Változások a fehérjetranszlációban és a karbonsavkatabolikus folyamatokban cukorbeteg vesebetegségben Ⅱ

3. Eredmények

3.1. Emberi alanyok

Veseszövetminták 18 alany DKD és 9 referencia alany nélkülDKDmegszerezték és tanulmányozták (1. táblázat). Az átlagos életkor a szövetfelvételkor 55.0 év volt a DKD-ben szenvedő alanyoknál és 50,0 a referencia nefrektómiás alanyoknál. A DKD-s alanyok 61,1%-a nő és 27,8%-a fekete volt. A legtöbb DKD alany göbös glomerulosclerosisban szenvedett, és körülbelül a felüknél a podocita lábfolyamatok 80%-nál nagyobb mértékben ürültek ki. Nephrosis proteinuriát figyeltek meg a DKD alanyok 55,6%-ánál. Az alapvonal eGFR 63,2 ± 26,2 ml/perc volt. Az alanyok átlagosan 14,5 ml/perc/év eGFR-t veszítettek a követési idő alatt, ami átlagosan 47,7 hónap volt. Molekuláris összehasonlító csoportként kilenc referencia nefrektómiás mintát kaptunk. Ezeket a mintákat egy vak értékeltevesepatológus(CP) és nem mutatottszövettani bizonyítékspecifikuscukorbeteg vesebetegség; azonban a klinikai ésdemográfiai adatokmint a rassz, a proteinuria és az eGFR nem álltak rendelkezésre.

ÚJ GYÓGYNÖVÉNYEK FOR DIABETIKUS VESEBETEGSÉG

3.2. Differenciális génexpresszió és útelemzés a diabéteszes humán glomerulusban és a proximális tubulusban

Differenciális génexpressziós és útvonal-analíziseket végeztünk a DKD és a referencia csoportban. Különbözően expresszált géneket (DEG-eket) azonosítottak mindkét csoport lézeres mikrodisszekált glomerulusaiban és proximális tubulusaiban (S1 kiegészítő táblázat; https://doi.org/10.6084/m9.figshare.14450190.v1, elérve: 23 2022. január). Az ismert glomeruláris markerek csökkentek a DKD-ben, beleértve a nephrint (NPHS1, 3-szeres csökkenés, p=1,0 × 10-4 ) és a foszfolipáz C epsilon 1-et (PLCE1, 2.{18} }szeres csökkenés, p=3.3 × 10−4 ). Hasonlóképpen a proximális tubulus markerek, beleértve a 3-as nátrium-hidrogén csere kofaktort (PDZK1, 4.{27}}szeres csökkenés, p=1.9 × 10-5 ) és a nátrium-foszfát kotranszportert (SLC34A1, 3.2-szeres csökkenés, p=8.1 × 10-4 ) a DKD-ben alárendeltek voltak, valószínűleg krónikus sérülésre utal.

A DKD és a referencia minták humán glomerulusában és proximális tubulusában transzkriptogram hálózati elemzéssel vizsgáltuk az útvonal gazdagodását. Ez az elemzés magában foglalja a differenciális expresszió nagyságát, a hatás irányát, a szignifikancia szintjét és a fehérjét kódoló gének közelségét az x tengely mentén az ismert fehérje-fehérje kölcsönhatások szerint. A glomerulus leggazdagabb útvonala a GTPáz által közvetített jelátvitel (p=4,3 × 10-6 ) és a G-protein-kapcsolt receptor (GPCR) ligandumkötése (p=8,1 × 10-6 ) volt. 6 ). A proximális tubulusban a felső útvonalak a rodopszinszerű receptorok (p=4.1 × 10-6 ) és a szaglás jelátvitel (p=1.9 × 10-4 ) voltak. Érdekes módon a riboszóma (transzlációs) útvonal mind a glomerulusban, mind a proximális tubulusban gazdagodott (1. ábra). A differenciálisan szabályozott útvonalak teljes listája az S2 kiegészítő táblázatban található; (https://doi.org/10.6084/m9.figshare.14450196.v1, Hozzáférés: 2022. január 23.)

A DKD-mintákban dúsított transzlációs útvonalak hatásirányának meghatározásához a KEGG-ekvivalens útvonal, a hsa03010 riboszóma útvonal-nézetét mind a glomerulusra, mind a proximális tubulusra összeállítottuk. Az aminosavak és származékok transzlációjában és metabolizmusában lévő gének A GO útvonalak összhangban vannak a riboszóma KEGG útvonalával, 186 génből 130, illetve 87 átfedéssel. A riboszómális gének általános expressziója a DKD alanyok glomerulusában és proximális tubulusaiban is felfelé szabályozott (2. ábra).

3.3. A fordítás megváltozott a cukorbeteg egérvesében

Annak érdekében, hogy jobban megértsük az útvonal dúsításának jelentőségét a humán DKD biopsziás mintákban, lekérdeztük a db egér differenciális expresszióját, összehasonlítva a háttér kontrolltörzzsel, tömeges RNS szekvenálás segítségével. A diabéteszes egerek és a kontrolltörzs közötti útvonalelemzés (9 hetes korban) azt mutatta, hogy a legjobban dúsított útvonal a cGMP-protein kináz G jelátvitel volt (p=2.0 × 10−) 6) (3A. ábra). A dúsított utak között szerepelt a transzlációval kapcsolatos riboszóma biogenezis (p=0.047), amely "átfedésben volt" a humán DKD útvonal dúsítási adatkészletével. A transzlációt szabályozó fehérjék megnövekedett transzkripciójának és expressziójának funkcionális következményeinek közvetlen vizsgálatához db és háttér kontroll egerek veséin poliriboszómális profilozást végeztünk. Ez a vizsgálat a transzláció általános szintjét számszerűsíti a riboszómák mRNS-elfoglaltsága alapján. A poliriboszóma-profilok kimutatták, hogy a poliszóma-monoszóma-görbe alatti terület aránya megnövekedett cukorbeteg egerekben (9,76) a kontrollegerekhez képest (7,73, p < 0,05 az arányok különbségére), ami összhangban van a megnövekedett globális transzlációvalvese cukorbetegségben(3B. ábra).

Wecistanche támogató szolgálata

E-mail:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel.:+86 15292862950