyvtár létrehozására szolgált. A teljes RNS extrakciója után az mRNS-t az össz-RNS-ből (5 ug) Dynabeads Oligo (dT) (Thermo Fisher, CA, USA) alkalmazásával két tisztítási körrel tisztítottuk. A tisztítást követően az mRNS-t kétértékű kationok segítségével, magas hőmérsékleten (Magnesium RNA Fragmentation Module (NEB, cat. e6150, USA) 94 fok 5-7 perc alatt) rövid fragmensekre hasították. Ezután a hasított RNS-fragmenseket reverz transzkripcióval kapták meg a cDNS-t SuperScript™ II reverz transzkriptázzal (Invitrogen, kat. 1 896 649, USA), amelyet ezután U-jelölt második szálú DNS-ek szintetizálására használtak E. coli DNS-polimeráz I-gyel. NEB, cat.m0209, USA), RNase H (NEB, cat.m0297, USA) és dUTP Solution (Termo Fisher, kat.R0133, USA). Ezután minden szál tompa végéhez A-bázist adtunk, előkészítve őket az indexelt adapterekhez való ligáláshoz. Mindegyik adapter tartalmazott egy T-bázis túlnyúlást, hogy az adaptert az A-farkú fragmentált DNS-hez ligálja. Kettős indexű adaptereket ligáltunk a fragmentumokhoz, és a méretválasztást AMPureXP gyöngyökkel végeztük. Az U-jelzett második szálú DNS-ek hőre labilis UDG enzimmel (NEB, cat.m0280, USA) végzett kezelése után a ligált termékeket PCR-rel amplifikáltuk a következő körülmények között: kezdeti denaturálás 95 fokon 3 percig; 8 denaturációs ciklus 98 fokon 15 másodpercig, lágyítás 60 fokon 15 másodpercig, és meghosszabbítás 72 fokon 30 másodpercig; majd végső meghosszabbítás 72 fokon 5 percig. A végső cDNS-könyvtárak átlagos inszert hossza 300±50 bp volt. Végül elvégeztük a 2×150 bp-os páros végű szekvenálást (PE150) Illumina Novaseq™ 6000-en (LC-Bio Technology CO., Ltd., Hangzhou, Kína) a gyártó protokollja szerint [28].
Bioinformatikai elemzés A Clean Reads szekvenciája és szűrése
Egy cDNS-könyvtár, amelyet technológiával állítottak elő a 2008. évi egyesített RNS-bőlvesemintákegerek esetében szekvenáltuk, és az Illumina NovaseqTM 6000 szekvenciaplatformmal futtattuk. Az Illumina páros végű RNS-seq megközelítést használva szekvenáltuk a transzkriptumot, összesen millió 2×150 bp-os páros végű leolvasást generálva. A szekvenáló gépekből nyert leolvasások közé tartoznak az adaptereket vagy gyenge minőségű bázisokat tartalmazó nyers leolvasások, amelyek befolyásolják a következő összeállítást és elemzést. Így a jó minőségű tiszta leolvasás érdekében a leolvasásokat a Cutadapt [29] tovább szűrte (https://cutadapt.readthedocs.io/en/stable/, version:cutadapt-1.9). A paraméterek a következők voltak:
1) adaptereket tartalmazó olvasmányok eltávolítása;
2) a polyA-t és poli-t tartalmazó olvasmányok eltávolítása;
3) 5%-nál több ismeretlen nukleotidot (N) tartalmazó leolvasások eltávolítása;
4) az alacsony minőségű leolvasások eltávolítása, amelyek több mint 20%-ban rossz minőségű (Q-érték 20-nál kisebb vagy egyenlő) bázist tartalmaznak.
Tíz szekvencia minőségét FastQC [30] segítségével ellenőriztük (http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/, 0.11.9). beleértve a tiszta adatok Q20, Q30 és GC tartalmát. Ezt követően összesen G bp tisztított, páros végű leolvasás készült. A nyers szekvenciaadatokat az NCBI Gene Expression Omnibus (GEO) adatkészletébe küldték be GSE154223 hozzáférési számmal.
A referencia genom/annotáció a Mus{0}}musculus.GRCm38 volt. Az elemzésekhez használt génannotáció forrása és verziója az Ensembl_v88 volt.
Átiratok összeállítása
Először is, a Cutadapt [29] segítségével eltávolították azokat a leolvasásokat, amelyek adapterszennyeződést, gyenge minőségű bázisokat és meghatározatlan bázisokat tartalmaztak. Tíz szekvencia minőségét nagyon tápláltuk a FastQC segítségével (http://www.bioinformatics.Babra ham.ac.uk/projects/fastqc/). Bowtie2-t [31] és Hisat2-t [32] használtunk az egér genomjának leolvasására. Az egyes minták leképezett leolvasásait StringTie [33] segítségével állítottuk össze. Tíz, minden átirat innenvesemintákösszevonták, hogy Perl-szkriptek segítségével egy átfogó transzkriptumot rekonstruáljanak. A végső transzkriptom létrehozása után StringTie [33] és edgeR [34] segítségével megbecsültük az összes transzkriptum expressziós szintjét.
LncRNS azonosítás
Mindenekelőtt azokat az átiratokat, amelyek átfedésben voltak az ismert mRNS-ekkel és a 200 bp-nál rövidebb transzkriptumokkal, eldobták. Ezután a CPC-t [35] és a CNCI-t [36] használtuk a kódoló potenciállal rendelkező átiratok előrejelzésére. Minden átirat CPC-pontszámmal<-1 and CNCI score<0 were removed. The remaining transcripts were considered as lncRNAs.
Differenciálisan expresszált elemzési gének (DGE) elemzése
StringTie [33] was used to perform expression levels for mRNAs and lncRNAs by calculating FPKM [37]. Genes differential expression analysis was performed by DESeq2 software between two different groups (and by edgeR between two samples) [34, 38]. The genes with the parameter of q value below 0.6 and absolute fold change>2-t differenciálisan expresszált génnek tekintettük.
Az lncRNS-ek célgén-előrejelzése és funkcionális elemzése
Az lncRNS-ek funkciójának feltárása érdekében megjósoltuk az lncRNS-ek cisz-célgénjeit. Az LncRNS-ek cisz szerepet játszhatnak a szomszédos célgénekre gyakorolt hatásban. Ebben a vizsgálatban a 100, 000 upstream és downstream kódoló géneket Perl-szkript választotta ki. Ezután bemutattuk az lncRNS-ek célgének funkcionális elemzését a BLAST2GO szkriptek segítségével [39]. A nyilvános tartományra mutató teljes parancslink a Jie-Li/README.md volt a main · dandan-li/Jie-Li (github.com) címen.
A génontológiai (GO) kategóriák és a kiotói gének és genomok enciklopédiája (KEGG) elemzése
Az RNS-szekvenálás bioinformatikai elemzését OmicStudio eszközökkel (http://www.omicsudio.cn/tool) végeztük. A Gene Ontology (GO) funkcionális dúsítási analízist és a Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) [37–39] dúsítási elemzést használtuk a megjósolt célgének biológiai funkcióinak elemzésére. A GO elemzés három szemponton keresztül tisztázza a fő biológiai folyamatokat: sejtösszetétel, molekuláris funkciók és biológiai folyamatok (http://www.geneontology.org/). Az elemzés először az összes eltérően expresszált gént és háttérgént a GO adatbázisba helyezi. Minden elemet feltérképeznek, kiszámítják az egyes tételekben lévő gének számát, és a hipergeometrikus eloszlást használják fel a hipotézisvizsgálat elvégzésére, hogy megkapják a dúsítási eredmény P értékét. Minél alacsonyabb a P érték, annál jelentősebb a dúsítási eredmény. A KEGG egy olyan adatbázis-forrás, amely genetikai biológia segítségével elemzi a differenciálisan expresszált mRNS-eket, hogy feltárja a célgénekhez kapcsolódó fontos útvonalakat (https://www.genome.jp/kegg/). Az eredményeket p-értékekkel fejezzük ki; minél alacsonyabb a p-érték, annál jelentősebb a dúsítási eredmény.
qRT-PCR
Endogén kontrollként GAPDH-t használtunk. Ezután kiszámítottuk az ismeretlen gének relatív expressziós szintjét. Minden primert kifejezetten ehhez a kísérlethez terveztek és szintetizáltak. A GAPDH primerek kereskedelmi forgalomba kerültek. Az Adra1a és Csnk1a1 primerek specificitását az olvadási görbe egyetlen csúcsa azonosította.
Építsen fel mRNS-lncRNS koexpressziós hálózatot
A transzreguláció kutatásokon alapult, majd kiszámolták a transzenergiát. Minél kisebb volt a transzenergia, annál nagyobb a kötődés lehetősége. Ezután az mRNS-lncRNS korrelációs együtthatóját is kiszámítottuk. Az mRNS-lncRNS hálózatot a 0,9-et meghaladó Spearman-korrelációs együttható kiválasztásával hoztuk létre. Az mRNS-lncRNS koexpressziós hálózatot Cytoscape szoftverrel (v3.7.1) hoztuk létre.
Sejttenyésztés
Egér vese proximális tubuláris epiteliális sejtjeit (MRPT-EpiC) tenyésztettük 2% borjúmagzati szérumot (FBS, Cat. #0010) és Epithel Cell Growth Supplement-állat hámsejt-tápközegben (EpiCM-a, Cat. #4131) (EpiCGS-a, Cat. #4182) antibiotikumok nélkül párásított inkubátorban 37 fokon és 5% CO2-on. A táptalajt 2-3 naponta cseréltük. A logaritmikus növekedési fázisban lévő sejteket továbbtenyésztjük, amikor a növekedés elérte a 90%-ot. A tripszinnel emésztett sejtszuszpenziót 6-lyukú lemezekre oltottuk, 2*104 -5*104 sejttel minden lyukban. A transzfekcióhoz használt sejtek mindegyike a 2. és az 5. generáció közötti volt.
Plazmid konstrukció és sejttranszfekció
Az lncRNS Gm43360 overexpressziós plazmidot a GeneChem (Sanghaj, Kína) készítette. A plazmid gerince GV658 volt, és a CMV promoter vezérelte az lncRNS expresszióját. A klónozott nukleotidszekvencia a kiegészítő anyagban található. Az lncRNA Gm43360 leütéséhez három lncRNA ENS-nek KELL00000197656-céloznia az siRNS-t (lncRNA Gm43360- siRNA1, 5'-CCUUCACUCCAGCUGGUAATT-3'; lncRNA Gm43360-siRNA2, 5'-CCCUGUCACUCA Az UGAAGUUTT-3'; és az lncRNA Gm43360-siRNA3, 5'-GGUCAAAUAACUCAAUGGGTT-3') a GenePharmánál (Sanghaj, Kína) tervezték és szintetizálták. A gyártó protokollja szerint a sejteket lyukonként 2500 ng plazmiddal vagy 100 pmol siRNS-sel 6 µl Lipofectamine™ 2000 transzfekciós reagenssel (Invitrogen, USA) transzfektáltuk. Az RNS és fehérje expressziós szinteket a transzfekció után 48 órával detektáltuk, és minden kísérletet legalább háromszor megismételtünk. Valós idejű kvantitatív PCR-t használtunk az lncRNA Gm43360 túlzott expressziója és leütésének hatékonyságának validálására.
Western blot analízis
A tenyésztett sejteket jéghideg PBS-sel mostuk, 120 µl RIPA puffert (Heart, Kína) adtunk hozzá, és proteáz inhibitort és PMSF-et (Heart, Kína) adtunk hozzá 30 percig jégen. Miután a sejteket különböző mikrocentrifuga csövekben összegyűjtöttük, a fehérjekoncentrációt számszerűsítettük. Minden mintához töltőpuffert adtunk, majd 7 percig forraltuk. A mintából harminc mikrogrammot 12%-os SDS-PAGE-val (Beyotime, Kína) választottunk el, és elektrotranszferáltunk PVDF membránokra (Thermo Fisher, USA). Ezután a membránokat 5%-os tejjel blokkoltuk. A membránokat specifikus primer antitestekkel inkubáltuk: anti-p21 (1:1000, Abcam, ab109199), anti-p53 (1:1000, Proteintech, 10442-1-AP) és anti-GAPDH (1:3000, Profintech). , 60004-1-Ig) éjszaka 4 fokon. TBST-vel történő mosás után a membránokat egy másodlagos antitesttel inkubáltuk 1 órán át szobahőmérsékleten. A fehérjesávokat kemilumineszcens kit (Millipore, USA) segítségével figyeltük meg. A GAPDH expresszióját használták a fehérjeszint normalizálására.
Sejtproliferációs vizsgálat
A sejtproliferáció kapacitását a sejtszámláló kit-8 (CCK-8) teszttel határoztuk meg. Negyvennyolc órával a transzfekció után 90 µl új táptalajt és 10 µl CCK-8 oldatot adtunk minden egyes lyukba (Beyotime, C0042). A sejteket 1-4 órán át 37 fokon, 5%-os CO2-ban inkubáltuk, és 450 nm-en mértük univerzális mikrolemez-leolvasóval (Bio-Tek, USA).
Áramlási citometrikus elemzés
A sejteket a transzfekció előtti napon 6-lyuklemezekre szélesztettük. A transzfekció után 48 órával a sejteket tripszinnel kezeltük, és 1000 fordulat/perc sebességgel centrifugáltuk 5 percig. Ezután a sejteket 70%-os etanolban fixáltuk 4 fokon legalább 4 órán át. Centrifugálás után RNáz A-t és propidium-jodid (PI) festőoldatot adtunk a sejtekhez, majd a sejteket 30 percig szobahőmérsékleten, sötétben inkubáltuk. A te-festett sejteket ACEA NovoCyte (Biosciences, USA) segítségével analizáltuk.
Statisztikai analízis
A normál eloszlású mérési adatokat átlag±SD-ként adjuk meg. A két különböző csoport közötti különbséget kétoldali páratlan Student-féle t-próbákkal határoztuk meg, és a p-érték < 0,05 volt statisztikailag szignifikáns. Minden számítást GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Inc., USA) segítségével végeztünk.
Hivatkozások
1. Docherty MH, O'Sullivan ED, Bonventre JV, Ferenbach DA. Sejtes öregedés a vesében. J Am Soc Nephrol. 2019;30(5):726–36.
2. Partridge L, Deelen J, Slagboom PE. Szembenézni az öregedés globális kihívásaival. Természet. 2018;561(7721):45–56.
3. Pan JX. Az LncRNA H19 elősegíti az érelmeszesedést a MAPK és az NF-kB jelátviteli útvonalak szabályozásával. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2017;21(2):322–8.
4. Wasson CW, Abignano G, Hermes H, Malaab M, Ross RL, Jimenez SA, Chang HY, Feghali-Bostwick CA, Del Galdo F. A hosszú, nem kódoló RNS HOTAIR EZH2-dependens myofibroblast aktivációt hajt végre szisztémás szklerózis a NOTCH miRNS 34a-függő aktiválása révén. Ann Rheumatic Dis. 2020;79(4):507–17.
5. Luo J, Wang K, Yeh S, Sun Y, Liang L, Xiao Y, Xu W, Niu Y, Cheng L, Maity SN és mások. Az LncRNA-p21 megváltoztatja az antiandrogén enzalutamid által kiváltott prosztatarák neuroendokrin differenciálódását az EZH2/STAT3 jelátvitel modulálásával. Nat Commun. 2019;10(1):2571.
6. Wang Y, Yang L, Chen T, Liu X, Guo Y, Zhu Q, Tong X, Yang W, Xu Q, Huang D és mások. Egy új lncRNS MCM3AP-AS1 elősegíti a hepatocelluláris karcinóma növekedését a miR-194-5p/FOXA1 tengely megcélzásával. Mol Rák. 2019;18(1):28.
7. Wu YY, Kuo HC. A nem kódoló RNS-ek funkcionális szerepei és hálózatai a neurodegeneratív betegségek patogenezisében. J Biomed Sci. 2020;27(1):49.
8. Li Z, Wang Z. Öregedő vese és öregedéssel kapcsolatos betegségek. Adv Experiment Med Biol. 2018;1086:169–87.
9. Wang X, Vrtiska TJ, Avula RT, Walters LR, Chakkera HA, Kremers WK, Lerman LO, AD szabály. Az életkor, a veseműködés és a kockázati tényezők eltérően kapcsolódnak a vese kérgi és velő térfogatához. Kidney Int. 2014;85(3):677–85.
10. Lin Q, Hou S, Dai Y, Jiang N, Lin Y. Az LncRNA HOTAIR a miR-126-5p-t célozza meg, hogy elősegítse a Parkinson-kór progresszióját a RAB3IP segítségével. Biol Chem. 2019;400(9):1217–28.
Wecistanche támogató szolgáltatása – Kína legnagyobb cisztanche exportőre:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel.:+86 15292862950
Vásároljon további specifikációkért:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
