A Cistanche-fenil-etanol-glikozidok terápiás hatása és mechanizmusa a ciklofoszfamid által kiváltott spermatogenezisre egerekben

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

ZHAODong-hai1, ZHANGLei2, ZHANGYan3, QILing1, ZOU Xiang-ming4

[Összefoglaló]

Célja:A terápiás hatás feltárásáraCistanche feniletanoid glikozidokciklofoszfamid által kiváltott spermatogenezisben szenvedő egereken, és előzetesen tisztázni a hatásmechanizmust.Módszer:Az etanolos extrakciós módszer az extraháláshozCistanche feniletanoid glikozidok. Negyven BALB/C egeret véletlenszerűen kontrollcsoportra, modellcsoportra és alacsony dózisú csoportra osztottakCistanche feniletanoid glikozidcsoport (50 mg·kg-1) és egy nagy dózisú csoport (100 mg·kg-1), mindegyik csoportban 10 egér volt. A kontrollcsoport kivételével a többi csoport egerei ciklofoszfamidot (80 mg·kg-1) kaptak naponta 5 egymást követő napon, hogy elkészítsék a spermatogenezis rendellenességeinek egérmodelljét. Az utolsó adagolás után az egerek az alacsony és nagy dózisú csoportokbanCistanche feniletanoid glikozidokA megfelelő dózisokat szondán keresztül adták be, a kontrollcsoport és a modellcsoport egereinek pedig ugyanazt a térfogatú normál sóoldatot adták szondán keresztül, naponta egyszer 30 napon keresztül. Huszonnégy órával az utolsó gyomorszondát követően vettük az egér hereszövetét. Enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatot alkalmaztunk a tesztoszteron szintjének meghatározására egér hereszövet homogenizátumában. Összehasonlítottuk az egyes csoportok spermiumsűrűségét, motilitását és a spermium abnormalitási arányát. A hereszövet morfológiai változásait HE festéssel figyeltük meg. Eredmények: A kontroll csoporthoz képest a modellcsoport spermiumok sűrűsége és motilitási rátája csökkent (P<0.01), the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" increased=""><0.01), and="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" decreased=""><0.01). 0.01);="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility="" of="" mice="" in="" each="" dose="" group="" of="">Cistanche feniletanoid glikozidokjelentősen megnövekedtek (P<0.01), the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.01), and="" the="" testicular="" tissue="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" homogenate="" increased=""><0.05 or=""><0.01). histological="" observations="" showed="" that="" the="" seminiferous="" tubules="" in="" the="" testis="" of="" the="" model="" group="" were="" atrophied="" and="" degenerated,="" the="" seminiferous="" epithelium="" was="" significantly="" thinner,="" the="" arrangement="" of="" spermatogenic="" cells="" was="" disordered,="" and="" the="" number="" of="" sperm="" in="" the="" cavity="" decreased;="" the="" number="" of="" the="" seminiferous="" epithelium="" in="" the="" testes="" of="" the="">Cistanche feniletanoid glikozidcsoport szignifikánsan megnövekedett, A rétegek elkülönülnek, a spermatogén sejtek szépen, szorosan és szabályosan helyezkednek el, a lumenben a spermiumok láthatók.Következtetés: Cistanche feniletanoid glikozidokJelentős terápiás hatást fejt ki a ciklofoszfamid egerekben okozott spermatogenezis zavarára, és mechanizmusa összefüggésbe hozható a hereszövetek tesztoszteronszintjének javulásával.

[Kulcsszavak]Cistanche feniletanoid glikozidok; ciklofoszfamid; spermatogenezis rendellenesség; egerek, BALB/C

Kattintson a Cistanche termékekhez

A társadalmi ritmus felgyorsulásának, a rossz életmódnak és a környezetszennyezésnek, valamint más tényezőknek köszönhetően a spermiumok rendellenes minősége, mint például az oligospermia és az asthenospermia vált a férfi meddőség fő okaivá [1]. Jelenleg kevesebb gyógyszer áll rendelkezésre az oligospermia és az asthenospermia kezelésére, és a terápiás hatás nem nyilvánvaló. A hagyományos kínai orvoslás receptjei vagy hatóanyagai jó hatással vannak a férfiak reproduktív funkcióinak javítására [2-6]. A vényköteles gyógyszerek sokfélesége miatt azonban nem egyértelmű a kapcsolat a gyógyszer farmakológiai hatásai és a hatóanyag hatékony összetevői között, ami korlátozza a spermatogén szerek népszerűsítését és alkalmazását. A kínai orvoslás hatékony összetevőinek kutatása és fejlesztése, reproduktív károsodások terápiás hatásainak vizsgálata jó alkalmazási értékkel bír.Cistanche feniletanoid glikozidokaz egyik legfontosabb hatóanyagCistanche deserticola. Általában természetes glikozidok, amelyek észterkötéseket és oxo-glikozidkötéseket tartalmaznak, amelyek magja -glükóz. Széles körben megtalálhatók a kétszikű növényekben [7]. Tanulmányok [8] kimutatták, hogyCistanchefeniletanoidglikozidokin vitro képes megvédeni a patkány spermát az oxidatív károsodástól, de spermatogeneziséről nincs jelentés. Ez a kísérlet a Cistanche feniletanoid glikozidok terápiás hatását vizsgálja ciklofoszfamid által kiváltott spermatogenezisben szenvedő egerek spermatogén funkciójára, és kísérleti és elméleti alapot ad aCistanche feniletanoid glikozidokspermatogenezis rendellenességek kezelésében.

1. Anyagok és módszerek

1.1. Laboratóriumi állatok, fő reagensek és műszerek

40 SPF-osztályú, 6-8 hetes, 20-22 g testtömegű felnőtt BALB/C egeret vásároltunk a Jilin Egyetem Orvostudományi Alapiskola Állatkísérleti Központjától, és az állatbizonyítvány számát. : SCXK (Kirgizisztán) 2008-005. Az egereket a kísérlet előtt 5 napig adaptívan tenyésztettük. Etetési feltételek: 22 fok ~ 25 fok, cirkadián ritmus (12h/12h), ingyenes ivóvíz és étel. A Cistanche a Xinjiang Dakang Trading Company terméke. Az injekcióhoz való ciklofoszfamidot a Jiangsu Hengrui Pharmaceutical Co., Ltd.-től vásároltuk (11061921 tételszám). A hereszövet homogenizátum tesztoszteron enzimhez kötött immunoassay készletet a Tianjin Jiuding Medical Bioengineering Co., Ltd.-től vásárolták (gyártási szám: 20120812), a többi reagens mind hazai gyártású analitikai minőségű. PLUS384 mikrolemez-olvasó (MDC az Egyesült Államokban), TE2000U fordított mikroszkóp (Nikon, Japán) és J-26XP centrifuga (Nanodrop, Egyesült Államok).

1.2 Cistanche Phenylethanol Glucoside készítése

10 g cisztanche port 70%-os etanollal visszafolyató hűtő alatt forralva kétszer, minden alkalommal 2 órán át extraháltunk, hogy megkapjuk a fenetil-alkohol-glikozid-koncentrátumot. A tömény oldatot D101 makroporózus gyanta oszlopon kromatografáltuk, és 70%-os etanollal eluáltuk, így Cistanche fenekozid-alkoholt kaptunk. Az UV spektrofotométer a kivonatot 333 nm hullámhosszon azonosította.

1.3 Állatmodell és gyógyszerbeadási módszer készítése

Miután 40 hím BALB/C egeret adaptív módon tápláltunk 5 napig, az egereket véletlenszerűen 4 csoportra osztották (minden csoportban 10 egér): kontrollcsoport, modellcsoport, Cistanche.Cistanche feniletanoid glikozidokalacsony dózisú csoport, ésCistanche feniletanoid glikozidoknagy dózisú csoport. A kontrollcsoport kivételével a másik három egércsoport intraperitoneálisan 80 mg·kg-1 ciklofoszfamid injekciót kapott egérenként 5 egymást követő napon keresztül, hogy elkészítsék a spermatogenezis rendellenességeinek állatmodelljét. A modell elkészítése után az egerek az alacsony és nagy dózisú csoportokbanCistanchefeniletanoid 50 és 100 mg·kg-1·d-1-ot kaptak. A kontrollcsoport és a modellcsoport egerei azonos térfogatú normál sóoldatot kaptak. Naponta egyszer 30 napig. Minden egeret leöltünk 24 órával az utolsó gyógyszeradagolás után, és kétoldali teszteket végeztünk. A jobb herét formaldehiddel rögzítettük. A mellékherét és a herét a bal oldalról vettük. A herét homogenizáltuk, és 3,000 perccel 10 percig centrifugáltuk. A felülúszót kivettük és jégszekrényben tároltuk -20 fokon tesztelés céljából. A bal oldali mellékhere megvizsgálta a spermiumok sűrűségét, motilitását és deformitási arányát.

1.4 A spermiumok sűrűségének, motilitásának és deformitási arányának meghatározása

Helyezzen egy 10 ml spermium-tápoldatot [9] tartalmazó kémcsövet állandó hőmérsékletű vízfürdőbe, hogy 37 fokra melegítse elő, vegyen egy egyoldali mellékhereet a kötőszövet és zsír eltávolításához, vágja le a szövetet, és tegye egy kémcsőbe 37 fokon 10 percig Miután a spermium teljesen felszabadult, cseppentsen 1 cseppet a vérsejtszámláló lemezre, és számítsa ki a spermium sűrűségét a sejtszámlálási módszer szerint. Az eredményt a spermiumok milliliterenkénti számában fejezzük ki; ezen kívül vegyünk ki a kémcsőből 5μL spermiumszuszpenziót és ugyanennyi eozin-Y-t. Jól keverjük össze, tegyük 10 percre szobahőmérsékletre, adjunk hozzá egy fedőüveget, és vizsgáljuk meg fénymikroszkóppal. Az elhalt spermiumok rózsaszínre festődnek, az élő spermiumok nem festődnek, és a citoplazma átlátszó. Minden minta 200 spermiumot számol meg, kiszámítja a spermiumok életképességét, az eredményt százalékban fejezik ki, a spermiumok életképességét=az élő spermiumok száma / a spermiumok teljes száma × 100 százalék . További 5 μl spermiumszuszpenziót 5 percig metanolban fixáltunk, szárítottuk és 1 órán át 2 százalékos eozin vizes oldattal festettük, öblítettük, majd szárítjuk. Keressen olyan részeket, amelyekben kisebb a spermiumok átfedése egy kis teljesítményű lencse alatt, és használjon nagy teljesítményű lencsét a spermiumok morfológiájának sorrendben történő ellenőrzéséhez. Minden egér 1,000 teljes spermiumot vizsgált meg. A kampó nélküli, a banán alakú, amorf, kövér fejeket és a kettős fejeket deformitásnak ítéltük. Kiszámoltuk a spermium deformitási arányát, és az eredményeket százalékban fejeztük ki. A spermiumok deformitási aránya=a deformált spermiumok száma / a spermiumok teljes száma × 100 százalék.

1.5 A reproduktív hormonok meghatározása

A herét leválasztottuk a membránról és egy fiola edénybe helyeztük, majd az előhűtött homogenizáló táptalajt (0.01 mol·L-1 szacharóz, 0,01 mol) ·L-1 Trisz-HCl, 0,1 mmol·L-1 EDTA-Na2 oldat, pH 7,4), vágja le a hereszövetet szemészeti ollóval, öntse egy üveg homogenizáló csőbe, és centrifugálja 4 °C-on, 000×g 10 percig alacsony hőmérsékleten, és vegye ki a felülúszót. Használjon enzimhez kötött immunszorbens vizsgálati készletet a tesztoszteronszint mérésére a hereszövet homogenizátumában, és teszteljen 3 párhuzamos mintát minden mintához. A kísérleti lépéseket és módszereket a kit utasításai szerint végeztük el.

1.6 A here morfológiai megfigyelése

Vegyünk paraffinos metszeteket az egér heréből, HE-vel megfestve, és fénymikroszkóp alatt figyeljük meg a spermatogónia és a spermatogén sejtek eloszlását a hereszövetben.

1.7 Statisztikai elemzés

A statisztikai elemzés az SPSS17.{1}} statisztikai szoftverrel készült. A spermiumok sűrűségét, a spermiumok motilitási arányát, a spermiumok deformitási arányát és az egerek here tesztoszteron szintjét minden csoportban x±s-ben fejeztük ki, és a csoportok összehasonlítását egyfaktoros varianciaanalízissel végeztük.

2. eredmények

2.1. A spermiumok sűrűsége, a spermiumok mozgékonysága és a spermiumok deformitási aránya az egyes egércsoportokban

A kontrollcsoporthoz képest a modellcsoport spermiumsűrűsége és életképessége csökkent (P<0.01), and="" the="" sperm="" deformity="" rate="" increased=""><0.01). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility="" rate="" of="" mice="" in="" each="" dose="" of="">Cisztanche fenoxietanol-glikozidmegnövekedett (P<0.05 or=""><0.01), and="" the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.05 and=""><0). .01).="" compared="" with="" the="" low-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group,="" the="" high-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group="" had="" higher="" sperm="" density="" and="" sperm="" motility=""><0.05), and="" the="" rate="" of="" sperm="" deformity="" decreased=""><0.05). see="" table="">

2.2 Tesztoszteronszintek az egerek hereszövetében az egyes csoportokban

A tesztoszteron szint a kontrollcsoport és a modellcsoport hereszövet-homogenizátumában (10,26±0,57) és (5,33±0,84) nmol·L-1 volt, illetőleg. A modellcsoport tesztoszteronszintje szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a kontrollcsoporté (P<0.01). the="" testosterone="" levels="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" of="" the="" low-dose="" cistanche="" phenethyl="" alcohol="" glycoside="" group="" were="" (7.55±1.21)="" and="" (10.35±0.94)="" nmol·l-1.="" the="" level="" of="" testosterone="" in="" the="" low="" and="" high-dose="" groups="" of="" cistanche="" cistanche="" ethanol="" glycosides="" was="" significantly="" higher="" than="" that="" of="" the="" model="" group=""><0.05 or=""><0.01). the="" testosterone="" level="" in="" the="" testicular="" tissue="" homogenate="" of="" the="">Cistanchea cistanche fenetil-glikozid nagy dózisú csoport szignifikánsan magasabb volt, mint az alacsony dózisú csoporté (P<>

2.3 Az egér heréjének morfológiája minden csoportban

Fénymikroszkóppal megfigyelve a normál csoport heréiben sűrűn helyezkedtek el a magtubulusok, a csírasejtek szintje és száma nagy volt, a maghám szépen elrendeződött, és a magtubulusokban spermiumképződés látható. A modellcsoportban az egerek heréiben lévő ondótubulusok sorvadtak, degeneráltak, a ondóhám jelentősen elvékonyodott, a hámrétegek száma csökkent, az elrendeződés rendezetlen volt, az üregben lévő spermiumok száma csökkent. A modellcsoporthoz képest az alacsony dózisúCistanche fenetil-alkohol glikozid.

A csoportban megnövekedett a magtubulusok hámrétegeinek száma, szabályosabb lett a hám elrendeződése, és nyilvánvalóan javult a ondótubulusok károsodása; a nagy dózisú ondótubulusok szerkezeteCistanche feniletanoid glikozidcsoport szignifikánsan javult, és jelentősen megnőtt a szemiferikus hámrétegek száma és száma. Szépen elrendezve, érett spermiumok találhatók az ondótubulusokban, és a szerkezet alapvetően visszaállt a normális kerékvágásba. Lásd az 1. ábrát (6. betét).

3 Vita

A ciklofoszfamid egy általánosan használt daganatellenes gyógyszer és immunszuppresszáns, amely elsősorban a DNS alkilezésén keresztül zavarja a különféle intracelluláris biológiai funkciókat. A reprodukciós toxicitás a ciklofoszfamid [3] egyik fő mellékhatása, amely könnyen vezethet a spermium DNS-ének károsodásához és a spermiumok rendellenes fejlődéséhez. Klinikai vizsgálatok [10-11] azt mutatják, hogy a ciklofoszfamid reprodukciós toxicitása azoospermiát vagy oligospermiát okozhat. , Meddőséghez vagy genetikai hibák vagy fejlődési rendellenességek előfordulásához vezet az utódokban.

Cistanche tubulosaegy évelő magasabb parazita növény a Leiden családban. Jól ismert kínai orvoslás, amely táplálja a vesét és a jangot, táplálja a vért, és táplálja a beleket. Ez egy gyakran használt vényköteles gyógyszer a férfiak reproduktív diszfunkciójának hagyományos kezelésére [12].Fenil-etanol-glikozidokegyik legfontosabb aktív összetevőjeCistanche[13] és számos farmakológiai hatásuk van, például antioxidáns, öregedésgátló és daganatellenes [14].

Ebben a vizsgálatban ciklofoszfamidot használtak a spermatogenezis rendellenességének egérmodelljének elkészítésére, és a Cistanche fenil-etanoid glikozidok terápiás hatását a ciklofoszfamid által okozott spermatogenezis rendellenességre. Az eredmények azt mutatták, hogy a normál csoporthoz képest a modellcsoportban csökkent a spermiumok sűrűsége, csökkent a túlélési arány és nőtt a deformitás aránya. A modellcsoporthoz képest a Cistanche fenoxietanol-glikozidok mindegyik dóziscsoportja hatékonyan növeli a spermiumok sűrűségét, fokozza a spermiumok mozgékonyságát és csökkenti a spermiumok deformitási arányát. A fenti eredmények azt mutatják, hogy a cistanche fenoxietanol-glikozidok elősegíthetik a spermatogenezist és megvédhetik a sérült herét. A here morfológiájának eredményei azt mutatták, hogy a kezelés után aCistanche feniletanoid glikozid, a modell egerek heréjében szignifikánsan megnőtt a ondóhám száma, a rétegek elkülönültek, a spermatogén sejtek rendezetten, szorosan és szabályosan elhelyezkedtek, a lumenben pedig a spermiumok láthatók, ami arra utal, hogyCisztanche fenil-etanolmegváltoztathatja Shanhe helyreállítja az ondóhám szerkezetét és morfológiáját a reproduktív sérülések után.

A tesztoszteron szabályozza a hím csírasejtek differenciálódását, és szükséges feltétele a here normális fejlődésének és a spermiumok normális előfordulásának. Egyes tanulmányok [15] arról számoltak be, hogy az androgénreceptorok szelektív kiütése a here Sertoli sejtjeiben spermiumfejlődési zavarokat és hímsterilitást okozott. Ebben a vizsgálatban ciklofoszfamidot használtak spermatogén anyagok előállítására.

Az akadálysérülési modellt követően az egerek hereszövetében a tesztoszteron szint szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a normál csoportban. A Cistanche fenil-etanoid glikozidok hatására a tesztoszteron szint mindegyik dóziscsoportban megemelkedett, és a magas dózisú csoport tesztoszteronszintje szignifikánsan magasabb volt, mint az alacsony dózisú csoportban. Feltételezik, hogy a cistanche fenoxietanol-glikozidok elősegíthetik a spermatogenezist azáltal, hogy növelik a tesztoszteron szintjét a hereszövetben a spermatogén diszfunkció kezelésére, de a tesztoszteronra gyakorolt ​​hatásának mechanizmusa további kutatást és vitát igényel.

A tesztoszteron szabályozza a hím csírasejtek differenciálódását, és szükséges feltétele a here normális fejlődésének és a spermiumok normális előfordulásának. Egyes tanulmányok [15] arról számoltak be, hogy az androgénreceptorok szelektív kiütése a here Sertoli sejtjeiben spermiumfejlődési zavarokat és hímsterilitást okozott. Ebben a vizsgálatban ciklofoszfamidot használtak spermatogén anyagok előállítására.

Az akadálysérülési modellt követően az egerek hereszövetében a tesztoszteron szint szignifikánsan alacsonyabb volt, mint a normál csoportban. Az akció utánCistanche feniletanoid glikozidok, a tesztoszteronszint minden dóziscsoportban nőtt, és a tesztoszteronszint a nagy dózisú csoportban szignifikánsan magasabb volt, mint az alacsony dózisú csoportban. Feltételezik, hogy a cistanche fenoxietanol-glikozidok elősegíthetik a spermatogenezist azáltal, hogy növelik a tesztoszteron szintjét a hereszövetben a spermatogén diszfunkció kezelésére, de a tesztoszteronra gyakorolt ​​hatásának mechanizmusa további kutatást és vitát igényel.

[hivatkozások]

[1] Wang Yixin, Zheng Jufen. Új előrelépés a férfi meddőség kutatásában [J]. Chinese Journal of Andrology, 2006, 12(9): 771-774.

[2] Xie Jianxing, Wang Jun, Chen Ming és mások. A Guilingji kapszula hatása oligospermiás modellpatkányokra. A spermiumtermelés szerepe és hatása a nemi hormonokra [J]. Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy, 2011, 28(6): 621-623.

[3] Zhang Changcheng, Jia Liangliang, Li Shouchao és mások. Az epimedium összflavonoidok minimalizálják a ciklofoszfamidot A patkányszülött spermium gát védő hatásának kutatása [J]. Kínai szabadalmi gyógyászat, 2010, 32 (12): 2052-2055.

[4] Xu Lei, Wang Rui, Zhang Weixing és mások. A Shengjing granulátumok a ciklofoszfamid által kiváltott spermiumkárosodáson Megakadályozzák az egerek terápiás hatását [J]. Journal of Zhengzhou University: Medical Science Edition, 2008, 43(2): 267-270.

[5] Wang Rui, Xu Lei, Zhang Weixing és mások. A kínai orvoslás Shengjing granulátumainak hatása a spermatogenezisre károsodott egerekre Terápiás hatások kísérleti kutatása [J]. Chinese Journal of Andrology, 2008, 14 (11): 1046-1049.

[6] Guo Kaihua, Gao Fulu, Niu Siyun és mások. A Heshouwu főzet hatása öregedő patkányok hereszövetére A sejt Rb/p53 jelátviteli útvonalának hatása [J]. Anatomy Journal, 2010, 41(3): 435-439.

[7] Wu Haihong, Xuan Guodong, Liu Chunquan. A Cistanche Phenylethanol Glucoside reflux extrakciójának hatása etanol faktor kutatással [J]. Jiangsu Agricultural Sciences, 2009 (1): 250-251.

[8] Li Gang, Zhu Wenbin, Niu Fei és mások. A Cistanche Phenylethanol Glucoside hatása a patkányspermére Kutatások a külső oxidatív károsodások védő hatásáról [J]. Lishizhen Traditional Chinese Medicine and Materia Medica, 2010, 21(9): 2205-2207.

[9] Chen Deyu, Liu Limin, Xie Qingdong stb. Anti-sperma antitestek a spermium mitokondriális működésére A [J] hatása. Journal of Shantou University Medical College, 2008, 21(1): 4-6.

[10] KenneyLB, Laufer MR, Grant FD, etal. Az információ magas kockázata Highdoseccyclophaphamiddeforsarcoma gyermekkorban [J].Cancer, 2001, 91(3): 613-621.

[11] JahunkainenK, EhmckeJ, Houm, etal. A herefunkció és a termékenység megőrzése rosszindulatú daganatos betegségekben [J]. BestPrect ResClinEndocrinol Metab, 2011, 25: 287-302.

[12] Gao Zhanyou, Zhou Haitao, Lin Qiang. A Cistanche azon képessége, hogy ellenálljon a terheléses fáradtságnak patkányokban és az agyi szabad gyökök hatása [J]. Anhui Agricultural Sciences, 2011, 39(16): 9592-9595.

[13] Ren Lu, Gu Xiaohong, Tang Jian és mások. Feniletanol-glikozidok termesztett Cistanche cistanche-ban Extrakciós és tisztítási kutatások [D]. Wuxi: Jiangnan University, 2006, 25(3): 33-36. [14] Jinghui, Zuo Jianfeng, Li Jiaoshe. Előrelépések a fenoxi-etanol-glikozidok farmakológiai kutatásában Kiállítás [J]. Lishizhen Medicine és Materia Medica, 2006, 17(3): 440-441.

[15] ChangC, ChenYT, YehSD, etal. Infomedia tavaszi TheandrogénreceptorinSertolicells [J]. ProcNatlAcadSci USA, 2004, 101 (18): 6876-6881.