Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

YANG Jian-hua1' 2 , HU Jun-ping2, RENA • Kasimu2 ,〔DU Nian-sheng

(1. Affiliated Tumor Hospital, Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Kína; 2. College of Pharmacy, Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, Kína)

Absztrakt:Célkitűzés: A feniletanoid-glikozidok szerkezet-aktivitás összefüggéseinek vizsgálata Cistanche salsa növényekben az antioxidáns aktivitásra vonatkozóan. Módszerek: A DPPH • vizsgálati rendszerével hat növényből származó fenil-etanol-glikozid antioxidáns aktivitása.CistancheA salsa antioxidáns aktivitása és a fenil-etanoid glikozidok szerkezeti jellemzői közötti kapcsolat vizsgálata volt. Eredmények: A fenil-etanoid-glikozidok antioxidáns hatása dózisfüggő hatású változat volt. A hat komponens antioxidáns hatásának erősségének sorrendjét kimutatták2 ^Acetil-lakteozid > Akteozid Tubulozid BN Izoakteozid > Echinakozid > Cisztanozid A. Következtetés: A fenil-etanoid-glikozidok antioxidáns hatása összefügg a fenolos hidroxilcsoportok számával, a sztérikus gátlással, a középső glükopiranózon lévő 2-acetil-csoporttal, valamint a fenolos hidroxilcsoport elhelyezkedésével. Ezenkívül összefüggésben lehet a fenol-2-propenil j3-telítetlen ketonjával.

Kulcsszavak: Cistanche salsa ( CA Mey. ) G, Beck; feniletanoid glikozidok; Antioxidáns aktivitás; Struktúra-tevékenység; DPPH

Echinakozid

A hagyományos kínai orvoslásCistanchea Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck, szárított, húsos szár pikkelyekkel és levelekkel. Először a "Shen Nong's Materia Medica"-ban jelent meg. Az előfordulás gyakorisága a legmagasabb, a ginzeng után a második az öregedésgátló és öregedésgátló kínai orvoslás receptjei között, és a "sivatagi ginzeng" hírében áll. A fenil-etanol-glikozidok jellemző komponenseiCistanchenemzetségbeli növények. Jelenleg több mint 30 ilyen vegyületet izoláltak ebből a nemzetségből. A farmakológiai vizsgálatok alapvetően világossá tették, hogy ezek a vegyületek jelentik a fő anyagi alapotCistanchefarmakológiai tevékenység kifejtésére).

A dibenzopicryl gyök (DPPH •) egy viszonylag stabil szabad gyök, amelynek nitrogénjében szabad elektron található. A DPPH metanolos oldata lila színű, maximális abszorpciós csúcsa 517 nm-en. Ha van szabad gyökfogó, annak felszívódása fokozatosan megszűnik az egyelektronos párosítás miatt. Elszíneződésének mértéke mennyiségileg összefügg az általa befogadott elektronok számával. Ezért a DPPH abszorbanciájában a mintaoldattal való reakció után bekövetkezett változás kimutatására spektrofotometria használható a minta szabad gyökök eltávolítására és oxidációval szembeni ellenálló képességének tesztelésére (3). Jelenleg a padlizsánpürében található fenetil-alkohol glikozidok antioxidáns kutatásáról érkeztek beszámolók a szabad gyökök megkötésében, de nincs elemzés az antioxidáns tulajdonságai és a hatóanyagok közötti szerkezet-aktivitás összefüggésről. Ebben a cikkben a DPPH • szabadgyök-elemzési módszert először alkalmazzuk 6 fenetil-alkohol glikozid monomer antioxidáns aktivitásának tesztelésére Rouhuanrongban. Ezen vegyületek szerkezeti jellemzői és aktivitás-meghatározási eredményei alapján előzetesen következtethetünk a fenetil-alkohol-glikozid komponensekre. Az antioxidáns aktivitás szerkezet-aktivitás kapcsolata.

1 Készülékek és anyagok

Echinakozid, cisztanche glikozid A,verbascoside, izomedencés glikozid, 2,-acetil-verbaszkozid, tubus antocianin B referenciaanyag (Cistanche salsa-ból izolált és előállított, UV, IR, EI-ms/h -nmrJ3c-nmr adatok megfelelnek az irodalmi értéknek, a tartalom meghatározása HPLC területtel történik normalizálási módszerrel, a tisztaság nagyobb, mint 95 százalék, a szerkezeti képlet az 1. ábrán és az 1. táblázatban látható); A difenil-pikril-gyököt (DPPH •) a Sigmától vásároltuk; egyéb reagensek Valamennyi hazai tisztaságú.

SpectraMax M5 többfunkciós, teljes hullámhosszú biológiai aktivitásdetektor (Anthos Co. Austria), 96-lyuktenyésztő lemez (Costar), AB104-N elektronikus mérleg]Mettler-Toledo Instr. (Shang Hai) Ltd.]

1. ábra Hat fenetanol-glikozid szerkezeti képlete Cistanche-ban

1. táblázat Szubsztituensek 6 fenetanol-glikozid vegyületben Cistanche-ban

Megjegyzés: Az Ac jelentése acetil, Cf jelentése transz-koffeoil, Glc * pD-gluviolanóz és Rha jelentése al-ramnóz

2 Vizsgálati oldat elkészítése

DPPH • Készítsen etanollal 1,3 x 10'2mol/L koncentrációjú törzsoldatot, tárolja hűtőszekrényben, hígítsa fel a törzsoldatot etanollal 1-3 xl{{7}-ra. }^mol/L közvetlenül felhasználás előtt; 6 féle fenetil-alkohol-glikozid A referenciaanyagot és a C-vitamint 0.05-50,0 ptg/mL koncentrációjú oldattá formálják etanollal.

Acteozid

3 módszer és eredmények

3. 1 Módszer Először adjon 10 |xL mintát a mintaüregekbe, adjon 10|jlL etanolt a vaküregekhez, majd adjon hozzá 190 jiL DPPH-t • 1,3 xlO^mol/L koncentrációban, és helyezze be sötétben szobahőmérsékleten 30 percig. Használja a SpectraMax M5 többfunkciós, teljes hullámhosszú biológiai aktivitásdetektort az abszorbancia (A) mérésére 517 nm-en. Mindegyik abszorbanciát 3-szor párhuzamosan mértük, és az átlagértéket vettük. A kiürülési arány kiszámítása a következőképpen történik: kiürülési arány ( százalék )=(Egy vak-A minta)/A vakpróba x 100 százalék

3.2 Eredmények A meghatározás eredményeit a 2. táblázat mutatja be. A 2. táblázatból látható, hogy a hat fenetil-alkohol-glikozid különböző koncentrációban eltérő fokú DPPH-fogó hatást fejt ki • és szabad gyökfogó képességük jelentős dózisú. hatás kapcsolata a koncentrációval. Glikozid a DP PH-n • A scavenging hatás mértéke a koncentráció növekedésével nő.

2. táblázat Különböző koncentrációjú minták kiürülési sebessége DPPH-n • («=3)

Megjegyzés: A pozitív kontroll aszkorbinsav (C-vitamin), a minta száma 7

According to the IC5 of each sample. According to the value, the scavenging ability of 6 kinds of phenylethanoid glycosides on DPPH • is in order: 2'-acetyl verbascoside> verbascoside BN isophorbasin glycoside> echinacoside>cistanche glikozid A. A hat fenetil-alkohol glikozid hatása a pozitív kontroll C-vitaminnal azonos koncentrációban valamivel alacsonyabb, mint a C-vitaminé.

verbascoside

4. Megbeszélés

A tanulmány eredményei megerősítették, hogy a fenetil-alkohol-glikozidok általában antioxidáns hatással rendelkeznek. Kémiai szerkezetüket elemezve és összehasonlítva a verbaszkozid, az izo-verbazin-glikozid, a 2'-acetil-verbazinglikozid és a tubus-anorotozit B mind glikozidok, míg az echinakozid ill.cistancheA trigliceridek, nagy sztérikus gátlással. A megnövekedett sztérikus gátlási hatás az echinakozidot és a solanakozid A-t nehezen megközelíthetővé teszi a szabad gyökökhöz, így antioxidáns kapacitásuk viszonylag gyenge; az echinacoside és a striata szerkezeti különbsége: az echinacoside A csak Az előbbi R5 egy fenolos hidroxilcsoport, az utóbbi pedig egy metoxicsoport. Az o-fenolos hidroxilcsoport az antioxidáns aktivitás fontos funkciós csoportja. A difenol-hidroxilcsoport eltűnik, és az antioxidáns hatás jelentősen csökken. A vegyület szerkezetének elemzésével és a mérési eredmények egyesítésével arra a következtetésre juthatunk, hogy a padlizsánpépben lévő fenetil-glikozidok antioxidáns aktivitása összefüggésben áll a fenil-akriloilcsoporton lévő aglikonok és fenolos hidroxilcsoportok számával, a fenolsav kapcsolódási helyzetével. hidroxilcsoport, a vegyület sztérikus gátlásának nagysága és a centrális glükóz 2 A pozícióban lévő acetilcsoport szubsztitúciója között bizonyos összefüggés van, ami összefüggésben lehet az a,/3 telítetlen keton szerkezeti fragmenssel is. a sztirol-acilcsoport, de kevés kapcsolata van a fenil-akriloilcsoport szubsztitúciós helyzetével.

A DPPH • egy viszonylag stabil szabad gyök, amelynek középpontja N, erős abszorpcióval 517 nm-en. A vizsgált anyag hozzáadása után az abszorbancia változásának detektálásával 517 nm-en, miután a DPPH • gyökök reakcióba lépnek a mintaoldattal, igazolható a minta szabad gyökfogó és antioxidáns képessége. A kísérletek azt mutatják, hogy a DPPH • alkalmazása egy in vitro szabadgyök-károsodási modell létrehozásához nem igényel bonyolult berendezéseket és drága reagenseket. Egyszerű és könnyen használható, érzékeny, megbízható és reprodukálható. Jó módszer a szabad gyökfogók szűrésére.

A C-vitamin jelenleg rendkívül aktív és széles körben használt antioxidánsként ismert. Ezért ez a kísérlet a C-vitamint választotta pozitív kontrollként a fenetil-alkohol-glikozidok antioxidáns kapacitására a szabad gyökök megkötésében.

hivatkozások

[1] Lei Li, Song Zhihong, Tu Pengfei. A Cistanche kémiai összetevőire vonatkozó kutatás Kutatási előrehaladás[J].Chinese Herbal Medicine, 2003,34(5):473476.

[2] Song Zhihong, Lei Li, Tu Pengfei. A Cistanche növények farmakológiai tevékenységével kapcsolatos kutatások előrehaladása[J]. Chinese Herbal Medicine, 2003, 34(9): Mellékelve 16-18.

[3] Xu Shenhong, Hang Hu. Egy egyszerű módszer a szabad gyökfogók szűrésére [J]. Chinese Herbal Medicine, 2000, 31(2): 96-97.

[4] Fu Rong, Zhu Jiuwei. Chuanling, Rhodiola Rosea és Huang Zhi antioxidáns aktivitásának meghatározása difenil-kalóz gyök spektrofotometriával [J]. Journal of Dalian University of Light Industry, 2004, 23 (2) ): 114-117.