A német krónikus vesebetegség (GCKD) vizsgálatának eredményei a relatív telomerhosszúság és a mortalitás között a közepesen súlyos krónikus vesebetegségben szenvedő betegek nagy csoportjában
Mar 12, 2022
Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger és mások.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, International Society of Nephrology. Kiadó: Elsevier Inc. Ez egy nyílt hozzáférésű cikk a CC BY licenc alatt
Ismeretes, hogy a telomerek hossza fordítottan összefügg az öregedéssel, és az öregedéssel összefüggő betegségek markereként javasolták. A telomerek kopását felgyorsíthatja az oxidatív stressz és a gyulladás, mindkettő gyakran előfordul krónikus vesebetegségben szenvedő betegeknél. Itt azt vizsgáltuk, hogy a relatív telomerhossz összefüggésben áll-e a mortalitással a krónikus vesebetegség G3 és A1-3 vagy G1-2 stádiumában szenvedő betegek nagy csoportjában, akiknek a beiratkozáskor nyilvánvaló proteinuriája (A3) jelentkezett. A relatív telomerhosszt a perifériás vérben kvantitatív PCR-módszerrel határozták meg 4955 betegnél a GCKD-vizsgálatból, egy folyamatban lévő prospektív megfigyelési kohorszból. A teljes négyéves követés 4926 betegnél volt elérhető, akiknél 354 halálesetet regisztráltunk. A relatív telomerhossz erős és független előrejelzője volt a minden ok miatti halálozásnak. Minden egyes 0,1 relatív telomerhossz-egység csökkenése szoros összefüggést mutatott a halálozás kockázatának 14%-os növekedésével (kockázati arány 1,14 [95%-os konfidenciaintervallum 1.06-1.22]) egy korrigált modellben életkor, nem, kiindulási eGFR, vizelet albumin/kreatinin arány, diabetes mellitus, gyakori szív- és érrendszeri betegségek, LDL-koleszterin, HDL-koleszterin, dohányzás, testtömeg-index, szisztolés és diasztolés vérnyomás, C-reaktív fehérje és szérum albumin. Ez 75 százalékkal nagyobb kockázatot jelentett a legalacsonyabb telomerhosszúság legmagasabb kvartiliséhez képest. Az összefüggést főként 117 szív- és érrendszeri haláleset (1,20 [1.05-1.35]), valamint 67 fertőzés miatti haláleset (1,27 [1.07-1.50]) okozta. Eredményeink tehát alátámasztják a rövidebb telomerhosszúság összefüggését az összes okból bekövetkező mortalitással, a kardiovaszkuláris mortalitással és a fertőzések okozta halálozással közepesen súlyos krónikus vesebetegségben szenvedő betegeknél.
KULCSSZAVAK:krónikus vesebetegség; fertőzések; halálozás; relatív telomerhossz
Krónikus vesebetegség(CKD) egy összetett betegség, és örökölhetőségét 30–70 százalékra becsülték.9–12 Az elmúlt években a genomra kiterjedő asszociációs vizsgálatok számos, a veseműködéssel és a CKD-vel kapcsolatos genetikai lókuszt azonosítottak.13–17
Mindazonáltal az azonosított lókuszok index egyetlen nukleotid polimorfizmusa az öröklődésnek csak egy kis részét magyarázza, és további genetikai hozzájárulók hiányozhatnak. Eddig csak néhány kis tanulmány vizsgálta a TL és a vesebetegség közötti összefüggést. Egyes tanulmányok azt találták, hogy a rövid TL korrelál a károsodott veseműködéssel az általános populációban,18,19, valamint a szívelégtelenségben szenvedő betegekben.20 Nemrég írtunk le szignifikánsan rövidebb relatív TL-t (RTL) mérsékelten súlyos CKD-ben szenvedő betegeknél, akiknek prevalens szív- és érrendszeri betegségük van. CVD),21, valamint összefüggés a krónikus veseelégtelenség időtartamával22 és progressziójával.23 A hemodialízissel kezelt veseelégtelenségben szenvedő betegekről azt írják, hogy az egészséges kontrollokhoz képest csökkent a TL24–27, és a csökkent TL fordítottan összefügg a mortalitással. 28 Csak néhány vizsgálatot végeztek nem dializált vesebetegeken.21–23,29,30 Tudomásunk szerint ez a tanulmány az első olyan prospektív vizsgálat, amely a leukocita RTL és a halálozási okok közötti összefüggést vizsgálja nem dialízis-függő CKD kohorsz.
A Cistanche előnyei: javítja a veseműködést
EREDMÉNYEK
A vizsgált populáció kiindulási jellemzői
Az RTL-t perifériás vérben kvantitatív polimeráz láncreakciós módszerrel határozták meg 4955 német betegnél.Krónikus vesebetegségtanulmány. 4926 beteg teljes {{0}}éves követése volt elérhető. A 4926 beteg kiindulási jellemzőit az RTL kvartiliseinek megfelelően az 1. táblázat tartalmazza. Az RTL minimum {{10}},40 és maximum 2,31 között volt (S1 kiegészítő ábra). ), amelynek átlaga ± SD 0,95 ±0,19, mediánja pedig 0,92 (1. kvartilis ¼ 0,82; 3. kvartilis ¼ 1 .05). Az RTL negatívan korrelált az életkorral (r ¼ –{{30}},36, P < 0,001),="" és="" pozitívan="" korrelált="" a="" becsült="" glomeruláris="" filtrációs="" rátával="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" és="" a="" vizelet="" albuminnal="" kreatinin="" arány="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" amikor="" az="" rtl-t="" korhoz="" és="" nemhez="" igazítottuk,="" már="" nem="" figyeltünk="" meg="" szignifikáns="" korrelációt="" az="" egfr-rel="" és="" a="" vizelet="" albumin-kreatinin="">
Leendő nyomon követés és halálozás
A 4 éves (1483 napos) medián követési időszak alatt összesen 354 haláleset történt. A halál okai a szívinfarktus, a szívkoszorúér-betegség, a hirtelen szívhalál, a pangásos szívelégtelenség, a tüdőembólia, a szívbillentyű-betegség és az ischaemiás stroke (117 beteg, 33,1 százalék), fertőzések (67 beteg, 18,9 százalék), a nemiszkémiás cerebrovaszkuláris betegségek voltak. okok (9 beteg, 2,5 százalék), perifériás érbetegség (7 beteg, 2,{15}} százalék), veseelégtelenség (8 beteg, 2,3 százalék), különféle egyéb okok (103 beteg, 29,1 százalék) és ismeretlen okok ( 43 beteg, 12,1 százalék).
A kumulatív incidencia diagramok azt mutatják, hogy a minden ok miatti halálozás előfordulása (1a. ábra) növekszik rövidebb RTL mellett, a legmagasabb előfordulási gyakoriság pedig a legalacsonyabb RTL kvartilis mellett. A kardiovaszkuláris (1b. ábra) és a fertőzési mortalitás (1c. ábra) kumulatív előfordulási függvény görbéjén a kvartilisek közötti különbség kevésbé volt kifejezett, de a kvartilisek sorrendje megegyezett.
1. ábra|Kumulatív előfordulási függvény (a) minden ok miatti halálozás, (b) szív- és érrendszeri betegségek (CVD) mortalitás és (c) fertőzések miatti halálozás tekintetében, a relatív telomerhossz (RTL) kvartilisében (Q). Az 1. negyedév a legrövidebb RTL-vel rendelkező betegeket tartalmazó kvartilis.
A különböző korrekciókat alkalmazó Cox-regressziós modellek eredményeit a 2. táblázat tartalmazza, amelyek szignifikáns összefüggést mutattak a rövidebb RTL és a minden ok miatti halálozás kockázata között. Folyamatosan kiértékelve, minden 0,1 RTL egység csökkenés a halálozás kockázatának 16%-os növekedésével járt egy életkorhoz és nemhez igazított modellben (kockázati arány [HR], 1,16; 95 százalékos konfidencia intervallum [CI], 1.08–1,24; P ¼ 1,7e-05). Az összefüggés szignifikáns maradt az eGFR, a vizelet albumin-kreatinin arány, a diabetes mellitus és a prevalens szív- és érrendszeri betegségek (2. modell: HR, 1,16; 95 százalékos CI, 1,08-1,24), valamint a további CVD-kockázati tényezők alacsony denzitású korrekciója után is. lipoprotein koleszterin, nagy sűrűségű lipoprotein koleszterin, dohányzás, testtömeg-index, szisztolés vérnyomás, diasztolés vérnyomás, C-reaktív fehérje és szérum albumin kiinduláskor (3. modell: HR, 1,14; 95 százalékos CI, 1,06-1,22; P ¼ 3,5e-04). A nemlineáris P spline elemzéseket a 2. ábra mutatja be, és az RTL szinte lineáris összefüggését mutatta ki a minden ok miatti mortalitással. A legrövidebb RTL-vel (1. kvartilis) rendelkező betegeknél 75 százalékkal nagyobb volt az összes okból bekövetkező halálozás kockázata, mint a leghosszabb RTL-t mutató kvartilisben (S1 kiegészítő táblázat, teljesen kiigazított modell: HR, 1,75; 95 százalékos CI, 1,22–2,50 P ¼ 0,0024).
Ezt követően azt elemeztük, hogy mi okozza az RTL és a minden ok miatti halálozás közötti összefüggést (2. táblázat). Kiértékeltük a 2 leggyakoribb specifikus halálokot, és megfigyeltük, hogy minden 0,1 RTL-egység csökkenése 20 százalékkal nőtt a szív- és érrendszeri betegségek miatti halálozás kockázatával a teljesen kiigazított modellben (HR, 1,2). 0; 95 százalékos CI, 1.05–1,35; P ¼ 0,0052). A csökkent RTL szintén szignifikánsan fordított összefüggést mutatott a fertőzések miatti halálozással. Az RTL minden 0,1 egységnyi csökkenése 1.{18}}szer nagyobb fertőzések miatti halálozási kockázattal járt (HR, 1,27; 95 százalékos CI, 1,07–1,50; P ¼ 0,0051). Az S1 kiegészítő táblázatban a különböző kvartilisekre vonatkozó becslések alapján kiderült, hogy a fertőzések miatti halálozásra vonatkozóan az 1., 2. és 3. kvartilis becslései hasonlóan magasabbak voltak a 4. kvartilishez képest. valamint az ismeretlen halálokok nyilvánvalóan túl heterogének voltak, és nem mutattak semmilyen összefüggést az RTL-lel (az adatokat nem mutatjuk be).
A skálázott Schoenfeld-maradványok grafikonja és az arányos veszélyfeltevésekkel végzett teszt nem utalt semmilyen időben változó hatásra az RTL-re a vizsgált eredmények egyikére sem. Az S2 kiegészítő táblázatban közölt, mind a kardiovaszkuláris, mind a fertőzéses halálozási HR-ek csak kismértékben gyengültek az ok-specifikus HR-ekhez képest.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 a teljesen beállított modellekben). Tekintettel arra, hogy a közelmúltban U-alakú összefüggést figyeltünk meg a CKD és az RTL időtartama között,22 érzékenységi elemzést végeztünk, amely a CKD kiindulási időtartamához is igazított, mint 6 hónap, 6 hónap és 5 év között, és több mint 5 hónap. évek. Ez a további kiigazítás csak marginális változásokat eredményezett a mindhárom végpontra kapott HR-ekben (S3 kiegészítő táblázat).
A Cistanche előnyei: javítja a veseműködést
VITA
Ennek a vizsgálatnak az eredményei azt mutatták, hogy az RTL szignifikáns összefüggést mutat a minden ok miatti halálozással egy nem dialízis-függő CKD kohorszban. A rövidebb RTL a vesefunkciótól és a hagyományos CVD kockázati tényezőktől függetlenül a mortalitás magasabb kockázatával járt együtt. Ezt az összefüggést a szív- és érrendszeri betegségek okozta halálozás, valamint a fertőzések miatti halálozás okozta.
Összefüggés a minden ok miatti halálozással
Előzetes tanulmányok,5,6,31–35néhány kivételtől eltekintve,36,37 negatív összefüggést mutattak ki az RTL és az általános populáció összes okból bekövetkezett halálozása között. Az eddigi legnagyobb vizsgálatot (n ¼ 64 637) Rode és munkatársai végezték, a mortalitásra korrigált HR-vel 1,40 a legrövidebb decilisben, szemben a leghosszabb RTL-vel rendelkező decilisben.35Ezekkel az eredményekkel összhangban tanulmányunk azt mutatta, hogy minden egyes 0.1 RTL egységnyi csökkenés esetén 14 százalékkal magasabb a minden okból kifolyólagos halálozás kockázata, ami 75 százalékkal magasabb kockázatot jelent a legalacsonyabbakhoz képest a legmagasabbhoz képest. kvartilis az RTL. Tudomásunk szerint csak Carrero et al.28vizsgálták az RTL és a mortalitási kockázat közötti összefüggést CKD betegekben. 175 végstádiumú vesebetegségben szenvedő, hemodialízissel kezelt beteget vizsgáltak, akik közül 70 halt meg átlagosan 31 hónapos megfigyelés alatt. A szerzők megfigyelték, hogy a TL függetlenül megjósolta a betegek túlélését az életkor, a nem és a gyulladás szerinti további korrekció után. A jelenlegi tanulmány ezeket a megfigyeléseket kiterjeszti a CKD-ben szenvedő egyének sokkal nagyobb csoportjára, akik nem igényelnek dialízist.
2. ábra|Korrigált nemlineáris spline-ok (és 95 százalékos megbízhatósági sávok) a növekvő relatív telomerhossz (RTL) és a kockázati arány (HR) közötti összefüggésre az (a) minden ok miatti halálozás, (b) a kardiovaszkuláris halálozás és (c) a fertőzések miatti halálozás között . A HR log-skálaként van megadva az adókon. Szürkevonal: 1. beállítási modell (életkorhoz és nemhez igazítva). Blueline: 3. korrekciós modell (korhoz, nemhez igazítva, becsült [folytatás]
Kapcsolat a szív- és érrendszeri halálozással
Eddig egyetlen tanulmány sem vizsgálta az RTL összefüggését a szív- és érrendszeri betegségek mortalitásával CKD-betegeknél, bár ezeknél a betegeknél ez a fő halálok. A vizsgált etnikai hovatartozástól és az adatkiigazítási modellektől függően néhány, de nem minden, az általános populációban végzett tanulmány összefüggést számolt be az alacsony RTL és a CVD kimenetele között.33,38–41Az ok-okozati összefüggést erősen alátámasztotta egy mendeli randomizációs vizsgálat, amelyben a rövidebb RTL-hez kapcsolódó genetikai variánsok ischaemiás szívbetegséghez kapcsolódnak.40Jelen tanulmányban az RTL és a kardiovaszkuláris halálozás közötti szignifikáns összefüggést azonosítottuk, amely 20 százalékkal magasabb kockázatot jelent az RTL minden egyes 0,1 egységgel történő csökkenésével, vagy 75 százalékkal magasabb kockázatot azoknál. a legrövidebb TL-vel rendelkező kvartilisbe tartozó betegek a leghosszabb TL-ekkel rendelkező kvartilishez képest. Ez a megállapítás összhangban van korábbi jelentésünkkel a prevalens kardiovaszkuláris eseményekkel ebben a betegpopulációban: az RTL minden 0,1 egységgel történő csökkenése szignifikánsan a prevalencia CVD esélyének 6 százalékkal volt összefüggésben az életkorhoz, nemhez és aktuális állapothoz igazodó modellben. dohányzás, magas vérnyomás, cukorbetegség állapota, alacsony sűrűségű lipoprotein koleszterin, nagy sűrűségű
lipoprotein koleszterin, C-reaktív fehérje, eGFR és testtömeg-index.21A jelen vizsgálatban ezeknek a betegeknek a prospektív követése feltárta, hogy különösen az RTL legalsó kvartiliséhez társult jelentősen megnövekedett kockázat, míg a másik 3 kvartilis nagyon hasonló becsléseket mutatott (1b. ábra).
A fertőzések okozta halálozással való kapcsolat
Bár a kísérleti bizonyítékok alátámasztják a sejtöregedés és a rövid TL szerepét a károsodott immunválaszban, az epidemiológiai vizsgálatok ritkák, különösen a CKD-s betegeknél. Helby és mtsai. elvégezte a legnagyobb (n ¼ 75 309) prospektív populációs alapú vizsgálatot, amely az RTL-t és a fertőző betegség miatti kórházi kezelés kockázatát és a fertőzéssel összefüggő halálozás kockázatát vizsgálta. A 7 éves követés során a legrövidebb kvartilisben nagyobb fertőzési kockázatot figyeltek meg, mint a leghosszabb RTL-t tartalmazó kvartilisben.42 A korábbi, kisebb mintaszámú vizsgálatok ellentmondó eredményekről számoltak be.32,43,44A krónikus vesebetegségben szenvedő betegeken szerzett eredményeink első ízben írják le az összefüggést a rövid RTL és a fertőzések miatti magasabb halálozási kockázat között ebben a magas kockázatú populációban.
A Cistanche előnyei: javítja a veseműködést
Potenciális mechanizmus
Az RTL és a mortalitás közötti kapcsolat mögött meghúzódó biológiai mechanizmus még mindig tisztázatlan. A vizsgálatunk által azonosított összefüggés nem tisztázza, hogy az RTL lerövidülése okozati összefüggésben áll-e a szív- és érrendszeri betegségekkel és fertőzésekkel. Azonban egy genomszintű asszociációs vizsgálat, amelyet egy genetikai kockázati pontszám elemzés követett, amely 7 genetikai lókuszban kombinálta a vezető variánsokat, azt mutatta, hogy a rövidebb RTL-hez kapcsolódó allélek összefüggést mutatnak a koszorúér-betegség fokozott kockázatával. Ez a megállapítás lehetséges alátámasztja az RTL lehetséges okozati szerepét a szív- és érrendszeri betegségekben.45,46Ezenkívül a telomerek koptatása által kiváltott sejtöregedés az érelmeszesedés és az érelmeszesedés kiváltója lehet. Az öregedő sejtek felhalmozódása az érben hozzájárul az atheroscleroticus plakkok képződéséhez és a media meszesedéséhez, ami az urémiás artériás betegség domináns jellemzőjeként az artériák merevségének növekedését eredményezi.47A legtöbb tanulmányban RTL-t mértek a perifériás leukociták DNS-ében. Ugyanakkor szoros összefüggést mutattak ki a leukociták és az aortafalszövet TL között.48Ezért a sejtek öregedése befolyásolhatja az endothel sejteket, ami az érfal diszfunkciójához vezethet, és elősegítheti az immunsejtek adhézióját, ami az ateroszklerózis elsődleges eseménye. Ezenkívül a rövid telomerek aktiválják a p53-at és az autofágiát a szív progenitor sejtjeiben, destabilizálva a nyugalom és a proliferáció egyensúlyát a differenciálódás és az öregedés felé, ami a szív progenitor sejtek kimerüléséhez vezet.49Kimutatták, hogy a telomer diszfunkció a mitokondriális biogenezis és funkció fő szabályozóinak mélyreható p53-függő elnyomását idézi elő, ami bioenergetikai kompromisszumhoz vezet az oxidatív foszforiláció és az adenozin-trifoszfát képződésének károsodása miatt.50,51
Számos kapcsolat is van az RTL és a fertőzések között. A telomerek elvesztését figyelték meg a T-sejtek differenciálódása során,52krónikus vírusfertőzések esetén,53és a korral.54Ezenkívül a rövid leukocita TL-ről számoltak be különböző immunrendszeri betegségek kockázati tényezőjeként55és a cukorbetegség.56A leukocita rövidebb TL sejtek öregedését okozza, amelyet az immunsejtek proliferációs kapacitásának csökkenése követ. A TL szerepet játszhat az immunfunkció életkorral összefüggő hanyatlásában is, amely az oltásokra és akut fertőzésekre adott elégtelen válasz miatt következik be.57–59A TL fertőzésekben betöltött lehetséges szerepét alátámasztja egy kínai populáción végzett közelmúltbeli genomszintű asszociációs vizsgálat is. Dorjee és munkatársai összefüggést figyeltek meg a TL-csökkentő allél és a légúti fertőzés okozta halálozás között.60Az RTL kopását erősen kiválthatja a megnövekedett oxidatív stressz jelenléte, amely gyakori állapot a CKD-ben.61 Számos in vitro és in vivo vizsgálat kimutatta, hogy az oxidatív stressz felgyorsítja a telomerek kopását.62,63Valójában a telomerek magas guanintartalmukkal nagyon érzékenyek az oxidatív károsodásokra,64és az oxidatív stressz által kiváltott egyszálú DNS-szakadások fontos tényezői lehetnek a telomer rövidülésének a DNS-replikáció során.65
A Cistanche előnyei: javítja a veseműködést
Erősségek és korlátok
Ennek a vizsgálatnak az erősségei közé tartozik egy jól körülhatárolt populáció nagy mintaszáma, 4 éves medián követési idővel, szinte semmi veszteség nélkül, a vizsgált populáció homogenitása, valamint a TL és az eredménymutatók központosított értékelése. Az RTL mérése különösen azért fontos, mert a laboratóriumok közötti szabványosítást nem könnyű megvalósítani, ezért a folyamatot ugyanabban a laboratóriumban kell végrehajtani, pontosan azonos feltételek mellett protokoll, referenciagén, műszer, személyzet,66 és DNS tekintetében. extrakciós eljárás.67
Ennek a tanulmánynak vannak bizonyos korlátai. Először az RTL-t perifériás leukocitákban mértük. Ismeretes, hogy az öregedésig való progresszió sebessége különbözik a limfocita-alcsoportok között. 59A német nyelvben sajnos nem álltak rendelkezésre adatok a vérsejtek összetételérőlKrónikus vesebetegségvizsgálatot, ezért nem volt lehetséges ezt a szempontot vizsgálni. Különböző vesesejt-típusokból származó RTL ismerete érdekes lenne, de ezt egy nagy epidemiológiai vizsgálat során nem lehet megszerezni, mivel ehhez biopsziákból származó szövetanyagra lenne szükség. A második korlátozás magában foglalja a vizsgálat megfigyelési tervét, amely nem teszi lehetővé az ok-okozati összefüggés vagy a biológiai mechanizmus tisztázását. Harmadszor, a tanulmány főként G3 vagy A3 stádiumú CKD betegeket vont be, és előfordulhat, hogy az eredmények nem általánosíthatók a CKD más stádiumaira. Negyedszer, a halálozás konkrét okaival való összefüggést korlátozhatta a statisztikai erő, de továbbra is jelen volt a 2 fő halálok esetében. Végül, bár elemzéseinket a hagyományos szív- és érrendszeri kockázati tényezőkhöz, valamint a vesefunkciós paraméterekhez igazítottuk, nem zárhatjuk ki annak lehetőségét, hogy ismeretlen vagy nem mért zavaró tényezők maradjanak fenn.
változók. Nagyon érdekes volt azonban látni, hogy az életkor és nem szerint korrigált RTL becslések a különböző kimenetelekre nagyon stabilak voltak a többi változó további korrekciójával, ami azt jelzi, hogy az RTL viszonylag független a többi változótól, ha az adatokat korra és nemre korrigálják.
Következtetések
A perifériás vér leukocitáiból számszerűsített rövid relatív TL független összefüggést mutatott az összes okból bekövetkező mortalitással a 4 éves követés során közepesen súlyos CKD-ben szenvedő betegeknél. Ezt az összefüggést a szív- és érrendszeri betegségek okozta halálozás, valamint a fertőzések miatti halálozás okozta.
A Cistanche előnyei: javítja a veseműködést
MÓD
Vizsgálati populáció
A németKrónikus vesebetegség study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/perc per 1,73 m2 nyílt proteinuria jelenlétében (G1-G2, A3 stádium). A kizárási kritériumok a következők voltak: nem kaukázusi származás, szilárd szerv- vagy csontvelő-transzplantáció, aktív rosszindulatú daganat a szűrést megelőző 24 hónapon belül, a New York Heart Association IV. stádiumú szívelégtelensége, valamint a törvényes jelenlét vagy a beleegyezés megadásának képtelensége. A bemutatott laboratóriumi paraméterek mindegyikét egy központi laboratóriumban gyűjtött biomintákból mérték, a korábban leírtak szerint.68 A szociodemográfiai tényezőkről, az orvosi és családi anamnézisről, a gyógyszeres kezelésről és az egészséggel összefüggő életminőségről szerzett információkat képzett személyzet szabványosított kérdőívek segítségével. A kiinduláskor elterjedt szív- és érrendszeri megbetegedést úgy határozták meg, mint az anamnézisben szereplő nem halálos kimenetelű miokardiális infarktus, koszorúér bypass graft, perkután transzluminális koszorúér-angioplasztika, stroke és a nyaki artériákon végzett beavatkozások (carotis endarterectomia és/vagy carotis ballon angioplasztika vagy stent beültetés).
Minden résztvevő írásos beleegyezését adta, és a vizsgálatot az összes részt vevő intézmény etikai bizottsága jóváhagyta, és bejegyezték a klinikai vizsgálatok nemzeti nyilvántartásába (DRKS 00003971). Minden módszert a jóváhagyott irányelveknek és a Helsinki Nyilatkozatnak megfelelően hajtottak végre. Az adatok gyűjtése és kezelése az Askimed (https://www.askimed.com) segítségével történik, amely felhőalapú webes platform az esetjelentési űrlapok és laboratóriumi adatok gyűjtésére és kezelésére.
Klinikai végpontok a prospektív követés során
A közelmúltban leírtak szerint 69 beteget követnek évente képzett személyzet, akik személyes és telefonos látogatásokat váltanak. E látogatások során egy strukturált interjú részeként frissítik a kórházi kezelésekre, kimenetelekre és kórtörténetre vonatkozó adatokat. A kórházi elbocsátási jelentéseket a kezelőorvosoktól és/vagy kórházaktól kell begyűjteni. A végpontokat folyamatosan kivonja ezekből a jelentésekből egy képzett és felügyelt végpontbizottság, amely 3 független orvosból áll egy előre meghatározott végpontkatalógus szerint. A halál okára vonatkozó információkat ezekből a jelentésekből, valamint a polgári anyakönyvi kirendeltségektől begyűjtött halotti anyakönyvi kivonatokból veszik, amikor a vizsgálati személyzetet egy vizsgálatban résztvevő haláláról értesítik.
A jelenlegi elemzés tartalmazza az összes olyan végpontot, amely a 4-éves követésig előfordult. Ha egy beteg kihagyta az 4-éves követési látogatást, az összes végpontot figyelembe vettük a megfelelő kiindulási vizit után 4,5 évig. Ezért a cenzúrázási idő vagy az 4-éves követési dátum, vagy az alapérték utáni 4,5 év volt. Az elsődleges eredmény a minden ok miatti halálozás volt. Annak értékelésére, hogy az azonosított összefüggések egy adott halálokhoz köthetők-e, a szív- és érrendszeri okokból és a fertőző betegségekből eredő halálozást másodlagos kimenetelnek tekintették. A szívinfarktus, szívkoszorúér-betegség, hirtelen szívhalál, pangásos szívelégtelenség, tüdőembólia, szívbillentyű-betegség és ischaemiás stroke. Más halálokokat is feljegyeztek, de ezek az alcsoportok nem voltak elég nagyok ahhoz, hogy további ok-specifikus elemzéseket végezzenek.
Az RTL mérése
A genomiális DNS-t teljes vérből extraháltuk egy központi laboratóriumban a Chemagic Magnetic Separation Module I-vel (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Németország). A jelenlegi elemzés 4926 olyan betegen alapult, akiknél rendelkezésre álltak a kiindulási vérmintákban mért RTL és a mortalitási adatok. Az RTL-t négy párhuzamosban mértük a Cawthon7 által kifejlesztett kvantitatív polimeráz láncreakción alapuló vizsgálati módszerrel0, amelyet a korábban leírtak szerint módosítottak.71 DNS-mintát futtattunk 15- ml-es reakciókban, amelyek 1x Quantifast TM SYBR Green PCR mesterkeveréket tartalmaztak. (Qiagen, Hilden, Németország), 10 ng DNS, 1 mM telomer primer vagy 250 nm housekeeping gén 36B4 primer. Meghatároztuk a telomer ismétlődő kópiaszám (T) és az egykópiás gén kópiaszámának (36B4 gén, PO riboszomális foszfoproteint kódoló, a 12. kromoszómán található) relatív arányát. A T/S arányok az egyes RTL-ekkel arányosak. Ennek a nagy áteresztőképességű eljárásnak az automatizálása nagyon jó minőség-ellenőrzési intézkedéseket eredményezett a T/S arányok alacsony inter-assay variációs együtthatójával. Az összes kvantitatív polimeráz láncreakciós lemezen lévő, kereskedelmi forgalomban kapható DNS-t használtuk a vizsgálat teljesítményének ellenőrzésére a teljes vizsgálat során. A 112 független kísérletben elemzett minta T/S arányainak interassay variációs együtthatója a normalizálás előtt 9,6 százalék volt, a normalizálás után pedig 4,0 százalékra csökkent (S2 kiegészítő ábra).
Statisztikai analízis
Összehasonlítottuk a résztvevők kiindulási jellemzőit (1. táblázat) a Kruskal–Wallis teszt segítségével a folytonos változókra és a khi-négyzet teszttel a kategorikus változókra. Kumulatív előfordulási függvény görbéket használtunk a versengő kockázatot felszámító különböző halálokok kumulatív előfordulásának becslésére.72 Cox-arányos hazard regressziós modelleket végeztünk az RTL 3 eredménnyel való összefüggéseinek értékelésére: (i) minden okú halálozás, ( ii) szív- és érrendszeri betegségek okozta halálozás, és (iii) fertőzések miatti halál. Mindkét ok-specifikus végpontnál (ii és iii) a betegeket cenzúrázták, ha a halál bármilyen más okból következett be. Ezenkívül az ezekkel az ok-specifikus végpontokkal fennálló összefüggéseket a versengő kockázatok túlélési regressziójával vizsgálták, az egyéb okokból eredő összes halálozást versengő eseménynek tekintve. Ezért mind az ok-specifikus HR-eket, mind az alosztály HR-eket a CVD vagy fertőzések miatti halálesetek miatt jelentették. A Cox-arányos veszélyek modelljeit 3 különböző beállítási szinttel illesztettük: az 1. modell életkorhoz és nemhez igazítva; a 2. modell a kiindulási eGFR-re, a vizelet albumin-kreatinin arányára, a prevalens CVD-re és a cukorbetegségre is igazítva; A 3. modellt tovább korrigálták az alacsony sűrűségű lipoprotein koleszterin, a nagy sűrűségű lipoprotein koleszterin, a testtömegindex, a dohányzás, a szisztolés és diasztolés vérnyomás, a C-reaktív fehérje és az albumin hagyományos CVD kockázati tényezőihez. A különböző modellekben korrigált változók kiválasztása az 1. táblázatban megadott RTL kvartilisek klinikai jellemzőinek különbségei alapján történt. A regressziós modellekben az RTL-t folyamatosan és kategorikus prediktorként (RTL kvartilisben) elemeztük. Tekintettel arra, hogy a kezdeti eredmények magasabb kockázatot jeleztek, különösen az alacsony RTL-értékek esetén, az (ok-specifikus) HR-t az 1., 2. és 3. kvartilisre is jelentették referenciaként a 4. kvartilishez képest (S1 kiegészítő táblázat). A további downstream elemzés a P-spline vizuális vizsgálatán alapult, hogy megállapítsa az RTL és a halálozási kockázat közötti kapcsolat alakját. Spearman rangkorrelációs együtthatóját használtuk a vizsgálati változók közötti összefüggés felmérésére. Minden statisztikai elemzést az R 3.3.2 (https://www.r-project.org) használatával végeztünk; P-értékek<0.05 were="" considered="" statistically="">
IRODALOM
1. Moyzis RK, Buckingham JM, Cram LS és mások. Egy erősen konzervált ismétlődő DNS-szekvencia (TTAGGG)(n), amely az emberi kromoszómák telomerjein található. Proc Natl Acad Sci US A. 1988;85:6622–6626.
2. Baird DM. Telomer dinamika az emberi sejtekben. Biochimie. 2008;90:116–121.
3. von Zglinicki T, Martin-Ruiz CM. Telomerek, mint biomarkerek az öregedés és az életkorral összefüggő betegségek számára. Curr Mol Med. 2005;5:197–203.
4. Forero DA, González-Giraldo Y, López-Quintero C, et al. Telomer hossza Parkinson-kórban: metaanalízis. Exp Gerontol. 2016;75:53–55.
5. Mons U, Müezzinler A, Schöttker B, et al. A leukocita telomerek hossza és az összes ok, a szív- és érrendszeri betegségek és a rák mortalitása: 2 nagy prospektív kohort tanulmány egyéni résztvevői adatainak metaanalízisének eredményei. Am J Epidemiol. 2017;185:1317–1326.
6. Wang Q, Zhan Y, Pedersen NL és mtsai. Telomerhossz és minden ok miatti halálozás: metaanalízis. Aging Res Rev. 2018;48:11–20.
7. Wills LP, Schnellmann RG. Telomerek és telomeráz a vese egészségében. J Am Soc Nephrol. 2011;22:39–41.
8. Kordinas V, Tsirpanlis G, Nicolaou C, et al. Van-e összefüggés a gyulladás, a telomeráz aktivitás és a telomeráz reverz transzkriptáz transzkripciós állapota között veseelégtelenségben? Cell Mol Biol Lett. 2015;20:222–236.
9. Cañadas-Garre M, Anderson K, Cappa R és mtsai. A krónikus vesebetegségre való genetikai hajlam – még néhány darab az öröklődési rejtvényhez. Front Genet. 2019;10:453.
10. Satko SG, Freedman BI. A vesebetegségek és a kapcsolódó fenotípusok családi csoportosulása. Med Clin North Am. 2005;89:447–456.
11. Regele F, Jelencsics K, Shiffman D, et al. Genomszintű vizsgálatok a vesebetegség kockázati tényezőinek azonosítására, különös tekintettel a cukorbetegekre. Nephrol Dial Transplant. 2015;30:iv26–iv34.
12. Wuttke M, Köttgen A. Betekintés a vesebetegségekbe genomszintű asszociációs vizsgálatokból. Nat Rev Nephrol. 2016;12:549–562.
13. Böger CA, Gorski M, Li M, et al. A GWAS által azonosított eGFR-hez kapcsolódó lókuszok asszociációja incidens CKD-vel és ESRD-vel. PLoS Genet. 2011;7: e1002292.
14. Chambers JC, Zhang W, Lord GM és társai. Veseműködést és krónikus vesebetegséget befolyásoló genetikai lókuszok. Nat Genet. 2010;42:373–375.
15. Köttgen A, Pattaro C, Böger CA, et al. Veseműködéssel és krónikus vesebetegséggel kapcsolatos új lókuszok. Nat Genet. 2010;42:376–384.
16. Pattaro C, Teumer A, Gorski M és mtsai. Az 53 lókuszban található genetikai asszociációk rávilágítanak a vesefunkció szempontjából releváns sejttípusokra és biológiai útvonalakra. Nat Commun. 2016;7:10023.
17. Wuttke M, Li Y, Li M és mtsai. A veseműködéssel kapcsolatos genetikai lókuszok katalógusa millió egyén elemzéséből. Nat Genet. 2019;51:957–972.
18. Bansal N, Whooley MA, Regan M és mtsai. A veseműködés és a telomerhossz közötti összefüggés: a szív és a lélek tanulmányozása. Am J Nephrol. 2012;36:405–411.
19. Eguchi K, Honig LS, Lee JH és mtsai. A rövid telomerhosszúság vesekárosodással jár a szív- és érrendszeri kockázattal küzdő japán alanyoknál. PLoS One. 2017;12:e0176138.
20. Wong LSM, Van Der Harst P, De Boer RA és munkatársai. A veseműködési zavar a szívelégtelenségben a telomerek rövidebb hosszával jár. Clin Res Cardiol. 2009;98:629–634.
21. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S et al. A relatív telomerhossz összefüggése a szív- és érrendszeri betegségekkel egy nagy krónikus vesebetegség kohorszban: a GCKD tanulmány. Érelmeszesedés. 2015;242:529–534.
22. Raschenberger J, Kollerits B, Titze S et al. A telomereknek nagyobb plaszticitásuk van, mint gondolták? A német krónikus vesebetegség (GCKD) mint magas kockázatú populáció vizsgálatának eredményei. Exp Gerontol. 2015;72: 162–166.
23. Raschenberger J, Kollerits B, Ritchie J és mtsai. A relatív telomerhossz összefüggése a krónikus vesebetegség progressziójával két kohorszban: dohányzás és cukorbetegség hatásmódosítása. Sci Rep. 2015;5:1–8.
24. Betjes MGH, Langerak AW, Van Der Spek A, et al. A keringő T-sejtek idő előtti öregedése végstádiumú vesebetegségben szenvedő betegeknél. Kidney Int. 2011;80:208–217.
25. Hirashio S, Nakashima A, Doi S et al. Telomer G-farok hossza és kórházi kezelés szív- és érrendszeri események miatt hemodializált betegeknél. Clin J Am Soc Nephrol. 2014;9:2117–2122.
26. Ramírez R, Carracedo J, Soriano S et al. Stressz által kiváltott idő előtti öregedés a hosszú távú hemodialízisben részesülő betegek mononukleáris sejtjeiben. Am J Kidney Dis. 2005;45:353–359.
27. Tsirpanlis G, Chatzipanagiotou S, Boufidou F et al. A telomeráz aktivitás csökken a hemodializált betegek perifériás vér mononukleáris sejtjeiben. Am J Nephrol. 2006;26:91–96.
28. Carrero JJ, Stenvinkel P, Fellström B, et al. A telomerek kopása gyulladással, alacsony fetuin-A-szinttel és magas mortalitással jár a gyakori hemodializált betegeknél. J Intern Med. 2008;263:302–312.
29. Mazidi M, Rezaie P, Covic A és mtsai. Telomerkopás, veseműködés és elterjedt krónikus vesebetegség az Egyesült Államokban. Oncotarget. 2017;8:80175–80181.
30. Kidir V, Aynali A, Altuntas A et al. Telomeráz aktivitás 2–5D stádiumú krónikus vesebetegségben szenvedő betegeknél. Nefrologia. 2017;37:592–597.
31. Batsis JA, Mackenzie TA, Vasquez E és mtsai. A zsírosodás, a telomerhossz és a mortalitás összefüggése: az NHANES 1999-2002 adatai. Int J Obes. 2018;42:198–204.
32. Fitzpatrick AL, Kronmal RA, Kimura M, et al. A leukocita telomer hossza és mortalitása a szív- és érrendszeri egészségügyi vizsgálatban. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2011;66A:421–429.
33. Needham BL, Rehkopf D. A leukocita telomerek hossza és mortalitása a National Health and Nutrition Examination Survey-ben, 1999–2002. Járványtan. 2015;26:528–535.
34. Pusceddu I, Kleber M, Delgado G és munkatársai. Telomerhossz és mortalitás a ludwigshafeni kockázati és kardiovaszkuláris egészségügyi vizsgálatban. PLoS One. 2018;13:e0198373.
35. Rode L, Nordestgaard BG, Bojesen SE. A perifériás vér leukocita telomereinek hossza és mortalitása az általános populációból származó 64 637 egyedek körében. J Natl Cancer Inst. 2015;107:djv074.
36. Loprinzi PD, Loenneke JP. A leukocita telomer hossza és mortalitása az amerikai felnőttek körében: hatásmódosítás a fizikai aktivitás viselkedésével. J Sports Sci. 2018;36:213–219.
37. Gao X, Zhang Y, Mons U et al. A leukocita telomer hossza és az epigenetikai alapú mortalitási kockázati pontszám: összefüggések az idősebb felnőttek minden okból bekövetkező mortalitásával. Epigenetika. 2018;13:846–857.
38. D'Mello MJJ, Ross SA, Briel M és munkatársai. A lerövidített leukocita telomerhossz és a kardiometabolikus eredmények közötti összefüggés: szisztematikus áttekintés és metaanalízis. Circ Cardiovasc Genet. 2015;8:82–90.
39. Haycock PC, Heydon EE, Kaptoge S és mtsai. A leukocita telomer hossza és a szív- és érrendszeri betegségek kockázata: szisztematikus áttekintés és metaanalízis. BMJ. 2014;349:g4227.
40. Madrid AS, Rode L, Nordestgaard BG és társai. Rövid telomerhosszúság és
ischaemiás szívbetegség: megfigyelési és genetikai vizsgálatok 290 022 személyen. Clin Chem. 2016;62:1140–1149.
41. Mwasongwe S, Gao Y, Griswold M és mtsai. A leukocita telomer hossza és a szív- és érrendszeri betegségek afroamerikaiaknál: A Jackson Heart Study. Érelmeszesedés. 2017;266:41–47.
42. Helby J, Nordestgaard BG, Benfield T és munkatársai. A leukocita telomerek rövidebb hossza a fertőzések nagyobb kockázatával jár: egy prospektív vizsgálat 75 309 személy bevonásával az általános populációból. Haematologica.2017;102:1457–1465.
43. Cawthon RM, Smith KR, O'Brien E és munkatársai. A vér telomerhossza és a 60 éves vagy annál idősebb emberek mortalitása közötti összefüggés. Gerely. 2003;361:393–395.
44. Njajou OT, Hsueh WC, Blackburn EH, et al. A telomerhossz, a konkrét halálokok és az egészséges életévek közötti összefüggés az egészségben, az öregedésben és a testösszetételben: populációalapú kohorszvizsgálat. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2009;64:860–864.
45. Codd V, Nelson CP, Albrecht E és mtsai. Hét lókusz azonosítása, amelyek befolyásolják az átlagos telomerhosszt és összefüggésüket a betegséggel. Nat Genet. 2013;45:422–427.
46. Zhan Y, Hägg S. Telomerhosszúság és szív- és érrendszeri betegségek kockázata. Curr Opin Cardiol. 2019;34:270–274.
47. Stenvinkel P, Luttropp K, McGuinness D és munkatársai. A CDKN2A/p16INK4a expresszió a vaszkuláris progériához kapcsolódik krónikus vesebetegségben.
Öregedés (Albany. NY). 2017;9:494–507.
48. Wilson WRW, Herbert KE, Mistry Y et al. A vér leukocita telomer DNS-tartalma előrejelzi a vaszkuláris telomer DNS-tartalmat érbetegségben szenvedő és nem szenvedő emberekben. Eur Heart J. 2008;29:2689–2694.
49. Matsumoto C, Jiang Y, Emathinger J és munkatársai. A rövid telomerek p53-at és autofágiát indukálnak, és módosítják az életkorral összefüggő változásokat a szív progenitor sejtek sorsában. Őssejtek. 2018;36:868–880.
50. Lai L, Leone TC, Zechner C, et al. A PGC-la és PGC-lb transzkripciós koaktivátorok a szív perinatális éréséhez szükséges átfedő programokat szabályozzák. Genes Dev. 2008;22:1948–1961.
51. Moslehi J, Depinho RA, Sahin E. Telomerek és mitokondriumok az öregedő szívben. Circ Res. 2012;110:1226–1237.
52. Rufer N, Brümmendorf TH, Kolvraa S et al. A granulocitákban és a T-limfociták alcsoportjaiban mért telomer fluoreszcencia magas értéket mutat.
