Cukorbetegség okozta vesebetegség kezelése: Oleanolsav

További információ:Ali.ma@wecistanche.com

A cukorbetegség által kiváltott krónikus vesebetegség kialakulásának megelőzése a prediabétesz alatt: Az oleanolsav hatása a krónikus vesebetegség kiválasztott markereire diéta által kiváltott prediabéteszes patkánymodellben

Szereplők: Mlindeli Gamede, Lindokuhle Mabuza, Phikelelani Ngubane, Andile Khathi

1. Bemutatkozás

A 2-es típus körülbelül 30-40 százalékacukorbetegségmellituszban (T2DM) szenvedő betegeknél veseszövődmények alakulnak ki annak ellenére, hogy különféle hagyományos gyógyszerekkel kezelik őketcukorbetegség[1]. Ez részben e gyógyszerek veseműködésre gyakorolt ​​negatív hatásainak tulajdonítható [2.Cukorbetegségegyik vezető okakrónikus vesebetegségek(CKD), beleértve a diabéteszes nephropathiát [3]. Vesekomplikációk, amelyek túlnyomórészt acukorbetegségide tartozik a glomeruláris hiperfiltráció, a vesetubuláris rendellenességek és a nefromegália [4]. Ezek a szövődmények hagyományosan nyilvánvaló T2DM-hez kapcsolódnak, azonban a legújabb tanulmányok ezt mutattákcukorbetegség-társultvesea szövődmények a prediabéteszes állapotban kezdődnek [5. Laboratóriumunkban végzett korábbi vizsgálatok arról számoltak be, hogy a magas zsírtartalmú, magas szénhidráttartalmú diéta által kiváltott prediabéteszes patkánymodelleket szisztémás inzulinrezisztencia, csökkent glükóztolerancia (IGT) és oxidatív stressz jellemzi [6. Ezek a szövődmények közvetlenül összefüggenek a funkcionális és szerkezeti rendellenességekkelvese7I. Az IGT tartós hiperglikémiához vezethet, amely a glükóz nem enzimatikus reakcióját eredményezi a helyi vesefehérjékkel, amelyek fejlett glikációs végtermékeket (AGE) és reaktív oxigénfajtákat (ROS) képeznek[8]. Az oxidatív stresszhez kapcsolódikvese-sérülések és a glomeruláris alapmembrán integritásának elvesztése. Ezt általában a felszabályozás jellemzivesesérülésmolekula-1 (KM-1) és a podocita szerkezet elvesztése [7I. Ezek a szerkezeti rendellenességek a funkcionalitást is befolyásoljákvesea glomeruláris bazális membrán permeabilitásának (GBMP) növelésével, ami hiperfiltrációt eredményez [9. Ezenkívül az IGT változtathatvesefunkcióa glükóz fokozódó glomeruláris filtrációja és ezt követő reabszorpciója a proximális tubulusban, ami növeli a nátrium reabszorpcióját [101. A plazma nátriumszintjének növekedése és a megnövekedett GBMP az eGFR növekedéséhez és a makromolekulák, például az albumin vizeletből történő elvesztéséhez vezethet [11]. A glomeruláris hiperfiltráció a podocita elvesztésével jár, és így a podocin jelenléte a vizeletben [71.Cukorbetegségszerepet játszik a renin-angiotenzin-aldoszteron rendszer (RAAS) aktiválódásában a vese elektrolit- és vízkezelésének megváltozásában a nátrium- és vízvesztés ellen [2]. A cukorbetegséggel összefüggő veseszövődményeket hagyományosan farmakológiai szerekkel kezelik, beleértve az inzulinérzékenyítőket és az angiotenzin-konvertáló enzim (ACE) blokkolókat [13]. Ezen túlmenően étrendi beavatkozások is javasoltak olyan esetekben, amikor ezek a szövődmények a T2DM miatt jelentkeznek [14]. Az étrendi beavatkozást azonban gyakran bonyolult végrehajtani, és általában a betegek rossz együttműködésével jár együtt [15]. Laboratóriumunkban végzett legújabb vizsgálatok azt mutatják, hogy a növényi bioaktív vegyületek, mint ploleanolsav(OA) inzulinérzékenyítő és kardioprotektív hatást fejtenek ki az étrend által kiváltott esetekbenprediabetes[16]. Az OA hatásai azonban (oleanolsav)a veseműködésről inprediabetesismeretlenek maradnak. Ezért a jelen tanulmány célja az OA hatásainak értékelése volt.oleanolsav) kiválasztott CKD markereken (krónikus vesebetegségek), oxidatív stressz és gyulladás avesediéta által kiváltott prediabéteszes patkányok.

Kattintson a Cistanches és Cistanche termékek vesebetegségre

2. Módszerek és anyagok

21. Gyógyszerek és vegyszerek

Minden vegyszer és reagens megbízható gyógyszerszállítóktól származott, és analitikai minőségűek voltak.

2.2. Izolálási módszer

OA (oleanolsav)Syzygium aromatic [(Linnaeus)Merill & Perry] [Myrcene](szegfűszeg)-ből izolálták Khathi et al. [17].

2.3. Állatgondozás

Minden állatkísérletet és tartási körülményt jóváhagyott a KwaZulu-Natal Egyetem Állatkutatási Etikai Bizottsága (etikai szám: AREC/035/016M). A hím Sprague-Dawley patkányokat (130-160 g) a KwaZulu-Natal Egyetem Orvosbiológiai Kutatóegységében tenyésztették ki és helyezték el. Az állatokat standard laboratóriumi körülmények között tartottuk állandó hőmérsékletű (22±2 fok), CO2-tartalom mellett.<5000 ppm.),="" relative="" humidity="" (55±5%),="" and="" illumination(12="" h="" light/dark="" cycle,="" lights="" on="" at="" 07h00="" a.m.).the="" noise="" level="" was="" maintained="" at="" less="" than="" 65="" decibels.="" the="" animals="" were="" allowed="" access="" to="" food="" and="" fluids="" ad="" libitum.="" the="" animals="" acclimatized="" to="" their="" new="" environment="" for="" one="" week="" while="" consuming="" standard="" rat="" chow="" and="" tap="" water="" before="" exposure="" to="" a="" well-established="" experimental="" high-fat,="" high="" carbohydrate="">

2.4. Prediabétesz előidézése és etetési program

A 36, 150 és 180 közötti testtömegű hím Sprague-Dawley patkányt véletlenszerűen két csoportra osztottuk, a normál étrenddel táplált csoportra (n=6) és a magas zsírtartalmú, magas szénhidráttartalmú diétás csoportra (n {{9). }}). Az állatok egy hétig akklimatizálódtak új környezetükhöz, miközben standard patkányeledelt és csapvizet fogyasztottak, mielőtt kísérleti, magas zsírtartalmú, magas szénhidráttartalmú (HFHC) diétát fogyasztottak volna. Azok az állatok, amelyekben prediabéteszben szenvedtek, HFHC diétát kaptak, amelyet korábban a mi laboratóriumunkban fejlesztettek ki, AVI foods (Dél-Afrika) által, míg a normál kontrollt normál patkányok táplálékával etették az UKZN állategységből. Az etetési program és a prediabétesz-indukció 20 hétig tartott. Ezalatt az éhgyomri vércukorszintet, a glükóztoleranciát és a vér trigliceridjét minden negyedik héten ellenőrizték. Ebben a vizsgálatban a prediabéteszt a teljes testtömeg, az éhgyomri vércukorszint, az 2-óra glükóztolerancia (az orális glükóz tolerancia teszt során) és a vér trigliceridszintjének jelentős növekedéseként határozták meg, amelyeket a HFHC diétával táplált állatoknál figyeltek meg. .

2.5.Állatok és csoportok

A vizsgálat átfogó célja annak meghatározása volt, hogy az OA (oleanolsav)enyhítheti a prediabetes által kiváltott kockázati tényezőketkrónikus vesebetegségekdiétás beavatkozás jelenlétében és hiányában egyaránt. E célok vizsgálata során a normál étrenddel táplált csoportot nem prediabetes kontrollnak (NPC) (n=6) tekintették. Azokat az állatokat, amelyek HFHC diétát kaptak és prediabéteszben alakult ki, véletlenszerűen öt csoportra osztották a megfelelő kezelésük szerint: kezeletlen prediabéteszes kontrollcsoport (PC), metforminnal kezelt csoport (MET), metforminnal kezelt diétás intervenciós csoport (MET plusz DI, oleanolsavval kezelt csoport (OA (oleanolsav)) és oleanolsavval kezelt diétás beavatkozással (OA (oleanolsav)plusz DI). Minden csoport n= 6 volt.

3. Prediabéteszes állatok kezelése

A kezelési időszak 12 hétig tartott, ami elegendő időt biztosít a hemoglobin glikációjához. Az állatokat minden harmadik napon kezelték, ahol a MET és MET plus DI csoportok metformint (500 mg/kg p. o) kaptak, míg az OA (oleanolsav)és az OA plusz DI-csoportok oleanolsavat (80 mg/kg po.) kaptak. Ezt a dózist nem mérgezőnek tekintik, és a korábbi laboratóriumunkban végzett vizsgálatok szerint hatékonyabb [15. A paramétereket, beleértve a folyadékbevitelt és a vizeletmennyiséget, minden csoportban minden negyedik héten megmértük a kezelés időtartama alatt. A po kód az orális szondán át adott adagra vonatkozik.

3.1. Vérvétel és szövetgyűjtés

A 12-hetes kezelési időszak végén az állatokat Isoformmal (100 mg/kg) (Safeline Pharmaceuticals(Pty)Ltd, Roodeport, Dél-Afrika) érzéstelenítő gázkamrában leölték. (Biomedical Resource Unit, UKZN, Durban, Dél-Afrika) 3 percig, majd a lefejezést követte, és a vért minden állatnál szívlyukasztásos módszerrel gyűjtöttük előre lehűtött heparinizált tartályokba. A vért ezután centrifugáltuk (Eppendorf centrifuge 5403, Németország) 4 °C-on, 503 g-n 15 percig, majd a plazmát összegyűjtöttük és - 80 fokos fokon Bio Ultra fagyasztóban (Snijders Scientific, Hollandia) tároltuk addig. készen áll a biokémiai elemzésre. Azveseeltávolítottuk, hideg normál sóoldattal öblítettük, és folyékony nitrogénben gyorsfagyasztva tároltuk Bio Ultra fagyasztóban (Snijders Scientific, Tilburg, Hollandia) -80 fokon a további biokémiai elemzés elvégzéséig.

3.2. Vizeletgyűjtés

Minden kísérleti csoportból vizeletmintákat gyűjtöttünk a Biomedical Resource Unit által biztosított metabolikus ketrecrendszer segítségével. A vizeletmintákat a kezelési időszak különböző pontjain, azaz a 0., a 4., a 8. és a 12. héten gyűjtöttük. Az összegyűjtött vizeletmintákat -80 C fokon tároltuk.

3.3. Biokémiai elemzés

A plazmát és a vizeletet a Global Clinical and Viral Laboratories-ba (Amanzimtoti Dél-Afrika) küldték biokémiai elemzés céljából. A vizelet elemzése magában foglalta az elektrolitok, például nátrium, kálium, albumin és kreatinin mennyiségi meghatározását.Veseszövetelemzés: AzveseA szövetet foszfát puffer sóoldattal (PBS) homogenizáltuk 1 g (szövet):9 ml (PBS) arányban, és a homogenizátumot a malondialdehid (MDA) vizsgálathoz használtuk fel a lipidperoxidáció és az oxidatív stressz mennyiségi meghatározására egy jól bevált protokoll szerint. . Az MDA esszét az antioxidáns enzimek számszerűsítése kísérte, beleértve a szuperoxid-diszmutáz (SOD) és a glutation-peroxidáz (GPx) koncentrációit, amelyeket Elabscience ELISA kitekkel [10.11] végeztek. Plazma analízis: Plazma aldoszteron és KIM{5}} koncentrációk voltak elemeztük a megfelelő patkány ELISA kittel (Elabscience Biotechnology Co., Ltd) a gyártó utasításai szerint.

3.4. Kvantitatív valós idejű PCR

A ribonukleinsavat (RNS) a kezelési időszak 12. hetében vett vizeletmintákból extraháltuk. Az RNS-kivonást az Inqaba Biotech (Dél-Afrika) ZR Urine RNS izolációs kittel (zymo Research, Amerikai Egyesült Államok) végeztük.RNS-hozam nanodrop segítségével határoztuk meg, és elvégeztük az RNS-koncentráció standardizálását. Az átalakított dezoxiribonukleinsavat (cDNS) ezután a cDNS szintézis kit (ThermoFisher) segítségével szintetizáltuk.

A ThermoFisher light cycler SYBR Green I master mixet használtuk az erősítéshez a gyártó utasításai szerint a Thermo fisher light cycler rendszeren. A ciklus körülményei a következők voltak: Az előinkubálást 95 fokon 60 másodpercig végeztük. Ezt követi egy 3-lépcsős erősítés 95°C-on 15 másodpercig, 60°C-on 30 másodpercig és 72°C-on 30 másodpercig. Az olvasztás 95 fokon 10 másodpercig, 65 fokon 60 másodpercig, és 97 fokon 1 másodpercig történt. Továbbá a hűtés 30 másodpercig 37 fokon történt. Belső kontrollként gliceraldehid-foszfát-dehidrogenázt (GAPDH) használtunk az adatok normalizálására, hogy meghatározzuk a kérdéses gén relatív expresszióját. A génexpressziós értékeket a 248c módszerrel ábrázoljuk. Az alábbi primereket használtuk.

3.5. Számítás és egyenletek

A vizelet albumin/kreatinin arányát (Alb/Cr-R) a kezelés 12. hete után 24 órás vizeletmintákból nyert albumin [UAlb] és kreatinin [UCr] felhasználásával számítottuk ki. Az Alb/Cr-R mértékegysége (mg/mgCr). ALB/Cr-R=albumin/kreatinin arány,[UALB]=vizelet albuminkoncentráció és [UCr] =vizelet kreatininkoncentrációja

Az RT-PCR mennyiségi meghatározását összehasonlító módszerrel számítottuk ki

Hajtás változás a kezelés miatt=2-△XR

ACT=CT(célgén) és CT(referenciagének)

Egy ACT= ACT(célminta)-ACT(referenciaminta)

3.6. Az elektrolitok vontatási kiválasztása

Frakciós nátrium-kiválasztás (FENa）= WNex× 100 Kálium-frakciókiválasztás (FEK)= Wes× 100

UNaurnary nátrium, PCR-plazma kreatinin, UCR-vizelet kreatinin, PNa-plazma nátrium, UK-vizelet kálium és PK-plazma kálium.

3.7. Statisztikai analízis

Az összes adatot átlag ± SD-ben fejeztük ki. A statisztikai összehasonlításokat a Graph Pad In-Stat szoftverrel (7-es verzió.00, Graph Pad Software, Inc., San Diego, California, USA) végeztük, a variancia (ANOVA), amelyet Bonferroni többszörös összehasonlító teszt követett, hogy egyidejűleg meghatározzák a statisztikai különbségeket két független csoport átlaga között.

4. Eredmények

4.1. Hatása a folyadékbevitelre és a vizeletkiválasztásra

A folyadékbevitelt és a vizeletkibocsátást minden kísérleti csoportban négyhetente ellenőriztük a kezelési időszak alatt. Az eredmények azt mutatták, hogy a kezelési időszak kezdetétől (O hét) a PC-csoportban szignifikánsan magasabb volt a folyadékbevitel és a vizelet mennyisége az NPC-hez képest (PC vs NPC) (p<0.05). however,="" the="" administration="" of=""> (oleanolsav)diétás beavatkozással és anélkül, a 12 hét alatt szignifikánsan progresszív csökkenést eredményezett mind a folyadékbevitelben, mind a vizeletkibocsátásban a PC-hez képest. A MET-kezelés nem mutatott szignifikáns különbséget a PC-hez képest a folyadékbevitelben a négy hét alatt. Míg a MET plusz DI kezelés az NPC tartományra csökkentette a folyadékbevitelt. A vizeletkibocsátás tekintetében a MET megnövekedett vizeletmennyiséget mutatott mind az NPC-hez, mind a PC-hez képest, különösen a 8. és a 12. héten (lásd 1. ábra).

1. ábra. Az oszlopdiagram mutatja az OA diétás beavatkozással és anélkül, valamint a Met hatását diétás beavatkozással és anélkül (n {0}}, csoportonként) a folyadékbevitelre és a vizeletürítésre az összes kísérleti csoportban a 0. héttől a hétig 12.

Az értékeket az átlag ± SD szórásaként adjuk meg. ★ {{0}}p < 0.05="" az="" npc-vel="" való="" összehasonlítást="" jelöli;="p">< 0,05="" a="" pc-vel="" való="" összehasonlítást="">

4.2. Hatás a nátrium (FENa) és a kálium (FEK) frakciójára

A plazma és a vizelet elektrolitkoncentrációit a kezelési periódus végén (12. hét) mértük, miközben a nátrium és kálium frakcionált kiválasztódását számoltuk. A PC szignifikánsan alacsonyabb FENa-val rendelkezett az NPC-hez képest (p < 0,05).="" az="" oa=""> (oleanolsav)étrendi beavatkozással és anélkül (OA plusz DI és OA) szignifikánsan javította a nátriumkiválasztást a PC-hez képest (p< 0.05).="" the="" met-formin="" treated="" group="" (met)showed="" overt="" sodium="" retention,="" however,="" when="" metformin="" was="" combined="" with="" dietary="" intervention="" (met+dd,="" there="" was="" a="" significant="" improvement="" in="" sodium="" excretion="" by="" comparison="" with="" pc="" (p=""><>

Érdekes módon a PC FEK-je jelentősen csökkent az NPC-hez képest. Az OA adminisztrációja azonban (oleanolsav)diétás beavatkozással és anélkül (OA és OA plusz DI) jelentősen javult a káliumkiválasztás. Az étrendi beavatkozás nélküli MET nyilvánvaló kálium-visszatartást mutatott, ami hasonló volt a PC-hez. A MET azonban étrendi beavatkozással kombinálva (MET plusz DI) jelentősen javította a kálium kiválasztását a PC-hez képest.

4.3. A kreatinin-clearance-re (CRC) gyakorolt ​​hatás

A CRC-t a szérum kreatinin, a 12. heti vizelet kreatinin és a térfogat alapján számították ki minden kísérleti csoportban. Az eredmények azt mutatták, hogy a PC-csoport szignifikánsan magasabb CRC-vel rendelkezett az NPC-hez képest. Az OA adminisztrációja (oleanolsav)diétával és anélkül is (az OA és az OA plusz DD a CRC szignifikáns csökkenését eredményezte a PC-hez képest. A MET szignifikánsan megnövelte a CRC-t az étrenddel összehasonlítva. Míg a MET plusz DI a CRC-t az NPC tartományra csökkentette (p<0.05)(see>

2. ábra.Az oszlopdiagram mutatja az OA diétás beavatkozással és anélkül, valamint a Met hatását étrendi beavatkozással és anélkül (n=6, csoportonként) a nátrium és kálium százalékos kiürülésére az összes kísérleti csoportban.

Az értékeket az átlag ± SD szórásaként adjuk meg. ★{{0}}p < 0.05="" az="" npc-vel="" való="" összehasonlítást="" jelöli;="p">< 0,05="" a="" pc-vel="" való="" összehasonlítást="">

4.4. Hatások a proteinuriára (albumin/kreatinin arány)

A proteinuriát Alb/Cr-R módszerrel vizsgáltuk, amelyet a 12. heti vizeletből nyert vizeletalbuminból és kreatininből számítottunk ki. Az eredmények azt mutatták, hogy a PC-csoportban szignifikánsan megnőtt az Alb/Cr-R az NPC-hez képest. Azonban az OA beadása diétával és anélkül (OA (oleanolsav)és az OA plusz DD szignifikáns csökkenést mutatott az Alb/Cr-R-ben a PC-hez képest. A MET és a MET plusz DI szintén csökkentette az Alb/Cr-R-t a PC-hez képest (p < 0,05)="" (lásd="" a="" 3.="" és="" 4.="">

3. ábra.Az oszlopdiagram mutatja az OA diétás beavatkozással és anélkül, valamint a Met hatását étrendi beavatkozással és anélkül (n {0}}, csoportonként) az összes kísérleti csoport kreatinin-clearance (CRC) arányára. Az értékeket az átlag ± SD szórásaként adjuk meg. ★=p < 0.05="" az="" npc-vel="" való="" összehasonlítást="" jelöli;="p">< 0,05="" a="" pc-vel="" való="" összehasonlítást="">

4. ábra.Az oszlopdiagram mutatja az OA diétás beavatkozással és anélkül, valamint a Met hatását étrendi beavatkozással és anélkül (n {0}}, csoportonként) az összes kísérleti csoport albumin/kreatinin arányára. Az értékeket az átlag ± SD szórásaként adjuk meg. ★=p < 0.05="" az="" npc-vel="" való="" összehasonlítást="" jelöli;="p">< 0,05="" a="" pc-vel="" való="" összehasonlítást="">

5. ábra.Az oszlopdiagram az OA hatásait mutatja (oleanolsav)diétás beavatkozással és anélkül és Met diétás beavatkozással és anélkül (n=6, csoportonként) az összes kísérleti csoport plazma aldoszteronszintjére. Az értékek az átlag ± SD szórásaként jelennek meg.★=o<0.05 denotes="" comparison="" with="" npc;α=""><0.05 denotes="" comparison="" with="">

4.5. A plazma aldoszteron szintjére gyakorolt ​​hatás

A plazma aldoszteron koncentrációját ELISA kit segítségével mértük. Az eredmények azt mutatták, hogy a PC szignifikánsan magasabb plazma aldoszteronnal rendelkezik, mint az NPC. Az OA adminisztrációja azonban (oleanolsav)diétás beavatkozással és anélkül (OA és OA plusz DI) a plazma aldoszteron szintjének szignifikáns csökkenését eredményezte a PC-hez képest. A MET aldoszteron koncentrációja szignifikánsan nőtt az NPC-hez képest. Míg a MET plusz DI csökkentette az aldoszteron koncentrációt az NPC tartományra. (o<0.05) (see="">

4.6. A vese oxidatív stresszére gyakorolt ​​hatás

A vese oxidatív stresszét az MDA SOD és a GPx mérésével értékeltékveseszövet. Az eredmények azt mutatták, hogy a PC szignifikánsan magasabb MDA-koncentrációt mutatott az NPC-hez képest<0.05). furthermore,="" pc="" had="" significantly="" lower="" sod="" and="" gpx="" concentrations="" when="" compared="" to="" npc.="" however,="" the="" administration="" of=""> (oleanolsav)diétás beavatkozással és anélkül szignifikánsan csökkent MDA-koncentrációt eredményezett a PC-hez képest (p<0,05), while="" the="" levels="" of="" sod="" and="" gpx="" were="" within="" the="" npc="" range="" met="" had="" a="" significant="" increase="" on="" mda="" and="" reduced="" sod="" and="" gpx="" concentrations="" in="" comparison="" to="" npc.="" however,="" met+di="" increased="" the="" sod="" and="" gpx="" to="" the="" npc="" range.="" (p="" <="" 0.05)(see="" table="">

4.7. A vizelet podocin expressziós szintjére gyakorolt ​​hatás

A vizelet podocin mennyiségét a 12. héttől nyert vizeletben határoztuk meg. A prediabéteszes kontrollnál megnőtt a vizelet podocin expressziója a standardizált NPC-hez képest. A diétával és anélkül történő beadása (OA és OA plusz DI) azonban a vizelet podocin expressziójának szignifikáns csökkenését eredményezte a PC-hez képest. A MET és a MET plusz DI szintén csökkentette a vizelet podocin expresszióját a PC-hez képest. (o<0.05)(see fig="">

Asztal 1:Az OA hatásai (oleanolsav) és a MEtonveseA prediabetikus MDA, SOD és GPx, Az értékek az átlag ± SD szórásaként vannak megadva.*=p< 0.05="" denotes="" comparison="" with="" npc;α=""><0.05 denotes="" comparison="" with="">

6. ábra. Az oszlopdiagram mutatja az OA diétás beavatkozással és anélkül, valamint a Met hatásait diétás beavatkozással és anélkül (n {0}}, csoportonként) a vizelet podocin expressziós szintjére minden kísérleti csoportban. Az értékeket az átlag ± SD szórásaként adjuk meg. ★=p < 0.05="" az="" npc-hez="" viszonyítva;="p">< 0,05="" a="" pc-hez="" viszonyítva.="" megjegyzés.="" a="" pc="" az="" npc-hez="" viszonyítva,="" ami="1," az="" összes="" többi="" kezelés="" pedig="" a="" pc-hez="">

4.8. Hatás a vesekárosodás molekulájára-1(KIM-1)

A plazma KIM{0}}-koncentrációit ELISA készlettel mértük. Az eredmények azt mutatták, hogy a PC szignifikánsan magasabb plazma KIM-lin értékkel rendelkezik, mint az NPC. Az OA adminisztrációja azonban (oleanolsav)diétás beavatkozással és anélkül (OA és OA plusz DD a plazma KIM{0}} jelentős csökkenését eredményezte a PC-hez képest. A MET szignifikánsan növelte a KIM-1 értékét az NPC-hez képest. Míg a MET plusz DI csökkentette a KIM{2}} értéket az NPC tartományra. (o< 0.05)(see="">

7. ábra.Az oszlopdiagram mutatja az OA diétás beavatkozással és anélkül, valamint a Met hatását étrendi beavatkozással és anélkül (n {0}}, csoportonként) az összes kísérleti csoport plazma KIM-1-jára. Az értékeket az átlag ± SD szórásaként adjuk meg. ★=p < 0.05="" az="" npc-vel="" való="" összehasonlítást="" jelöli;="p">< 0,05="" a="" pc-vel="" való="" összehasonlítást="">

5. Vita

Korábbi tanulmányok beszámoltak arról, hogy a diéta által kiváltott prediabéteszes állapot a szív- és érrendszeri betegségek és a korai stádiumú CKD kialakulásának fokozott kockázatával jár. (krónikus vesebetegségek) [18]. Prediabetesproteinuria, megnövekedett eGFR, valamint elektrolit-egyensúlyzavar jellemzi, amelyek mind kockázati tényezői a CKD-nek (krónikus vesebetegségek). Hagyományosan,prediabetesa gyógyszeres kezelés és az életmód-módosítások, például az étrendi beavatkozás kombinációjával kezelik [19I. Az életmód-módosítások a betegek alacsony együttműködési hajlandóságához kapcsolódnak, ami befolyásolja a gyógyszeres terápia hatékonyságát [20]. Laboratóriumunkban végzett vizsgálatok kimutatták, hogy az OA beadása (oleanolsav)diéta által kiváltott prediabetesben helyreállítja az inzulinérzékenységet és csökkenti a szív- és érrendszeri szövődmények kockázatát.prediabetesdiétás beavatkozás jelenlétében és hiányában is [21]. Ennek a növényi eredetű triterpénnek a hatásai azonban a CKD kialakulásával kapcsolatos kockázati tényezőkre (krónikus vesebetegségek)még nem vizsgálták ki. Ezért ez a tanulmány a növényi eredetű hatásokat kívánta megvizsgálnioleanolsav(OA) a CKD kiválasztott rizikófaktorairól (krónikus vesebetegségek)diéta által kiváltott prediabéteszes patkánymodellben az étrendi beavatkozás hiányában és jelenlétében egyaránt. A tanulmányban vizsgált kiválasztott kockázati tényezők közé tartozikveseoxidatív stressz, glomeruláris filtrációs ráta (GFR), a renin-angiotenzin-aldoszteron rendszer összetevője, albuminuria, vesefolyadék és elektrolitkezelés az összes kísérleti csoportban.

Laboratóriumunkban végzett korábbi vizsgálatok arról számoltak be, hogy a diéta által kiváltott prediabéteszes állatokban az inzulinrezisztencia következtében károsodott glükóztoleranciával és éhgyomri glükózszinttel járó elhízás alakul ki. Az IGT növeli a keringő glükóz mennyiségét, ami növeli a plazma ozmolaritását[22. Ez növelheti a plazma ozmotikus nyomását, majd a szomjúságérzetet, ami folyadékbevitelt eredményez [23]. Ezenkívül az elhízást a renin-angiotenzin rendszer aktiválása is jellemzi, amely szintén szerepet játszik a T2DM kialakulásában. A jelenlegi vizsgálat kimutatta, hogy a prediabéteszes állatok 24 órával megnövelték a folyadékbevitelt és a vizelet mennyiségét. Ez az elhízás és az inzulinrezisztencia következtében megnövekedett angiotenzin II-szintnek tudható be. Érdekes módon a prediabéteszes állatok vizeletkibocsátása is megnövekedett, ami ellentmond a RAS aktiváció jól ismert hatásának. Kezelés OA-val (oleanolsav), diétás beavatkozással és anélkül, a folyadékbevitel és a vizeletkibocsátás progresszív helyreállását mutatta, ami a 12. héten még kifejezettebb volt. Ez arra utalhat, hogy az OA (oleanolsav)helyreállíthatja az antidiuretikus hormon szabályozását. Ezt a mechanizmust azonban még ki kell alakítani.

A RAS aktiválódását tovább erősítette a plazma aldoszteron emelkedett koncentrációja a prediabéteszes állatokban. Az aldoszteron a nefronba történő nátrium-visszaszívódás fokozása mellett a perifériás inzulinérzékenységet is csökkenti, ami IGT-hez vezet, ami a CKD kockázati tényezője. (krónikus vesebetegségek)[24]. Érdekes módon ez a tanulmány azt találta, hogy a prediabéteszes állatok plazma nátriumkoncentrációja normális volt, de a vizelet nátriumkoncentrációja csökkent. Ez arra utalhat, hogy a plazma aldoszteronszintjének növekedése hatással volt a nátrium nefronból történő visszaszívására, ami a vizelet nátriumszintjének csökkenését vagy a nátrium frakcionált kiválasztódásának csökkenését (FENa) eredményezte[25]. OA (oleanolsav)diétás beavatkozás jelenlétében és hiányában végzett kezelés a plazma aldoszteronkoncentrációjának csökkenését és a nátriumkiválasztás javulását eredményezte. Ezek az eredmények megegyeznek a korábbi tanulmányokkal, amelyek arról számoltak be, hogy az OA (oleanolsav)csökkenti az átlagos artériás nyomást a rennin-angiotenzin-aldoszteron rendszer (RAAS) deaktiválásával és a nátrium-reabszorpció csökkentésével [26]. A RAAS normalizálódása nyilvánvaló volt a plazma aldoszteron és a vizelet nátriumkoncentrációjának csökkenésén [Nat][27]. Ez azonban a szukcinát redukciójának is tulajdonítható, amely a citromsavciklus terméke, amely az IGT során megemelkedik. [28I. A szukcinátról beszámoltak arról, hogy serkenti a renin felszabadulását a macula densa sejtekből, ami elindítja azt a jelátvitelt, amely a RAAS aktiválását eredményezi a G-protein receptor 91 (GPR91) metabolitjával való kölcsönhatás révén [29]. Az OA antihiperglikémiás hatása a glikolízishez szükséges glükóz szubsztrát csökkenését is eredményezhette, ami azután a piruvát alacsony termeléséhez vezetett, amely belép a citromsav körbe és szukcinátot termel [30J. Ezenkívül a diétás beavatkozás fontos szerepet játszhatott a glükózuria, a szukcináttermelés és a renin szekréció csökkentésében a szénhidrát metabolitok csökkentésén keresztül [31].

Fiziológiás körülmények között a plazma aldoszteronszintjének növekedése fokozza a tubuláris Nat reabszorpcióját Nat/Kf ATPáz csatornákon keresztül, ami K-kiválasztást eredményez [32. Az inzulinrezisztencia azonban összefüggésbe hozható a máj ketonjainak termelésével, ami növeli a vér pH-értékét és a hidrogénion (H) kiválasztását a nátrium-hidrogén cserélőn keresztül a kexcretionig [33I. Érdekes módon ez a tanulmány azt figyelte meg, hogy a nátrium-visszaszívás növekedése összefüggésbe hozható elhanyagolható káliumkiválasztás az OA-n (oleanolsav)- kezelt állatok. Ez a nátrium-hidrogén antiport stimulációjának tulajdonítható a ketoacidózis termelés miatti vér pH-növekedése következtében [6]. Ez magyarázhatja a nátrium-reabszorpció növekedését, kifejezett káliumkiválasztás nélkül [34j. Ezek a megfigyelések megegyeztek a korábbi tanulmányok eredményeivel, amelyek arról számoltak be, hogy az OA (oleanolsav)növeli a nátrium kiválasztását, és ezáltal csökkenti a szisztémás vérnyomást [6]. Ennek a tanulmánynak az eredményei azonban azt sugallják, hogy az OA a nátrium-hidrogén-antiport-kiválasztás révén segíti elő a nátrium-kiválasztást, nem pedig a nátrium-kálium-ATPázok [6]. Korábbi tanulmányok arról is beszámoltak, hogy a több növényi eredetű fehérjét tartalmazó étrend javítja a metabolikus acidózist és lelassítja a diabéteszes nephropathia progresszióját [33I. Ez arra is utalhat, hogy az étrendi beavatkozás hozzájárulhatott a nátriumkiválasztás javulásához.

A mérsékelt hiperglikémia inprediabetesfüggetlenül részt vesz a mitokondriális diszfunkcióban, és fokozza a reagáló oxigénfajták (ROS) termelődését, ami ezt követően oxidatív stresszhez vezet [35I. Korábbi tanulmányok nem mutatták ki, hogy a vese oxidatív stressze fokozott mértékben járul hozzávesesérülések. a glomeruláris bazális membrán integritásának elvesztése és proteinuria [36]. Valójában ez a tanulmány kimutatta, hogy a prediabéteszes állatoknál megnövekedett, megemelkedett a vese lipidperoxidációjavesesérülésmolekula-1(KIM-1) vizelet podocinja, és megnövekedett albumin-kreatinin arány. Ez a glükóz magas beáramlásának tudható bevesea perifériás inzulinrezisztencia miatt, amely ROS és előrehaladott glikozilációs végtermékek (AGE) képződését eredményezheti [371. A hiperglikémia a nikotinamid-adenin-dinukleotid-foszfát-hidrogén (NADPH) oxidáz enzim aktiválásához vezet, amely katalizálja a szuperoxid (O2) termelődését a vesesejtekből [37I. Ezenkívül az oxidatív stressz és a hiperglikémia szorosan összefügg a fejlett glikációs végtermékek (AGE-k) képződésével a glükóz fehérjével, zsírokkal vagy nukleinsavakkal való nem enzimatikus reakciója révén [38I. A ROS összefüggésben áll a sejt-sejt és a sejt-mátrix adhéziós kapcsolatok megszakadásával, ami az endothelsejtek leválásához vezet az alapmembránról, ami a KIM{8}} vérbe kerülését eredményezi [39].

A ROS és az AGE a glomeruláris alapmembrán podocita rétegének károsodásával jár [40]. Ez tovább veszélyeztetheti a nefron egyik elsődleges funkcióját, amely a fehérjék proteinuriához vezető szűrésének megakadályozása. Az OA adminisztrációja azonban (oleanolsav)diétával és anélkül a lipidperoxidáció csökkenését, a KIM-1 csökkenését, a vizelet podocinszintjének csökkenését és az albumin-kreatinin arány csökkenését eredményezte. Ez a renális antioxidáns enzimek szuperoxid-diszmutáz (SOD) és glutation-peroxidáz (GPx) jelentős javulásának tudható be, amelyet az OA-val kezelt csoportokban figyeltek meg. A szuperoxidot (O2) a SOD semlegesíti, és hidrogén-peroxidot (HzO2) termel[41. Míg a HO2 tovább alakul nem toxikus HO-vá és O-vá, a GPx hatására [42. Ezek az eredmények összefüggenek Gamede és munkatársai (2019) megállapításaival, amelyek szerint az OA (oleanolsav)javítja az antioxidánsok elérhetőségét a diéta által kiváltott prediabéteszes állatokban [21. Ez tovább magyarázhatja a csökkenésétvesesérülést és podocita károsodást észleltek az OA-t felolvasó állatoknál (oleanolsav)diétás beavatkozással és anélkül. A glomeruláris alapmembrán integritásának helyreállítása a podocitaveszteség megelőzésével az albumin-kreatinin arány csökkenésének tulajdonítható az OA-n. (oleanolsav)- kezelt állatok.

Vesehiperfiltrációt (megnövekedett CRC) újonnan diagnosztizált T2DM-betegeknél is jelentettek, és kimutatták, hogy ez megelőzi a vesefunkció hanyatlását[43]. A hiperinzulinémiával járó károsodott glükóz homeosztázis szerepet játszik a CRC emelkedésében, amelyről ismert, hogy megelőzi a glomeruláris károsodást [44]. A jelenlegi diéta által kiváltott prediabéteszes patkánymodellről korábban beszámoltak olyan szív- és érrendszeri szövődményekről, mint például a szisztémás magas vérnyomás. Ezenkívül a jelenlegi tanulmány azt is megfigyelte, hogy a prediabéteszes csoportban megnövekedett a CRC. A CRC növekedése a glomeruláris filtráció emelkedését jelzi, amely különféle mechanizmusoknak tudható be, mint például a megemelkedett plazma inzulin és a vese AGE következtében kialakuló afferens glomeruláris vazo-tágulás [45I. Kezelés OA-val (oleanolsav)a CRC helyreállítását eredményezte, ami a sikeres glikémiás kontrollnak tulajdonítható, ami a plazma inzulin és a vese AGE csökkenését eredményezte. Ezenkívül az OA-ról korábban beszámoltak arról, hogy csökkenti a hiperinzulinémiát és javítja a glükóz homeosztázist [6]. A megnövekedett GFR-ben szenvedő betegeknek gyakran javasolják a nátriumszegény étrendet, és ezt az egyik módszernek tekintik a meghosszabbításra.vesetúlélés [6]. Ez a tanulmány azt is megállapította, hogy az OA (oleanolsav) diétás beavatkozással és anélkül is erősebb hatást gyakorol néhány kockázati tényezőrevesebetegségmint a KIM{0}} és a GFR a standard metformin gyógyszerhez képest.

A metformin alkalmazása nem javasolt a krónikus vesebetegség előrehaladott stádiumában (krónikus vesebetegségek)[46. Ennek oka a metforminhoz kapcsolódó ellenjavallatok, például a tejsavas acidózis, amely veseelégtelenséget okozhat[47]. Ebben a vizsgálatban azt találtuk, hogy a metformin diétás beavatkozás nélküli adagolása nincs jótékony hatással olyan tényezőkre, mint a vesefolyadék-kezelés, az eGFR, az elektrolitkezelés és a renális oxidatív stressz diéta által kiváltott prediabéteszes állatok. Ha azonban a metformint diétás beavatkozással kombinálták, a hatékonyság javult. Ez egybevág azokkal a korábbi tanulmányokkal, amelyek azt sugallják, hogy a metformin függ az életmódbeli változásoktól, például az étrend és a testmozgás változásaitól.

Javítja a veseműködést-cistanche

6. Következtetések és ajánlások

A tanulmány eredményei arra utalnak, hogy az OA beadása (oleanolsav)diétás beavatkozás jelenlétében és hiányában egyaránt javítja a CKD-hez kapcsolódó markereket (krónikus vesebetegségek), Ez nyilvánvaló volt az olyan paraméterek megfigyelt változásában, mint a vízbevitel, a vizeletkibocsátás és a vese elektrolitkezelés. A vese elektrolit- és vízkezelésének javulása tovább magyarázza a szisztémás vérnyomás csökkenését, amelyet kezeletlen prediabéteszes patkányoknál figyeltek meg. Továbbá ez a tanulmány arról is beszámol, hogy az OA beadása (oleanolsav)ban benprediabetesmegakadályozza a vese oxidatív stresszét,vesesérülések és az azt követő proteinuria. Összességében a tanulmány eredményei azt sugallják, hogy ez a növényi eredetű triterpén alternatív kezelésként használható, mivel renoprotektív tulajdonságokkal rendelkezik az étrend által kiváltottprediabetesAzonban további tanulmányokat kell végezni annak a pontos mechanizmusának vizsgálatára, amellyel ez a vegyület kifejti hatását.

7. A tanulmány korlátai

A GSH és GSSG, a fehérje oxidáció, a teljes antioxidáns kapacitás és az antioxidáns gének génexpressziója elemezhető, hogy felmérjük a redox egyensúlyhiányt, amelyet költségvetési korlátok miatt nem lehetett elemezni. Ezenkívül ez a tanulmány nem tudta elemezni az összes elektrolitot, amely részt vehet a vesefunkció megváltoztatásában.

Hivatkozások

[1] MCThomas, ME.Cooper, P.Zimmet, Changing epidemiology of 2. típuscukorbetegségmellitusz és kapcsolódókrónikusvesebetegség, Nat. Rev.Nephrol.12(2)(2016)73-81.

[2] M. May, C. Schindler, Klinikailag és farmakológiailag releváns interakciók antidiabetikus gyógyszerek Ther. Adv.Endocrinol. Metab.7 (2) (2016)69-83.

[3] SB Ghaderan, F.Hayatl, S.Shayanpour, S.SB. Mousavi,Cukorbetegségés végstádiumú vesebetegség; áttekintő cikk az új fogalmakról, J. Ren.Inj.Prev.4(2)(2015)28.

[4] C. Mora-Fernandez, V. Dominguez-PImentel, MM Fuentes, JL. Gomez, A. Martfnez-Caselao. J., EF. Navaho-Gonzalez,CukorbetegségvesebetegségA fiziológiától a terápiáig, J. Physlol.592 (18) (2014)3997-4012.

[5] L. Rato, M. Alves T. Dlas, G. Lopes, J. Cavaco, S. Socorro, P. Olveilra, A Highenergdets prediabéteszes állapotot idézhet elő, megváltoztatva a here glikolitikus metabolikus profilját és a hím szaporodási paramétereket, Andrology 1 (3) (2013)495-504.

[6]L. Mabuza, M. Gamede, S. Maikoo, LBooysen, P. Ngubane, A. Khathi, Effects of a ruthenium Schiff base complex on glucose homeostasis in diet-Induced pre-diabetic rats, Molecules 23 (7) (2018)1721.

[7] ML.B.Duran-Salgado, AF.Rubio-Guera, Diabetikus nephropathia és gyulladás, Worl J.Cukorbetegség5(3) (2014)393.

[8] N.Rabbanl, PJ Thornalley, Advanced glycation end products in the pathogenesiskrónikusvesebetegség. VeseInt. 93 (2018) 803-813.

[9] A. Chagnac, B. Zingemman, B. Rozen-Zv, M. Herman-Edelstein, Consequences of glomeruláris hiperfiltráció: a fizikai erők szerepe a patogenezisbenkrónikusvesebetegségban bencukorbetegségés elhízás, Nephron 143(1)(2019)38-42.

[10] C. Reclo, L. Lazaro, A. Ogulza, L. Lopez-Sanz, S. Bernal, J. Blanco, J. Egldo, C. Gomez-Guerrero, Suppressor of cytokin signaling1 peptidomimetic limits progression of diabetic nephropathia, J. Am. Tehát Nephrol.28(2)(2017) 575-585.