A Cistanche Tubulosa szárából származó összes glikozid enyhíti a depresszióhoz hasonló viselkedést

Kapcsolatba lépni:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Li Fan, Ying Peng, Jingwen Wang, Ping Ma, Lijuan Zhao, Xiaobo Li *

ABSZTRAKT

Háttér:Mint a leggyakrabban használtvese-yang méregtelenítő gyógynövénya hagyományos kínai orvoslásban a Cistanche tubulosa (Schenk) Wight (CT) szárított zamatos szárai hatékonynak bizonyultak a depresszió kezelésében. Az antidepresszáns komponensek és azok mögött meghúzódó mechanizmusok azonban továbbra sem tisztázottak.

Célja:Feltárni a CT depresszió elleni aktív komponenseit, valamint a lehetséges mechanizmusokat. Vizsgálati terv és módszerek: Viselkedési kétségbeesés teszteket használtunk a poliszacharidok, oligoszacharidok és a CT-ből leválasztott különböző glikozidban dúsított frakciók, valamint a tipikus bélmikrobióta metabolitok, köztük a 3-hidroxi-fenil-propionsav ({{2) antidepresszáns hatásának felmérésére. }}HPP) és hidroxitirozol (HT). Ezen túlmenően a bioaktív frakciók és metabolitok hatásait a krónikus, előre nem látható enyhe stressz (CUMS) modellekre több farmakodinamikai és biokémiai analízissel vizsgálták. A vastagbél hisztológiájában és a bélgátban bekövetkezett változásokat festéssel és immunhisztokémiai analízissel figyelték meg. A bélmikrobiális jellemzőket és a triptofán-kinurenin metabolizmust 16S rRNS szekvenálás, illetve Western-blot segítségével vizsgáltuk.

Eredmények:A teljes glikozidok (TG) drámaian enyhítették a depresszióhoz hasonló viselkedést a különböző elválasztott frakciókhoz képest, tükrözve a fenil-etanoid és iridoid glikozidok szinergikus hatását a hipotalamusz-hipofízis-mellékvese (HPA) tengely hiperaktiválására, valamint a súlyos neuro- és perifériás gyulladásra, valamint a 5-hidroxi-triptamin (5-HT) és az agyból származó neurotróf faktor hiánya a hippocampusban. Ezenkívül a TG enyhítette az alacsony fokú gyulladást a vastagbélben és a bélgát zavarában, és számos baktériumnemzetség bősége erősen korrelált a HPA tengellyel és a CUMS patkányok gyulladásával. Következetesen az indoleamin 2, 3-dioxigenáz 1 (IDO1) expressziója a vastagbélben szignifikánsan csökkent a TG beadása után, amit a triptofán-kinurenin metabolizmus elnyomása kísért. Másrészt a HT kifejezett antidepresszáns hatást is kifejtett a HPA tengely működésének, a gyulladást elősegítő citokin felszabadulásnak és a triptofán-kinurenin metabolizmusnak a javításával, miközben nem volt képes a TG-hez hasonlóan nagymértékben beállítani a rendezetlen bélmikrobiótát. Meglepő módon a fluoxetinnél jobb TG és HT tovább javíthatja a hipotalamusz-hipofízis-ivarmirigy tengely diszfunkcióját és az abnormális ciklikus nukleotid-anyagcserét.

a cistanche salsa előnyeitovább lehetnejavítja a diszfunkciót.

Bevezetés

A depresszió egy krónikus, visszatérő és potenciálisan életveszélyes mentális zavar, amely világszerte a lakosság 20 százalékát érinti (Nabavi et al., 2017). Jelenleg, bár számos antidepresszánst hagytak jóvá, a mellékhatások aggasztóak. Nevezetesen, a szelektív szerotonin újrafelvétel-gátlókkal (SSRI-kkel) végzett hosszú távú kezelés, mint például a fluoxetin, a depresszió fő farmakológiai hatóanyaga, súlyosbította a problémákat, például a krónikus szexuális diszfunkciót (Bijlsma et al., 2014); ez egyre nagyobb figyelmet fordított a természetes gyógynövényekből származó új antidepresszánsok felfedezésére (Wang et al., 2019). A hagyományos kínai orvoslás (TCM) elméletében a vese-jang-hiány a depresszió klinikai tüneteihez hasonló teljesítményjellemzőket eredményez, mint például a szemétledobás, az érdeklődés elvesztése és a szentimentalitás (Yang et al., 2020), ami elősegíti a gondolatokat. a depresszióhoz hasonló viselkedések enyhítésére a vese-yang tonizálásával. Véletlenül sok vese-jang tonizáló gyógynövény rendelkezik azzal az előnnyel, hogy javítja a szexuális funkciót (Wu et al., 2015). Az ilyen tanulmányok felhívják a figyelmet a Cistanches Herba, amely a leggyakrabban használt vese-jang tonizáló gyógynövény a TCM-ben, és hatékony a férfiak szexuális diszfunkcióinak kezelésében (Wang et al., 2020), az antidepresszáns fejlesztések szempontjából. A Cistanches Herba-t, amelyet hivatalosan a Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight (CT) és a Cistanche deserticola (YC Ma) szárított zamatos száraiként tartanak nyilván a kínai gyógyszerkönyvben (Wang et al., 2017), Kínában és más kelet-ázsiai országokban használták. a 15. század óta olyan állapotok kezelésére, mint a vese-yang-hiány, az impotencia és a női meddőség. A modern farmakológiai vizsgálatok azt mutatják, hogy a Cistanches Herba többféle bioaktivitással rendelkezik, mint például immunerősítő, neuroprotektív, antioxidáns, öregedésgátló és fáradtság gátló hatása (Wang et al., 2017). A Cistanches Herba neuroprotektív tulajdonságai arra utalnak, hogy terápiás potenciállal rendelkezik olyan kognitív betegségekben, mint például a stroke, a depresszió és az Alzheimer-kór (Wang et al., 2020). Korábbi vizsgálatunkban azt találtuk, hogy a CT-kivonat enyhítette a krónikus, kiszámíthatatlan enyhe stressz (CUMS) patkányok depresszió-szerű viselkedését (Li et al., 2018). A mai napig a CT kémiai elemzése azt mutatta, hogy fő összetevői a fenil-etanoid glikozidok, iridoid glikozidok, poliszacharidok és oligoszacharidok (Jiang és Tu, 2009), azonban az antidepresszáns hatásában domináns szerepet játszó vegyület típusa továbbra sem tisztázott.

Számos tanulmány igazolta, hogy a bél (különösen a kommenzális mikrobiota) fiziológiai hatása fontos szerepet játszik a depresszió kialakulásában, és szabályozhatja a neuroendokrin, a vegetatív idegrendszer és az immunrendszer működését (Yang et al., 2020). Ráadásul a triptofán-anyagcserét, a bélmikrobiótát és a depressziót összekapcsoló kapcsolat fokozatosan felkeltette a figyelmet. A megváltozott bélmikrobióta aktiválhatja a triptofán-kinurenin útvonalat, ezt követően csökkentve a perifériás és agyi triptofán elérhetőségét, ami 5-HT-hiányt eredményez (Agus és mtsai, 2018). Korábbi vizsgálatunk kimutatta, hogy a CT-ben a feniletanoid-glikozidok általában alacsony biológiai hozzáférhetőséggel rendelkeznek, és a bélmikrobióta gyorsan 3-hidroxi-fenil-propionsavvá (3-HPP) és hidroxi-tirozollá (HT) metabolizálódhat (Li et al., 2016). Ezenkívül a CT-kivonatról beszámoltak arról, hogy helyreállítja a bélmikrobióta homeosztázist CUMS-patkányokban (Li et al., 2018). Az ilyen kutatások alapján arra a következtetésre jutottunk, hogy a fitokemikáliák és a bélmikrobióta kétirányú kölcsönhatása szabályozhatja a CT specifikus bioaktív komponenseinek antidepresszáns hatását. Pontosabban, a vegyületek a gyomor-bél traktusban felszívódó metabolitokká (például 3-HPP és HT) alakulhatnak át a bélmikrobióta által, és ezt követően antidepresszáns hatást fejthetnek ki. A bioaktív komponensek által kiváltott bélmikrobióta szerkezeti változások viszont egyidejűleg létfontosságú szerepet játszhatnak az antidepresszáns aktivitásban.

Anyagok és metódusok

Anyagok

A kémiai elemzéshez használt összes standardot a Dursttól (Sichuan, Kína) vásároltuk. 3-A HPP-t, a HT-t, a fluoxetint és az imipramint az Aladdintól (Sanghaj, Kína) vásároltuk. A BCA fehérje kvantitatív készletet a Bostertől (Wuhan, Kína) vásároltuk. Nanjing Jiancheng (Nanjing, Kína) biztosította a 5-HT-t, a BDNF-et, a tumor nekrózis faktor-alfát (TNF-), az interleukin-1béta-t (IL-1) és az interferon-gammát (IFN-). ) enzim-linked immunosorbent assay (ELISA) készletek. A kortikoszteron (CORT), az adrenokortikotrop hormon (ACTH) és a kortikotropin-felszabadító hormon (CRH) ELISA kiteket a Multi Sciences-től (Hangzhou, Kína) vásároltuk. A ciklikus adenozin-monofoszfát (cAMP), a ciklikus guanozin-monofoszfát (cGMP), a tesztoszteron (T) és a gonadotropin-releasing hormon (GnRH) ELISA kiteket az Enzyme-linked Biotechnology-tól (Sanghaj, Kína) vásároltuk. A triptofán és kinurenin ELISA kiteket a Small Molecule Antibodies cégtől (Bordeaux, Franciaország) szereztük be. Az elsődleges/szekunder antitesteket, köztük a zonula occludens 1-et (ZO-1), az indoleamin 2-t, a 3-dioxigenáz 1-et (IDO1), az -aktint és a HRP kecske anti-nyúl IgG-t (H plus L) a Proteintech-től vásároltuk. (Wuhan, Kína). Az összes többi analitikai minőségű vagy annál nagyobb tisztaságú reagenst kereskedelmi szállítóktól szereztük be.

cistanche kivonat kiegészítő

CTE-ből leválasztott különböző frakciók előállítása

A CT-t 2015 novemberében gyűjtötték a kínai Xinjiang állambeli Hetianban, és Prof. Xiaobo Li hitelesítette. Az utalványmintát (20151108) a Shanghai Jiao Tong Egyetem Gyógyszerészeti Iskolájában helyezték letétbe.

A zúzott mintákat háromszor extraháltuk desztillált vízzel (1:10, w/v) 2 órán keresztül 80-90 ◦C-on, így CTE-t kaptunk (a hozam 57,1 százalék volt). A CTE-t feloldottuk desztillált vízben, majd lassan etanollal (1:4, v/v) kevertük, és 24 órára 4 ◦C-ra helyeztük. Ezután a csapadékot és a felülúszót centrifugálással gyűjtöttük össze 4000 rpm-en 20 percig. Az összes poliszacharidot (TP; hozam 5,7 százalék) úgy kaptuk meg, hogy 80 százalékos etanollal mostuk, és az összegyűjtött csapadékból háromszor Sevage reagenssel fehérjementesítettük. A maradék felülúszót ezután D101 mikroporózus gyanta oszlopon kromatografáltuk, és desztillált vízzel és 40%-os etanollal eluáltuk. Az eluált vizes és 40 százalékos etanolos frakciók összes oligoszacharidot (TO; a hozam 35,1 százalék), illetve összes glikozidot (TG; a hozam 12,1 százalék) tartalmaztak. A TG-t tovább eluáltuk desztillált vízzel és 5, 10 és 40 százalékos etanollal ismét D101 mikroporózus gyantán keresztül, és az eluált 5 százalékos és 40 százalékos etanolos frakciók teljes iridoid glikozidok voltak (TG-IrG; a kitermelés 2,7 százalék volt). és az összes fenil-etanoid glikozid (TG-PhG; a hozam 8,7%).

Kémiai elemzés

Először a CTE-ből leválasztott különböző frakciók fő kémiai összetevőit jellemeztük UPLC-QTOF-MS módszerrel. Másodszor, az összes szénhidrát és glikozid relatív tartalmát UV-Vis módszerrel határoztuk meg. Harmadszor, a főbb komponenseket (echinakozid, verbaszkozid, izoverbaszkozid, 8-epilogánsav és genipozidsav) validált HPLC-módszerrel számszerűsítettük. A részletes paraméterek és a módszer validálása a Kiegészítő anyagokban látható.

1. ábra Állatkísérletek folyamatábrája

1. táblázat Az alanyok és az egerek vagy patkányok dózisa az egyes csoportokban.

Állatkísérletek

A konkrét állatkísérletek ütemezése az 1. ábrán látható. Minden kísérleti állatot a kísérletek előtt 1 hétig a Sanghaji Jiao Tong Egyetem (Sanghaj, Kína) Laboratory Animal Centerében tartottunk és akklimatizáltunk, ellenőrzött szobahőmérsékleten (25 ± 2 °C). ◦C; 55 ± 10 százalék relatív páratartalom) 12:12 órás világos-sötét ciklussal. Ezt a kutatást az SJTU laboratóriumi állatok gondozására és használatára vonatkozó irányelvei szerint végezték. Az állatlétesítményeket és a protokollokat az SJTU Állat-etikai Bizottsága hagyta jóvá (No. A2019008).

Százötven hím ICR egeret (18–20 g súlyú, 6 hetes) vásároltunk a Shanghai Slack Biotechnology Company-tól (Sanghaj, Kína), és véletlenszerűen 10 csoportra osztották őket (n=15/csoport). Az alanyokat és a kétségbeesett viselkedésű egerek dózisait az egyes csoportokban az 1. táblázat tartalmazza. A CTE és az elkülönített frakciók dózisait a következő képlettel számítottuk ki: dózis=4,55 g/kg.d.bw × hozam, amelyet három emberi egyenértékdózis számítás szerint határoztak meg a testfelület alapján. A pozitív gyógyszer, az imipramin és a bélmikrobióta metabolitok (3-HPP és HT) dózisait a korábbi vizsgálatok (Gupte és mtsai, 2016; Pablos és mtsai, 2019) alapján határozták meg. Napi egyszeri intragasztrikus beadást követően 7 napon át a nyílt terepen végzett tesztet (OFT), a farok felfüggesztési tesztet (TST) és a kényszerúszási tesztet (FST) a 8., a 9. és a 10. napon végeztük el. A viselkedési tesztek konkrét módszereit a Kiegészítő anyagok ismertetik.

Hetvenkét hím Sprague-Dawley patkányt (160-180 g súlyú, 6 hetesek) a Shanghai Slack Laboratory Animal Company-tól (Sanghaj, Kína) vásároltunk. A formális kísérletek előtt minden patkányt alávetettünk a szacharóz preferencia tesztnek (SPT) a megfelelő edzés után. A patkányokat 8 csoportra osztották (n=9/csoport) szacharóz preferenciájuk szerint (S1 kiegészítő ábra). Az alanyokat és a patkányok dózisait az egyes csoportokban az 1. táblázatban mutatjuk be. A dózisokat az egér és a patkány közötti konverziós együttható alapján állítottuk be, a viselkedési kétségbeesett egerekben kapott effektív dózisaik alapján. És a pozitív kontroll gyógyszer, a fluoxetin dózisa összhangban volt az előző vizsgálattal (Hou et al., 2017). A kontrollcsoport kivételével minden csoport krónikus, előre nem látható enyhe stresszt (CUMS) kapott. A stresszorokat folyamatosan és véletlenszerűen alkalmazták 4 hétig (a részletekért lásd az S1 kiegészítő táblázatot). Az élelem és a víz szabadon hozzáférhetett a kontrollpatkányok számára, amelyek a viselkedési tesztek kivételével zavartalanul egy másik helyiségben maradtak. Az alanyokat intragasztrikusan adták be 1 órával a CUMS-eljárás előtt, 4 héten keresztül. 28 napos folyamatos stresszorok és gyógyszeradagolás után az OFT, SPT és FST 29., 31. és 33. napon történt. A viselkedési kísérletek konkrét módszereit a Kiegészítő anyagok mutatják be.

2. táblázat Echinakozid, verbaszkozid, izoverbakozid, 8-epilogánsav és genipozidsav tartalma az egyes frakciókban.

Mintagyűjtés és biokémiai elemzés

A viselkedési tesztek után az éheztetett patkányokat pentobarbitál-nátriummal elaltattuk, és teljes vért vettünk a szérumminták kinyeréséhez. A szív sóoldattal történő perfúzióját követően a hippokampusz, a vastagbél és a vakbél tartalmát összegyűjtöttük és -80 ◦C-on tároltuk. A vastagbél disztális szegmenseit eltávolítottuk és 4%-os paraformaldehidben rögzítettük. A CORT, CRH, ACTH, TNF-, IL-1, IFN-, cAMP, cGMP, T, GnRH, triptofán és kinurenin szintje a szérumban, a 5-HT, BDNF és TNF- a hippocampusban, a TNF- és IFN-szintet pedig a vastagbélben a megfelelő ELISA készlethez mellékelt utasítások szerint mértük.

Szövettan, immunhisztokémia és Western-blot vizsgálat

A vastagbélszövet kóros elváltozásainak megfigyelésére hematoxilin és eozin (H&E) és Alcian blue-periodikus sav-Schiff (AB-PAS) festést alkalmaztunk. Ezen túlmenően ezen metszeteken immunhisztokémiai értékeléseket is végeztek, hogy megfigyeljék a ZO-1 fehérje expresszióját a vastagbél hámsejtekben (Ding et al., 2020). A minta-előkészítéssel és a Western-blot vizsgálattal kapcsolatos részletek az IDO1 fehérje expressziójának meghatározására a vastagbélben és a hippocampusban szintén megtalálhatók a Kiegészítő anyagokban.

A bélmikrobióta összetételi profilanalízise

A 16S rRNS nagy áteresztőképességű szekvenálását a MajorBio Co., Ltd. (Sanghaj, Kína) végezte, a részletes módszert és az adatfeldolgozást a Kiegészítő anyagok tartalmazzák.

Statisztikai analízis

Az adatokat az átlag ± standard hibájaként (SEM) fejezzük ki. Egyirányú varianciaanalízist (ANOVA) alkalmaztunk több csoport összehasonlítására az SPSS 20.0 szoftver segítségével. A különbséget szignifikánsnak tekintettük, ha p < 0,05.="" a="" bélmikrobák="" és="" bizonyos="" depresszióval="" összefüggő="" fiziológiai="" tényezők="" közötti="" összefüggéseket="" a="" spearman="" korrelációs="" koefficiens="" segítségével="" elemeztük="" hőtérkép-analízis="">

Eredmények

A CTE-ből leválasztott különböző frakciók kémiai elemzése

A fő komponenseket UPLC-QTOF-MS segítségével jellemeztük (S2 kiegészítő táblázat és S2 ábra), és összesen 21 összetevőt azonosítottunk, köztük 16 fenil-etanoid-glikozidot, 2 fenolos glikozid összetevőt CTE-ben, TG-ben és TG- PhG; és 3 iridoid glikozid összetevő a CTE-ben, TG-ben és TG-IrG-ben. Összességében az összes szénhidrát relatív tartalma a TP-ben és a TO-ban 60,3%, illetve 80,8% volt. Az összes glikozid relatív tartalma a TG-ben 87,7 százalék volt. Ennek megfelelően a feniletanoid és iridoid glikozidok a TG-PhG és a TG-IrG 86,7 százalékát, illetve 53,4 százalékát tették ki. Az echinakozid, verbaszkozid, izoverbakozid, 8-epilogánsav és genipozidsav tartalma az egyes frakciókban a 2. táblázatban látható, a HPLC kromatogram és a módszer validálási adatai pedig az S3 kiegészítő táblázatban és az S3 ábrán láthatók.

2. ábra: A CTE-től és a tipikus metabolitoktól a bélmikrobióta által leválasztott különböző frakciók hatása az FST, TST, OFT sejteken egerekben.

A CTE-től és a tipikus metabolitoktól a bélmikrobióta által elválasztott különböző frakciók hatása egereken végzett viselkedési kétségbeesés tesztekre

A 2. ábrán látható, hogy a kontrollcsoporttal összehasonlítva a 7 napon át imipramint (pozitív kontroll) kezelt egerek mozdulatlanságideje jelentős csökkenést mutatott mind az FST, mind a TST esetében, és nem mutattak szignifikáns hatást az OFT-ben megtett teljes távolságra. . Hasonló változásokat figyeltek meg a CTE, TG és HT csoportokban is, ami azt jelzi, hogy a CTE, TG és HT kifejtette az antidepresszáns hatást, és a hatások nem kapcsolódnak az ingerlékenységhez. Ezért a TG és a HT volt a domináns bioaktív frakció, amelyet a CTE-től és a tipikus metabolitoktól a bélmikrobióta választott el. Érdekes módon a TG-PhG és TG-IrG beadása után nem mutattak ki szignifikáns változást az FST immobilitási idejében a kontrollokhoz képest, illetve a TST-ben a TG-PhG beadása után, ami arra utal, hogy a feniletanoid és iridoid glikozidok jelenléte nélkülözhetetlen a CTE antidepresszáns aktivitásában.

3. táblázat Különböző glikozidban dúsított frakciók és HT hatásai az FST-re, SPT-re és OFT-re CUMS patkányokban.

Különböző glikozidban dúsított frakciók és HT farmakodinámiás hatásai és biokémiai változásai CUMS patkányokon

A 3. táblázatból látható, hogy a CUMS paradigma 28 napos kezelésének alávetett patkányok szignifikáns csökkenést mutattak (p < 0.001)="" a="" szacharózpreferenciában="" az="" spt-ben,="" a="" teljes="" megtett="" távolságban,="" és="" a="" nevelési="" szám="" az="" oft-ben,="" valamint="" a="" teljes="" mozdulatlanság="" idejének="" szignifikáns="" növekedése="" (p="">< 0,01)="" az="" fst-ben="" a="" kontrollokhoz="" képest,="" ami="" depresszió-szerű="" fenotípusok="" indukálására="" utal="" cums="" patkányokban.="" a="" depressziós="" teljesítmények="" megfordultak="" az="" flx="" (pozitív="" kontroll)="" csoportban.="" hasonlóképpen,="" a="" cte-,="" tg-,="" tg-phg-,="" tg-irg-="" és="" ht-kezelés="" a="" szacharózpreferencia="" normál="" szintre="" való="" visszaállítását="" eredményezte="" cums-patkányokban,="" amelyek="" aránya="" 102,7="" százalék,="" 94,1="" százalék,="" 89,8="" százalék,="" 91,9="" százalék="" és="" 94,3="" százalék="" volt.="" vezérlők,="" ill.="" az="" fst-ben="" konzisztens="" módon="" a="" cte="" és="" a="" tg="" csoport="" mutatta="" a="" legszembetűnőbb="" hatást,="" és="" az="" immobilitási="" idők="" a="" kontrollcsoport="" 103,3,="" illetve="" 93,4="" százalékát="" érték="" el,="" míg="" a="" tg-phg,="" tg-irg="" és="" ht="" csoportok="" mozdulatlansági="" ideje="" éppen="" elérte="" a="" kontrollcsoport="" 62,1="" százalékát,="" 73,2="" százalékát="" és="" 69,9="" százalékát.="" hasonló="" szignifikáns="" növekedést="" (p="">< 0,05)="" figyeltek="" meg="" a="" teljes="" megtett="" távolságban="" és="" az="" utódszámban="" az="" oft-ben="" a="" cte,="" tg="" és="" ht="" beadása="" után,="" és="" a="" tg-phg="" és="" tg-irg="" kezelés="" a="" cums="" patkányok="" ivadékszámának="" felülvizsgálatához="" vezetett.="" az="" eredmények="" azt="" mutatták,="" hogy="" a="" tg="" volt="" a="" domináns="" bioaktív="" antidepresszáns="" frakció="" a="" cte-től="" elkülönítve,="" és="" a="" fenil-etanoid="" és="" iridoid="" glikozidok="" nélkülözhetetlenek="" voltak="" antidepresszáns="" hatásának="" kifejtéséhez.="" ezenkívül="" a="" ht-ról="" kimutatták,="" hogy="" a="" tg="" egyik="" aktív="" metabolitja="" in="">

Következetesen a CUMS-ben szenvedő betegek szignifikánsan növelték a CORT, CRF, ACTH, TNF-, IL-1 és IFN-szinteket a szérumban és a TNF-szintet a hippocampusban a kontrollcsoporthoz képest (p< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte,="" tg,="" and="" ht,="" indicating="" that="" cte,="" tg,="" and="" ht="" showed="" ameliorative="" effects="" on="" the="" hyperactivation="" of="" hpa="" axis,="" severe="" peripheral="" and="" neural="" inflammation,="" and="" deficiencies="" in="" 5-ht="" and="" bdnf.="" likewise,="" tg-irg="" and="" tgphg="" treatment="" significantly="" reduced="" the="" levels="" of="" serum="" cort,="" tnf-α,="" ifn-γ,="" and="" hippocampal="" tnf-α,="" and="" increased="" the="" level="" of="" hippocampal="" 5-ht="" in="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05).="" significant="" decreases="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" serum="" crf="" and="" acth="" were="" also="" observed="" in="" the="" tg-irg="" group="" compared="" with="" cums="" group.="" interestingly,="" the="" levels="" of="" serum="" cort,="" tnf-α,="" acth,="" and="" crf="" in="" tg-phg="" and="" tg-irg="" groups="" were="" significantly="" higher="" than="" those="" in="" the="" tg="" group="" (p="" <="" 0.05),="" and="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" exhibited="" the="" opposite="" expression="" pattern="" (p="" <="" 0.05).="" these="" results="" showed="" that="" the="" effects="" of="" tg-phg="" and="" tg-irg="" on="" the="" hyperactivity="" of="" the="" hpa="" axis,="" peripheral="" and="" neural="" inflammation="" and="" shortage="" of="" 5-ht="" were="" clearly="" inferior="" to="" tg,="" indicating="" that="" phenylethanoid="" and="" iridoid="" glycosides="" might="" exert="" synergistic="" effects="" on="" the="" above-mentioned="" multiple="">

A TG és a HT szabályozza a HPG tengelyt és a ciklikus nukleotid metabolizmust CUMS patkányokban

Megmértük a T, GnRH, cAMP és cGMP szintjét, valamint a cAMP és cGMP arányát (cAMP/cGMP) a CUMS-nek alávetett szérumban, és az eredményeket a 4. táblázatban mutatjuk be. A T, GnRH, cAMP, és a szérumban lévő cAMP/cGMP szignifikánsan csökkent, a cGMP szintje pedig szignifikánsan emelkedett (p < 0.05)="" a="" cums="" csoportban="" a="" kontrollokhoz="" képest,="" ami="" azt="" jelzi,="" hogy="" a="" cums-nek="" alávetett="" a="" hpg="" tengely="" elnyomása="" és="" a="" ciklikus="" nukleotid="" metabolizmus="" diszfunkciója.="" a="" cums="" csoporthoz="" képest="" az="" flx="" csoportban="" nem="" történt="" jelentős="" változás.="" meglepő="" módon="" a="" tg-="" és="" ht-kezelést="" követően="" szignifikáns="" növekedés="" (p="">< 0,05)="" volt="" kimutatható="" a="" szérum="" t,="" gnrh,="" camp="" és="" camp/cgmp="" szintjében,="" míg="" a="" szérum="" cgmp="" szintje="" szignifikánsan="" csökkent="" (p="">< 0,05).="" ezek="" az="" eredmények="" azt="" mutatták,="" hogy="" a="" tg="" és="" a="" ht="" szabályozta="" a="" hpg="" tengelyt="" és="" a="" ciklikus="" nukleotid="" metabolizmust,="" ami="" egyértelműen="" jobb,="" mint="" a="" pozitív="" kontroll="">

3. ábra: Különböző glikozidban dúsított frakciók és HT hatása a CORT, ACTH, CRF, TNF-, IL-1, IFN- és a 5-HT, BDNF, TNF- szintjére a szérumban CUMS patkányok hippocampusában.

A TG és a HT enyhíti az alacsony fokú vastagbélgyulladást és a bélgát zavarát CUMS patkányokban

A vastagbél morfológiai károsodásának felmérésére H&E festést alkalmaztunk, és a vastagbélben nem figyeltek meg szignifikáns különbséget a kísérleti csoportok között (4a. ábra). Ezenkívül elemeztük a TG és a HT hatását a vastagbél gyulladására és a bélgát zavaraira (4b-d ábra). A CUMS csoportban a kehelysejtek száma és a nyálkaréteg vastagsága a kontroll csoporthoz képest csökkent. Következetesen a ZO-1 fehérje expressziója, valamint az IFN- és TNF- szintje a vastagbélben szignifikánsan csökkent (p < 0.05)="" és="" emelkedett="" (p="">< {="" {13}}.05),="" ami="" azt="" sugallja,="" hogy="" bár="" nyilvánvaló="" szövettani="" károsodás="" nem="" indukálódott,="" a="" cums-nek="" alávetett="" enyhe="" fokú="" vastagbélgyulladást="" és="" a="" bélgát="" felborulását="" eredményezte.="" a="" fluoxetin-,="" tg-="" és="" ht-kezelést="" követően="" a="" serlegsejtek="" száma="" és="" a="" nyálkaréteg="" vastagsága="" nőtt,="" a="" vastagbél="" ifn-="" és="" tnf-szintje="" pedig="" szignifikánsan="" csökkent="" (p="">< 0,05).="" ezenkívül="" a="" tg="" és="" a="" ht="" szignifikánsan="" (p="">< 0,05)="" növelte="" a="" zo-1="" fehérje="" expresszióját="" a="" kontrollcsoporthoz="" hasonló="" szintre.="" ezek="" az="" eredmények="" azt="" mutatták,="" hogy="" a="" tg="" és="" a="" ht="" enyhítheti="" az="" alacsony="" fokú="" vastagbélgyulladást="" és="" a="" bélrendszeri="" gát="" zavarát="" cums="">

4. táblázat A TG, HT vagy fluoxetin hatása a HPG tengelyhez kapcsolódó hormonokra és a nukleotid metabolizmussal kapcsolatos indexekre CUMS patkányok szérumában.

A TG és a HT hatása a bél mikrobiota összetételére

A minősítetlen szekvenciák eltávolítása után összesen 1 874 721 hatékony leolvasást kaptunk. Az alfa-diverzitás (5a. ábra) és a béta-diverzitás (5b. ábra) eredményei azt mutatták, hogy bár a bélmikrobióta gazdagsága (Chao) és diverzitása (Shannon) a vakbél tartalmában nem különbözött, a bélmikrobióta általános szerkezete a főkoordináta-elemzés (PCoA) diagramja szembetűnő különbséget mutatott a kontroll és a CUMS csoport között. Ezenkívül a TG- és HT-kezelés szignifikánsan növelte a CUMS patkányok bakteriális gazdagságát, és jelentős különbségeket indukált a PCoA diagramban a CUMS patkányokhoz képest, egyértelmű hasonlóságot mutatva a kontrollokkal, különösen a TG vizsgálatakor.

A mikrobiota taxonómiai változásai tovább erősítették, hogy a TG drámai szabályozó hatást fejtett ki a bélmikrobióta összetételére. A TG beadása után a megváltozott taxonok többségének abundanciája CUMS patkányokban a kontrollcsoporthoz hasonló szintre fordított. Jelentős csökkenés (14,2 százalék, p < 0,05)="" és="" dúsítás="" (53,6="" százalék,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="" group="" compared="" with="" cums="" group="" (fig.="" 5c),="" respectively.="" consistently,="" at="" the="" family="" level="" (supplementary="" table="" s4),="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae="" (phylum="" firmicutes)="" and="" peptococcaceae="" (phylum="" firmicutes)="" by="" 33.9%="" and="" 82.9%,="" respectively,="" compared="" with="" cums="" group="" (p="" <="" 0.05).="" conversely,="" significant="" enrichments="" in="" the="" abundances="" of="" family="" erysipelotrichaceae="" (phylum="" firmicutes,="" 78.4%,="" p="" <="" 0.05)="" and="" muribaculaceae="" (phylum="" bacteroidetes,="" 77.3%,="" p="" <="" 0.05)="" existed="" in="" tg="" group.="" consistently="" at="" the="" genus="" level="" (fig.="" 5d),="" the="" abundances="" of="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostridium_9,="" unclassified_f_ruminococcaceae="" (members="" of="" the="" family="" ruminococcaceae),="" and="" peptococcus="" (a="" member="" of="" the="" family="" peptococcaceae)="" were="" significantly="" decreased="" while="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allobaculum,="" dubosiella="" (members="" of="" the="" family="" erysipelotrichaceae)="" and="" norank_f_muribaculaceae="" (a="" member="" of="" the="" family="" muribaculaceae)="" displayed="" higher="" abundances="" in="" tg="" group="" than="" those="" of="" cums="" group="" (p="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

4. ábra: A TG, HT vagy fluoxetin hatása a morfológiai változásokra, a ZO-1 fehérje expressziójára, az IFN- és a TNF-koncentrációkra CUMS patkányok vastagbelében.

TG és HT által érintett megváltozott mikrobiális nemzetségek korrelációs elemzése, HPA tengelyhez kapcsolódó hormonok, gyulladást elősegítő citokinek, 5-HT és BDNF

A TG és HT által befolyásolt bélmikrobióta összetétel változásai és a megfelelő depresszióval kapcsolatos tulajdonságok közötti összefüggések tisztázására Spearman korrelációs elemzését végezték el. Amint a 6. ábrán látható, a 5-HT és a BDNF szintjei a hippocampusban csak szignifikánsan pozitív korrelációt mutattak a norank_f_Muribaculaceae-vel. Ellenkező esetben egyértelmű összefüggéseket lehetett azonosítani a megváltozott mikrobiális nemzetségek és a HPA tengelyhez kapcsolódó hormonok között. Különösen a Dubosiella, a norank_f_Muribaculaceae, a norank_f_ Erysipelotrichacea és a Peptococcus volt erős kapcsolatban a HPA tengely funkciójával. A szérum CORT, CRF és ACTH negatív korrelációt mutatott a Dubosiella, a norank{10}}f_Muribaculaceae és a norank_f_Erysipelotrichacea, valamint a Peptococcusszal. Ezenkívül a Dubosiella és a norank_f_ Erysipelotrichacea negatív asszociációt mutatott a vastagbél IFN-ével és a hippokampusz TNF-ével, míg hasonló összefüggések léteztek az Allobaculum, a Harryfinita, valamint a szérum és a hippocampális TNF-, valamint a norank esetében _f_Lachnospiracea és szérum IFN- és TNF-. Ezzel szemben a Peptococcus pozitívan társult a vastagbél TNF-hez és a szérum TNF-hez. Hasonlóképpen, a norank_f_Muribaculaceae pozitív rokonságban állt a szérum IFN- és TNF-szintjével. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a megváltozott mikrobiális nemzetségek, különösen az Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae és Muribaculaceae családba tartozó egyes nemzetségek, amelyeket kifejezetten érintett a TG, erős asszociációkat mutattak a HPA tengelyhez kapcsolódó hormonokkal és a gyulladást elősegítő citokinekkel egyidejűleg, bizonyítva a kritikus szerepüket. a bél mikrobióta a HPA tengelyfunkció és a gyulladás szabályozásában.

cistanche propedades

A TG és a HT gátolja a triptofán-kinurenin metabolizmust CUMS patkányokban

Meghatároztuk a TG és a HT hatását a patkányok szérumának triptofán és kinurenin szintjére, valamint az IDO1 expresszióját a vastagbélben és a hippocampusban. Amint a 7. és 8. ábrán látható, a kontrollcsoporthoz képest a szérum triptofán szintje szignifikánsan csökkent a CUMS csoportban, ellentétben a kinurenin és a kinurenin-triptofán arány növekedésével (Kyn). /Trp) és IDO1 fehérje expressziója a vastagbélben és a hippocampusban. A CUMS csoporthoz képest a szérum Kyn/Trp szignifikánsan csökkent az FLX csoportban (p< 0.05).="" tg="" and="" ht="" treatment="" resulted="" in="" a="" significant="" increase="" in="" the="" serum="" tryptophan="" level="" in="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05),="" and="" a="" decrease="" in="" the="" levels="" of="" serum="" kynurenine="" and="" kyn/trp="" (p="" <="" 0.05).="" in="" addition,="" tg="" significantly="" inhibited="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" colon="" of="" cums="" rats="" (p="" <="" 0.05),="" while="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" hippocampus="" was="" observed="" between="" cums="" and="" tg="" groups.="" however,="" the="" effect="" of="" ht="" on="" the="" expression="" of="" ido1="" protein="" in="" the="" colon="" and="" hippocampus="" was="" contrary="" to="" that="" of="" tg,="" indicating="" that="" tg="" and="" ht="" inhibited="" tryptophan-kynurenine="" metabolism="" by="" decreasing="" the="" expression="" of="" ido1="" in="" the="" colon="" and="" hippocampus="" of="" cums="" rats,="">

5. ábra: A bélmikrobióta diverzitásának, összetételének és különbségeinek elemzése vakbélmintákban.

Vita

Ebben a vizsgálatban két különböző állatmodellt használtak a bioaktív vegyületek CT-ben történő szűrésére, amelyek először enyhítik a depresszióhoz hasonló viselkedést. A TP és a TO valószínűleg hatástalan összetevők voltak a CTE-ben, míg a TG mutatta a legnagyobb potenciált a depresszió kezelésében. A CT-vel, valamint a Cistanche-növényekkel kapcsolatos korábbi tanulmányok többnyire a legmagasabb tartalmú fenil-etanoid-glikozidok bioaktivitására összpontosítottak, és figyelmen kívül hagyták az iridoid-glikozidok és más kevésbé bőséges összetevők fontosságát. Érdekes módon tanulmányunk kimutatta, hogy a feniletanoid és iridoid glikozidok szinergikus hatást mutattak a HPA tengely hiperaktivitására, súlyos perifériás és idegi gyulladásokra, valamint a hippocampalis 5-HT és BDNF hiányosságaira, amelyek kritikus okai lehetnek az előnyös antidepresszánsnak. a TG hatása. Ezek az eredmények tovább utalnak a gyógynövényi gyógyászat többkomponensű és többcélú jellemzőire, és emlékeztetnek arra, hogy a kisebb mennyiségben, akár nyomokban előforduló összetevők is kulcsszerepet játszhatnak a farmakológiai hatásokban.

A krónikus stressz a HPA tengely hiperaktivitását idézi elő, ami elősegíti a depresszió kialakulását, valamint a HPG tengely elnyomását a csökkent GnRH felszabadulás és/vagy a hipofízis GnRH érzékenysége révén (Kirby et al., 2009). Eközben a cAMP és a cGMP fontos köztes csomópontok, amelyek számos neurotranszmitterre és hormonra támaszkodtak fiziológiai hatásuk kifejtéséhez (Siawrys et al., 2002). A legújabb tanulmányok következetesen kimutatták, hogy a vese-yang-hiány előfordulása szorosan összefügg a hipotalamusz-hipofízis-célmirigy tengely diszfunkciójával (Zhang et al., 2019). Vese-yang-hiány szindrómában a szérum cAMP és cAMP/cGMP szintjének jelentős csökkenését is megfigyelték. Ebben a vizsgálatban azt találtuk, hogy a TG gátolja a szérum CORT, CRF és ACTH szintjét, és növeli a szérum T és GnRH tartalmát CUMS patkányokban, ami a HPA és a HPG tengely diszfunkciójának helyreállását jelzi TG beadása után. Ezenkívül a TG visszafordította a szérum cAMP/cGMP szintjének szignifikáns csökkenését CUMS-nek alávetett patkányokban. Így a CT lehetséges mögöttes mechanizmusa a depresszió és a vese-yang-hiány kezelésében részben hasonló lehet, és további vizsgálatot érdemel. Ezenkívül a szexuális vágy és viselkedés kialakulása összetett idegi reflexfolyamat. A nemi hormonok a központi szexuális izgalom fő forrásai, és a nemi hormonok hiánya kisebb szexuális vágyat vagy szexuális diszfunkciót okozhat (Holloway és Wylie, 2015). Különösen a túlzott 5-HT gátolja a GnRH felszabadulását, ami a krónikus szexuális diszfunkció domináns oka a hosszú távú SSRI-kezelést követően (Prasad et al., 2015). Vizsgálatunkban a fluoxetin (az SSRI-k képviselője) hatástalan volt a HPG tengely diszfunkciójában. Bár a TG szignifikánsan javította a 5-HT szintjét a hippocampusban, hasonló változásokat figyeltek meg a szérum T és GnRH szintjében is, ami javította a HPG tengely elnyomását. Ezek az eredmények azt mutatják, hogy a CT kifejezetten előnyös a depresszió kezelésében, és az ezekért a hatásokért felelős belső mechanizmusokat tovább kell vizsgálni.

Egyre több bizonyíték igazolja, hogy a bél potenciális célpontja lehet a krónikus betegségek kezelésének alacsony biológiai hozzáférhetőségű természetes vegyületekkel (Zhou et al., 2020). A legújabb kutatások (Wei et al., 2019) kimutatták, hogy a CUMS-kezelés a széklet mikrobiomának megváltozását és a bélgát defektusait idézi elő, ami elősegíti a baktériumok bejutását a vastagbél nyálkahártyájába, és súlyosbítja a vastagbél gyulladásos reakcióit. Ezzel a jelentéssel összhangban eredményeink azt mutatták, hogy a 4 hetes CUMS-expozíció a patkány vastagbélben a kehelysejtszám és a nyálkaréteg vastagságának kiterjedt csökkenését, valamint a bélgát felbomlását idézte elő, amelyet a megnövekedett bélpermeabilitás jellemez. a ZO-1 fehérje mérése. Ezenkívül a gyulladást elősegítő faktorok (mint például a TNF- és az IFN-) fokozott expresszióját figyelték meg a vastagbélben. Ennek megfelelően ezek az eredmények azt mutatták, hogy bár nyilvánvaló szövettani károsodás nem indukált, a CUMS-kezelés elindította a vastagbélgyulladást és a bélgát megzavarását. Korábbi tanulmányok arról számoltak be, hogy a CT jobb hatékonyságot fejtett ki a DSS által kiváltott vastagbélgyulladás megelőzésében egerekben (Jia et al., 2014). Az inkonzisztens TG-ről azt is kimutatták, hogy enyhíti az alacsony fokú vastagbélgyulladást és a CUMS patkányok bélgát-zavarát, ami aláhúzza a vastagbélgyulladással összefüggő betegségek klinikai kezelésének lehetőségét.

Kiterjedt tanulmányok azt is kimutatták, hogy a kommenzális bélmikrobióta, a HPA tengely és a gyulladás közötti kapcsolat összetett, és döntő szerepet játszik a depresszió kialakulásában (Misiak et al., 2020). A bél mikrobiota összetételének megváltozása hozzájárulhat a citokinek fokozott felszabadulásához és a kis bioaktív molekulák szintéziséhez (Du et al., 2020). Bizonyos citokinek (például a TNF-) átjuthatnak a vér-agy gáton, és a HPA tengely erős aktivátorai (Misiak et al., 2020). A HPA tengely hiperaktivációja viszont hozzájárulhat a bél mikrobiota dysbiosisához, a vastagbél krónikus gyulladásához és a bél permeabilitásának megváltozásához (Misiak et al., 2020). A korábbi tanulmányokkal összhangban a bélmikrobióta TG-vel végzett módosítása valószínűleg felelős a depressziót enyhítő hatásokért. Megfigyeltük, hogy a CUMS-nek alávetett patkányokban a TG különböző szinteken megfordította a mikrobiális taxonok abundanciáját a kontrollokhoz hasonló szintre. Különösen a Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae és Muribaculaceae családba tartozó fő megváltozott nemzetségekről találták, hogy erősen korrelálnak a HPA tengellyel és a gyulladással. Eredményeinkkel összhangban a Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae és Muribaculaceae családról beszámoltak arról, hogy fontos szerepet játszanak a nyálkahártya gát integritásának megőrzésében és a gyulladások előfordulásában (Kankoush, 2015; Borton és mtsai, 2017; Zhang et al., 2020). Ezért azt sejtettük, hogy a TG mérsékelheti néhány, az Erysipelotrichacea, Peptococcaceae és Muribaculaceae családba tartozó nemzetség abundanciáját, ezt követően enyhítve a vastagbél alacsony fokú gyulladását, a HPA tengely hiperaktivitását és a nyálkahártya gát integritásának megzavarását. Érdekes módon tanulmányunkban csak egy, a nor ank{11}}f_Muribaculaceae nevű nemzetség mutatott összefüggést a 5-HT-vel és a BDNF-fel a hippocampusban. A kapcsolat konkrét mechanizmusa továbbra is tisztázatlan, és további vizsgálatra szorul. Egyébként az eredmények arra utalnak, hogy a TG által okozott megváltozott nemzetségek többsége számára rendkívül nehéz közvetlenül befolyásolni a 5-HT szintjét a hippocampusban. Annak elmagyarázására, hogy a bél mikrobiota összetételében bekövetkezett változások hogyan befolyásolják a hippocampalis 5-HT szintjét TG-kezelés után, felkeltette a figyelmünket a triptofán-anyagcserét, a HPA-tengelyt, a gyulladásos citokineket és a 5-HT-t összekötő bonyolult kapcsolat. A triptofán az ember számára esszenciális aminosav, és kevesebb, mint 1 százalékát használják fel a fehérjeszintézisben, a legtöbb (több mint 90 százalékot) az IDO1 és a triptofán 2, a 3-dioxigenáz 2 (TDO2) kinureninné alakítja, és kb. 5 százalékát a triptofán-hidroxiláz hajtja le a szerotonin útvonalon (Duan et al. 2018). A 5-HT szintje az agyban nagymértékben függ a perifériás triptofán elérhetőségétől, mivel a triptofán semleges aminosav-transzportereken keresztül kerül az agyba (Duan és mtsai, 2018). Az IDO1-et, a kinurenin út első lépésének sebességkorlátozó enzimét elsősorban az IFN- és más gyulladást elősegítő citokinek indukálják, mint például az IL-1 és a TNF- (Kennedy et al., 2017). amelyekről vizsgálatunk során kimutatták, hogy összefüggésben állnak a bél mikrobiótával. Amint arról beszámoltunk, több triptofán metabolizálódik a kinurenin-útvonalon keresztül, ezáltal kompetitív módon csökkenti a triptofán 5-HT-vé való átalakulását, és összekapcsolódik a depresszióban gyakran előforduló csökkent 5-HT-vel (O'Mahony et al., 2015). Így az alacsonyabb triptofánszint és a magasabb Kyn/Trp gyakori, és egybeesik a depressziós hangulat fokozott kockázatával. A TG beadása után az IDO1 túlzott expressziója a vastagbélben gátolt, ami megnövekedett szérum triptofánszintet és a szérum Kyn/Trp csökkenését eredményezte, ami feltárta a lehetséges kapcsolatot a bél mikrobiota és a hippocampus TG által befolyásolt 5-HT-szintje között. Mindeközben a BDNF, a neurotrofin család egyik tagja nélkülözhetetlen a sejtdifferenciálódáshoz, az idegsejtek túléléséhez, a szinapszisok kialakulásához és a neuroplaszticitási folyamatokhoz depresszióban (Greenberg et al., 2009). A legújabb tanulmányok kimutatták, hogy a BDNF szorosan összefügg a bélnyálkahártya-gát funkciójával és a bélmikrobiótával (Maqsood és Stone, 2016). Emellett a bélmikrobióta változásairól számoltak be, hogy megnövelhetik a BDNF-expresszió szintjét, és így befolyásolhatják a depresszióhoz hasonló viselkedésformák kialakulását (Du et al., 2020). A 5-HT-variációhoz hasonlóan azonban rendkívül lehetetlen volt, hogy vizsgálatunkban a legtöbb TG által okozott megváltozott nemzetség közvetlenül befolyásolja a BDNF szintjét a hippocampusban, és a belső molekuláris kapcsolat és mechanizmus további vizsgálatokat igényel.

Ezzel szemben a HT, a TG bélmikrobióta metabolitja, szintén antidepresszáns hatást fejtett ki a jelen vizsgálatban, ami összhangban van előnyös neuroprotektív aktivitásával (Hu et al., 2014). Aggodalomra ad okot, hogy a HT mérsékelheti a gyulladást előidéző ​​citokinek, a HPA és a HPG tengelyhez kapcsolódó hormonok, valamint a hippocampalis 5-HT koncentrációját is a kontrollokhoz hasonló szintre CUMS patkányokban, míg a legtöbb megváltozott mikrobiális nemzetség érintett A HT által végzett vizsgálat gyenge korrelációt mutatott a fenti fiziológiai indexekkel, ami arra utal, hogy a bél mikrobiota nem feltétlenül a HT antidepresszáns aktivitásának célpontja. Ezenkívül a HT elnyomta az IDO1 túlzott expresszióját a hippocampusban, de nem a vastagbélben, amit a megnövekedett szérum triptofánszint kísért. A TG és a HT közötti látszólagos különbségek előfordulása a HT véráramba történő kiváló felszívódásának és a HT vér-agy gáton való átjutási képességének tudható be (Robles-Almazan et al., 2018), ami szintén azt jelzi, hogy A bélmikrobióta erős metabolikus kapacitása különösen fontos a TG antidepresszáns aktivitásában, élettani funkciói mellett. Így előzetesen bebizonyítottuk, hogy a fitokemikáliák és a bélmikrobióta kétirányú kölcsönhatása kritikus szerepet játszik a depresszió kezelésében TG adásával (amint azt a 9. ábra mutatja).

Cistanche étrend-kiegészítőkjátszani akritikus szerepe van a depresszió kezelésében.

További információért kérjük kattintson

Következtetés

Összefoglalva, a TG főként a CT antidepresszáns hatásáért volt felelős, ami a feniletanoid és iridoid glikozidok HPA tengely hiperaktiválására, súlyos perifériás és idegi gyulladásra, valamint a 5-HT és BDNF hiányosságaira gyakorolt ​​szinergikus hatásában tükröződik. a hippokampusz. Továbbá a TG antidepresszáns hatásának potenciális molekuláris mechanizmusát a fitokemikáliák és a bélmikrobióta kétirányú kölcsönhatása révén sikerült elérni. Ezenkívül a szuppresszált HPG tengely és a ciklikus nukleotid rendellenességek TG és HT általi javítása, amelyeket nem szabályozott a fluoxetin által képviselt SSRI-kezelés, jelezte a CT egyértelmű előnyét a depresszió kezelésében. Az ilyen modulációk ígéretes stratégiát jelentenek a depresszió kezelésében CT és hasonló hagyományos gyógynövénykészítmények alkalmazásával.