A petrezselyem-polifenolok potenciálja és antioxidáns képessége a depresszió és a szorongás kezelésében: In vivo szubakut vizsgálat

További információért. kapcsolatba lépnitina.xiang@wecistanche.com

Absztrakt: A depresszió és a szorongás súlyos mentális egészségügyi problémák a világ minden részén. Ezek a betegségek számos kockázati tényezővel, köztük az oxidatív stresszel járnak. A kémiai természetű pszichotróp gyógyszerek számos mellékhatást mutattak, amelyek fokozták e betegségek hatását. Ezzel a helyzettel szemben a természetes termékek ígéretes alternatívának tűnnek. A tanulmány célja a Petroselinum sativum szorongásoldó és antidepresszáns hatásának értékelése volt.polifenolokin vivo, valamint korreláltantioxidáns tulajdonságai in vitro.Anxiolitikusa kivonat (50 és 100 mg/kg) aktivitását nyílt terepen és világos-sötét kamrás teszttel, míg az antidepresszáns aktivitást kényszerúszás teszttel értékeltük. A kivonat antioxidáns hatását a 2,2-difenil-1-pikrilhidrazil(DPPH) szabadgyök teszttel és a FRAP (vasredukáló képesség) teszttel értékeltük. A fenolos kivonat nagyon erős szorongásoldó és antidepresszáns hatást mutatott, különösen 100 mg/kg dózisban, csökkentve az egerek depresszív viselkedését (csökkent mozdulatlansági idő), valamint a szorongásoldó viselkedést (a középpontban és a megvilágított területeken való felfedezésre való hajlam) )még a paroxetinnél és a bromazepamnál (klasszikus gyógyszerek) is jobbak, ezekkel az eredményekkel együtt a kivonat fontos antioxidáns kapacitást is mutatott. Ezek az előzetes eredmények arra utalnak, hogy a Petroselinum satioum szorongásoldó és antidepresszáns potenciállal rendelkezik a depresszió és a szorongás kezelésére szolgáló kiegészítő vagy független fitomedicinaként.

Kulcsszavak: Petroselinum sativum; polifenol; szorongásoldó; antidepresszáns-szerű; antioxidáns; gyógyszertan; gyógynövény; természetes termékek

1. Bemutatkozás

A depressziót és a szorongásos zavarokat régóta mentális egészségügyi problémáknak tekintik, és súlyos terhet jelentenek minden olyan társadalom számára, ahol a stressz mindenütt jelen van. Az Egészségügyi Világszervezet (WHO) előrejelzése szerint 2030-ra a depresszió, mint potenciálisan halálos betegség, a fogyatékosság második vezető oka lesz világszerte [1]. A WHO legfrissebb becslései szerint világszerte több mint 300 millió ember szenved depressziótól, ebből több mint 260 milliónak szorongásos rendellenességei is vannak [2].

A Mentális Zavarok Diagnosztikai és Statisztikai Kézikönyve (DSM-V) a major depressziós rendellenességet nem csupán alkalmi szomorúságként vagy depressziós rohamként határozta meg, hanem inkább depressziós hangulatként, érdeklődés vagy öröm elvesztéseként, legalább két egymást követő héten keresztül, amelynek epizódjai a következők: gyakran visszatérő [3]. A WHO úgy is meghatározza a depressziót, mint "különféle pszichológiai és biológiai tüneteket, mint például az általános szomorúság érzése, az élvezet és az érdeklődés elvesztése, a bűntudat, az alvászavarok (álmatlanság vagy álmosság) és az étvágy, a fáradtság érzése (pszichomotoros retardáció). ), és a koncentráció hiánya".A legsúlyosabb esetekben a depresszió akár öngyilkossághoz is vezethet [4].

A WHO meghatározása szerint a szorongás egy „meghatározatlan közvetlen veszély érzése, amelyet rossz közérzet, izgatottság, tehetetlenség vagy akár megsemmisülés kísér”. Leírható úgy is, mint a potenciális és bizonytalan veszély okozta előrelátó félelem állapota, bár oka nem feltétlenül tudatos, szemben a valós veszéllyel szemben fellépő félelemmel. Ezt a két érzelmet azonban hasonló fiziológiai (emelkedett vérnyomás, izzadás, tachycardia stb.) és viselkedési (fokozott éberség és elkerülés) válaszok jellemzik [5].

A depressziót és a szorongást általában pszichotróp gyógyszerekkel kezelik, beleértve az antidepresszánsokat ésanxiolitikumok(nyugtatók), gyakran kémiai jellegűek, mint például a paroxetin és a benzodiazepinek. Ezeknek a gyógyszereknek a használata azonban bizonyos korlátokat mutat, és nemkívánatos mellékhatásokat okozhatnak. A bromazepamot szorongás kezelésére írják fel. Fogyasztása azonban számos negatív mellékhatással jár, beleértve az álmosságot, a szedációt és a memóriavesztést [6]. Az alvási nehézségek, az étvágytalanság, az álmosság és a szexuális diszfunkció szintén tipikus mellékhatásai a paroxetinnek, a szerotonin újrafelvétel-gátlók (SSRI) családjába tartozó antidepresszánsnak, amelyet súlyos depressziós rendellenességek kezelésére használnak [7]. Ennek a korlátozott hatékonyságnak köszönhetően nagyra értékelik az új, hatékonyabb és nem toxikus terápiás módszerek feltárását.

A gyógynövények megfelelő forrást jelenthetnek az új, biztonságos és hatékony gyógymódok számára, különösen mivel soknak ismert, hogy kevesebb mellékhatást mutatnak [8]. Több gyógynövényt is teszteltek a fenti rendellenességekben, és nagyon kellemes eredményeket hoztak, amelyek további kutatásokat ösztönöztek további növények antidepresszánsszerű és szorongásoldó tulajdonságainak felfedezésére [9].

A Petroselinum satioum Hoffm., közismert nevén "petrezselyem" (arabul "maadnous"), az Apiaceae család tagja. Apium crispum Mill, Apium Petroselinum L., Petroselinum Hortense Hoffm és Petroselinum crispum (Mill) Fuss. a Petroselinum sativum Hoffm szinonimája is.[10] A petrezselyem, mint a mediterrán térségből származó konyhai gyógynövény, a modern időkben világszerte elterjedt gyógynövényré vált [11]. A P. sativum számos jótékony tulajdonsággal rendelkezik, többek közöttantioxidáns, fájdalomcsillapító, görcsoldó, antidiabetikus, immunmoduláló és gyomor-bélrendszeri hatások [12]. Ezek a különféle előnyök a növény alapvető összetevőinek tulajdoníthatók, mint például a polifenoloknak (apigenin, kvercetin, luteolin és kaempferol), vitaminoknak, karotinoidoknak, kumarinnak és tanninoknak [13]. Az Apiaceae család számos olyan növényt foglal magában, amelyek antidepresszáns és szorongásoldó hatásukról ismertek, mint például a Coriandrum satioum L.[14], Pimpinella anisum L.[15], Carum carvi L.[16] 50 és 200 mg/kg közötti koncentrációra.

Ebben a tanulmányban a petrezselyem potenciális antidepresszáns-szerű és szorongásoldó hatásait vizsgáltukpolifenolokelső alkalommal értékelték, azzal együttantioxidáns aktivitás, hogy megállapítsa, van-e összefüggés.

2. Eredmények

2.1. Az antioxidáns aktivitás értékelése

2.1.1.DPPH-teszt

Az 1. ábra az antioxidáns aktivitás százalékos arányát mutatja a PSPE és a BHT különböző szintjének függvényében. A kapott eredmények azt mutatják, hogy a kivonatunk és a BHT koncentrációfüggő antiradikális aktivitást mutat. Ez azt jelenti, hogy a DPPH-gyök gátlásának százalékos aránya a P. sativum és a BHT fenolos kivonatának koncentrációjával nő. A BHIT a legmagasabb aktivitást mutatta kivonatunkhoz képest. A 0,5 ug/ml esetében a BHT elérte a 90 százalékos maximális gátlási százalékot, amely 1 ug/ml koncentrációnál állandó maradt. Ugyanebben a koncentrációban a fenolos kivonat 58 százalékos maximális gátlást produkált

A szintetikus antioxidáns BHT nagyon erős gyökellenes aktivitást mutatott, körülbelül 0,024 ug/ml IC50 értékkel, ami magasabb, mint a P sativum fenolos kivonatánál regisztrált érték (körülbelül 0,184 ug/ml). .

2.1.2.FRAP teszt

A 2. ábra az optikai sűrűség (OD) változását mutatja a PSPE és a BHT (pozitív kontroll) különböző koncentrációinak függvényében. Látható, hogy a redukció százalékos aránya mind a kivonat, mind a BHT koncentrációjával arányos. Ez utóbbi nagyobb százalékos csökkenést mutatott a kivonathoz képest.

Annak érdekében, hogy a P.sativoum (PSPE) polifenolos frakciójának hatékonyságát összehasonlíthassuk a BHT-éval, meghatároztuk azt a koncentrációt, amely 50%-kal csökkentette a FRAP-ot (IC50).

A BHT (a szintetikus antioxidáns BHT) rendkívül erős antioxidáns aktivitást mutatott, körülbelül 0,09 ug/ml IC50 értékkel, ami magasabb, mint a P. sativum fenolos kivonatánál mért érték (körülbelül 0,38 ug/ml). ）.

2.2. Az antidepresszáns aktivitás értékelése, kényszer úszóteszt

A kényszerúszási teszt leállási idejének változását a kísérlet három hete alatt a 3. ábra mutatja. A teszt alatti mozdulatlanság ideje szignifikánsan rövidebb volt a PSPE-vel kezelt egerekben (PSPE 50 mg/kg (34 s±3,286), PSPE 100 mg/kg (33,8s± 2,653)) összehasonlítva a kontrollokkal (Paroxetine (100,8s±6,837), Vehicle (176s±6,550).

Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a P. sativum fenolos kivonatának antidepresszáns hatása nagyobb, mint a paroxetineé.

2.3. Az anxiolitikus aktivitás értékelése

2.3.1. Szorongó viselkedés a nyílt terepen

A 4. ábra a szabadföldi teszt középpontjában eltöltött idő változását mutatja a háromhetes kivonatkezelés során. Látható, hogy a PSPE-vel (50 és 100 mg/kg) kezelt egerek több időt töltöttek a központi területen, mint a kontrollcsoportok. Ez a jelentős növekedés nemcsak a kezelés időtartamával, hanem a kivonat koncentrációjával is arányos. Az optimális értéket 100 mg/kg koncentrációval kaptuk (37,4 s± 1,778, szemben a 33,4 s± 1,208 50 mg/kg-os dózissal). Ez egyszorongásoldóennek a növénynek a hatása.

A háromhetes kísérlet során a keresztezett csempék számának változását az 5. ábra mutatja. Az elemzés azt mutatta, hogy a PSPE-kezelt egerek (50 mg/kg (161,2±5,490), 100 mg/kg) jelentős mértékben megnőtt a lapkák száma. kg (173±10,104)) összehasonlítva az 1 mg/kg bromazepammal (115,8± 1,393) és a hordozóval (147,4±1,568) kezelt csoportokkal. Ezek az eredmények az FPPS nagyobb szorongásoldó hatását jelzik, mint az 1 mg/kg-os bromazepámé.

2.3.2. Szorongó viselkedés a világos-sötét szobában

A 6. ábra a vizsgált időszakban a megvilágított kamrában eltöltött idő változásának eredményeit mutatja be. Az eredmények a PSPE-vel kezelt egerek esetében a megvilágított kamrában töltött idő progresszív növekedését mutatják az idő múlásával. Ez a növekedés különösen észrevehető a 21. napon. Ebben a tesztben a bromazepammal és PSPE-vel kezelt egerek szignifikánsan több időt töltöttek a megvilágított térben (bromazepam 1 mg/kg (146,8 s ± 1,068), PSPE 50 mg/kg (199,6 s± 1,068) 6,838), PSPE 100 mg/kg (213,6 s±9,331), összehasonlítva a kontroll egerekkel (vivőanyag (75,8 s±4,352)). Ezt a P. sativum polifenolos kivonat szorongásoldó hatásának bizonyítékaként értelmezték.

A 7. ábra a világos és sötét kamrák közötti átmenetek számának változását mutatja a vizsgálat során. Figyelemre méltó különbséget találtunk a 21 nap alatt a PSPE-kezelt egerek között (50 mg/kg (16±{{10}}.548), 100 mg/ kg (12,4±0,510)) és kontroll egerek (vivőanyag (10±0,837),bromazepam 1 mg/kg (12±0,949). Ezek az eredmények összhangban vannak a megvilágított kamrában töltött idő eredményeivel, mivel ez a két paraméter fordítottan arányos az egerek által kifejtett szorongás szintjével.

3. Vita

Ebben a vizsgálatban kimutattuk, hogy a P. satioum fenolos kivonata in vitro antioxidáns, in vivo pedig szorongásoldó és antidepresszáns aktivitást mutat.

A ferulinsav és a fahéjsav antidepresszáns hatásúnak bizonyult néhány tanulmányban [17,18], míg a kvercetin és a hidroxitirozol jóváhagyott szorongásoldó hatást mutatott [19,20]. Ezek a vegyületek állhatnak a megfigyelt hatás mögött.

Egy antioxidáns hatékonysága különböző formákban érvényesülhet, mint például a szabad gyökök megkötése, a szabad gyökök lebontása, valamint a fémionok kelátképzése [17]. Ez az aktivitás FRAP és DPPH vizsgálatokkal értékelhető, amelyek közül az utóbbit gyorsasága miatt gyakran használják a növényi kivonatokban jelenlévő molekulák szűrésére [18]. Eredményeink antioxidáns hatást mutattak a petrezselyem fenolos kivonatában. Hinneburg és munkatársai[21] korábbi munkái kimutatták, hogy a petrezselyem vizes kivonata gyenge gátló hatást fejt ki a DPPH-gyökre, IC50-értékkel 12.0±{{8} ​​nagyságrendű. },10 mg/ml (összehasonlítva a vizsgálatunkban szereplő polifenolos kivonattal, 0,184 ug/ml). Ezzel szemben ennek a kivonatnak a kelátképző hatása hatékonyabb volt az ugyanabban a vizsgálatban használt más kivonatokhoz képest.

A közelmúltban végzett tanulmányok összefüggést találtak a hangulati rendellenességek és az oxidatív stressz [22,23] és a pszichológiai stressz [24,25] között is, így új utakat nyitnak meg a szorongás és depresszió megelőzésében és/vagy kezelésében az antioxidánsok lehetséges alkalmazását illetően. Desrumaux et al. [26] észrevette, hogy az E-vitamin hiánya az egerek agyában megemelte az oxidatív stressz és a szorongásos viselkedés kulcsfontosságú jeleit. Hasonlóképpen a C-vitamint kapott egerek nemrégiben kimutatták, hogy ennek a vegyületnek antidepresszáns szerepe van a farok felfüggesztési teszt eredményei alapján [27]. A polifenolok, köztük a flavonoidok és a fenolsavak, jól ismertek erős antioxidáns hatásukról [28,29]. Ígéretes stratégia lehet ezeknek a másodlagos fitokémiai metabolitoknak a szorongás és depresszió elkerülésének és kezelésének módja [9]. Akinci et al. [30] kimutatták, hogy a petrezselyem sikeresen minimalizálja a stressz által kiváltott gyomorkárosodást szájon át szedve, mivel támogatja a sejtek antioxidáns védekező rendszerét, ami a szövetek átlagos glutationszintjének (53,31 ± 9,50) és a szuperoxid-diszmutáz aktivitásának növekedésében mutatkozik meg. 15,18±1,05) és kataláz (16,68±2,29).

A nyílt terepen végzett kísérletet egy állat érzelmi állapotának értékelésére használják. Az otthoni ketrecükből elkülönített és más környezetbe helyezett állatok gyakran szorongást és szorongást mutatnak azáltal, hogy az összes vagy néhány paraméterben megváltoztak, mint például az ambuláns tevékenység, a feltárás és a mozgásképtelenség csökkenése, de az ápoltság fokozódása. viselkedés [31]. A P. sativum kivonat 100 mg/kg dózisban igen jelentős szorongásoldó hatást fejtett ki, amit a terep közepén töltött idő és a teljes ambuláns aktivitás jelentős növekedése mutat. Ez a növekedés nagyobb volt, mint az 1 mg/ttkg bromazepammal kezelt egereknél.

A világos-sötét szoba kísérlet a gyógyszerek szorongásoldó hatásának előrejelzésében is hasznos. A teszt során az egerek szorongásának mértékének mérésére két paramétert kell figyelembe venni: (1) Az állat által a sötét kamrában eltöltött idő alacsonyabb százalékos aránya összefügg a szorongásos szintjével. Más szóval, ha a megvilágított rekeszben eltöltött idő százaléka minimális, a szorongás magasnak tekinthető, és (2) az átmenetek száma, azaz a két rész közötti átjárások száma fordítottan arányos a szorongás szintjével. (alacsonyabb számú átmenet magas szorongásos szintet jelent)[32]. A vizsgálat eredményei azt mutatták, hogy a P. sativum polifenolos kivonat 100 mg/kg dózisban optimális szorongásoldó hatást mutatott az állat megvilágított kamrában töltött időnövekedése és az átmenetek száma alapján a kontrollokhoz képest a vizsgálati időszakban.

A kényszerúszási kísérletet az 1970-es években fejlesztették ki. Feltalálója nevén Porsolt-tesztként is ismert [33]. Eredményeink azt mutatják, hogy a kezelt egerek mozdulatlansági ideje rövidebb volt, mint a kontrollegereké, ami a P. sativum fenolos kivonatának antidepresszáns hatását jelzi. A mozdulatlanság idejének ez a csökkenése azonban akár az úszás, akár a mászási idő növekedése mellett szólhatott. Ez a különbség neurofarmakológiai szempontból nagyon fontos, mivel elméletileg a kényszerúszás során a túlnyomórészt noradrenerg vagy dopaminerg emelkedést produkáló antidepresszánsok az eszkaláció idejének növelésével csökkentik a mozdulatlanságot [34], míg az 5HT-t aktiválók ehelyett az úszásidő növelésével csökkentik a mozdulatlanságot. [35]. A központi idegrendszer működését tekintve a polifenolok többsége közvetlenül lép kölcsönhatásba a neurotranszmitter rendszerekkel [36]. A petrezselyemmel végzett vizsgálatok a flavonoidok túlsúlyát mutatják 37]. A hagyományos, hagyományos gyógyászati ​​kivonatokban található flavonoidok széles skálája a jelentések szerint nyugtató/szorongásoldó hatást fejt ki a GABA A receptorokhoz való közvetlen kötődés révén [38].

Priprem et al. [39] azt jelzi, hogy a polifenol kvercetin szorongásoldó hatást mutat egy hét ismételt 300 mg/kg-os adagolás után, ami nem olyan hatékony, mint a diazepam, amely alacsonyabb dózisok beadása után egy órával fejti ki hatását. Pereira et al. [40] kimutatta, hogy a rozmarinsav nagyon alacsony dózisokban (2-4 mg/kg) szorongásoldó hatást fejt ki. Egy másik példa az apigenin, amely szelektív és alacsony affinitást mutat a benzodiazepin receptorokhoz, és szinte mellékhatások nélkül szorongásoldó hatást fejt ki[41]. A flavonoidok a depresszióban is szerepet játszanak a monoamin-oxidáz gátlásán keresztül, és ennek következtében a 5-HT, DA és a noradrenalin szintjének növekedése az agy bizonyos területein [42].

A serkentő aminosavak, mint az aszpartát, glutamát, homocisztein és cisztein, stimulálják a posztszinaptikus sejteket, míg a gátló aminosavak, mint az alanin, glicin, GABA és taurin, elnyomják a posztszinaptikus sejtfejlődést 43]. Az aromás L-aminosav-dekarboxiláz nevű enzim, más néven DOPA-dekarboxiláz, triptofán-dekarboxiláz, 5-hidroxi-triptofán-dekarboxiláz vagy AAAD, amely az L-dopa és a 5-hidroxi-triptofán megfelelő dekarboxilációját katalizálja dopaminná és {{ 7}}hidroxi-triptamin is szerepet játszhat. A petrezselyem ennek az enzimnek a túlzott expresszióját okozhatja, hozzájárulva annak antidepresszáns hatásához. Az azonos Apiaceae családba tartozó növényen, a Centella Asiaticán végzett vizsgálat kimutatta, hogy az összes triterpének antidepresszáns hatása a hipotalamusz-hipofízis-mellékvesekéreg tengely működésének javulásának és a monoamin neurotranszmitterek tartalom növekedésének köszönhető. [44]. Ezek a vizsgálatok arra utalnak, hogy a P. sativum fenolos kivonata szorongásoldó és antidepresszáns hatást fejt ki.

4. Anyagok és módszerek

4.1. Növényi anyag

Petroselinum sativum Hoffm. A légi részeket a virágzás előtti szakaszban (2018 tavaszán) gyűjtöttük az észak-marokkói Tanounate régióból (34 fok 32'9"É 4 fok 38'24"Ny). Ennek a növénynek az osztályozását, azonosítását és botanikai nevét egy szakképzett botanikus Pr. Bari Amina. A növény mintáját a Természettudományi Kar Dhar El Mahrez Fez herbáriumában helyezték el (utalványminta: 18TA5001).

4.2. Kitermelés

Az extrakciót Slighoua és mtsai. [11]. Röviden, a P. sativum finom por szárított légi részeit 100 g metanollal (100 ml) összekeverjük, és 3 órán át 50 °C hőmérsékleten maceráljuk. Ezután a szűrletet rotációs bepárlóban szárazra pároljuk, hogy biztosítsuk az oldószer teljes elpárologtatását. A kapott extraktumot újra feloldottuk 200 ml desztillált vízben, és háromszor kimostuk hexánnal és kloroformmal (háromszor 200 ml), hogy megszabaduljunk a pigmentektől és egyéb szennyeződésektől. Az utolsó vizes fázist háromszor 200 ml etil-acetáttal extraháltuk. A szerves fázist (etil-acetát) bepároljuk, így kapjuk a polifenolos extraktumot. Az extrakció hozama 10,52 százalék.

Korábban publikáltunk ugyanarra a kivonatra vonatkozó munkát, amely HPLC-DAD analízissel kimutatta, hogy a következő polifenolokból áll: (1) ferulsav, (2) fahéjsav, (3) galluszsav, (4) kvercetin, (5) Myricetin, (6) Naringenin, (7) Hidrox-tirozol [11].

4.3. Tanulmányozni az állatokat

Ebben a tanulmányban az egereket (svájci albínó) a Dhar el Mahraz Fez Természettudományi Kar Állatháza biztosította. Mielőtt bevonták volna őket a kísérletekbe, hatos csoportokba helyezték őket hagyományos ketrecekben, és kéthetes alkalmazkodási időszakot kaptak, szabad hozzáférést biztosítva élelemhez és vízhez, valamint 22 ± 2 fokos szabályozott hőmérsékleten, fény/sötét ciklus mellett. 12 óra/12 óra.

A kísérleteket a kísérleti állatok kezelésére és felhasználására vonatkozó nemzetközi szabványok [16] és a Belső Állat-etikai Bizottság (#09-12/2019/LBEAS) szerint végezték.

4.4. Az antioxidáns aktivitás értékelése

4.4.1.2, 2-difenil-1-pikrilhidrazil (DPPH) teszt

A DPPH az egyik leggyakrabban használt kémiai vegyület, amelyet a fenolos vegyületek antioxidáns hatásának értékelésére használnak |45. A DPPH egy páratlan elektront tartalmaz egy nitrogénatomon. Ennek a tesztnek az elve az extraktum azon képességében foglalható össze, hogy a sötétlila DPPH szabadgyököt spektrofotometriával mérhető sárgás színű redukcióvá redukálja [28]. Egy sor kivonatkoncentrációt készítettünk metanolban, amelyekből 100 μL-t adtunk 750 µl metanolos DPPH-oldathoz (0,004 százalék). 30 perces, 25 °C-on végzett inkubációs periódus után az abszorbanciát 517 nm-en mértük. A negatív kontrollhoz a mintát metanollal helyettesítettük. A DPPH százalékos arányát a következő egyenlettel határoztuk meg:

(1)I=[(Üres minta)/Üres]×100

Az antiradikális aktivitás százalékában a minta a minta abszorbanciája, az üres pedig a negatív kontroll abszorbanciája.

4.4.2. Vastartalmú redukáló teljesítmény (FRAP) teszt

A vas redukáló erejét (Fe3 plusz) a vizsgált kivonatban a Mechchate és munkatársai által leírt módszer szerint határoztuk meg. 【28】. Röviden összefoglalva, 100 μL-t különböző koncentrációjú kivonattal összekevertünk 500µl foszfáttal pufferolt oldattal (PBS, 0,2 M, pH 6,6). és 500 μl 1%-os kálium-ferricianid K, Fe (CN) oldatot. Ezeket 50 fokos vízfürdőben 20 percig inkubáltuk. Ezután 500 µl 10 százalékos vizes triklór-ecetsav (TCA) oldatot, 100 µl 0,1 százalékos vas(III)-klorid FeCl3 oldatot és 0,5 ml desztillált vizet adunk a reakcióelegyhez. Ennek a keveréknek az abszorbanciáját 700 nm-en vettük le egy vakpróbával szemben, amely a táptalaj összes reagensét tartalmazza, kivéve a növényi kivonatot. Az eredményeket 50 százalékos hatásos koncentrációban (EC50) fejezzük ki, amely az antioxidánsok azon koncentrációját jelenti, amely a 0,5-es abszorbancia eléréséhez szükséges. Az abszorbancia növekedése a vizsgált kivonat redukálóképességének növekedésének felel meg.

4.5. Antidepresszáns aktivitás kényszerített úszóteszt (FST)

A Porsolt-modell vagy a kényszerúszó teszt az antidepresszáns típusú aktivitás prediktív tesztje. Az egereket egyenként úszásra kényszerítjük egy 12 cm magasságig vízzel megtöltött hengeres edényben. A teszt 6 percig tart, de csak a teszt utolsó 4 percét elemzik. Az állat akkor tekinthető mozdulatlannak, ha függőleges helyzetben lebeg, és csak néhány mozdulatot tesz, hogy megőrizze egyensúlyát a vízben (mozdulatlansági idő).

Összesen négy, egyenként öt egérből álló tételt használtunk ehhez a teszthez. Az összes növényi kivonatot szondán keresztül adtuk be 21 napon keresztül, és a vizsgálatot 1 órával a kivonatok beadása után 21 napon keresztül végeztük. Az A csoport, a negatív kontroll fiziológiás oldatot kapott vivőanyagként. A B csoport, a pozitív kontrollcsoport 11 mg/kg paroxetint kapott. A C és D csoport 50, illetve 100 mg/kg PSPE-t kapott.

Egy órával a növényi kivonat beadása után a mozdulatlansági időt 6 percig számoltuk. Az első két percben az egér alkalmazkodott a stresszhez, majd idővel az egér elfáradt és mozgásképtelenné vált. Az immobilitási időt másodpercben számoltuk, majd összehasonlítottuk a pozitív kontrollcsoportban (paroxetin) lévő egerek mozdulatlansági idejével [33].

4.6. An.xiolitikus aktivitás

4.6.1. Nyitott mező

A nyílt mező (OF) tesztet a szorongásoldó aktivitás előrejelzésére használják, mivel az állatok a perifériához képest nagymértékben elkerülik a központi területet. Feltárás- és mozgástesztként is használják. A terület négy, 40 cm magas, 50×50 cm-es területen elhelyezett fafalból állt, 25 azonos méretű, fekete vonalakkal jelölt csempére osztva.

Összesen négy, egyenként öt egérből álló tételt használtunk ehhez a teszthez. Minden növényi kivonatot szondán keresztül adtunk be 21 napon keresztül. Ezt követően a tesztet 1 órával a növényi kivonat beadása után, az 1., 7. és 14. napon végezték el, és az A csoport, a negatív kontroll fiziológiás oldatot kapott vivőanyagként, a B csoport, a pozitív kontroll 1 mg/kg bromazepamot kapott. . A C és D csoport 50, illetve 100 mg/kg PSPE-t kapott.

60 perc elteltével a tesztet úgy végezték el, hogy minden egeret a központi négyzetre helyeztek, hogy felfedezzék az arénát, hogy megmérjék az egerek teljes ambuláns aktivitását (az egerek által keresztezett összes lapka számát, azaz a perifériás lapkák számát és a az egerek által mind a négy lábukkal keresztezett központi csempe) és a szabadföld közepén eltöltött idő [3146].

4.6.2. Világos-sötét szoba teszt

A világos-sötét szoba tesztet a szorongásoldó aktivitás előrejelzésére is használják, mivel lehetővé teszi a szorongással összefüggő állati viselkedések egyszerű értékelését azáltal, hogy elemzi az állat mozgását két különböző színű és megvilágítású rekesz között. Az aggódóbb állatok általában kevesebb időt töltenek a megvilágított szobában. A 44 × 21 × 21 cm méretű, világos-sötét fából készült doboz két fekete-fehér rekeszből állt, amelyeket egy átjáró (középen egy 7 × 7 cm-es lyuk választja el a két rekeszt, és hozzáférést biztosít az egyikhez vagy a másikhoz) kapcsolt össze. a rekeszek közül). A megvilágított rekeszt lámpa világította meg.

Összesen négy, egyenként öt egérből álló tételt használtunk ehhez a teszthez. Minden növényi kivonatot szondán keresztül adtunk be 21 napon keresztül. A tesztet a növényi kivonat beadása után 1 órával végeztük az 1., 7., 14. és 21. napon. Az A csoport, a negatív kontroll fiziológiás oldatot kapott vivőanyagként. A B csoport, a pozitív kontroll 1 mg/kg bromazepámot kapott. A C és D csoport 50, illetve 100 mg/kg PSPE-t kapott.

60 perc elteltével az ötperces tesztet úgy végeztük el, hogy minden egeret a sötét rekeszhez csatlakozó nyílás felé helyeztünk [47]. Minden vizsgálat után a dobozt alkohollal megtisztították. A mért paraméterek a megvilágított kamrában töltött idő és a kamraátmenetek száma voltak [48].

5. Következtetések

A petrezselyem, a világszerte naponta használt kulináris gyógynövény, óriási egészségügyi előnyökkel jár, és ez a tanulmány kimutatta, hogy figyelemre méltó antidepresszáns-szerű és szorongásoldó hatást fejt ki, még a klasszikus gyógyszereknél is jobb, különösen 100 mg/kg dózisban. Ha olyan hatékony gyógyszert keresünk, amely kevesebb vagy szinte semmilyen mellékhatással nem jár, ez a növény jó alternatíva lehet. Ez a munka ösztönzi a napi fogyasztását, valamint a jól bevált fitogyógyászattá fejlesztését.

A munka befejezéséhez további kutatásokra van szükség, beleértve más viselkedési tesztek elvégzését is ugyanazzal a kivonattal, hogy megerősítsék annak hatékonyságát. Így a P. satioum fenolos kivonatának biológiailag irányított frakcionálását tervezik, hogy azonosítsák a megfigyelt szorongásoldó és antidepresszáns hatásokért felelős kulcsfontosságú komponenst, és meghatározzák azok pontos hatásmechanizmusát.

Hivatkozások
1. Friedrich, MJ A depresszió a fogyatékosság vezető oka a világon. JAMA 2017, 317, 1517. [CrossRef] [PubMed]
2. Lim, GY; Tam, WW; Lu, Y.; Ho, CS; Zhang, MW; Ho, RC Depresszió prevalenciája a közösségben 30 országból 1994 és 2014 között. Sci. Rep. 2018, 8, 2861. [CrossRef]
3. Amerikai Pszichiátriai Társaság. Mentális zavarok diagnosztikai és statisztikai kézikönyve (DSM-5®); Amerikai Pszichiátriai Társaság: Washington, DC, USA, 2013; ISBN 0-89042-557-4.

4. Dinga, R.; Marquand, AF; Veltman, DJ; Beekman, AT; Schoevers, RA; van Hemert, AM; Pennx, BW; Schmaal, L. A depresszió naturalisztikus lefolyásának előrejelzése klinikai, pszichológiai és biológiai adatok széles skálájából: gépi tanulási megközelítés. Ford. Pszichiátria 2018, 8, 1–11. [CrossRef]
5. Daviu, N.; Bruchas, MR; Moghaddam, B.; Sandi, C.; Beyeler, A. A stressz és a szorongás közötti neurobiológiai kapcsolatok. Neurobiol. Stressz, 2019, 11, 100191. [CrossRef]
6. Sanabria, E.; Cuenca, RE; Esteso, M.Á.; Maldonado, M. Benzodiazepines: Alkalmazásuk alapvető gyógyszerekként vagy mérgező anyagokként. Toxics 2021, 9, 25. [CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar, S.; Sheth, CS; Ombach, HJ; Olson, PR; Bogdanova, OV; Petersen, M.; Renshaw, CE; Sung, Y.-H.; D'Anci, KE; Renshaw, PF Hypobaric Hypoxia expozíció patkányokban eltérően változtatja meg a szelektív szerotonin-újrafelvételt gátló fluoxetin, paroxetin, escitalopram és szertralin antidepresszáns hatását. Pharmacol. Biochem. Behav. 2018, 170, 25–35. [CrossRef]
8. Es-Safifi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Bari, A.; Cerruti, P.; Avella, M.; Andriy, A.; Andriy, D. Az akut emésztőrendszeri problémák kezelésére használt gyógynövények a marokkói Fez-Meknes régióban: Etnofarmakológiai felmérés. Etnobotanika. Res. Appl. 2020, 20. [CrossRef]
9. Amaghnouje, A.; Mechchate, H.; Es-Safifi, I.; Boukhira, S.; Aliqahtani, AS; Noman, OM; Nasr, FA; Conte, R.; Calarco, A.; Bousta, D. Az Origanum Majorana L. polifenolok toxicitásának és antidepresszáns-szerű hatásainak szubakut értékelése svájci albínó egerekben. Molecules 2020, 25, 5653. [CrossRef]
10. Agyare, C.; Appiah, T.; Boakye, YD; Apenteng, JA Petroselinum crispum: Áttekintés. Med. Fűszerek Veg. Afr. 2017, 527–547. [CrossRef]
11. Slighoua, M.; Mahdi, I.; Di Cristo, F.; Amaghnouje, A.; Grafov, A.; Boucetta, N.; Bari, A.; Bousta, D. A petrezselyem hidro-etanolos kivonata és polifenolos frakciója (Petroselinum sativum Hoffm.) in vivo ösztrogén és gyulladáscsökkentő hatásának értékelése. J. Ethnopharmacol. 2020, 265, 113290. [CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei, MH; Abbasabadi, Z.; Ardekani, MRS; Rahimi, R.; Farzaei, F. Parsley: Áttekintés az etnofarmakológiáról, fitokémiáról és biológiai tevékenységekről. J. Tradit. Áll. Med. 2013, 33, 815–826. [CrossRef]
13. Chaves, DS; Frattini, FS; Assafim, M.; de Almeida, AP; Zingali, RB; Costa, SS A Petroselinum Crispum kivonat fenolos kémiai összetétele és hatása a vérzéscsillapításra. Nat. Prod. Commun. 2011, 6, 1934578X1100600709. [CrossRef]
14. Mahendra, P.; Bisht, S. A Coriandru m Sativum szorongásellenes aktivitását különböző kísérleti szorongásos modellek segítségével értékelték. Indian J. Pharmacol. 2011, 43, 574. [CrossRef]
15. Shahamat, Z.; Abbasi-Maleki, S.; Mohammadi Motamed, S. A Pimpinella Anisum gyümölcs vizes és etanolos kivonatainak antidepresszáns hatásainak értékelése egerekben. Avicenna J. Phytomed. 2016, 6, 322–328. [PubMed]
16. Es-Safi, I.; Mechchate, H.; Amaghnouje, A.; Jawhari, FZ; Al Kamaly, OM; Imtara, H.; Grafov, A.; Bari, A.; Bousta, D. Betekintés a Carum carvi L. szorongásoldó és antidepresszáns-szerű tulajdonságaiba és azok összefüggéseibe az antioxidáns aktivitással. Life 2021, 11, 207. [CrossRef]
17. Zheng, X.; Cheng, Y.; Chen, Y.; Yue, Y.; Li, Y.; Xia, S.; Li, Y.; Deng, H.; Zhang, J.; Cao, Y. A ferulicsav gyulladáscsökkentő aktivitással és HPA-tengelyen keresztül javítja a depresszióhoz hasonló viselkedést prenatálisan stresszes utódpatkányokban. Int. J. Mol. Sci. 2019, 20, 493. [CrossRef]
18. Diniz, LRL; de Souza, MTS; Barboza, JN; de Almeida, RN; de Sousa, DP A fahéjsavak antidepresszáns potenciálja: Hatásmechanizmusok és perspektívák a gyógyszerfejlesztésben. Molecules 2019, 24, 4469. [CrossRef]
19. Lee, B.; Yeom, M.; Shim, I.; Lee, H.; Hahm, D.-H. A kvercetin védő hatása a szorongásszerű tünetekre és a lipopoliszacharidok által kiváltott ideggyulladásra patkányokban. Evid. alapú kiegészítés. Altern. Med. 2020, 2020, 4892415. [CrossRef]
20. Karkovi´c Markovic, A.; Tori's, J.; Barbaric, M.; Jakobuši´c Brala, C. Hidroxitirozol, tirozol és származékai és lehetséges hatásaik az emberi egészségre. Molecules 2019, 24, 2001. [CrossRef]
21. Hinneburg, I.; Dorman, HD; Hiltunen, R. Válogatott kulináris gyógynövényekből és fűszerekből származó kivonatok antioxidáns hatásai. Food Chem. 2006, 97, 122–129. [CrossRef]
22. Nunes, CS; Maes, M.; Roomruangwong, C.; Moraes, JB; Bonifacio, KL; Vargas, HO; Barbosa, DS; Anderson, G.; de Melo, LGP; Drozdstoj, S. A hangulati zavaroknál tapasztalható alacsonyabb életminőség összefüggésben áll a megnövekedett neuro-oxidatív stresszel és a bazális pajzsmirigy-stimuláló hormonszinttel, valamint görcsoldó hangulatstabilizátorok használatával. J. Eval. Clin. Gyakorlat. 2018, 24, 869–878. [CrossRef] [PubMed]
23. Bonifácio, KL; Barbosa, DS; Moreira, EG; Coneglian, CF; Vargas, HO; Nunes, SOV; Moraes, JB; Maes, M. A megnövekedett nitro-oxidatív stressz-toxicitás mint a megnövekedett vérnyomás fő meghatározója a hangulati zavarokban. J. Affekt. Zavar. 2021, 278, 226–238. [CrossRef] [PubMed]
24. Eick, SM; Barrett, ES; van 't Erve, TJ; Nguyen, RH; Bush, NR; Milne, G.; Swan, SH; Ferguson, KK Társulás a prenatális pszichológiai stressz és az oxidatív stressz között a terhesség alatt. Paediatr. Perinat. Epidemiol. 2018, 32, 318–326. [CrossRef]
25. McAllister, MJ; Basham, SA; Waldman, HS; Smith, JW; Mettler, JA; Butawan, MB; Bloomer, RJ A pszichológiai stressz hatásai edzés közben az oxidatív stressz markereire fiatal, egészséges, edzett férfiakban. Physiol. Behav. 2019, 198, 90–95. [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux, C.; Risold, P.-Y.; Schroeder, H.; Deckert, V.; Masson, D.; Athias, A.; Laplanche, H.; Le Guern, N.; Blache, D.; Jiang, X.-C. A foszfolipid transzfer fehérje (PLTP) hiánya csökkenti az agy E-vitamin-tartalmát, és fokozza a szorongást az egerekben. FASEB J. 2005, 19, 1–16. [CrossRef]