A T-sejtből származó interleukin-22 elősegíti a CD155 rákos sejtek általi expresszióját, hogy elnyomja az NK-sejtek működését és elősegítse a metasztázisokat
Oct 10, 2023
ÖSSZEFOGLALÁS
Bár a T-sejtek erős daganatellenes immunitást fejthetnek ki, a T-helper (Th) sejtek egy része, amely emlő- és tüdődaganatokban interleukin-22-t (IL-22) termel, összefügg a betegek rossz kimenetelével. Itt megvizsgáltuk azokat a mechanizmusokat, amelyek révén ezek a T-sejtek hozzájárulnak a betegségekhez. A tüdő- és emlőrák egérmodelljében az Il22 alkotmányos és T-sejt-specifikus deléciója csökkentette a metasztázisokat anélkül, hogy befolyásolta volna az elsődleges tumor növekedését. Az IL-22 receptor deléciója a rákos sejteken az IL-22-hiányos egereknél tapasztalthoz hasonló mértékben csökkenti a metasztázisokat. Az IL-22 a CD155 magas expresszióját indukálta, amely az NK-sejtek CD226 aktiváló receptorához kötődött. A túlzott aktiváció a CD226 mennyiségének csökkenéséhez és funkcionálisan károsodott NK-sejtekhez vezetett, ami növelte a metasztatikus terhelést. Az IL-22 jelátvitel szintén összefüggésbe hozható a CD155 expressziójával humán adatkészletekben, és a betegek rossz kimenetelével. Összességében eredményeink egy T-sejt-eredetű IL-22 által aktivált immunszuppresszív áramkört tárnak fel, amely elősegíti a tüdőmetasztázisokat.
A cistanche tubulosa-Antitumor előnyei
BEVEZETÉS
A neoplasztikus progresszió fő ismertetőjele és a rákkal összefüggő mortalitás elsődleges oka a rákos sejtek azon képessége, hogy másodlagos helyekre terjedjenek, és áttéteket képezzenek.1,2 A metasztázisok kialakulása megelőzhető immunfelügyelettel, melyben természetes gyilkos (NK), citotoxikus is van. , és T helper (Th) 1 sejtek.3,4 Ezzel szemben a szabályozó T-sejtek (Treg), a keringő monociták és a Th sejtből származó IL-17A immunszuppresszív mikrokörnyezetet alkotnak, lehetővé téve az immunszökést és elősegítve a metasztázisokat. 4–6 Ezért kritikus fontosságú a jelátviteli kaszkádok azonosítása, amelyek meghatározzák a tumorellenes immunsejtek működését.7,8 Az interleukin-22 (IL-22) a Th17 által termelt citokin. és emberben a Th1 alcsoport által is, amelyről ismert, hogy elősegíti a rákos sejtek növekedését, fokozza a migrációt, véd az apoptózistól, indukálja a hám-mezenchimális átmenetet, és fenntartja a rosszindulatú sejtek szárát.9–13 Elősegíti a korai karcinogenezist is, hat. prekurzor léziókon vagy éretlen rákos őssejteken.14–18 IL-22-termelő sejtek, főleg Th-sejtek, de gamma-delta (gd) T-sejtek, invariáns természetes gyilkos T-sejtek (iNKT) és veleszületett limfoid sejtek (ILC) is ), kimutatták az elsődleges rákos elváltozásokban.19–24 Az IL-22 biológiailag releváns szinten expresszálódik emlő-, vastagbél-, tüdő-, gyomor- és hepatocelluláris karcinómában.9,11,12,25,26 A legtöbb vizsgálatban , kifejeződése rossz prognózissal, magasabb betegségstádiummal és gyorsabb tumorprogresszióval jár.13,22–24,27–29 Az IL-22 kizárólag az IL-22 receptoron (IL{{40) keresztül hat }}R), amely két alegységből áll: IL-22RA1 és IL-10RB.30,31 A szekretált IL-22 hatását egy inhibitor, az IL{{47} modulálja. } kötő fehérje (IL-22BP, IL-22RA2), az IL-22RA1 homológja, amelyet főként mieloid sejtek termelnek.32,33 Egyensúlyi körülmények között az IL A -22 nélkülözhetetlen homeosztatikus citokin a hámrétegben, például a bélben, a tüdőben és a bőrben.34,35 Ezeken a helyeken az IL-22 elősegíti a védelmet, a regenerációt és a helyreállítást, hogy fenntartsa a gát integritását36, 37, hiánya pedig súlyosbítja a gyulladás által kiváltott karcinogenezist.13,38 Ezek az adatok együttesen rávilágítanak az IL-22 széles körű, kontextusfüggő funkcióira mind fiziológiás, mind kóros állapotokban. Receptorkötődésekor az IL-22 kiváltja a Janus Jak1 és Tyk2 kinázokat a STAT3, STAT1 vagy STAT5 foszforilálására, de az IL-22 más downstream útvonalakat is elindíthat, beleértve a mitogén által aktivált protein kinázok (MAPK) kaszkádját. vagy PI3K-AktmTOR jelátvitel, a celluláris kontextustól függően.13,36,39–44 A jelátviteli útvonalak sokfélesége az IL-22 jelátvitelhez kapcsolódó fiziológiai hatások sokaságában tükröződik, beleértve a fent leírtakat is, valamint védelmet nyújt a genotoxikus károsodás ellen, valamint antibakteriális peptidek, nyálka, pro- és gyulladásgátló citokinek, valamint kemokinek indukciója.36,38,39,45,46 A rákos sejtek indukálják az IL-termelést-22 emlő- és tüdőrákos betegek Th-sejtekből.12,47,48 Az NLRP3 gyulladás által vezérelt IL-1b felszabadulása IL-22-termelést indukál a daganatban lévő T-sejtekből, és mindkét IL-22+ Th-sejtek és egy NLRP3-IL-1b aláírás található az emlő- és tüdőrák tumormintáiban.48,49 Itt azt a mechanizmust szeretnénk felvázolni, amellyel az IL{102}} elősegíti mell- és tüdőrák progressziója. Megállapítottuk, hogy az IL{103}} elősegíti a metasztázis tüdőbe való terjedését, feltárva egy olyan áramkört, amelyben az IL-22 immunszuppressziót közvetített a metasztatikus résben azáltal, hogy elősegíti a CD155 expresszióját a rákos sejteken, ami a CD226 expressziójának csökkenése volt. az NK-sejtekre és csökkenti az interferon-g (IFNg) termelést. A klinikai adatok azt mutatják, hogy az ilyen utak aktiválása összefügg a betegek kimenetelével.
EREDMÉNYEK
A cistanche-kiegészítés előnyei – az immunitás növelése
Az IL-22 hatással van a disszeminált rákos sejtekre a tüdő- és mellrák szingén egérmodelljeiben
To understand the impact of the IL-22-IL-22R1 signaling axis on cancer progression, we analyzed syngeneic murine models of breast and lung carcinoma. As cancer patients mostly succumb to metastatic disease, we recapitulated this with phenotypically relevant models. We implanted either 4T1 breast cancer or Line-1 lung cancer cells subcutaneously (s.c.) in the right flank of wild-type mice (WT) and mice lacking IL-22 expression (Il22 / ) (Figure 1A). IL-22 did not impact the outgrowth of the primary tumors in either model (Figures 1B and 1C). Upon reaching pre-defined termination criteria (tumor >225 mm2 vagy fekélyesedés), a tüdő volt a fő metasztázis helye modellünkben, esetenként máshol is találtak áttéteket (nincs ábrázolva). Az Il22/egerek a Line-1 és a 4T1 sejtek tüdőbe történő metasztatikus szétterjedését csökkentették a vad típusú állatokhoz képest, függetlenül az elsődleges tumor méretétől, különböző áttétek kimutatási módszerekkel (1B, 1C és S1A ábra). Hasonló metasztatikus fenotípust figyeltünk meg az emlőrák ortotopikus modelljében is, ahol 4T1 sejteket ültettek be az emlő zsírpárnába (S2B ábra). A vak makroszkópos számlálás, a klonogén vizsgálatok vagy a szövettan valamennyi alkalmazott módszere nagy konzisztenciát mutatott az alacsonyabb metasztatikus terhelés kimutatásában az Il22/állatok esetében (1B, 1C és S1C ábra). Ez az IL-22 kulcsfontosságú szerepét jelenti a metasztatikus folyamatban. Ezután intravénás ráksejt injekcióval kényszerítettük a metasztázist, amely megkerüli a szövetleválás és az invázió szükségességét (1D ábra). Mindkét sejtvonal intravénás (iv) injekciója a szubkután modell fenotípusát tükrözte. Valóban megerősíthettük az alacsonyabb metasztatikus terhelést Il22/egerekben (1E. és 1F. ábra). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az IL-22 sajátos szerepet játszik a keringésben lévő disszeminált sejtekben. A törzsspecifikus hatások felismerésére egy E0771 emlőrákmodellt használtunk (1G. ábra).50,51 Az E0771- GFP sejtek intravénás injekciója csökkent áttétes terhelést mutatott ki az Il22 / állatokban, áramlási citometriával validálva (1H és ábra). S1D). Hasonlóképpen alacsonyabb metasztatikus terhelést figyeltünk meg az egerek májában, amikor E0771-GFP sejteket injektáltunk intrasplenicusan (S1E ábra). Az E0771-GFP-vel injektált egerek bal tüdejét optikailag megtisztítottuk az iDISCO protokollt követően a metasztázisok mennyiségi meghatározására fénylap-mikroszkóppal in situ (1I. ábra).52 Itt az Il22/egerek csökkent hajlamot mutattak áttétek kialakulására. , míg a megjelenített metasztázisok mérete nem különbözött, és nem volt specifikus lokalizációjuk (1J ábra). Összefoglalva, az IL-22 a szétszórt rákos sejtekre hatott, lehetővé téve a mell- és tüdőrák áttéteket a tüdőben.
A T-sejtek az IL{0}} releváns forrásai a tüdő metasztatikus résében
Korábban a CD4+ T-sejteket azonosítottuk az IL-22 fő forrásaként az elsődleges humán tüdődaganatokban és a bronchoalveoláris mosómintában.12,47,48 Az IL-22 forrásának körülhatárolása a modelljeink tüdejébe intravénásan E0771 sejteket injektáltunk Foxp3mRFP Il17aGFPIl22sgBFP riporter állatokba, és áramlási citometriával számszerűsítettük az IL-22+ sejteket (2A és S2A ábra). }} és kettős negatív (DN) (CD4 , CD8 ) ab T-sejtek (CD3+ gdTCR NK1.1 ), gd T-sejtek (CD3+ gdTCR+ NK1.1 ) és CD{{ 26}} NK1.{28}} és CD3 NK1.1+ sejteket (2B. és S2B. ábra). Megfigyeltük a CD4+, CD{8+ T-sejtek és az NK11+ sejtek arányának növekedését, amelyek IL-22-t termeltek a tumorral injektált állatok tüdejében ( 2C, S2C és S2D ábra). Itt a CD4+ és CD8+ T-sejtek alkották az IL-22-termelő sejtek többségét daganatos egerekben (2C. ábra). Ezenkívül megállapítottuk, hogy az ilyen CD4+ T-sejtek IL-22-t termelnek, IL-17A-t nem (2D. ábra). Ezeknek a sejteknek alacsony volt a CD44 expressziója, ami megerősíti memória fenotípusukat, összhangban korábbi megfigyeléseinkkel (S2E ábra).48 Ezen eredmények további modellek közötti feltárásához intracelluláris festést alkalmaztunk az IL-22 termelésének felmérésére a vonalban {56}} sc-modell, amely hasonló eredményeket hozott, kivéve a CD8+ T-sejt IL-22 termelőinek csökkent részét (S2F–S2I. ábra). Azt is megállapítottuk, hogy az IL-22+ sejtek nem expresszáltak együtt IFNg-t, ami megkülönbözteti az egér IL-22 termelőit a Th1 alhalmaztól (2G ábra). riporter állatokból származó tüdőszeleteket, hogy kikérdezzük azok térbeli eloszlását a tumorral injekciózott egerek tüdejében. Itt megállapíthattuk, hogy az ilyen IL-22 és IL-17A termelők szinte kizárólag a metasztatikus gócokban lokalizálódnak (2E. ábra). Amint azt az áramlási citometria kimutatta, nem találtunk összefüggést az IL-22 és az IL-17A riportersejtek termelése között a metasztatikus gócokban, ami arra utal, hogy IL-22 és IL-17 valóban két különböző sejtalcsoport termeli. Azt is megerősítettük, hogy az IL-22-termelő sejtek nagy része CD4+ T-sejt (2E. ábra). Mivel ezek az adatok a T-sejtek domináns szerepét jelezték az IL-22 termelésben, létrehoztunk egy Il22floxCd4cre egeret, amelyben az Il22 feltételes deléciója minden érett T-sejtben (2F. ábra). Amikor E0771-GFP sejtekkel fertőzték meg, az Il22floxCd4cre egerek csökkent hajlamot mutattak áttétek kialakulására a tüdőben, ami a globális Il22 / állatoknál megfigyelt fenotípusra emlékeztet (2F ábra). Azonban azt is megerősítettük, hogy a CD4-promotor irányítása alatt álló kre-rekombináz teljesen megszüntette az IL-22-termelést nemcsak a CD4+-ben, hanem a lépből izolált CD8+ T-sejtekben is. Il22floxCd4cre egerek esetében, és ezért ez a modell nem használható az IL-22 specifikus forrásának meghatározására (S2J ábra). Annak igazolására, hogy a Th-sejtek az IL-22 kulcsfontosságú forrása a modellünkben, vad típusú és Il22/CD4+ T-sejteket vittünk át Rag1/II22/ állatokba, amelyek ezt követően E{{ 104}} GFP sejtek iv (2G. ábra). Itt megerősíthettük, hogy az adoptív transzferált CD4+ T-sejtek IL-22 termelése elegendő a tüdőmetasztázisok elősegítéséhez modellünkben, de ez megszűnik, ha II22-ből / állatokból izolált CD4+ T-sejteket használunk. (2G. ábra). Fontos, hogy a metasztázisbeli különbségeket befolyásolta a T-sejt-beültetés az átvitel során (S2K ábra). Összefoglalva, a Th-sejteket az IL{112}} elégséges forrásaként azonosítottuk, amely áttétek kialakulását segíti elő daganatos egerek tüdejében, majd a megfelelő célsejt azonosítására törekedtünk.
1. ábra: Az IL-22-knockout csökkenti a tüdőmetasztázisok számát, de nem befolyásolja a tumornövekedést a tüdő- és emlőkarcinóma szingén egérmodelljeiben
2. ábra: A T-sejtek az IL-22 elsődleges forrásai a daganatos egerek tüdejében
Az IL-22RA1 tumorsejteken történő expressziója nélkülözhetetlen a metasztázisok kialakulásához
Az IL-22RA1 expressziója a nem hematopoietikus sejtekre korlátozódik, és korlátozó tényezőként szolgál az IL-22 jelátvitelben. A metasztatikus fenotípusra gyakorolt hatásának vizsgálatára stabil Il22ra1 deléciót generáltunk a 4T1 és Line{8}} sejtekben (3A ábra). Korábbi megállapításainkkal összhangban a 4T1 Il22ra1 sejtek tumornövekedése nagyrészt változatlan maradt a 4T1 kontrollsejtekhez képest (3B. ábra). Azonban az egerek, amelyekbe 4T1 Il22ra1 sejteket injektáltak sc vagy iv, kevesebb makroszkópos és klonogén áttétet észleltek a tüdőben, mint a kontroll 4T1 sejtekkel (3B. és 3C. ábra). Annak megerősítésére, hogy ez a hatás nem klónfüggő, létrehoztunk és elemeztünk három Line-1 Il22ra1 klónt, és teszteltük őket három kontrollklónnal szemben, amelyek hasonló eredményeket adtak (3D és 3E ábra). Ez megerősíti, hogy az IL-22RA1-kifejező rákos sejtek az IL-22 releváns célpontjai a tüdőmetasztázisok előidézésében. A módszer nem célzott hatásainak kizárása érdekében IL-22BP-t használtunk az IL-22 jelátvitel gátlására. Létrehoztunk 4T1 és Line-1 sejtvonalakat, amelyek konstitutívan szekretálták az IL-22BP-t (Il22ra2+ ) (S3A ábra). Szubkután injektálva a Line{44}} Il22ra2+ sejtek a beültetés helyén a kontrollhoz hasonlóan növekedtek, amint azt korábban az Il22ra1 modelleknél és az Il22 / egereknél láthattuk, bár a 4T1 Il22ra2+ sejtek növekedtek. lassabb (S3B ábra). Itt a 4T1 Il22ra2+ sejtekben nagymértékben csökkent a metasztázisok száma, amikor szubkután injektálták (S3B és S3C ábra). A nagyobb variabilitás ellenére a Line-1 Il22ra2+ sejtek is kevesebb áttétet képeztek sc vagy iv injektálva (S3D és S3E ábra). Így az IL-22 semlegesítés IL-22BP-n keresztül nagyrészt az Il22ra1 sejteknél és az Il22/egereknél megfigyelt fenotípust utánozta, megerősítve a citokin jelentőségét a metasztatikus folyamatban.
A cistanche-kiegészítés előnyei – az immunitás növelése
Az IL-22 szabályozza a tumorsejtek növekedését a metasztatikus beültetés korai szakaszában
To determine the role of IL-22 signaling during the dissemination process, we analyzed the kinetics of metastatic seeding in our models. For this, we injected 4T1-GFP cells i.v. and analyzed lungs at 12 and 48 h after injection (Figure S4A). We used confocal microscopy to quantify the numbers of GFP+ colonies (defined as cell clusters of >100 mm) és az egyes sejtek per mm2 tüdőszövet (S4B ábra). Az injektálás után 12 órával nem tudtunk különbséget észlelni, ami azt jelzi, hogy az IL-22 nem befolyásolja jelentős mértékben a vetést (S4C és S4D ábra). Azonban a 48-h időpontban a GFP+ sejtek és telepek száma csökkent az Il22/egerek tüdejében (S4C és S4D ábra). Ez arra utalt, hogy az IL{12}} szerepet játszik a tüdő korai metasztázisában. A proliferáció sebességének felmérése érdekében az egerekbe együtt injekcióztunk 5-etinil-20 -dezoxiuridint (EdU) 4 órával a vizsgálat előtt, 12, 24, 48 órában és 7 nappal a tumor injekciója után (S4E ábra). . A mikroszkópos számláláshoz hasonlóan nem észleltünk különbséget a GFP+ sejtek számában korábban, mint 48 órával az injekció beadása után (S4F–S4G ábrák). Ezzel szemben különbségeket tudtunk kimutatni az EdU beépülésében, ami az osztódó sejtek nagyobb hányadát jelzi csak az injekció utáni 7. napon (S4G ábra). Ezért úgy gondoljuk, hogy az IL-22 által érintett tüdődaganat-terhelésben már 48 órában megfigyelt különbségeket a proliferációtól független mechanizmus közvetíti.
3. ábra: Az IL-22RA1 expressziója a tumorsejteken nélkülözhetetlen a metasztázis kialakulásához
Az IL-22 szabályozza a CD155 expresszióját a tumorsejteken, és ezáltal elősegíti a metasztázisokat
Megállapításaink alapján, miszerint az IL-22 az IL-22ra1+ rákos sejtekre hat, és elősegíti az áttétek kialakulását, az IL-22-el kezelt 4T1 sejtek tömeges RNS-szekvenálását végeztük el a további körvonalazás érdekében. a mögöttes mechanizmus (GEO: GSE202314) (4A. ábra). 147 gént fedeztünk fel, amelyek eltérően szabályozottak. Ezek közül 133 gén expressziója nőtt, és 14 csökkent IL-22 kezelés hatására (4B és S5A ábra). Validáltuk a Pvr-t (poliovirus receptor, Pvr), mint az egyik legjelentősebben megnövelt célpontot a qPCR segítségével (S5B ábra). Ez azért figyelemre méltó, mert a CD155, a Pvr terméke különféle rákos megbetegedésekben túlzottan expresszálódik, és daganatot elősegítő tulajdonságokkal rendelkezik, beleértve a metasztázisokat is.54–56 Eredményeink megerősítése érdekében értékeltük a CD155 expresszióját IL-22-stimulált 4T1-ben, Line-1 és E0771 sejtek áramlási citometriával (4C. ábra). A CD155 expressziójának növekedését észleltük minden sejtvonalban 72 óra alatt (4D. és 4E. ábra), de ez a hatás hiányzott az IL-22RA1-et nem tartalmazó sejtekben (S5C. ábra). Ezt követően értékeltük az IL-22 hatását a CD155 expressziójára daganatos egerek tüdejéből származó E0771-GFP sejtekben (4F. ábra). Itt megerősíthettük, hogy az Il22/egerekbe beültetett sejtekben alacsonyabb volt a CD155 expressziója, ami korrelált az áramlási citometriával kimutatott E0771-GFP sejtek kisebb részével (4G és 4H ábra). A CD155 metasztázisban betöltött szerepének igazolására Pvr Line-1 és 4T1 sejtvonalakat hoztunk létre (4I., S5D és S5G ábra). Noha ez csekély hatással volt a szubkután növekedési képességükre (S5E és S5F ábra), megszüntette a tüdőben a metasztázisok képződésének képességét (4J és S5H ábra). Ezt a folyamatot megfordíthattuk konstitutív CD155 expresszióval Pvr sejtekben, függetlenül az IL-22-indukált szabályozástól (Pvr+ ).
4. ábra. Az IL-22 jelátvitel növeli a CD155 expresszióját a tumorsejtek felszínén, és rezisztenciát biztosít a metasztázis szabályozásával szemben
Ebben a helyzetben áttéteket indukálhatunk az Il22 / egerek tüdejében, kiemelve e két molekula közötti kapcsolatot és a metasztatikus folyamat közvetítőiként betöltött szerepüket (4K és S5I ábra).
A tumorsejteken lévő CD155 a CD226 NK-sejteken történő csökkent expressziójával és csökkent IFNg-termeléssel jár
A CD155 alapvető szerepet játszik a rákos sejtek proliferációjában és adhéziójában, többek között54–57. Nem észleltünk hiányosságokat a Line-1 Pvr sejtek proliferációjában in vitro (az adatokat nem mutatjuk be). Fontos, hogy a CD155 sejten kívüli pro-metasztatikus szerepet játszik azáltal, hogy az NK- és T-sejtek felszínén található CD96, CD226 vagy TIGIT immunmoduláló receptorokhoz kötődik.54–56,58,59 A CD155 kötőpartnereinek pontos meghatározásához elemeztük. daganatellenes válaszok 4T1-luciferáz+ sejteket (4T1-Luc) tartalmazó egerek tüdejében (5A. ábra). Egy in vivo képalkotó rendszer (IVIS) segítségével megerősítettük, hogy a vad típusú és az Il22/egerekben hasonló volt a tumorsejtek beoltása az injekció beadását követő 5. napon, és a tumorterhelés különbségei két hét alatt növekedtek (5B és 5C ábra). . Valójában az NK-sejtek IFNg-termelésének hibája, de nem más sejttípusok, a humorális effektormechanizmusok elvesztését mutatta (5D, 5E és S6A ábra), és korrelált a nagyobb tumorterheléssel (S6B ábra). Ez a hatás következetesen megtalálható volt a Line{30}} sc modellben (S6C–S6E ábrák). Chip-citometriával megvizsgálva, 4T1-tüdőáttétet hordozó egerekből származó 60 minta kimutatta a CD155 fokozott expresszióját a WT metasztatikus gócaiban, de az Il22/állatok esetében nem (5F és S6F ábra). Azt találtuk, hogy az NK-sejtek nagyobb mértékben infiltrálódnak az Il22 / WT állatok metasztatikus gócaiba, de nem, ami magasabb aktivációra utal, és megerősíti az NK-sejtektől, mint tumorellenes effektorsejtektől való függőséget (5F ábra). A CD226-ot, de nem a TIGIT-et vagy a CD96-ot, eltérően expresszálták az NK-sejtek és kisebb mértékben a CD8+ T-sejtek a vad típusú és Il22/állatok tüdejében (5G és S6G–S6H ábra). A CD226 az NK és CD8 T sejtek effektor funkcióinak aktiválásához nélkülözhetetlen társreceptor. Ezért arra vállalkoztunk, hogy modellünkben feltárjuk patofiziológiai relevanciáját.61–64
cistanche tubulosa – erősíti az immunrendszert
A CD226 blokkolása megszünteti az IL-22-hiányos állatok metasztatikus fenotípusát
A tumor mikrokörnyezetében jelenlévő túlzott CD155--közvetített jelátvitel indukálhatja a CD226 internalizációját és lebomlását az effektor sejtekben.61,63 A túlzott CD155 expresszió CD226-on és az azt követő daganatellenes válaszreakciók szerepének felvázolására 4T1 kontrollt és Pvr+ sejtek iv. Il22/ egerekben, és két csoport is kapott anti-CD226 blokkoló antitestet (480.1) (6A. ábra). Mind a Pvr+ sejtek, mind a CD226 blokád hasonlóképpen elősegítheti a tüdőmetasztázisokat Il22/egerekben, és ezek a hatások nem mutattak szinergiát (6B. ábra). A vad típusú állatokon végzett korábbi megfigyeléseinkhez hasonlóan ez is elegendő volt az NK-sejtek IFNg-termelésének gátlásához (6C. ábra). Végül Pvr+-injektált egerekben a CD226 expressziójának csökkenését észleltük NK-sejteken a kontrollsejtekhez képest. Ez korrelált ezen NK-sejtek csökkent IFNg-termelési kapacitásával (6D. ábra). Továbbá megvizsgáltuk az agonista TIGIT antitest (IG9) azon képességét, hogy gátolja az NK-sejt aktiválódást Il22/ állatokban, és a CD96 blokád (3.3) az NK-sejtek működésének gátlásának megakadályozására (6E. ábra). Sem a TIGIT agonista, sem a CD96 antagonista nem változtatta meg a metasztázisok számát, összehasonlítva az Il22-vel / állatokkal, amelyek kontrollt vagy Pvr+ 4T1 sejteket kaptak (6F. ábra). Aktiválva a TIGIT gátolhatja az IFNg-termelést a CD8+ T-ből, de nem az NK-sejtekből (6G. ábra). Így egy IL-22- CD155 tengely a CD226 csökkent expresszióját váltja ki az NK sejtekben, és inertté teszi őket a tumor mikrokörnyezetében.
A CD155 expresszió kiegészíti az IL-22 gén aláírását emlő- és tüdőrákos betegekben
Végül felmértük a CD155 klinikai jelentőségét az IL-22-IL-22RA1 tengely összefüggésében. A CD155 expressziója önmagában kedvezőtlen prognózissal jár számos rákos entitásban.54 Elemeztük a rákos genom atlasz (TCGA) tüdő adenokarcinóma (TCGA: LUAD, n=504) és a HER2- RNS-szekvenálási adatait. pozitív betegminták az invazív emlőkarcinóma (TCGA: BRCA, n=110) adatkészleteiből. A kulcsfontosságú IL{9}}kapcsolódó génekre összpontosítottunk: IL22RA1, IL22RA2, IL10RB és PVR. A betegcsoportok rétegezéséhez agglomeratív klaszterezést alkalmaztunk, amely egy nem felügyelt klaszterezési módszer, amely három fő klasztert eredményezett (7A és 7B ábra). Ez megkülönböztető génexpressziós mintákat tárt fel: 0 klaszter (IL22RA1hi, IL22RA2lo, IL10RBmed, PVRhi), 1. klaszter (IL22RA1lo, IL22RA2hi, IL10RBhi, PVRlo) és 2. klaszter (IL22RA1lo, IL22RA2lo, IL10RBlo, PVRmed) (7C. ábra). Ezek a klaszterek egyenletesen oszlottak el ebben a két kohorszban (7D. ábra). A 0. klaszterbe és a 2. klaszter LUAD-adatkészletébe tartozó betegek túlélése rosszabb volt, mint az 1. klaszterbe tartozó betegek (7E. ábra). Az 1. és 2. klaszter túlélése nem különbözött mindkét kohorszban (7E. ábra). Továbbá kiszámítottuk a korlátozott átlagos túlélési időket (RMST) a 0. és 1. klaszterre, hogy számszerűsítsük a várható túlélési idő különbségét az ötéves követésig, ami 361,18 napot eredményezett a LUAD esetében és 93,23 napot a BRCA esetében (7F ábra). A 0. és 1. klaszterben különbségek mutatkoztak a patológiás betegség stádiumainak gyakoriságában a LUAD-ban, de nem a BRCA kohorszban (7G. ábra). Fontos, hogy a klaszterek (IL22RA1hiPVRhi) és 1 (IL22RA1loPVRlo) közötti túlélési különbségek főként a betegség korai (I. és II.), de nem előrehaladott stádiumában (III. és IV.) diagnosztizált betegekből erednek (S7A ábra). Az egyes gének túlélésre gyakorolt hatásának felmérésére Cox arányos kockázati modelljét használtuk. Mind az IL22RA1 (kockázati arány [HR]=1.23), mind a PVR (HR=1.28) befolyásolja a túlélést, míg az IL22RA2 és IL10RB nem változtatta meg a kockázatot a LUAD kohorszban (S7B ábra). Sőt, csak a CD226 (p=0.06), de nem a TIGIT vagy a CD96 befolyásolta a túlélést, összhangban a preklinikai modellekben elért eredményeinkkel (S7B ábra). A CIBERSORTx dekonvolúciós algoritmust használtuk a LUAD kohorszban annak felmérésére, hogy klasztereink génexpressziós mintázata hatással van-e a betegek immunsejt-infiltrációjára.65 Érdekes módon az 1. klaszterben az aktivált NK-sejtek CIBERSORTx-egységei megnövekednek a klaszterekkel összehasonlítva. 0 és 2 a LUAD-betegeknél, míg a nyugalmi NK-sejtek vagy az aktivált CD{80}} memória T-sejtek között nem volt különbség (S7C ábra), hasonló tendenciával a BRCA kohorszban (S7D ábra). Ezek a klinikai csoportokból származó eredmények együttesen demonstrálják a T-sejt-eredetű IL{84}} és a CD155 közötti szabályozó kapcsolat jelentőségét.
5. ábra. A CD226 expressziója magasabb az NK-sejteken Il22–/– egerekben
VITA
Ebben a tanulmányban felfedeztünk egy olyan mechanizmust, amellyel a T-sejtek IL-t{0}} termelnek, hogy elősegítsék a tüdőmetasztázisokat a tüdő- és mellrák egérmodelljeiben. Mechanikusan a tüdő metasztatikus gócaiban található T-sejtek, elsősorban a CD4+, IL-22-ot termelnek, amely közvetlenül a rákos sejtekben expresszált receptorán keresztül jelez, elősegítve a metasztatikus CD155 molekula expresszióját.{{ 5}},58,59 A CD155 jól tanulmányozott pánrák expressziója és a rák progressziójában betöltött belső és külső szerepe ellenére54 a rosszindulatú sejtekben a CD155 szabályozásáért felelős útvonal továbbra is megfoghatatlan.66–68 Kimutattuk, hogy az IL{{ 15}} növelte a CD155 expresszióját tüdő- és emlőrák sejtvonalakban in vitro és in vivo, míg konstitutív expressziója metasztázisokat tett lehetővé Il22/egerekben, összehasonlítva a kontroll és a hiányos sejtekkel. A CD155 fokozott expressziója a tumortüdő mikrokörnyezetében a CD226 kostimuláló molekula csökkenéséhez vezetett az NK-sejteken, csökkentve a metasztázisokhoz való lokalizációjukat és az IFNg-termelést, ami korrelált a nagyobb tumorterheléssel. Korábbi vizsgálataink során IL-22-termelő T-sejtek felhalmozódását észleltük a nem kissejtes tüdőkarcinómás (NSCLC) betegek daganatmintáiban.12,48 Kimutattuk, hogy a rákos sejtek NLRP-t váltanak ki3- az IL-1b függő szekrécióját, amely főként Th-sejtekből indukálja az ilyen IL-22-termelést.18 Érdemes megjegyezni, hogy emberben a Th-sejtek citokinprofiljaiban mutatkozó különbségek miatt az IL{{ 31}} a Th1 sejtekben is indukálódik. Elképzelhető, hogy ez ronthatja a daganatellenes immunválaszt. Fontos, hogy az ilyen Th1-variánsok részben megmagyarázhatják a rák hiperprogresszióját az ellenőrzőpont blokádot követő T-sejt-aktiváció során.69 Korábbi megfigyeléseinkkel összhangban megerősítettük az IL-22-termelő CD4+ és CD{{38} felhalmozódását. } T-sejteket, de NK1.{40}} sejteket is a tumorral injektált állatok tüdejének metasztatikus résében. Fontos megjegyezni, hogy modelljeink között törzsspecifikus különbségeket figyeltünk meg az ilyen IL-22-termelő CD8+ T-sejtek felhalmozódásában. Mindazonáltal az IL-22 termelésének megszüntetése az összes érett T-sejtekben elegendő volt ahhoz, hogy összefoglaljuk az IL-22-hiányos állatoknál megfigyelt hatást.70 Továbbá a CD4+ T-sejtek adoptív átvitele a T-sejtekbe. A Rag / II22 / egerek elegendőnek bizonyultak a tüdőmetasztázisok indukálásához, rámutatva a Th-sejtek elsődleges szerepére az IL forrásaként-22. Ezzel szemben korábbi eredményeink azt sugallják, hogy a CD8+ T-sejtek daganatmintákban való felhalmozódása ellenére ezek hozzájárulása az IL-22 poolhoz csekély.48 Mindenesetre az ilyen CD{53 jellemzése }} Az IL-22-termelő T-sejtek nélkülözhetetlenek tumor-pro- vagy daganatellenes tulajdonságaik gondos értékeléséhez, amint új adatok jelennek meg erről az alpopulációról.71,72 Ezenkívül az NK- és NKT-sejtek elsődleges szerepe a tumorkontrollban felülmúlja a tumorellenes tulajdonságaikat. az IL-22 révén történő metasztázis kialakulásához való potenciális hozzájárulás, amelyet egy Rag / II22 / adoptív transzfer kísérletben fedeztek fel érett T-sejtektől mentes, de működőképes NK-sejtekkel rendelkező állatokkal.37 Ezt a hipotézist tovább támasztják a metasztázisban elért eredményeink. gócok, ahol az NK-sejteket nagyobb mennyiségben találták meg, mint a citotoxikus T-sejteket, kiemelve az NK-sejteket, mint a tumorkontroll alapvető szereplőit IL hiányában-22. Fontos megjegyezni, hogy a tüdőben lévő metasztatikus gócokban lévő IL-22 termelőkre összpontosítottunk, de nem vettük figyelembe eredetüket, klonalitásukat vagy a vérben vagy nyirokszervekben való eloszlásukat. Ezenkívül az IL-22 különféle forrásai kontextusfüggő módon elősegítik a tumor progresszióját e citokin pleiotróp hatása által. Ezen a vonalon a hasonló IL{66}}termelő sejtek különböző kompartmentekben (tüdő vs. lép vs. nyirokcsomó) eltérően befolyásolhatják a pro-tumorális fenotípusokat, vagy a kontextustól függően nincs funkciójuk, ami további vizsgálatot igényel. Rákkutatások ismételten beszámolnak arról, hogy az IL-22 befolyásolja az elsődleges daganatok kialakulását és növekedését, és végső soron a neoplasztikus progressziót.26,73–76 Ezt a felfogást főként a rákos sejtek migrációját, invázióját és őssejtjét elősegítő képessége indokolja. in vitro, és ezáltal elősegíti a metasztázisok képződését.76,77 Fontos, hogy az IL-22 ablációja enyhítheti az immunszuppresszív mikrokörnyezetet a tüdőrák Kras-mutáns modelljében.14 Jelen tanulmányunkban kimutattuk, hogy a megnövekedett metasztatikus terhelés az IL-22 közvetlen hatása a disszeminált IL-22RA1+ daganatsejtekre, ami a telepek fokozott növekedését eredményezte. Fontos, hogy adataink formálisan nem zárják ki a nem daganatos sejtekre gyakorolt hatást. Mint ilyen, az IL-22 hatását a tumorsejtek terjedésére az endogénen expresszált IL-22R belső hatása révén Giannou és munkatársai78 széleskörűen kiemelik.
6. ábra: A CD226 jelátvitel nélkülözhetetlen az NK-sejtek IFNg-termeléséhez
Kimutattuk, hogy a Pvr egyike azon géneknek, amelyek fokozott expressziót mutatnak a rákos sejteken IL-22 kezelés hatására. Ebben az összefüggésben a CD155-hiányos sejtek kevés áttétet képeztek, mind a vad típusú, mind az Il22/egerekben, és ami fontos, a CD155 újbóli bevezetése lehetővé tette a metasztatikus fenotípus helyreállítását. A CD155 rákos sejtekben betöltött belső szerepét jól tanulmányozták, és ismert, hogy befolyásolja az oltást, a tumorsejtek proliferációját és a migrációt.56,57 A Pvr-sejtek azonban nem mutattak gátolt proliferációt vagy migrációt a kezünkben, és a tumorsejtek beoltását. nem változott az Il22/egerekben. A kezdetben antigénprezentáló sejteken azonosított CD155 a tumor progressziójának külső promotereként szolgál, amely elnyomja az NK- és T-sejtek működését azáltal, hogy a felületükön a CD96-hoz és a TIGIT-hez kötődik, és indukálja a CD226 internalizációját és leszabályozását.56,61–64,79–85Due. immunszuppresszív funkciója miatt a rák- és gazdasejtekben lévő CD155 metasztatikus tulajdonságokat fejt ki, és az ellenőrzőpont gátlás blokkolásának célpontjaként javasolt.61,86 Az NK-sejtek kostimuláló jelet kapnak az antigénprezentáló sejtektől a CD226-on keresztül. 87 Azonban a CD226 túlzott stimulálása a tumor mikrokörnyezetében internalizálódáshoz és lebomláshoz vezet.63 Ezt általában ellensúlyozza a CD96 és a TIGIT, amelyek nagyobb affinitással kötik a CD155-öt.58 Érdekes módon a 4T1 sejtekről ismert, hogy CD226 downregulációt indukálnak a tumor-infiltrációban. 88 Itt kimutattuk, hogy az IL-22-hiány megőrizte a CD226 expresszióját az NK és CD8+ T-sejteken. Azonban csak az NK-sejteknek volt drasztikusan magasabb IFNg-termelési képessége, és fordítottan korreláltak a metasztatikus teherrel. Érdekes módon a TIGIT jelátvitel aktiválása vizsgálatunkban gátolta az IFNg termelést a CD8+ T sejtekből, de nem az NK-sejtekből, és nem volt elegendő a metasztatikus terhelés növeléséhez. Hasonlóképpen, a CD155 másik receptora, a CD96 sem nem volt differenciáltan szabályozott Il22/egerekben, sem gátlása nem akadályozta meg a metasztázisokat, ami azt jelzi, hogy a CD155 nem szuppresszálja az NK sejteket a CD96-on keresztül a mi modellünkben. Ez kiemeli a tumorellenes válaszok sejttípus-specifikus szabályozását a CD155 és különféle kötőpartnerei által.
A cistanche-kiegészítő előnyei – hogyan erősítsük az immunrendszert
Kattintson ide a Cistanche Enhance Immunity termékek megtekintéséhez
【Kérjen többet】 E-mail:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
A CD155 hatása a prognózisra és a tüdő-, emlő-, vastagbél- és más típusú rák patogenezisében betöltött szerepe megállapításra került.79–85 Hatalmas bizonyíték áll rendelkezésre az IL-22 és rokon gének prognosztikai relevanciájára vonatkozóan. különböző rákos entitásokban.10,21,27,75,89–91 Egyes tanulmányok azonban nem számolnak be az IL-22 expressziójának a túlélésre gyakorolt hatásáról.12 Bár ezek az eltérések a rák heterogenitásából adódhatnak. betegpopulációk, mintavételi és jelentési problémák miatt sok ilyen tanulmány egyetlen, az IL-22 jelátvitelhez kapcsolódó génre összpontosít. Itt agglomeratív klaszterezést alkalmaztunk, hogy felismerjük az IL22RA1, IL22RA2, IL10RB és PVR expressziós mintázatait LUAD és BRCA kohorszokban a TCGA-ban, és összekapcsoljuk őket a klinikai adatokkal. Itt e gének három expressziós mintáját azonosítottuk: 0. mintát (IL22RA1hi, IL22RA2lo, PVRhi), 1. mintát (IL22RA1lo, IL22RA2hi, PVRlo) és 2. mintát (IL22RA1lo, IL22RA2lo, PVRmed). Megállapítottuk, hogy az IL22RA1 magas expressziója egybeesett a PVR magas expressziójával, ami szintén rossz általános túlélési eredményeket eredményezett, különösen azoknál a betegeknél, akiknél korai (I és II), de nem előrehaladott (III és IV) patológiás stádiumban diagnosztizáltak. ennek a mechanizmusnak a színpad-specifikus szerepe. Ezzel szemben az IL22RA2, más néven IL-22BP magas expressziója összefüggést mutatott az alacsonyabb PVR-expresszióval és a jobb túléléssel.18,34 A harmadik mintázat teljesen alacsony expressziónak felelt meg, és immunológiailag hideg daganatokat jelentett.92 Ezen a vonalon. A CIBERSORTx dekonvolúció azt mutatta, hogy az 1. klaszter, amelyet magas IL22RA2 expresszió jellemez, az aktivált, de nem nyugvó NK-sejtek génaláírását tartalmazza a többi klaszterhez képest. Számos NSCLC klinikai vizsgálatban kimutatták, hogy a CD226 expressziója rétegzi a betegeket a kimenetel szerint.93 A CD226 pre- és poszttranszlációs szabályozásának kettős módja miatt azonban az expresszió nem mindig tükröződik az mRNS szekvenálási adatokban.94 Ennélfogva a tanulmányok, amelyek középpontjában állnak. a CD226 poszttranszlációs szabályozásáról, értékelje ki expresszióját a klinikai mintákban antitestfestéssel.63 Mindazonáltal a CD155-kötő partnerek és a túlélés közötti kapcsolatra vonatkozó TCGA-adatkészlet lekérdezése során csak a CD226 mutatott jobb prognózist (log (HR) {{57) }}.24, p=0.06), míg a TIGIT és a CD96 nem mutatott összefüggést a túléléssel. Fontos, hogy az IL-22BP kiválasztására tervezett tumorsejtek kevesebb áttétet képeztek, ami rávilágít az IL-22 útvonal célzott terápiás beavatkozási lehetőségeire. Ez ellensúlyozhatja a tumor CD155 túlzott expresszióját, mivel a közvetlen célzás továbbra is kihívást jelent a társreceptorok összetett hálózata miatt. Megjegyzendő továbbá, hogy az IL-22 semlegesítésének a metasztázisokra gyakorolt hosszú távú hatásai nem ismertek, de közvetlen hatással lehetnek a T-sejtek terápiás mérlegelésére, vagy megalapozhatják az IL-22 semlegesítését olyan antitestekkel jótékony biztonsági profil, mint például a fezakinumab (NCT01941537 vizsgálat) vagy a szerkezet alapú tervezéssel tervezett IL-22.39,95 Összefoglalva, azonosítottuk az IL-22-indukált CD155 túlzott expresszióját a tumorsejteken olyan mechanizmusként, amely előnyös a metasztatikus kinövés. Ez a prognózisban betöltött lényeges szerep hangsúlyozta az IL-22 potenciálját, mint terápiás célpontot a rákban. Eddig az IL-22 semlegesítését főként az autoimmun betegségek kezelésének stratégiájaként javasolták.31,49 Adataink az IL-22BP-ről mint az IL-22 semlegesítőjéről, amely fenomásolja a globális IL-22-hiány, amely alátámasztotta az IL-22-IL-22R1 tengely megcélzásának terápiás potenciálját, és ezt a preklinikai és klinikai vizsgálatok során tovább kell vizsgálni.
IRODALOM
1. Hanahan, D. és Weinberg, RA (2011). A rák jellemzői: a következő generáció. Cell 144, 646–674. https://doi.org/10.1016/j.cell.2011. 02.013.
2. Massaague´, J. és Obenauf, AC (2016). Metasztatikus kolonizáció keringő tumorsejtek által. Természet 529, 298–306. https://doi.org/10.1038/ nature17038.
3. Renner, P., Rovira, J., Klein, C., Schlitt, HJ, Geissler, EK és Kroemer, A. (2014). A KLRG1(+) természetes gyilkos sejtek immunfelügyelettel védenek a tüdő metasztatikus betegségei ellen. OncoImmunology 3, e28328. https://doi.org/10.4161/onci.28328.
4. Mohme, M., Riethdorf, S. és Pantel, K. (2017). Keringő és disszeminált daganatsejtek - az immunfelügyelet és a menekülés mechanizmusai. Nat. Rev. Clin. Oncol. 14, 155–167. https://doi.org/10.1038/nrclinonc. 2016.144.
5. Briukhovetska, D., Do¨ rr, J., Endres, S., Libby, P., Dinarello, CA, and Kobold, S. (2021). Interleukinek a rákban: a biológiától a terápiáig. Nat. Rev. Cancer 21, 481–499. https://doi.org/10.1038/s41568-021-00363-z.
6. Kitamura, T., Qian, BZ és Pollard, JW (2015). A metasztázisok immunsejtek elősegítése. Nat. Rev. Immunol. 15, 73–86. https://doi.org/10.1038/ nri3789.
7. Galon, J. és Bruni, D. (2020). Tumor immunológia és tumor evolúció: összefonódó történetek. Immunity 52, 55–81. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.12.018.
8. Page` s, F., Mlecnik, B., Marliot, F., Bindea, G., Ou, FS, Bifulco, C., Lugli, A., Zlobec, I., Rau, TT, Berger, MD , et al. (2018). A konszenzus Immunoscore nemzetközi validálása a vastagbélrák osztályozására: prognosztikai és pontossági vizsgálat. Lancet 391, 2128–2139. https://doi. org/10.1016/S0140-6736(18)30789-X.
9. Rui, J., Chunming, Z., Binbin, G., Na, S., Shengxi, W. és Wei, S. (2017). Az IL-22 a HOXB-AS5 szabályozásával elősegíti az emlőrák progresszióját. Oncotarget 8, 103601-103612. https://doi.org/10.18632/ oncotarget.22063.
10. Kryczek, I., Lin, Y., Nagarsheth, N., Peng, D., Zhao, L., Zhao, E., Vatan, L., Szeliga, W., Dou, Y., Owens, S ., et al. (2014). Az IL-22(+)CD4(+) T-sejtek a STAT3 transzkripciós faktor aktiválása és a DOT1L metiltranszferáz indukciója révén elősegítik a vastagbélrák kialakulását. Immunity 40, 772–784. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2014.03.010.
11. Jiang, R., Tan, Z., Deng, L., Chen, Y., Xia, Y., Gao, Y., Wang, X. és Sun, B. (2011). Az interleukin-22 a STAT3 aktiválásával elősegíti a humán hepatocelluláris karcinómát. Hepatology 54, 900–909. https://doi.org/10.1002/hep.24486.
12. Kobold, S., Vo¨ lk, S., Clauditz, T., K€ felső, NJ, Minner, S., Tufman, A., D€ uwell, P., Lindner, M., Koch, I ., Heidegger, S., et al. (2013). Az interleukin-22 gyakran expresszálódik kis- és nagysejtes tüdőrákban, és elősegíti a kemoterápiára rezisztens rákos sejtek növekedését. J. Thorac. Oncol. 8, 1032–1042. https://doi.org/10.1097/JTO.0b013e31829923c8.
13. Hernandez, P., Gronke, K. és Diefenbach, A. (2018). Egy csapás-22: interleukin-22 és rák. Eur. J. Immunol. 48, 15–31. https://doi.org/10. 1002/eji.201747183.
14. Khosravi, N., Caetano, MS, Cumpian, AM, Unver, N., De la Garza Ramos, C., Noble, O., Daliri, S., Hernandez, BJ, Gutierrez, BA, Evans, SE, et al. (2018). Az IL22 elősegíti a Kras-mutáns tüdőrák kialakulását azáltal, hogy protumor immunválaszt indukál és megvédi a szár tulajdonságait. Cancer Immunol. Res. 6, 788–797. https://doi.org/10.1158/ 2326-6066.CIR-17-0655. 15. Li, H., Mou, Q., Li, P., Yang, Z., Wang, Z., Niu, J., Liu, Y., Sun, Z., Lv, S., Zhang, B és Yin, C. (2019). A MiR-486-5p gátolja a mellráksejtek IL-22--indukálta epiteliális-mezenchimális átmenetét a Dock1 elnyomásával. J. Cancer 10, 4695–4706. https://doi.org/10.7150/jca.30596.
16. Kim, K., Kim, G., Kim, JY, Yun, HJ, Lim, SC és Choi, HS (2014). Az interleukin-22 elősegíti a hámsejtek átalakulását és az emlődaganat kialakulását a MAP3K8 aktiválásával. Karcinogenezis 35, 1352–1361. https://doi.org/10.1093/carcin/bgu044.
17. Katara, GK, Kulshrestha, A., Schneiderman, S., Riehl, V., Ibrahim, S., and Beaman, KD (2020). Az interleukin-22 elősegíti a rosszindulatú elváltozások kialakulását a spontán emlőrák egérmodelljében. Mol. Oncol. 14, 211–224. https://doi.org/10.1002/1878-0261.12598.
18. Huber, S., Gagliani, N., Zenewicz, LA, Huber, FJ, Bosurgi, L., Hu, B., Hedl, M., Zhang, W., O'Connor, W., Jr., Murphy, AJ és mtsai. (2012). Az IL-22BP-t a gyulladás szabályozza, és modulálja a daganatképződést a bélben. Természet 491, 259–263. https://doi.org/10.1038/ nature11535.
19. Perez, LG, Kempski, J., McGee, HM, Pelzcar, P., Agalioti, T., Giannou, A., Konczalla, L., Brockmann, L., Wahib, R., Xu, H., et al. (2020). A Th17 sejtekben a TGFbéta jelátvitel elősegíti az IL-22 termelését és a vastagbélgyulladással összefüggő vastagbélrákot. Nat. Commun. 11, 2608. https://doi.org/10.1038/ s41467-020-16363-w.
20. Meyer, A., Stark, M., Karstens, JH, Christiansen, H. és Bruns, F. (2012). A koponyaalap Langerhans sejt hisztiocitózisa: hatékony az alacsony dózisú sugárterápia? Case Rep. Oncol. Med. 2012, 789640. https:// doi.org/10.1155/2012/789640.
21. Zhuang, Y., Peng, LS, Zhao, YL, Shi, Y., Mao, XH, Guo, G., Chen, W., Liu, XF, Zhang, JY, Liu, T. és társai. (2012). A fokozott intratumorális IL-22-termelő CD4(+) T-sejtek és Th22-sejtek összefüggést mutatnak a gyomorrák progressziójával, és a betegek rossz túlélését jósolják. Cancer Immunol. Immunother. 61, 1965–1975. https://doi.org/10.1007/s{11}}.
22. Chen, X., Wang, Y., Wang, J., Wen, J., Jia, X., Wang, X. és Zhang, H. (2018). A T-helper 22 sejtek, az interleukin-22 és a mieloid eredetű szupresszor sejtek felhalmozódása elősegíti a gyomorrák progresszióját idős betegeknél. Oncol. Lett. 16, 253–261. https://doi.org/10.3892/ol.2018.{12}}.
23. Doulabi, H., Rastin, M., Shabahangh, H., Maddah, G., Abdollahi, A., Nosratabadi, R., Esmaeili, SA és Mahmoudi, M. (2018). IL-17/IL-22-t együtt termelő Th22, Th17 és CD4(+) sejtek elemzése a humán vastagbélrák különböző stádiumaiban. Biomed. Pharmacother. 103, 1101–1106. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2018.04.147.
24. Zeng, H., Liu, Z., Wang, Z., Zhou, Q., Qi, Y., Chen, Y., Chen, L., Zhang, P., Wang, J., Chang, Y ., et al. (2020). Az intratumorális IL22-termelő sejtek meghatározzák az immunevazív altípust az izom-invazív hólyagrák (2017). Az IL-22BP védő funkciója ischaemia-reperfúzióban és acetaminofen által kiváltott májkárosodásban. J. Immunol. 199, 4078–4090. https://doi. org/10.4049/jimmunol.1700587.
25. Jiang, R., Wang, H., Deng, L., Hou, J., Shi, R., Yao, M., Gao, Y., Yao, A., Wang, X., Yu, L és Sun, B. (2013). Az IL-22 a STAT3 aktiválása révén kapcsolódik az emberi vastagbélrák kialakulásához. BMC Cancer 13, 59. https://doi.org/10.1186/1471-2407-13-59.
26. Fukui, H., Zhang, X., Sun, C., Hara, K., Kikuchi, S., Yamasaki, T., Kondo, T., Tomita, T., Oshima, T., Watari, J ., et al. (2014). A rákkal kapcsolatos fibroblasztok által termelt IL-22 elősegíti a gyomorráksejtek invázióját a STAT3 és az ERK jelátvitel révén. Br. J. Cancer 111, 763–771. https://doi.org/ 10.1038/bjc.2014.336.
27. Liu, T., Peng, L., Yu, P., Zhao, Y., Shi, Y., Mao, X., Chen, W., Cheng, P., Wang, T., Chen, N ., et al. (2012). A megnövekedett keringő Th22 és Th17 sejtek a daganat progressziójával és a betegek túlélésével járnak humán gyomorrákban. J. Clin. Immunol. 32, 1332–1339. https://doi.org/10.1007/ s10875-012-9718-8.
28. Niccolai, E., Taddei, A., Ricci, F., Rolla, S., D'Elios, MM, Benagiano, M., Bechi, P., Bencini, L., Ringgressi, MN, Pini, A. ., et al. (2016). Az intratumorális IFN-gamma-termelő Th22 sejtek korrelálnak a TNM stádiummal és a hasnyálmirigyrák legrosszabb kimenetelével. Clin. Sci. 130, 247–258. https://doi.org/10.1042/CS20150437.
29. Xu, X., Tang, Y., Guo, S., Zhang, Y., Tian, Y., Ni, B. és Wang, H. (2014). A megnövekedett intratumorális interleukin 22 szint és az interleukin 22-CD-t4+ termelő T-sejtek gyakorisága korrelál a hasnyálmirigyrák progressziójával. Pancreas 43, 470–477. https://doi.org/10.1097/MPA.{10}}.
30. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP és Pestka, S. (2001). A funkcionális interleukin-22 (IL-22) receptor komplex azonosítása: az IL-10R2 lánc (IL-10Rbeta ) az IL{{7} közös lánca }} és IL-22 (IL- 10-kapcsolódó T-sejt-eredetű indukálható faktor, IL-TIF) receptor komplexek. J. Biol. Chem. 276, 2725–2732. https://doi.org/10.1074/jbc.M0078 37200.
31. Ouyang, W. és O'Garra, A. (2019). IL-10 Családi citokinek IL-10 és IL- 22: az alaptudománytól a klinikai fordításig. Immunity 50, 871–891. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2019.03.020.
32. Kempski, J., Giannou, AD, Riecken, K., Zhao, L., Steglich, B., L€ ucke, J., Garcia-Perez, L., Karstens, KF, Wo¨ stemeier, A. , Nawrocki, M., et al. (2020). Az IL22BP közvetíti a limfotoxin daganatellenes hatását a vastag- és végbéldaganatok ellen egerekben és emberekben. Gasztroenterológia 159, 1417– 1430.e3. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2020.06.033.
33. Kotenko, SV, Izotova, LS, Mirochnitchenko, OV, Esterova, E., Dickensheets, H., Donnelly, RP és Pestka, S. (2001). Egy új oldható receptor azonosítása, klónozása és jellemzése, amely megköti az IL-22-et és semlegesíti annak aktivitását. J. Immunol. 166, 7096–7103. https://doi. org/10.4049/jimmunol.166.12.7096.
34. Dudakov, JA, Hanash, AM és van den Brink, MRM (2015). Interleukin-22: immunbiológia és patológia. Annu. Rev. Immunol. 33, 747–785. https://doi.org/10.1146/annurev-immunol-032414-112123.
35. Wolk, K., Kunz, S., Witte, E., Friedrich, M., Asadullah, K. és Sabat, R. (2004). Az IL-22 növeli a szövetek veleszületett immunitását. Immunity 21, 241–254. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2004.07.007.
36. Sabat, R., Ouyang, W. és Wolk, K. (2014). Az IL-22-IL-22R1 rendszer terápiás lehetőségei. Nat. Rev. Drug Discov. 13, 21–38. https://doi. org/10.1038/nrd4176.
37. Zenewicz, LA, Yancopoulos, GD, Valenzuela, DM, Murphy, AJ, Stevens, S. és Flavell, RA (2008). A veleszületett és adaptív interleukin-22 megvédi az egereket a gyulladásos bélbetegségtől. Immunity 29, 947–957. https://doi.org/10.1016/j.immuni.2008.11.003.
38. Gronke, K., Herna´ndez, PP, Zimmermann, J., Klose, CSN, Kofoed Branzk, M., Guendel, F., Witkowski, M., Tizian, C., Amann, L., Schumacher, F. és mtsai. (2019). Az interleukin-22 megvédi a bélrendszeri őssejteket a genotoxikus stressztől. Természet 566, 249–253. https://doi.org/10.1038/ s41586-019-0899-7.
39. Saxton, RA, Henneberg, LT, Calafiore, M., Su, L., Jude, KM, Hanash, AM és Garcia, KC (2021). Az interleukin-22 szövetvédő funkciói szétválaszthatók a gyulladást elősegítő hatásoktól a szerkezet alapú tervezés révén. Immunity 54, 660–672.e9. https://doi.org/10. 1016/j.immuni.2021.03.008.
40. Dumoutier, L., Louahed, J. és Renauld, JC (2000). Az IL-10-rokon T-sejt-eredetű indukálható faktor (IL-TIF) klónozása és jellemzése, egy új citokin, amely szerkezetileg az IL-10-hoz kapcsolódik, és IL-9-val indukálható. J. Immunol. 164, 1814–1819. https://doi.org/10.4049/jimmunol.164. 4.1814.
41. Lejeune, D., Dumoutier, L., Constantinescu, S., Kruijer, W., Schuringa, JJ és Renauld, JC (2002). Az interleukin-22 (IL-22) aktiválja a JAK/STAT, ERK, JNK és p38 MAP kináz útvonalakat patkány hepatóma sejtvonalban. Az IL-vel megosztott és attól eltérő útvonalak-10. J. Biol. Chem. 277, 33676–33682. https://doi.org/10.1074/jbc.M204204200.
42. Nagalakshmi, ML, Rascle, A., Zurawski, S., Menon, S., és de Waal Malefyt, R. (2004). Az interleukin-22 aktiválja a STAT3-at, és IL-10-t indukál a vastagbél epiteliális sejtjeivel. Int. Immunopharmacol. 4, 679–691. https://doi. org/10.1016/j.intimp.2004.01.008.
43. Mitra, A., Raychaudhuri, SK és Raychaudhuri, SP (2012). Az IL-22-indukált sejtproliferációt a PI3K/Akt/mTOR jelátviteli kaszkád szabályozza. Citokin 60, 38-42. https://doi.org/10.1016/j.cyto.2012.06.316.
44. Bachmann, M., Ulziibat, S., H€ ardle, L., Pfeilschifter, J., and M€ uhl, H. (2013). Az IFNalpha az IL-22-t citokinné alakítja, amely hatékonyan aktiválja a STAT1-et és annak downstream célpontjait. Biochem. Pharmacol. 85, 396–403. https://doi.org/10.1016/j.bcp.2012.11.004.
45. Zheng, Y., Valdez, PA, Danilenko, DM, Hu, Y., Sa, SM, Gong, Q., Abbas, AR, Modrusan, Z., Ghilardi, N., de Sauvage, FJ és Ouyang , W. (2008). Az interleukin-22 közvetíti a gazdaszervezet korai védekezését a bakteriális kórokozók megtapadása és eltávolítása ellen. Nat. Med. 14, 282–289. https://doi. org/10.1038/nm1720.
46. Andoh, A., Zhang, Z., Inatomi, O., Fujino, S., Deguchi, Y., Araki, Y., Tsujikawa, T., Kitoh, K., Kim-Mitsuyama, S., Takayanagi , A. és mtsai. (2005). Az interleukin-22, az IL-10 alcsalád tagja, gyulladásos válaszokat indukál a vastagbél subepiteliális myofibroblasztjaiban. Gasztroenterológia 129, 969–984. https://doi.org/10.1053/j.gastro.2005.06.071.
47. Tufman, A., Huber, RM, Vo¨ lk, S., Aigner, F., Edelmann, M., Gamarra, F., Kiefl, R., Kahnert, K., Tian, F., Boulesteix, AL és mtsai. (2016). Az interleukin-22 szintje emelkedett a tüdőrákban és más tüdőbetegségben szenvedő betegek öblítésében. BMC Cancer 16, 409. https://doi.org/10.1186/s12885-016- 2471-2.
48. Voigt, C., May, P., Gottschlich, A., Markota, A., Wenk, D., Gerlach, I., Voigt, S., Stathopoulos, GT, Arendt, KAM, Heise, C., et al. (2017). A rákos sejtek interleukin-22 termelést indukálnak a memória CD4(+) T-sejtekből az interleukin-1 segítségével, hogy elősegítsék a daganat növekedését. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 114, 12994–12999. https://doi.org/10.1073/pnas.{11}}.
49. Markota, A., Endres, S., and Kobold, S. (2018). Az interleukin-22 megcélzása a rákterápiában. Zümmögés. Vakcina. Immunother. 14, 2012–2015. https:// doi.org/10.1080/21645515.2018.1461300.
50. Ewens, A., Mihich, E. és Ehrke, MJ (2005). Távoli metasztázis szubkután növesztett E0771 medulláris emlő adenokarcinómából. Anticancer Res. 25, 3905–3915.
51. Sugiura, K. és Stock, CC (1952). Tanulmányok egy tumor spektrumban. I. A metil-bisz(2-klór-etil)-amin és a 3-bisz(2-klór-etil)-amino-metil-4-metoxi-metil--5-hidroxi{{7} hatásának összehasonlítása }metilpiridin különböző egér- és patkánydaganatok növekedésére. Rák 5, 382–402. https://doi.org/10.1002/1097-0142(195203)5:2<382::aidcncr2820050229>3.0.co;2-3.
52. Renier, N., Wu, Z., Simon, DJ, Yang, J., Ariel, P. és Tessier-Lavigne, M. (2014). iDISCO: egyszerű, gyors módszer nagyméretű szövetminták immunjelölésére térfogati képalkotáshoz. Cell 159, 896–910. https://doi.org/10. 1016/j.cell.2014.10.010.
53. Kleinschmidt, D., Giannou, AD, McGee, HM, Kempski, J., Steglich, B., Huber, FJ, Ernst, TM, Shiri, AM, Wegscheid, C., Tasika, E. et al.
54. O'Donnell, JS, Madore, J., Li, XY és Smyth, MJ (2020). A CD1 tumoros belső és külső immunfunkciói
55. Semin. Cancer Biol. 65, 189–196. https://doi.org/10.1016/j.semcancer.2019.11.013. 55. Molfetta, R., Zitti, B., Lecce, M., Milito, ND, Stabile, H., Fionda, C., Cippitelli, M., Gismondi, A., Santoni, A. és Paolini, R (2020). CD155: többfunkciós molekula a tumor progressziójában. Int. J. Mol. Sci. 21, 922. https://doi.org/10.3390/ijms21030922.
56. Gao, J., Zheng, Q., Xin, N., Wang, W. és Zhao, C. (2017). CD155, egy onkoimmunológiai molekula humán daganatokban. Cancer Sci. 108, 1934–1938. https://doi.org/10.1111/cas.13324.
57. Morimoto, K., Satoh-Yamaguchi, K., Hamaguchi, A., Inoue, Y., Takeuchi, M., Okada, M., Ikeda, W., Takai, Y. és Imai, T. ( 2008). A rákos sejtek és a vérlemezkék Necl-5/poliovirus receptor által közvetített kölcsönhatása fokozza a rákos sejtek áttétet a tüdőbe. Oncogene 27, 264–273. https://doi.org/10.1038/sj.onc.1210645.
58. Chan, CJ, Martinet, L., Gilfillan, S., Souza-Fonseca-Guimaraes, F., Chow, MT, Town, L., Ritchie, DS, Colonna, M., Andrews, DM és Smyth, MJ (2014). A CD96 és CD226 receptorok ellentétesek egymással a természetes ölősejtek működésének szabályozásában. Nat. Immunol. 15, 431–438. https://doi.org/10.1038/ni.2850.
59. Fuchs, A., Cella, M., Giurisato, E., Shaw, AS és Colonna, M. (2004). Élvonalbeli él: a CD96 (tapintható) elősegíti az NK-sejt-célsejtek adhézióját azáltal, hogy kölcsönhatásba lép a poliovírus receptorral (CD155). J. Immunol. 172, 3994–3998. https://doi.org/10.4049/jimmunol.172.7.3994.
60. Jarosch, S., Ko¨hlen, J., Wagner, S., D'Ippolito, E. és Busch, DH (2022). ChipCytometry fehérje és mRNS markerek multiplex kimutatására humán FFPE szövetmintákon. STAR Protoc. 3, 101374. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101374.
61. Chauvin, JM, Ka, M., Pagliano, O., Menna, C., Ding, Q., DeBlasio, R., Sanders, C., Hou, J., Li, XY, Ferrone, S., et al. (2020). Az IL15-stimuláció TIGIT blokáddal visszafordítja a CD155-közvetített NK-sejt diszfunkciót melanomában. Clin. Cancer Res. 26, 5520–5533. https://doi.org/10.1158/ 1078-0432.CCR-20-0575.
62. Weulersse, M., Asrir, A., Pichler, AC, Lemaitre, L., Braun, M., Carrie', N., Joubert, MV, Le Moine, M., Do Souto, L., Gaud, G. és mtsai. (2020). A CD226 koaktiváló receptor eomesdependent elvesztése korlátozza a CD8(+) T-sejtek daganatellenes funkcióit és korlátozza a rák immunterápia hatékonyságát. Immunity 53, 824–839.e10. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.06.
63. Braun, M., Aguilera, AR, Sundarrajan, A., Corvino, D., Stannard, K., Krumeich, S., Das, I., Lima, LG, Meza Guzman, LG, Li, K., et al. (2020). A tumorsejteken lévő CD155 immunterápiával szembeni rezisztenciát vált ki azáltal, hogy indukálja a CD8(+) T-sejtekben az aktiváló CD226 receptor lebomlását. Immunity 53, 805–823.e15. https://doi.org/10.1016/j.immuni. 2020.09.010.
64. Lepletier, A., Madore, J., O'Donnell, JS, Johnston, RL, Li, XY, McDonald, E., Ahern, E., Kuchel, A., Eastgate, M., Pearson, SA, et al. (2020). A tumor CD155 expressziója összefügg az antiPD1 immunterápiával szembeni rezisztenciával metasztatikus melanomában. Clin. Cancer Res. 26, 3671–3681. https://doi.org/10.1158/1078-0432.CCR-19-3925.
65. Newman, AM, Steen, CB, Liu, CL, Gentles, AJ, Chaudhuri, AA, Scherer, F., Khodadoust, MS, Esfahani, MS, Luca, BA, Steiner, D. és társai. (2019). Sejttípus abundancia és expresszió meghatározása ömlesztett szövetekből digitális citometriával. Nat. Biotechnol. 37, 773–782. https://doi.org/10.1038/s41587-019-0114-2.
66. Soriani, A., Zingoni, A., Cerboni, C., Iannitto, ML, Ricciardi, MR, Di Gialleonardo, V., Cippitelli, M., Fionda, C., Petrucci, MT, Guarini, A., et al. (2009). A DNSM-1 és NKG2D ligandumok ATM-ATR-függő felszabályozása myeloma multiplex sejteken terápiás szerek által fokozott NK-sejtek érzékenységet eredményez, és öregedő fenotípushoz kapcsolódik. Blood 113, 3503–3511. https://doi.org/10.1182/blood{13}}.