Sarmentosamide, egy öregedésgátló vegyület egy tengeri eredetű Streptomyces Sp. z. APmarine042

Kulcsszavak:Cisztanche; Streptomycessp. APmarine042;öregedésgátló; MMP-1; UVB; TNF-

Kattintson ide, ha többet szeretne megtudni a Cistanche For Aging Skin-Care termékről

1. Bemutatkozás

A bőr öregedésekét fő folyamat indukálja, amelyek belső és külső tényezők eredménye.Külső öregedéselsősorban a környezeti tényezőknek való kitettség okozza, mint például a levegőszennyezés [1] és ultraibolya (UV) sugárzás [2]. Az UV-fény UVA-ból (315-400 nm), UVB-ből (280-315 nm) áll,és UVC (200–280 nm), amelyek közül az UVB-sugarakról ismert, hogy behatolnak az epidermiszbe, és hozzájárulnak a bőrhöz.fotóöregedés [3]. Az UVB által kiváltott bőr fotoöregedés DNS-károsodást okoz [4] és reaktív oxigénfajták(ROS) generáció [5] és megzavarja az extracelluláris mátrixot [6]. A belső öregedést a természetesfiziológiai változások következményei, mint például genetikai tényezők, hormonok és anyagcsere-folyamatok [7]. Ezenkívül a gyulladásos citokinek, például a tumor nekrózis faktor-alfa (TNF ), interleukin 1 alfa/béta(IL-1 / ), és az interleukin 6 (IL-6), az életkor előrehaladtával krónikusan megnövekszik. Különösen a tumor nekrózistényező- (TNF ) köztudottan felgyorsítja az extracelluláris mátrix (ECM) komponenseinek lebomlásáta mátrix metalloproteinázok (MMP) expressziójának és aktivitásának fokozása idős bőrben [8]. Az MMP-1 azfőleg a dermisben lévő fibroblasztok bocsátják ki, és a szekretált MMP{0}} felelős a lebomlásértdermális kollagén, amely támogatja a bőr szerkezetét és működését. Ezért az MMP modulációja-1A dermális fibroblasztokban való expresszió ígéretes célpont lehet az öregedésgátlás fejlesztésébenkozmetikai összetevők.

Korábbi tanulmányok arról számoltak be, hogy az UVB sugárzás ROS-t (reaktív oxigénfajok termelést) indukál, és intracelluláris jelátviteli utak és transzkripciós faktorok (pl. AP-1, NF-kB) aktiválásához vezet [9. Ezeket a transzkripciós faktorokat a mitogén szabályozza -aktivált protein kinázokMAPK-k), amelyek MMP-1 és proinflammatorikus citokineket indukálnak. Három különböző MAPKamilia vesz részt az UVB/ROS ingerekben: extracelluláris jel által szabályozott kinázok (ERK), c-Jun N-terminális

kináz (NK), és p38. Vizsgálatunk egy Streptomyces sp. APmarine042 kivonat, amely erős gátló hatást fejtett ki az MMP-1 expressziójára. Ezt követően egy MMP-1-gátló vegyületet azonosítottak ebben a Streptomyces sp. Az APmarine042 kivonatot és kémiai szerkezetét az NMR-elemzési segédanyag (1) segítségével azonosítottuk, amely egy 101-es hexadienamid részt tartalmazó vegyület. Ezután tovább vizsgáljuk, hogy ez a vegyület gátolta-e az MMP-1 expresszióját UVB-besugárzott és TNFa-indukált humán bőrben. fibroblasztok, valamint szerepe a mögöttes jelátviteli útvonalak szabályozásában. Ezen kívül megvizsgáltuk a tha cisztanche antioxidáns hatása(1) egy 2,2-difenil-1-pikrilhidrazilon (DPPHI) keresztülgyökfogó vizsgálat.

2. Eredmények és megbeszélés

2.1. cistanche (1) Elkülönítés és azonosítás

a cistanche-t (1) izoláltuk HPLC-UV és bioaktivitás-vezérelt izolálás kombinációjával. Az ebben a vizsgálatban azonosított vegyület (a továbbiakban: 1" vegyület) NMR-adatainak (kiegészítő anyagok) és a korábban közölt vegyületek NMR-adatainak (kiegészítő anyagok) összehasonlítása alapján az 1-es vegyületet cisztánként azonosítottuk. Az 1-es vegyület optikai forgatóképessége: összhangban van a korábbi jelentésekkel is, amelyek tovább támogatták az 1. vegyület segítségét (1. ábra).

2.2. A cistanche (1) citotoxikus hatásai a humán dermális fibroblasztokra

A cisztanche citotoxikus hatásának vizsgálatára normál humán dermális fibroblasztokat (NHDFor humán fityma fibroblaszt sejteket (Hs68) különböző koncentrációjú (6, 12, 25, 50, 100 ug/ml) cisztanccsal kezeltünk 24 órán keresztül, majd a sejt counting kit-8 (CCK-8) ​​vizsgálatot végeztünk a sejtek életképességének számszerűsítésére.A CCK-8 oldatban a vízben oldódó tetrazólium só (WST-8) dehidrogenáz aktivitása csökkent sejteket, hogy sárga színű formazánfestéket kapjunk, amelynek mennyisége arányos volt az élő sejtek számával. Amint a 2. ábrán látható, a cisztanche sem az NHDF, sem a Hs68 sejtekben nem okozott megfigyelhető citotoxikus hatást {{15} közötti koncentrációban. } ug/ml

2. ábra: Cisztanche sejtéletképességi tesztje fibroblasztokon. (ab) A sejt életképességecisztanche-kezeltnormál humán dermális fibroblasztok (NHDF) (a) és humán fityma fibroblaszt sejtek (Hs68) (b) sejtjeit 24 órán belül CCK (sejtszámláló kit) vizsgálattal mértük. * p < 0.05, ** p < 0,01 vs. kezeletlen csoport).

2.3. cistanche (1) gátolja az MMP-1 expressziót és szekréciót UVB-besugárzott NHDF-sejtekben

Ezt követően az NHDF-eket UVB sugárzás (25 mJ/cm2) hiányában és jelenlétében cisztanchával (2,5 ug/ml) kezeltük rövid ideig, és a relatív MMP-1 mRNS expressziós szinteket kvantitatív, valós időben számszerűsítettük. PCR elemzés. Azt találták, hogy a cistanche akár 16%-kal, illetve 17%-kal csökkenti az MMP-1 mRNS-szintjét UVB hiányában (3a. ábra), illetve jelenléte (3b. ábra). Az UVB-sugárzás, a bőröregedés egyik fő kockázati tényezője behatolnak az epidermiszbe és elérik a dermisz felső részét, ami reaktív oxigénfajták (ROS) MMP termelődését és a kollagén szintézis lelassulását eredményezi. Ezért vizsgálatunk azt kívánta megvizsgálni, hogy a cisztanche gátolta-e az MMP-1 szekréciót UVB-besugárzással NHDF sejtek. Az MMP-1 szekréciós szintjét a sejttenyésztő tápközegben ELISA-val mértük, és az MMP-1szekréció relatív mennyiségét a teljes sejt lizátumokban lévő összes fehérjére normalizáltuk, amelyet bicinchonin segítségével mértünk. sav (BCA) fehérje kvantifikációs vizsgálata. Az UVB besugárzás (25 mJ/cm2) jelentősen megnövelte az MMP{18}}szekréciót (8{20}}szeresére) a nem UVB-besugárzott csoporthoz (3c. ábra) és a cisztanchához képest - gátolta az MMP-1 szekréciót UVB-sugárzással besugárzott NHDF sejtekben dózisfüggő módon.

3. ábra: A cistanche hatása a metalloproteináz-1 (MMP-1) expressziójára UVB-besugárzott NHDF-ekben. (a,b) Az MMP-1 relatív mRNS-szintje UVB-sugárzással (25 mJ/cm2) besugárzott vagy 16 órán keresztül cisztanchával (2,5 ug/ml) kezelt NHDF sejtekben. Az RPLPO gént belső kontrollként alkalmaztuk. * p < {{10}}.05.*** p < 0.001 (C) UVB besugárzás után (25 mJ/cm2) , szérummentes tápközegben lévő cistanche-t 48 órán át kezeltük, majd az MMP-1 relatív szekréciós szintjét a sejttenyésztő tápközegben ELISA-val elemeztük.### p < 0,001 (a nem UVB kontrollcsoporttal szemben); ** p < 0,01; *** p < 0,001 (UVB-besugárzott kontrollcsoport).

Kérdezz többet:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plusz 86 15292862950