Spontán granulocitás leukémia NOD/Shi-scid IL-2R null egérben

Absztrakt:Itt beszámolunk egy spontán granulocitás leukémia esetéről egy 51-hetes férfi NOD/Shi-SCIDIL-2R null (NOG) egér. Az egér megmutattaprogresszív vérszegénységésdurva légzőmozgás. Makroszkóposan a lép elszíneződött és megnagyobbodott. Szövettanilag a csontvelő aszegycsonta combcsont pedig erősen sejtes volt és szinte kizárólag telítettneoplasztikus sejtek. A neoplasztikus sejtek magjai nagyok, oválisak vagy kissé szabálytalan alakúak voltak, és kis számú sejtvese- vagy gyűrű alakú magok.Neoplasztikus sejtekkiterjedten beszivárgott a szervekbe, és a lép és a máj kiemelkedően érintett volt. Immunhisztokémiailag a neoplasztikus sejtek nagy populációja a lép vörös pulpájában és a máj sinusoidában pozitív voltmieloperoxidáz. A szövettani jellemzők alapján ezt az esetet diagnosztizáltákgranulocitás leukémia. Ez az új információ aspontán daganatokhasznos lehet ennek az egértörzsnek a megfelelő használatához a további kutatásokban. (DOI: 10.1293/tox.{2}}; J Toxicol Pathol 2021; 34:241–244)

Kulcsszavak: granulocitás leukémia, NOG egér, spontán daganat

KATTINTSON IDE, HOGY TERMÉSZETES SZERVES CISTANCHE KIVONATOT SZEREZZE MEG 25% ECHINAKOZIDOT ÉS 9% AKTEOZIDOT A VESEMŰKÖDÉSÉRT

Wecistanche támogató szolgáltatása – Kína legnagyobb cisztanche exportőre:

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel.:+86 15292862950

Vásároljon további specifikációkért:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Spontán granulocitás leukémiaRitkán jelentették több egértörzsben, bár a vegyi anyagok és az ionizáló sugárzás egyes egértörzsekben növelhetik az előfordulási gyakoriságot1, 2. A NOD/Shi-scid IL-2R null (NOG) egerek súlyosanimmunhiányos állatokés a T-, B- és természetes ölősejtek, valamint a rosszul működő makrofágok és dendrites sejtek defektusait mutatják be az IL-2 receptor-lánc (IL2R c) NOD-scid törzsbe történő kiiktatásával3. Ezt az egértörzset nem klinikai vizsgálatokhoz használják, például a tumorogenitási teszthez, az emberi eredetű sejt/szövet felhasználásával a regeneratív gyógyászatban felhasznált biológiai termékek minőségének és biztonságosságának felmérésére, mivel a xenogén sejtek jelentősen jobb beágyazódása 4–6. Bár az immunhiányos állapotot és annak következményeit a xenograftokra alaposan tanulmányozták, kevés információ áll rendelkezésre az ebben az egértörzsben előforduló spontán daganatokról, mint például a thymus limfóma,emlőmirigy adenoma/adenokarcinóma, bronchioloalveoláris karcinóma, rabdomioszarkómaés teratoma7. Itt egy granulocitás leukémia esetéről számolunk be egy 51-hetes hím NOG egérben.

Az állatot 6 hetes korában az In-Vivo Science Inc.-től (Kanagawa, Japán) szereztük be, és nem kezelték. Az állatot egyedileg szellőztetett ketrecrendszerrel (Maxi Miser Caging System; Oriental Giken Inc., Tokió, Japán) ellátott műanyag ketrecben helyezték el egy környezetileg ellenőrzött akadályrendszerű helyiségben, amelyet 22 ± 2 fokos hőmérsékleten tartottak. 50 ± 20% páratartalom és 12-óra világos/sötét ciklus. Az egeret autoklávozott pelletált táplálékkal (CRF-1; Charles River Japan, Inc., Tokió, Japán) etettük autoklávozott csapvízzel és libitummal. Az állat kezelését az AAALAC International által akkreditált CMIC Pharma Science Co., Ltd. Institutional Animal Care and Use Committee által jóváhagyott protokoll szerint végeztük.

Ez az egér a gyengülés klinikai tüneteit mutatta, mint például a vérszegénység, a durva légúti mozgás és a testtömeg csökkenése 49 és 51 hetes kor között. Az állatot 51 hetes korában elaltatták. A boncoláskor a lép elszíneződött és megnagyobbodott. A többi szervben nem észleltek nyilvánvaló kóros durva leleteket. A csecsemőmirigy és a nyirokcsomó atrófiás volt, hasonlóan a normál NOG egerekéhez.

Minden szerv- és szövetmintát rutinszerűen gyűjtöttünk, 10%-os semleges pufferolt formalinban fixáltuk, paraffinba ágyaztuk, és körülbelül 3 μm-es metszeteket vágtunk. Az ő patológiás vizsgálatához a metszeteket hematoxilinnel és eozinnal (HE) festettük. A lép és a máj metszeteit immunhisztokémiai úton megfestettük nyúl anti-humán mieloperoxidáz (MPO) poliklonális antitesttel (Dako Japán, Tokió, Japán), mint mieloid sejtmarkerrel, nyúl anti-humán CD3 monoklonális antitesttel (Nichirei Biosciences Inc., Tokió, Japán). ). A metszeteket az antitestekkel szobahőmérsékleten 1 órán át inkubáltuk, és az immundetektálást Histofine® MOUSESTAIN KIT (Nichirei Biosciences Inc.) segítségével 3,3'-diaminobenzidin/H2O2 kromogénnel végeztük. Immunfestett metszetek voltak akkorhematoxilinnal ellenfestve.

Szövettanilag a szegycsont és a combcsont csontvelője erősen sejtes volt, és szinte kizárólag daganatos sejtekkel volt tele (1A. ábra). A zsírszövet teljesen elmozdult. A csontvelőben időnként eritroid és megakariocita elemekből álló sejtes gócok voltak, amelyeket a csontvelő maradványainak tekintettek.normál hematopoiesis. A legtöbb neoplasztikus sejt blastos megjelenést mutatott, amelyet nagy, ovális vagy enyhén szabálytalan alakú magok jellemeznek, és egy vagy több kiemelkedő sejtmagot tartalmazó retikuláris kromatin. Kis számú sejt volt vese- vagy gyűrű alakú sejtmaggal, és néhány karéjos maggal rendelkező sejt is jelen volt (1B. ábra). A neoplasztikus sejtek citoplazmájában lévő granulátumok nem voltak nyilvánvalóak a HE-vel festett metszetekben. Számos mitotikus alakot találtak a csontvelőben, és alkalmanként apoptotikus testeket is megfigyeltek. A neoplasztikus sejtek jelentősen behatoltak a periosteumba és a környező vázizmokra. A neoplasztikus sejtek kiterjedt beszűrődést mutattak be más szervekbe és szövetekbe, és a lép és a máj kiemelkedően érintett volt. A lépben daganatos sejteket figyeltek meg a vörös pulpában (2. ábra). A daganatos sejtek kapszuláris beszűrődése nyilvánvaló volt. Néhány fejlődő eritroid sorozatot és megakariocitát figyeltek meg. Alkalmanként megakariocitákat figyeltek meg, amelyek egy vagy néhány mieloid sejtet tartalmaztak a citoplazmában, ami emperipolézisre utal. A májban a neoplasztikus sejtek diffúz módon beszivárogtak a Glisson-kapszulába és a máj sinusoidjaiba (3. ábra). Néhány véredényben vese- vagy gyűrű alakú maggal rendelkező neoplasztikus sejtek is nyilvánvalóak voltak. Néhány hepatocita a periportális területen, kiemelkedő neoplasztikus sejt-infiltrációval, degenerációt vagy nekrózist mutatott, míg a májlebeny normál szerkezete érintetlen maradt. Neoplasztikus sejt-infiltrációt más szervekben is találtak, beleértve a tüdő alveoláris falát és perivaszkuláris régióját, a vese interstadiumát, a mellékvesékben a szinuszoidot, valamint a gyomor traktusban (gyomor és bélrendszer) a nyálkahártyát és a submucosát. Immunhisztokémiai szempontból a neoplasztikus sejtek nagy populációja a lép vörös pulpájában (4. ábra) és a máj szinuszoidában pozitív volt MPO-ra. CD3 és Pax-5 pozitív sejteket nem észleltünk. A CD3 és Pax{11}} immunfestés eredménye hasonló volt a normál NOG egerek lépéhez, amelyek szövettanilag hipoplasztikusak voltak, és nem mutattak CD3 vagy Pax{13}} pozitív sejteket.

Az immunhisztokémiai vizsgálatok kimutatták, hogy a neoplasztikus sejtek a mieloid sejtvonalból származnak. Néhány érintett területen, különösen a lépben és a májban, kis számú sejtnek vese-, gyűrű- vagy lebenyes alakja volt, ami differenciálódó mieloid sorozatra utal. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a neoplasztikus sejtek éretlen granulocitákból származnak. A súlyos myelopoiesis esete nyilvánvaló lehet mindenféle fejlődő myeloid sorozat jelenlétéből, ellentétben a leukémiában az éretlen sejtek dominanciájával. Ezenkívül a progresszív vérszegénység a granulocitás leukémia gyakori klinikai tünete, és az eritroid és megakariocita sejtek számának növekedése gyenge1. Az érintett területen lebenyes sejtmaggal rendelkező granulociták kisebb populációja, nyilvánvaló gyulladás nélkül arra utal, hogy a jelen eset neoplasztikus és nem reaktív myelopoiesis.

Granulocitás leukémiában a csontvelőt éretlen és érett mieloid sejtek helyettesíthetik. Egy korábbi, más egértörzsekről szóló jelentésben ezek a neoplasztikus sejtek teljesen beszivárogtak a májba, lépbe, nyirokcsomókba stb.2, és ezek a lépben és májban található sejtek főként a vörös pulpában és a Glisson-kapszula környékén helyezkedtek el1. Így a leukémiás sejtek eloszlása ​​jelen esetben azonos volt az előző esettel. A sejtek morfológiája alapján az egerek granulocitás leukémiáját két típusra osztják: a fiatalkori típusra, amely a humán akut mielogén leukémiához hasonlítható, és az érett típusra a humán krónikus mielogén leukémiához1. A juvenilis esetben a csontvelőben, a lépben és a májban a daganatos sejteket a gyengén differenciált sejtek dominálták, míg a különböző érettségi fokot képviselő mieloid elemek láthatók, és néhány érett esetben alacsony volt a mieloblasztok aránya2, 9. Jelen esetben a leukémiás sejteket egy éretlen forma dominálta, nagy, ovális vagy kissé szabálytalan alakú magokkal. Ezen túlmenően, figyelembe véve azokat a klinikai eredményeket, amelyek szerint az általános egészségi állapot romlása, beleértve a progresszív vérszegénységet és a durva légzési mozgást, akut módon fejlődött ki; ezért a jelen esetről feltételezzük, hogy fiatalkori típusú.

1. ábra A combcsont csontvelőjének szövettani képei. V: A neoplasztikus sejtek diffúz módon szaporodnak, ezáltal helyettesítik a csontvelőt. B: A magok nagyok, oválisak vagy kissé szabálytalan alakúak. Néhány sejtnek vese (sárga nyílhegy), gyűrű (zöld nyílhegy) vagy lebeny (fehér nyílhegy) alakú magja van. A mitotikus alakot a fehér nyíl jelzi. HE foltok. Fekete sáv=50 μm (A), 10 μm (B).

Egy korábbi, NOG egerekről szóló publikációban a daganatos elváltozások általában nem voltak gyakoriak; azonban a thymus lymphomát 0,82%-ban jelentettek a 16-40 hetes korcsoportban7, 10. Legjobb tudomásunk szerint spontán granulocitás leukémiát korábban nem jelentettek NOG egerekben. Számos egértörzsben, beleértve a B6C3F1-et és a BALB/c-t, granulocitás leukémia ritkán fordult elő2, 11, és ezeknél az egereknél 12 hónapos vagy annál fiatalabbnál nem számoltak be. A jelen esetben 51 hetes korban alakult ki granulocitás leukémia, ami viszonylag fiatal kor volt. Ez a spontán daganatokról szóló új információ hasznos lehet ennek az egértörzsnek a további kutatásokban való megfelelő felhasználásához.