Az intranazális Lactococcus Lactis W136 probiotikum-kiegészítésre adott válasz a refrakter CRS-ben a nem 2-es típusú gyulladás modulációjával és a hámregenerációval kapcsolatos

Indokolás:

Korábban dokumentáltuk, hogy a műtétre nem reagáló krónikus rhinosinusitisben (CRS) szenvedő egyénekben az élő Lactococcus lactis W136 probiotikus baktérium intranazális alkalmazása javítja a sinus-specifikus tüneteket, a SNOT{2}} és a nyálkahártya-aspektust az endoszkópos vizsgálat során a sinus kórokozók számának csökkenése és a védőbaktériumok növekedése. Jelen munka az ezen megfigyeléseket alátámasztó molekuláris mechanizmusokat tárja fel a sinus nyálkahártya transzkriptomikájával.

A Lactococcus lactis egy probiotikum, amely a bél mikroflóra szabályozásával és az immunitás fokozásával képes fenntartani az emberi egészséget. A következő a kapcsolat a Lactococcus lactis és az immunitás között:

1. Segítség az immunitás fokozásában: A Lactococcus lactis elősegítheti a bélnyálkahártya gát integritását és immunválaszát, valamint elősegítheti a bélnyálkahártya immunsejtek szaporodását és aktiválódását, ezáltal erősítve az emberi immunitást.

2. Csökkentse az allergiás reakciókat: Ha az immunrendszer kiegyensúlyozatlan, az allergiás reakciókhoz vezet. A Lactococcus lactis azonban csökkentheti az allergiás reakciók előfordulását azáltal, hogy szabályozza az immunsejtek aktiválási állapotát a szervezetben.

3. Kórokozókkal szembeni rezisztencia: A Lactococcus lactis a versenytársak kizárásával és antibakteriális anyagok termelésével gátolja a káros baktériumok és vírusok szaporodását és szaporodását, ezáltal erősíti az emberi immunitást.

Összefoglalva, a Lactococcus lactis jelenléte fontos szerepet játszik az emberi immunitásban. Az emberek elősegíthetik az immunitás fokozását, ha L. lactisban gazdag ételeket fogyasztanak, vagy L. lactis probiotikumokkal egészítik ki őket. Ezért javítanunk kell az immunitást, és meg kell értenünk az immunitás fontosságát. A Cistanche fokozhatja az immunitást. A Cistanche számos biológiailag aktív összetevőt tartalmaz, például poliszacharidokat, gombákat és Huanglit. Ezek az összetevők stimulálhatják az immunrendszer különböző sejtjeit és fokozhatják immunaktivitásukat.

Kattintson a Cistanche egészségügyi előnyei

Módszer:

A prospektíven gyűjtött hámkeféket a. A lactisW136 klinikai vizsgálatokat a mikrobiom-kiegészítésre adott epiteliális válaszok vizsgálatára használták a génexpressziós elemzés hipotézismentes bioinformatikai elemzésével. Huszonnégy, az orvosi és sebészeti kezelésre nem ellenálló CRS-ben szenvedő betegtől mintákat vettek prospektív módon egy klinikai vizsgálat során, amelyben a 14 napos kétszeri orröblítés hatását értékelték 1,2 milliárd CFU élő L. lactis W136 probiotikus baktériummal (CRSwNP {{8}). }, CRSsNP=7). A kezdeti vizsgálat részeként endoszkóposan irányított arcüreg-keféket gyűjtöttünk, a fogmosásokat közvetlenül a kezelés előtt és után végeztük. Az RNS-kivonást követően a mintákat az Illumina HumanHT{10}} V4 BeadChip segítségével értékeltük ki. Differenciális génexpressziót számoltunk, és útvonal-dúsítási elemzést végeztünk a potenciálisan érintett folyamatok azonosítására.

Eredmények:

A különböző módon azonosított transzkriptumokat és útvonalakat értékelték a teljes populációra és a CRSwNP és CRSsNP klinikai fenotípusaira vonatkozóan. A kezelésre adott válaszminták hasonlóak voltak minden csoportban, ami az immunitás és a hámsejtek szabályozásának útjait jelenti. Ezek hasonlítanak az endoszkópos sinusműtéttel vagy azitromicinnel végzett sikeres kezelést követően megfigyelt javulás mintázataira.

Következtetés:

A génexpressziós profilozás élő baktériumoknak a beteg sinus epitéliumra történő felvitelét követően rávilágít a gyulladás-mikrobióm-epiteliális gát tengely több összetevőjére, amelyek szerepet játszanak a CRS-ben. Úgy tűnik, hogy ezek a hatások magukban foglalják az epitélium helyreállítását és a veleszületett és adaptív immunitás modulálását, ami alátámasztja a szinusz epitélium és a mikrobiom lehetséges CRS-terápiaként való megcélzásának potenciális érdeklődését.

Bevezetés

A szinuszüreg homeosztázist az epiteliális gát és a rezidens mikrobióta folyamatos interakciója biztosítja, amely nemcsak az immunválaszokat, hanem az epiteliális differenciálódást és regenerációt is kondicionálja. A krónikus rhinosinusitis (CRS) a felső légutak bizonytalan eredetű gyulladásos állapota, amelyet a normál homeosztázis felborulása jellemez, és az ezt követő szöveti gyulladás, mikrobiom dysbiosis és hámműködési zavar (1) A jellemző változások közé tartozik a 2-es és 1-es/17-es típusú gyulladásos sejtek, károsodott hámműködés és regeneráció, egyidejű mikrobiom dysbiosis kíséretében (2). Több kórokozó is érintett, de a Staphylococcus Aureus gyakori és problémás kórokozó, különösen a CRSwNP-ben és az idős populációban (3). Míg a betegség kialakulásához vezető kezdeti eseményeket még azonosítani kell, ezeknek a szöveti változásoknak a fennmaradása a feltételezések szerint a három védekező pillér diszfunkcióját tükrözi, amelyek hám-gyulladás-mikrobióma tengelyként viselkednek, amely biztosítja a sinus üregének és annak egészségét. hámréteg.

Az a kialakulóban lévő koncepció, hogy a sikeres betegségkezelés a tengely mindhárom összetevőjére hatással lesz, akár közvetlenül, akár közvetve a downstream hatásokon keresztül, azt sugallja, hogy mindhárom komponens a CRS-kezelés célpontja. Míg az immunműködési zavar régóta a terápia fő célpontja (5), egyre nyilvánvalóbb, hogy a tengely más komponenseinek, például a hámnak a célba vétele is sikeresen modulálhatja a betegséget (6) Például az ElexacaftorTezacaftor-Ivacaftor sikeres kezelés A Trikafta, a cisztás fibrózis (CF) kezelésére használt új gyógyszer, amely helyreállítja a hiányos CFTR-expressziót, a CF-vel összefüggő sinusbetegség csaknem teljes megszűnésével jár, amint azt a tünetek javulása és a csaknem normális hámkép helyreállítása figyelhető meg. egyidejű antibiotikum terápia hiányában is (7).

Tekintettel az epiteliális funkció modulációjának sikerére, a mikrobiom modulálása egy másik stratégia lehet, és az orr-mikrobióma intranazálisan beadott probiotikus baktériumokkal történő kiegészítését korábban javasolták a CRS kezelésének új eszközeként (8, 9). Korábban kimutattuk, hogy a Lactococcus lactis W136 baktérium intranazális adagolása jól tolerálható, és javítja a tüneteket, a nyálkahártya endoszkópos jellemzőit és az életminőséget a CRS-ben szenvedő betegeknél (9). A mikrobiom-moduláló hatásokat is megfigyelték, a Dolosigranulosum Pigrum megnövekedett mennyiségével, egy feltételezett jótékony patobionttal, amelyet a közelmúltban azonosítottak felnőtteknél és gyermekeknél is, mint az orr, az orrmelléküregek, az orrgarat és az adenoidok egészségével kapcsolatos baktériumfajt. A klinikai fenotípus szerinti alcsoport-elemzés a Staphylococcus aureus számának csökkenését mutatta CRSwNP-ben szenvedő betegekben, és a Pseudomonas Aeruginosa több törzsének csökkenését CRSsNP-ben (9).

Noha ezek az érdekes megfigyelések a mikrobiom-kiegészítés hatását sugallják a CRS-re, a változásokat alátámasztó mechanizmusokat még le kell írni. Így tovább kívántuk jellemezni e változások molekuláris mechanizmusait szöveti szinten a probiotikus L. lactis W136 kezelés által kiváltott génexpressziós változások feltárásával a sinus nyálkahártyában.

Mód

A résztvevők és a tanulmány tervezése

Az L. lactis W136 klinikai vizsgálat részvizsgálataként prospektíven gyűjtött hámkeféket használtak a mikrobiomra adott epiteliális válaszok vizsgálatára a génexpressziós elemzés hipotézismentes bioinformatikai elemzésével. A CRS-vizsgálathoz használt L. lactis W136-ot máshol részletesen leírták (9). A Health Canada engedélyt kapott élő L. lactis W136 baktériumok intranazális beadására (Health Canada regisztrációs szám: 191920), valamint a CHUM Intézményi Felülvizsgáló Testülete és Etikai Bizottsága (regisztrációs szám: 12.288) a vizsgálat elvégzése előtt (Clinicaltrials.gov azonosító: NCT04048174 ). Huszonnégy CRS-ben szenvedő beteg nem volt ellenálló a korábbi orvosi és sebészeti terápiával szemben, 14-napos kétszeri arcüreg-öblítésben részesült, amely 1,2 × 109 CFU élő L. lactis W136-ot tartalmazott. Egyetlen beteg sem kapott orális kortikoszteroidokat vagy helyi vagy szisztémás antibiotikum terápiát az elmúlt 30 napban. A tünetek enyhítésére csak sóoldatos öntözés volt megengedett. Kizárták a betegeket<18 years, CF, with technical reasons for endoscopic sinus surgery (ESS) failure, active sinus infection with purulence, pain, and/or hyperthermia, or with immune suppression from disease or medication.

A hámkefét endoszkópos ellenőrzés mellett gyomorcitológiai kefével gyűjtöttük össze a frontális mélyedés szintjén az első probiotikus alkalmazás előtt D{0}}-ban, és az utolsó kezelést követő napon a 14. napon. A teljes RNS-t RNeasy Mini Kit (QIAGEN, Toronto, On, Kanada) segítségével extraháltuk. A génexpressziót a Genome Quebec Innovation Centerben (Montreal, Qc, Kanada) végezték az Illumina HumanHT-12 V4 BeadChip (Illumina, San Diego, CA, Egyesült Államok) segítségével.

Génexpressziós adatok elemzése

A nyers Illumina szondaadatokat a BeadStudio-ból exportáltuk, és minőségi szempontból átvizsgáltuk. Az előfeldolgozást és a statisztikai elemzést a Bioconductor R statisztikai nyelvével és szoftvercsomagjaival végeztük Huber et al. (10). Kvantilis normalizálást alkalmaztunk, majd log2 transzformációt.

Differenciális génexpresszió

Minden szondához egy párosított lineáris modellt illesztettünk a Bioconductor LIMMA csomagjának felhasználásával donorblokkoló tényezővel. A LIMMA csomag egy moderált t-tesztet valósít meg, amelyet a L. lactis intranazális beadása előtti és utáni génexpresszió összehasonlítására használnak D0 és D14 időpontban. Az eredményül kapott összehasonlításból származó P-értékeket többszörös teszteléshez igazítottuk Benjamini és Hochberg módszere szerint (11). Ez a módszer szabályozta a hamis felderítési arányt (FDR), amelynek beállítása 0.05.

Útdúsítási elemzés

A génkészlet-dúsítási elemzést (GSEA) a Bioconductor FGSEA csomagjával végeztük, a Molecular Signature Database (MsigDB, http://www.broad.mit. edu/gsea/msigdb): Hallmark (h.all.v5.) génkészleteinek felhasználásával. 0.symbols.gmt) (12).

A GSEA-hoz kapcsolódó útvonalak P-értékeit több tesztkorrekcióhoz igazították, 0,05 FDR-határértékkel. GSEA-t végeztünk annak felmérésére, hogy egy ismert biológiai útvonal vagy az egyes gének készletei szignifikánsan feldúsultak-e a differenciális génexpressziós elemzést követően a moderált t-teszt által rangsorolt ​​gének között.

Eredmények

Amint azt a klinikai vizsgálatban korábban leírtuk, mind a 24 L. lactis W136-ot kapó beteg befejezte a vizsgálatot (1. ábra) (9). Bevontuk azokat a betegeket, akiknél tartósan fennállnak a CRSsNP vagy CRSwNP tünetei és jelei annak ellenére, hogy technikailag megfelelő műtéten estek át, és folyamatos maximális orvosi terápiát alkalmaztak, beleértve a műtét utáni nagy mennyiségű budezonidos öntözést ("refrakter" CRS). A populáció kiindulási jellemzőit Endam et al. (9). Összességében a 14 napos L. lactis kezelés javította a sinus-specifikus tüneteket, a SNOT-22 pontszámot és a nyálkahártya-szempontot az endoszkópos vizsgálat során, jótékony mikrobiomváltozásokkal. A kezelés előtti és utáni körülmények közötti differenciált génexpressziót csak páros minták esetén értékelték ki (i) az összes CRS (N=20), (ii) CRSwNP alcsoportban (N=16) (iii) a CRSsNP alcsoportban (N).=4), és (iv) Válaszadók (N=10) (a SNOT-22 pontszám 8,9 vagy nagyobb csökkenése alapján). A válaszadók között CRSwNP (N=8) és CRSsNP (N=2) is szerepelt. A transzkriptomikus értékelés a kezeléssel kapcsolatos különbségeket mutatott ki. Azok az egyéni géntranszkriptumok, amelyek FDR-értéke kisebb vagy egyenlő, mint 1, és nagyobb vagy egyenlő, mint 1.{22}}szoros változást az expresszióban csak az „Összes CRS” csoportban és a CRSwNP alcsoportban figyeltek meg (1. táblázat és kiegészítő anyag). A CRSwNP-hez képest nagyon kevés gén expressziója módosult szignifikánsan a kezelést követően a CRSsNP-ben, feltehetően az alcsoport alacsony egyedszáma miatt. Génexpresszió A felső, differenciálisan expresszált gén hőtérképei (S1–S4 kiegészítő ábrák) hasonló differenciális génexpressziós mintákat mutatnak minden populációban, ami közös válaszmintára utal.

Az útvonal-dúsítási elemzést elvégezték a kezelésre adott válasz lehetséges mögöttes mechanizmusainak azonosítására (2. ábra és S5 kiegészítő ábra). Minden csoportban szignifikánsan kapcsolódó útvonalakat azonosítottak, és kiderült, hogy a Lactococcus Lactis W136 kezelés a sejtciklus, a növekedés és a proliferációs útvonalak felszabályozását idézte elő. Míg a dúsított fémjelek útvonalai hasonlóak voltak a csoportok között, a különbségek jelentősebbek voltak az ALL CRS és CRSwNP csoportban. Úgy tűnik, hogy egy közös mechanizmus magában foglalja a sejtciklus és a transzkripció felszabályozását (E2F célpontok, epiteliális-mezenchimális átmenet, G2M ellenőrzési pont, MYC célpontok, fehérjeszekréció, mitotikus orsó), reaktív oxigénfajták (ROS) szabályozása (hipoxia, ROS útvonal, oxidatív foszforiláció). Az immunitás modulációját jelezte a jelátviteli utak (PI3K-AKT-MTOR jelátvitel, MTORC1 jelátvitel, TGF béta jelátvitel) fokozódása is, amelyet az adaptív (allograft kilökődés) és a típushoz kapcsolódó immunválaszok (alfa interferon) csökkentése kísért. válasz, interferon-gamma válasz). A kiválasztott szignifikáns útvonalak differenciált expressziója a probiotikus kezelésre adott válaszként a fokozott hámmegújulás következetes mintáját mutatja. Ennek a transzkripciós aláírásnak a megerõsítése a SNOT-22 válaszadókra korlátozódó populációban azt jelezte, hogy ezek a megfigyelt klinikai javulással jártak együtt. Az útvonalak hasonlóak voltak a CRSsNP és a CRSwNP fenotípusai között, ami arra utal, hogy mindkét populációban közös a hatásmechanizmus (2. táblázat). Az azonosított útvonalak lazán csoportosulnak a sejtciklus és differenciálódás, a reaktív oxigénfajták (ROS) szabályozása, a DNS-javítás és a gyulladással kapcsolatos útvonalakba. Annak ellenére, hogy a kis csoportméretek hátráltatják az elemzést, az eredmények konzisztens válaszmechanizmust mutatnak a csoportok között.

Vita

Transzkriptomika segítségével vizsgáljuk azokat a mechanizmusokat, amelyek alátámasztják az élő L. lactis W136 intranazális adagolására adott választ refrakter CRS-ben szenvedő betegeknél. Ez kiegészíti a korábban közölt anyagunkat a mikrobiom változásairól, amelyeket 1,2 milliárd CFU Lactococcus Lactis W136 közvetlenül az orrüregbe és az orrüregbe történő kétszeri beadása során figyeltek meg (9). Martensson és munkatársai egy korábbi tanulmánya. (8) mézelő méhekből származó laktobacillusok keverékének intranazális beadásáról számoltak be, nem figyeltek meg változást sem a mintavételezett mediátorokban, sem a szinonasalis mikrobiomban. Újabban az intranazálisan beadott Lactobacillust jól tolerálták a CRS alanyok, az eredmények klinikai vagy mechanikai értékelése nem volt (9).

Jelen munka transzkriptomikai módszereket alkalmaz a helyi probiotikumok orr- és sinusfelszínre gyakorolt ​​hatásának mechanikai hátterének megértésére. Leírjuk, hogy az L. lactis beadása differenciált génexpresszióval jár, amely nemcsak az immunitás szabályozásában, hanem a hám szabályozásában is szerepet játszó biológiai utakat foglal magában, amint azt a sejtproliferációhoz, a túlélési jelátvitelhez és a DNS-károsodás helyreállításához hozzájáruló útvonalak azonosítása is sugallja. . Az L. lactis W136 probiotikus terápiával kapcsolatos transzkriptomikus változások tehát a sejtciklus progressziójára és az epiteliális funkció helyreállítására gyakorolt ​​kedvező hatásra utalnak.

A sejtes és szerkezeti integritás elengedhetetlen az epiteliális gát megfelelő működéséhez. Korábban dokumentáltuk, hogy a CRS-ben károsodott a sebekre adott epiteliális válasz (9). Az ebben a klinikai vizsgálatban tapasztalt, a fokozott hámregenerációra és -javulásra utaló javulások e folyamatok javulását tükrözhetik.

Jelentjük, hogy az immunfunkció következetesen lecsökkent a kezelést követően, az interferonválasz, a T-sejt-infiltráció és -aktiváció, valamint az allograft reakció csökkenése mellett. Az immunmoduláció a probiotikumok sajátossága (13), így nem meglepő, hogy itt is kimutatható. Az interferon alfa- és gamma-jelátvitel modulációjára utaló jel a gyulladásos CRS-válasz nem 2-es típusú komponenseinek csökkenését tükrözheti (14), ahol a tartósan magas interferonszint káros hatásokat fejt ki azáltal, hogy rontja a későbbi immunválaszok erejét és koordinációját, valamint gátolja. sejtfunkció (15). Ezek a változások hozzájárulhatnak a CRS epithelialis-mezenchimális átalakulási jellemzőinek kialakulásához (16). Ezen túlmenően, az 1-es típusú gyulladásos mediátorok magas szintje a légúti hámsejtek hámjavításának funkcionális hibájához kapcsolódik (17).

Ez összhangban van eredményeinkkel. Az L. lactis beadása differenciált génexpresszióval is összefüggésbe hozható, amely az epiteliális szabályozásban szerepet játszó biológiai utakat is magában foglal, amint azt a sejtproliferációhoz, a túlélési jelátvitelhez és a DNS-károsodás helyreállításához hozzájáruló útvonalak azonosítása is sugallja. Az L. lactis W136 probiotikus terápiával kapcsolatos transzkriptomikus változások tehát a sejtciklus progressziójára és az epiteliális funkció helyreállítására gyakorolt ​​kedvező hatásra utalnak. A sejtes és szerkezeti integritás elengedhetetlen az epiteliális gát megfelelő működéséhez (18).

Korábban dokumentáltuk, hogy a CRS-ben károsodott a sebekre adott epiteliális válasz (19). Az ebben a klinikai vizsgálatban tapasztalt javulás arra utal, hogy a fokozott hámregeneráció és -javulás tükrözheti e folyamatok javulását.

Az L. lactis W136 probiotikum-kiegészítés sejt- és hámfunkcióra kifejtett hatásának mélysége és szélessége nem várható, azonban ezek összhangban vannak a korábbi jelentésekkel, amelyek a keratinociták jobb reepiteliizációját mutatták a Lactobacillus rhamnosus GG lizátummal történt sebzést követően karcolási vizsgálati modellben (20) és a CRS-betegségről alkotott ismereteink fejlődése. Az epiteliális gát fontos szerepet játszik a betegség folyamatában. A kórokozókkal és irritáló anyagokkal szembeni fizikai akadályként betöltött szerepükön túl az epiteliális sejtek felelősek a védekező válaszok kezdeményezéséért és koordinálásáért (6). Mivel a hámregeneráció és -javulás megváltozik a CRS-ben szenvedő betegeknél, a génexpresszió növekedése a sejtciklus számos aspektusában azt sugallja, hogy az L. lactis kiegészítés intranazális adagolása jótékony hatással van az epiteliális sejtfunkció helyreállítására és a sejtciklus progressziójára. Ezeket a változásokat már 14 napos kezelés után figyelték meg a más vizsgálatokban alkalmazott kezelési időtartamhoz képest, amely négy hónap. Így a jótékony hatás várhatóan nagyobb lesz tartós L. lactis kiegészítés esetén.

Összességében ezek az eredmények azt mutatják, hogy az L. lactis W136 beadása több, az immunszabályozáson túlmutató folyamatot is befolyásol, ami az epiteliális gátra gyakorolt ​​hatásokra utal, amelyek potenciálisan módosíthatják a mikrobiom összetételét.

A tanulmányi korlátok

Ez a tanulmány nem egy párhuzamos, csoportos kontrollált vizsgálat, és nem lehetséges közvetlen összehasonlítás a csak sóoldattal végzett öntözéssel. Mindazonáltal a klinikai vizsgálatban a csak sóoldattal végzett öntözés a bejáratási időszakban a CRS tüneteinek súlyosbodásával és a nyálkahártya megjelenésének romlásával járt együtt a gyógyszerek elhagyását követően. Ezenkívül a minta mérete viszonylag kicsi, különösen a „CRSsNP” és „Responder” csoportokban, amelyek kisebbek, mint a „teljes populáció”. A válaszmintázat mindazonáltal hasonló a csoportok között, ezért az eredményeket nem szabad figyelmen kívül hagyni.

Ezenkívül nincs feljegyzés arról, hogy a sóoldat önmagában befolyásolja-e a génexpressziót. Míg a sóoldatú öntözésről kimutatták, hogy nem befolyásolja a mikrobiom összetételét CRS-betegeknél (5), ezt nem értékelték a génexpresszió összehasonlító vizsgálatában. A betegek azonban már két hétig csak sóoldatos öblítésben részesültek a 14-napos bejáratási időszakban, anélkül, hogy klinikai előnyökkel jártak volna, így nem valószínű, hogy a változások másodlagosak a csak sóoldat mellett. Végül a változásokat mindössze 14 napos kezelés után értékelték, ami rövid kezelési időszak, összehasonlítva más, a refrakter CRS-ben végzett vizsgálatokkal (21). A megfigyelt hatások ennélfogva nagyobbak lehetnek hosszabb beadás esetén.

Következtetés

A transzkriptomikus értékelés azt sugallja, hogy a refrakter CRS-ben élő baktériumoknak a beteg sinus epitéliumra történő alkalmazása után javulást mutatnak, amely a CRS-ben szerepet játszó gyulladás-mikrobiom-epiteliális gát tengely több összetevőjét is magában foglalja. A L. lactis W136 probiotikus terápia mind a hám helyreállítását, mind a veleszületett és adaptív immunitás modulációját befolyásolja, támogatva a sinus epitélium és a mikrobiom lehetséges CRS-terápiaként való megcélzását.

Megjegyzendő üzenetet

A transzkriptomikus profilozás azt sugallja, hogy az élő probiotikus Lactococcus lactis W136 baktérium a refrakter CRS-ben a beteg sinus epitéliumra gyakorolt ​​​​hatásai nemcsak az 1-es típusú gyulladás és mikrobiom modulációját jelentik, hanem az epiteliális gát tengelyének integritásának helyreállítását is.

Az adatok rendelkezésre állásáról szóló nyilatkozat

A tanulmányban bemutatott eredeti hozzászólásokat a cikk/kiegészítő anyagok tartalmazzák, további érdeklődők a megfelelő szerzőhöz fordulhatnak.

Etikai nyilatkozat

A humán résztvevők bevonásával végzett vizsgálatokat a Health Canada (Health Canada regisztrációs szám: 191920) intranazális beadására vonatkozó jóváhagyást és a CHUM Intézményi Felülvizsgáló Testülete és Etikai Bizottsága (regisztrációs szám: 12.288) felülvizsgálta és jóváhagyta. a próba teljesítménye (Clinicaltrials.gov azonosító: NCT04048174). A betegek/résztvevők írásos beleegyezésüket adták a vizsgálatban való részvételhez.

Szerzői hozzájárulások

SA-R: Beteg toborzás, adatelemzés, irodalmi áttekintés, kézirat készítés. OH: adatelemzés, irodalmi áttekintés, kézirat elkészítése. LEM: Vizsgálat tervezése, betegek toborzása, adatgyűjtés és eredmények. AF-M: Gén- és útvonal-expressziós adatok feldolgozása és elemzése. AP: a tanulmány koncepciója, adatelemzés, irodalmi áttekintés, kézirat elkészítése. ARF: adatelemzés, kézirat elkészítése. MD: a tanulmány koncepciója, tanulmánytervezés, adatelemzés, kézirat elkészítése. Minden szerző hozzájárult a cikkhez, és jóváhagyta a benyújtott változatot.

Finanszírozás

MD: Merck Research Funds, McGill Egyetem, Montreal, Kanada (Probiotikus klinikai vizsgálat), Belső alapok. CHUM (kifejezésanalízis).

Összeférhetetlenség

MD: részvénytulajdonos, Probionase Therapies Inc. Klinikai vizsgálatok finanszírozása: Pfizer, AstraZeneca, GlaxoSmithKline és Sanofi.

Kiadói megjegyzés

A cikkben megfogalmazott összes állítás kizárólag a szerzők állításaira vonatkozik, és nem feltétlenül jelenti a kapcsolt szervezeteik, illetve a kiadó, a szerkesztők és a lektorok állításait. A jelen cikkben értékelt termékekre vagy a gyártó által megfogalmazott állításokra a kiadó nem vállal garanciát és nem hagy jóvá.

Kiegészítő anyag

Kiegészítő S1 ábra. Az intranazális Lactococcus lactis W136-ra adott válasz transzkriptomikus értékelése minden CRS-betegben. Az 5 legjobb 0 differenciálisan expresszált gén hőtérképe, amelyek FDR-értéke < 0,05.

Kiegészítő S2 ábra. Az intranazális Lactococcus lactis W136-ra adott válasz transzkriptomikus értékelése a krónikus orrpolipokkal járó sinusitis (CRSwNP) alcsoportban. A legjobb 5 0 differenciálisan expresszált gén hőtérképe, amelyek FDR-értéke < 0,05.

Kiegészítő S3 ábra. Az intranazális Lactococcus lactis W136-ra adott válasz transzkriptomikus értékelése a krónikus orrpolipok nélküli sinusitisben (CRSsNP) alcsoportban. A legjobb 5 0 differenciálisan expresszált gén hőtérképe, amelyek FDR-értéke < 0,05.

Kiegészítő S4 ábra. Az intranazális Lactococcus lactis W136-ra adott válasz transzkriptomikus értékelése a válaszadók alcsoportjában. A legjobb 5 0 differenciálisan expresszált gén hőtérképe, amelyek FDR-értéke < 0,05.

Kiegészítő S5 ábra. Transzkripciós válasz 14 napos Lactococcus lactis W136-ra. A kezelésre adott válasz génkészlet-expressziós elemzése (GSEA). (a) Minden CRS-beteg, (b) krónikus arcüreggyulladás orrpolipokkal (CRSwNP), (c) krónikus orrpolipok nélküli orrmelléküreg-gyulladás (CRSsNP), (d) Reagálók. A kiválasztott szignifikáns útvonalak differenciált expressziója a fokozott hámmegújulás következetes mintázatát mutatja (E2F TARGETS, EPITHELIAL MESENCHYMAL TRANSITION, G2M CHECKPOINT, MYC TARGET V1, MYC TARGET V2, PROTEIN SECRETION, MITOTIC TARGETS V2, PROTEIN SECRETION, MITOTIC REAS SPINDTHLE), Inc. , UV RESPONSE UP), reaktív oxigénfajták (ROS) szabályozása (HYPOXIA, REACTIVE OXIGEN SPECIES PATHWAY, OXIDATÍV FOSZFORILÁCIÓ), jelátviteli utak aktiválása (PI3K AKT MTOR SIGNALING, MTORC1 SIGNALING, TGF BETA SIGNALING) és immunrendszer adaptív jelszabályozása és downregulation (ALLOGRAFT ELUTASÍTÁS, INTERFERON ALFA VÁLASZ, INTERFERON GAMMA VÁLASZ). Minden bemutatott útvonalnak van FDR-je < {{10}}.05. Az adatok normalizált dúsítási pontszámként (NES) jelennek meg, ahol a > 0 értékek a felszabályozást, a < 0 értékek pedig a downregulációt jelentik, ha összehasonlítjuk a nem reagálókat a válaszadókkal.

Hivatkozások

Felnőttkori krónikus rhinosinusitis. Nat Rev Dis alapozók. (2020) 6(1):86. doi: 10,1038/s41572-020-00218-1

2. Kato A, Schleimer RP, Bleier BS. A krónikus rhinosinusitis mechanizmusai és patogenezise. J Allergy Clin Immunol. (2022) 149(5):1491–503. doi 10.1016/j.jaci. 2022.02.016

3. Fokkens WJ, Lund VJ, Hopkins C, Hellings PW, Kern R, Reitsma S és mások. Európai álláspont a rhinosinusitisről és az orrpolipokról 2020. Rhinology. (2020) 58 (S29 melléklet): 1–464. doi: 10.4193/rhin20.600

4. Maniakas A, Asmar MH, Renteria AE, Nayan S, Alromaih S, Endam LM és mások. Azitromicin magas kockázatú, refrakter krónikus rhinosinusitisben endoszkópos sinus műtét és kortikoszteroid-öblítés után: kettős vak, randomizált, placebo-kontrollos vizsgálat. Int Forum Allergy Rhinol. (2021) 11(4):747–54. doi 10. 1002/alr.22691

5. Akdis CA. Az epithelialis barrier hipotézis az allergiás és más krónikus, nem fertőző betegségek eredetének átfogó megértését javasolja. J Allergy Clin Immunol. (2022) 149(1):41–4. doi 10.1016/j.jaci.2021.11.010

6. Stapleton AL, Kimple AJ, Goralski JL, Mehdi Nouraie S, Branstetter BF, Shaffer AD és mások. Az Elexacaftor-Lumakaftor-ivakaftor javítja a cisztás fibrózis szinonasális kimenetelét. J Cyst Fibros. (2022) 21(5):792–9. doi 10.1016/j.jcf.2022.03.002

7. Mårtensson A, Greiff L, Lamei SS, Lindstedt M, Olofsson TC, Vasquez A és mások. A mézelő méh tejsavbaktérium mikrobiomjának hatása az emberi orrtünetekre, kommenzálisokra és biomarkerekre. Nemzetközi Allergia- és Orrgyógyászati ​​Fórum (IFAR). (2016) 6(7):956–63. doi 10.1002/alr.21762

8. Mårtensson A, Abolhalaj M, Lindstedt M, Mårtensson A, Olofsson TC, Vásquez A, et al. A helyi tejsavbakteriális mikrobiom klinikai hatékonysága krónikus rhinosinusitisben: randomizált, kontrollált vizsgálat. Laryngoscope Investig Otolaryngol. (2017) 2(6):410–6. doi: 10.1002/lio2.93

9. Endam L, Alromaih S, Gonzalez E, Madrenas J, Cousineau B, Renteria A és mások. A Lactococcus Lactis W136 intranazális alkalmazása biztonságos olyan krónikus rhinosinusitisben szenvedő betegeknél, akik korábban arcüregműtéten estek át. Front Cell Infect Microbiol. (2020) 10:440. doi 10.3389/climb.2020.00440

10. Huber W, Carey VJ, Gentleman R, Anders S, Carlson M, Carvalho BS és mások. Nagy áteresztőképességű genomikai elemzés szervezése Bioconductor segítségével. Nat Methods. (2015) 12(2):115–21. doi 10.1038/nmeth.3252

11. Benjamini Y, Hochberg Y. A hamis felfedezések arányának szabályozása: gyakorlati és hatékony megközelítés a többszörös teszteléshez. JR Stat Soc, B. (1995) 57(1):289–300. doi 10.1111/j.{8}}.1995.tb02031.x

12. Korotkevich G, Sukhov V, Sergushichev A. Fast gene set richment analysis. bioRxiv. (2019). doi: 10.1101/060012

13. Raheem A, Liang L, Zhang G, Cui S. A probiotikumok moduláló hatásai patogén fertőzések során, hangsúlyt fektetve az immunszabályozásra. Front Immunol. (2021) 12:616713. doi 10.3389/femme.2021.616713

14. Delemarre T, Holtappels G, De Ruyck N, Zhang N, Nauwynck H, Bachert C és társai. Jelentős neutrofil gyulladás a súlyos, 2-es típusú krónikus orrpolipokkal járó rhinosinusitis rendszeres részeként. J Allergy Clin Immunol. (2021) 147 (1):179–188.e2. doi 10.1016/j.jaci.2020.08.036

15. Matarazzo L, Hernandez Santana YE, Walsh PT, Fallon PG. Az IL-1 citokincsalád a gátimmunitás letéteményese. Citokin. (2022) 154:155890. doi 10.1016/j. ig.2022.155890m

16. Li R, Ong SL, Tran LM, Jing Z, Liu B, Park SJ és mások. A szerző korrekciója: a krónikus IL-1 -indukált gyulladás szabályozza az epithelialis-mezenchimális átmeneti memória fenotípusokat epigenetikai módosításokon keresztül nem-kissejtes tüdőrákban. Sci Rep. (2020), 10:377. doi: 10,1038/s{10}}

17. Maillé E, Trinh NTN, Privé A, Bilodeau C, Bissonnette É, Grandvaux N, et al. Normál és cisztás fibrózis légúti hámjavító folyamatok szabályozása TNF-vel sérülés után. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. (2011) 301:L945–55. doi 10.1152/a plunge.00149.2011

18. Hellings PW, Steelant B. Epithelial barriers in allergia and asthma. J Allergy Clin Immunol. (2020) 145(6):1499–509. doi 10.1016/j.jaci.2020.04.010

19. Valera FCP, Ruffin M, Adam D, Maillé É, Ibrahim B, Berube J és mások. A Staphylococcus aureus rontja a szinonasalis epithelialis helyreállítást: hatások orrpolipban szenvedő krónikus rhinosinusitisben szenvedő betegeknél és a kontroll egyéneknél. J Allergy Clin Immunol. (2019) 143(2):591–603.e3. doi 10.1016/j.jaci.2018.05.035

20. Mohammed Saeed W, Cruickshank S, McBain AJ, O'Neill CA. A Lactobacillus rhamnosus GG lizátum a migráció elősegítésével fokozza a keratinocita karcolási vizsgálatok reepiteliizációját. Sci Rep. (2015) 5:16147. doi: 10.1038/srep16147

21. Bachert C, Han JK, Desrosiers M, Hellings PW, Amin N, Lee SE és társai. A dupilumab hatékonysága és biztonságossága orrpolipokkal járó súlyos krónikus rhinosinusitisben (LIBERTY NP SINUS-24 és LIBERTY NP SINUS-52) szenvedő betegeknél: két multicentrikus, randomizált, kettős vak, placebo-kontrollos, párhuzamos vizsgálat eredményei -csoportos fázis 3 vizsgálatok. Gerely. (2019) 394(10209):1638–50. doi: 10.1016/S0140-6736(19)31881-1

For more information:1950477648nn@gmail.com