Gyulladáscsökkentő alapelvek a Pinus Taiwanensis Hayata tűiből és az In Silico potenciális öregedésgátló hatásukról Ⅱ

A tűleveleket metanollal extraháltuk, majd hexánnal, etil-dal megosztottukacetáttal és vízzel, hogy három oldható réteget kapjunk. Agyulladáscsökkentőtöredék, aetil-acetátos réteg, folyamatos hagyományos kromatográfiának vetettük alágrafikai technika kombinációját, és öt le nem írt vegyületet jellemeztünkköztük két új lignán, 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihidroxi-70 -(4-hidroxifenil)propán-80 -iloxi]benzoesav (1), 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihidroxi-70 -(4-hidroxi-3-metoxifenil)-propán-80 -il-oxi]-2-hidroxi-benzoesav (2), egy új diterpenoid, (13E,12R)-12 -hidroxiagatikussav (3), egy monoterpenoid, 5-izopropil-3-oxociklohex-1-én-1-karbonsav (4), és egyfenilpropán, sztiraxinolsav (5). Ezen új vegyületek kémiai szerkezeteAz NMR spektrális megvilágítás és az MS spektrum segítségével készültekmetrikus elemzés. Ezenkívül hetvenkét ismert vegyület, amelyek egy szteroidot tartalmaznak, -szitoszterin (6); egy szeszkviterpenoid, (-)-oplopan-4-egy-10- -O- -D-glükozid (7); egykumarin, umbelliferon (8); egyalkaloid, indol-3-aldehid (9); négy diterpenoid,

Kattintson ide az öregedésgátló Cistanche krém beszerzéséhez

3-metoxifenil)-1-propanon (64), 3-hidroxi-1-(4-hidroxi-fenil)-1-propanon (65),2-(4-hidroxi-fenil)-ecetsav (66), fenil-ecetsav (67), vanillinsav (68), benzoesavsav (69), vanillin (70), p-hidroxi-acetofenon (71), nátrium-szalicilát (72), vaníliasav4-O- -L-ramnozid (73), ford- ferulinsav (74), nátriump-kumarát (75), p-kumarsav (76), ford-metilp-kumarát (77), illetve vizsgálatával azonosítottákfizikai és spektroszkópiai adataikat a korábban publikáltakkal (az ismert hivatkozások).A vegyületeket a Kiegészítő anyagok B. függeléke tartalmazza).

3.1. Az 1-5. vegyületek szerkezeti feltárása

Összetett1 optikailag aktív színtelen szirupként izoláltuk, és a molekulárisképletet C-nek rendeltük hozzá16H16O6 HR-ESI-MS analízissel ([M− H]−, m/z 303,0855, számított: 303,0855;C számára16H15O6, 303,0869, S1 ábra). Az IR-spektrum egy hidroxilcsoport jelenlétét jelzi(3412 cm−1 ) és egy konjugált karbonilcsoport (1598 cm−1 ). A1H-NMR adatok (S2 ábra)kettőnek mutatta a jeleketbek-szubsztituált aromás csoportok [δH 6.72 (2H, d, J = 8,4 Hz,H-30 , -50 ), 6.86 (2H, d, J = 8,8 Hz, H-2, -6), 7,24 (2H, d,J = 8,4 Hz, H-20 , -60 ), és 7,83(2H, d, J = 8,8 Hz, H-3, -5)], két oxigénes metin [δH 4.48 (1H, m, H-80 ), és 4,85(1H, d, J = 5,6 Hz, H-70 )] és két metin [δH 3,81 (1H, dd,J {{0}}.0, 4,0 Hz, H-90 a), és 3.86 (1H, dd,J {{0}},0, 5,6 Hz, H-90 b)]. A13C és DEPT NMR spektrumok (S3 ábra)nak,-nek1 tizenhat szénatomot mutatott, amelyek egy metiléncsoportnak felelnek meg, kettő pedig oxigénezettszénatom, tizenkét aromás szénatom és egy konjugált karbonilcsoport (táblázat).1). A2 J- és3 J- HMBC korrelációk H-2, -6 és C-1 és 4 között; H-3-től 5-től C-1-ig és 7-ig; H-20, 60 nak nekC-40 és 70 ; H-70 C-80 és 90 ; és H-80 -ben C-1-ra figyeltek mega HMBC spektruma1 (S4 ábra). Ezenkívül egy nagy csatolási állandó H-70 és H-80 (J = 5.6 Hz) támogatja a relatív konfigurációt1 itt: C-70 /C-80 mintthreo[44]. A C-7 abszolút konfigurációi0 és C-80 nak,-nek1 elektronikus körlevéllel határozták megdikroizmus (ECD) elemzés. A pozitív Cotton-hatás 230 nm-en (∆ε plusz 0.17) egy 8-ast mutatott kiS konfiguráció ehhez1, a megjelent szakirodalom szerint [37,38] és ezért 70 R is volteltökélt. Más 2D spektrumok (S5-S7 ábra) lehetővé tették a proton és a teljes hozzárendelést.szén jelek. Ennek megfelelően a szerkezet a1 a következőként lett hozzárendelve: 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihidroxi-7 0 -(4-hidroxifenil)propán-80 ábrán látható -il-oxi]-benzoesav1. 

A molekuláris képlet2 C-nek jelölték ki17H18O8 HR-ESI-MS alapjánanalitikai adatok (m/z 349.0936 [M − H]−, S8 ábra). Az abszorpció az IR spektrumban(3425 és 1541 cm−1 ) jelezte a hidroxil- és konjugált karbonilcsoportokat,illetőleg. Az NMR-spektrumok összehasonlítása1 és2, megfigyelhette, hogy őkkülönböző aromás részekkel rendelkeztek. Két ABX-kapcsolt aromás gyűrű és egymetoxicsoportot lehetett kimutatni a1H- (S9 ábra) és13C-NMR (S10. ábra) adatoknak,-nek2 (Asztal1), és azt a vegyületet javasolta2 rendelkezett két háromszor helyettesített helyettbek- diszubsztituált aromás csoportok. A szignifikáns HMBC korrelációk (S11 ábra) aH-3 - C-1, C-5 és C-7; H-6-ból C-4-be; az OCH-tól3-30 C-30 ; H-60 C-40 ésC-70; H-70 C-10 , C-20 , C-80 és 90 ; H-80 a C-1, illetve azt állapította mega szerkezete2 szintén neolign csontváz volt. Egy nagy tengelykapcsoló kombinációjávalállandó (J7,8 = 5,2 Hz) és pozitív pamut hatás 230 nm-en (∆ε plusz 1,14), az abszolútkonfigurációja2 mint ahárom- és (70 R,80 S)-forma, ugyanaz, mint1 [44,45]. EgyébA 2D spektrumok (S12-S14 ábra) lehetővé tették a proton- és szénjelek teljes hozzárendelését.Ezek a leletek zárták le a szerkezet felépítését2 mint 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -dihidroxi-70 -(4-hidroxi-3-metoxifenil)propán-80 -il-oxi]-2-hidroxi-benzoesav (ábra1). 

Összetett3 színtelen por formájában kaptuk, és molekulaképlete a következő voltC-nek van kijelölve20H30O5 HR-ESI-MS analitikai adatok alapján (m/z 349.2024 [M − H]−, S15 ábra). Összetett3 abszorpciós csúcsokat mutatott 3450 (OH) és 1648 (karbonsav)sav) cm−1 IR spektrumában. Bizonyította a13C-NMR spektrum (S16. ábra) inamelynél két karboxil funkciós csoportot figyeltek megδC 167,2 (C-15) és 181,5 (C-19). Ban benannak1H-NMR (S17. ábra), a rezonanciák atδH 4,03 (1H, dd,J = 9,2, 2,8 Hz, H-12) ésδC 75,5 (C-12) egy másodlagos alkoholcsoport jelenlétét jelezte. A terminális metiléncsoportot a protonrezonanciák miatt lehetett létrehozniδH 4,53 (1H, s, H-17a) és4,91 (1H, s, H-17b), és a szénjelek atδC 106,9 (C-17), illetve 150,2 (C-8).Két metilcsoport atδH 0,63 (3H, s, CH3-20) és 1,21 (3H, s, CH3-18) csatlakoztak a következőhöza kvaterner szénatomok (C-10 és C-4), amelyeket a HMBC korreláció bizonyít (S18. ábra).A karboxilcsoport árnyékoló hatása C-4-nál a CH felfelé tolását eredményezte3-20 (δH 0.63), ami azt sugallja- konfiguráció [46]. Ezenkívül a H-17a (δH 4.53) jelent meg a felvidéki régióban, ami a 12R konfiguráció [47]. A HMBC-jébenspektrum, a H-12 és a C-9 közötti korrelációk, C-14 és C-16; H-17-ból C-7-be és C-9-be;CH3-16 - C-12 és C-14; CH3-18 - C-3, C-4 és C-19; CH3-20 - C-1, C-5,C-9 és C-10 megszerkesztette a síkbeli szerkezetét3 amint arról korábban beszámoltunka 12-hidroxi-agatsav [46]. Azonban a C-13 konfigurációja3 határozott voltmintE a NOESY analitikai adatokkal (S19 ábra), amely a NOE hatásokat jelenítette meg közöttH-5/H-9, H-5/H-18 és H-12/H-14. Ezenkívül a NOE H-14 és CH között3-16, amelyet 12-hidroxi-agatsavban kell rögzíteni [46], nem észlelték a következőben3. Egyéb2D spektrumok (S20–S21 ábra) biztosította a proton- és szénjelek teljes hozzárendelését.Végső soron a szerkezete3 néven jött létre (13E,12R)-12-hidroxi-agatsav mintlátható (ábra1).

A HR-ESI-MS spektruma4 kiállított egy [M− H]− ioncsúcs atm/z 181.0855 (S22 ábra), összhangban van a C pszeudomolekuláris képletével10H13O3. A felszívódáscsúcsa 3456 és 1635 cm-1 IR spektrumában hidroxilcsoport és konjugált karbonilcsoport volt láthatócsoportok, ill. Két metin proton atδH 2,09 (1H, m, H-5) és 6,32 (1H, dd,J = 2.4, 1,2 Hz, H-2), két metiléncsoport atδH 1.84 (1H, m, H-4a), 2.02 (1H, m, H-4b), 2.50 (1H, ddd,J = 19,2, 9,2, 4,8, 2,4 Hz, H-6a) és 2,70 (1H, dddd,J = 19,2, 5,2, 5,2, 1,2 Hz,H-6b), és egy izopropil-protonkészlet atδH 0.88 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-9), 0.98 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-10) és 2,31 (1H, hept,J = 6.8 Hz, H-8) jelent meg a1H-NMR spektrumnak,-nek4 (S23 ábra). Ezenkívül egy konjugált karbonil szénatom atδC 174,8 (C-7), és egykarboxil szén atδC 205,7 (C-3) volt megfigyelhető benne13C- és DEPT NMR spektrumok(S24 ábra). A megfigyelt HMBC korrelációk (S25 ábra) H-2-tól C-7-ig; H-4-tól igC-3; H-6-ból C-1, C-2 és C-5; CH3-9 - C-5 és CH3-10; CH3-10 - C-8,illetve felépítette a szerkezetét4 mint 5-izopropil-3-oxociklohex-1-én-1-karbonsavsav (ábra1). Más 2D spektrumok (S26-S28 ábra) biztosították a proton teljes hozzárendelésétés szén-jelek. A C-5 sztereokémiája azonban meghatározatlan maradt.

Összetett5 C molekulaképlettel rendelkezett11H14O5 deprotonáltból határozzuk megmolekuláris ion csúcs negatív módban HR-ESI-MS analízis (m/z 225.0767 [M − H]−, ábraS29). IR spektrumában a hidroxil (3421 cm−1 ) és karboxil (1572 cm−1 ) funkciókat lehetett észlelni. A1A H-NMR-spektrum (S30. ábra) két nagy hatótávolságú képet mutatott kiaromás protonok kapcsolása atδH 6.86 (1H, d, J = 2,4 Hz, H-4) és 7,31 (1H, d,J = 2,4 Hz, H-6), egy metoxicsoport atδH 3.56 (2H, t, J = 6,8 Hz, H-9), és egy készletpropanol protonok atδH 1,82 (2H, tt,J {{0}},0, 6,8 Hz, H-8), 2,61 (2H, t,J {{0}},0 Hz, H-7) és 3,56(2H, t, J = 6,8 Hz, H-9). Ezen túlmenően, egy karboxilcsoport találhatóδC 176,2 (C-10) hüvelykannak13C-NMR spektrum (S31. ábra). A sík szerkezete5 szignifikáns állapította megAz OCH HMBC korrelációi (S32 ábra).3-3 - C-3; H-6 - C-2, C-4, C-7 és C-10; H-7C-4, C-5 és C-8; H-9 - C-7, illetve C-8. Egyéb 2D spektrumok (S33-S35 ábra)biztosította a proton- és szénjelek teljes hozzárendelését. A fenti bizonyítékok arra utalnaka szerkezete5 mint 2-hidroxi-5-(3-hidroxipropil)-3-metoxibenzoesav (ábra1), amelyről a korábbi szintetikus irodalomban sztiraxinolsavként számoltak be [48]. Ennek ellenére a jelen kutatás az első jelentés5 természetes forrásokból.

3.2. Gyulladáscsökkentő tevékenység

A gyulladás a baktériumok által stimulált egyik fő önvédelmi mechanizmus,vírus, sebek vagy egyéb környezeti tényezők. Ez az immunrendszer első válaszafertőzés és irritáció elleni rendszer. A neutrofilek egy bőséges fajtához tartoznakmakrofágok, és jelentős szerepet játszanak a gyulladásban, és általában az első limfómsejteket, hogy elérjék a fertőzött régiót [49]. A neutrofilek egy sor citotoxint választanak ki, mint plszuperoxid anion és elasztáz válaszul az immunrendszer aktiválására [50]. Ban benAz elmúlt években kimutatták, hogy különböző emberi betegségek kapcsolatban állnak a neutrofilekkeltúlzott kifejezés [51–55]. Megállapították a gyulladás és a rák közötti kapcsolatot, és a szerzők rámutattak, hogy a rákos sejtek képződése közvetlenül összefügggyulladásra [49]. Ezért érdemes új gyulladáscsökkentő vegyületeket használnitovábbi tanulmányok a rák kezeléséről. Negyvenhárom izolált vegyületet értékeltünk kiaz emberi neutrofilek szuperoxid aniontermelésének és elasztáz felszabadulásának gátlásaválaszul az fMLF/CB-re [56] (lásd Kiegészítő anyagok, S2 táblázat). A jelentőségteljeshibitorlási eredmények (táblázat2) csak ezt bizonyította45, 47, 48, 49, és50 (Ábra2) Megjelenika szuperoxid anion képződésének jelentős gátlása, IC-vel50 től kezdve értékek3.3 ± 0.9 nak nek7.7 ± 0.9 µM összehasonlítva az LY294002 pozitív kontrollal (IC50 1.1 ± 0.3 µM). Ráadásul,48, 50, és51 (Ábra2) kimutatta az elasztáz felszabadulás jelentős gátlásátIC-vel50 értékek 5,3-tól kezdve± 0.2–8.3± 0.8 µM a pozitívhoz képestvezérlő LY294002 (IC50 3.2 ± 1.0 µM) (Táblázat2). Vegyületek48 és50 mindkettőt megjelenítettegátolja a szuperoxid anion képződését és az elasztáz felszabadulását, jelezve ezek többszörösétgyulladásgátló bioaktivitások. A tűkP. morrisonicolaarról számoltak begyulladáscsökkentő hatás a RAW 264.7 makrofágokban [13]. A szerzők ezt javasoltákepikatekin ésp-ben azonosított kumársavP. morrisonicolalehetnek a hatóanyagok.Jelen kutatásban az összes hatóanyag hasonló flavonvázat tartalmazotthogy az epikatekin és ap-coumaroil csoport is megfigyelhető volt49, 50, és51. Ez azt jelzi, hogy a flflavonoid illp- kumaroil funkciós csoportok hozzájárulhatnaka gyulladáscsökkentő bioaktivitást a jelen tanulmányban. Ezek a biológiai vizsgálati eredmények arra utalnakA flavonoidok kulcsszerepet játszanakPinusfajok gyulladásgátló bioaktivitása érdekében.

2. táblázat.A tisztított vegyületek gátló hatása a szuperoxid anionok képződésére és az elasztáz felszabadulásrahumán neutrofilek által fMLF/CB-re adott válaszként.

2. ábra.A gyulladáscsökkentő elvek felépítése45, 47, 48, 49, 50, és51. 

3.3. Molekuláris dokkolási tanulmány

A GH-szint életkorral összefüggő csökkenése a neuroendokrin tünetnek tekinthetőöregedés [57]. Ez a jelenség számos emlősfajnál létezik, például embernél, háziállatnálkutyák és laboratóriumi rágcsálók [57]. Emberben a GH-szint a plazmában csökkenni kezdaz életkorral a teljes fizikai érés után, és az élet évtizedei alatt is folytatódik [57]. A ghrelint a GHSR endogén ligandumaként azonosítják, és a GHSR fő szabályozójaGH szekréció [18,19]. A ghrelin különféle élettani és patofiziológiai folyamatokban vesz résztemberi mechanizmusok, mint például az öregedés [24,25]. Ezenkívül a ghrelinről azt gondolhatják, hogyösszefügg a gyulladáscsökkentő aktivitással. Az immunsejtek aktiválását a ghrelin korlátoztakezelés az NF-gátláson keresztülκB aktiválás és az azt követő MCP-1 szekréció [26]. Egy szintetikus ghrelin analóg növekedési hormont felszabadító peptidet-2 (GHRP-2) jelentettekcsökkenti a gyulladásos faktorokat ízületi gyulladásos patkányokban, és támogatja az immunsejteketa ghrelin receptorok aktiválása közvetítette [27]. Neves és mtsai. is javasoltaa gyulladás szabályozása, mint öregedésgátló beavatkozás [58]. Így szerint agyulladásgátló bioassay kísérleti adatok,45, 47, 48, 49, 50, és51 (Ábra2) mutattaszignifikáns gátló hatásokat, és azért választották ki, hogy meghatározzák kötőképességüket aghrelin receptor. A dokkolás szimulációja előtt a natív ligandum (8QX) szerepel a 6KO5-benA PDB fájl újra dokkolásra került ellenőrzés céljából. A 8QX és 6KO5 közötti kölcsönhatások és aA számított eredmények legjobb pozíciója nagy hasonlóságot és ismételhetőséget mutatott a natív adatokkal(az adatok nem láthatók). Az eredmények a meglévő szimulációs rendszer nagy pontosságát jelzikés támogatta a további számítástechnikát.

Az egyes ligandumok legalacsonyabb kötési energiáját tekintettük a legjobb konformációnak. Aa kötési affinitásokat a táblázat tartalmazza3. A növekedési hormont felszabadító peptid 6 (GHRP-6) voltpozitív kontrollként használják a ghrelin receptor kötőzsebéhez való dokkoláshoz, mint a mikorábbi jelentés. Bár az AutoDock Vina nem peptidek közötti dokkoláshoz készültés fehérjéket, számos sikeres eredményt publikáltak korábbi jelentésekben [59–61]. Ezért ebben a tanulmányban először a GHRP{0}}-t számították ki, hogy meghatározzák aA jelenlegi dokkolómodell és az eredmények jól egybeestek (ábra3A). Összehasonlítva a GHRP-vel-6,kötő energiái49, 50, és51 alacsonyabbak voltak, mint−10,3 kcal/mol (táblázat3). Ezazt sugallja49, 50, és51 dokkolhatna a ghrelin receptor zsebébe hasonló illmég jobb, mint a GHRP-6. Mert49között volt megfigyelhető a hidrogénkötéskét karbonilcsoport (C-4 ésp-kumaroil) és Arg283, C-5 hidroxil és Gln120,C-7 hidroxil és Tyr313, valamint C-40 hidroxil és Cys304. Arg199 alakult ahagyományos hidrogénkötés egy karbonilcsoporttalp- kumaroil. Továbbá,49 voltaz Arg283, Arg102, Asp99, Phe279, Phe312, Leu181 és Pro200 maradékaihoz kapcsolódika ghrelin receptor különböző hatásokon keresztül, mint például aπ- kation,π- anion,π–π T alakú, ésπ-alkil kölcsönhatások. Ezek lehetővé tették a vegyületet49 és fehérjét, hogy stabil komplexet képezzenek(Ábra3B). 50 Asp99, Arg102, Gln120, Arg283, Leu103, Asn305 ésArg199 különböző hidrogénkötéseken keresztül, míg más kölcsönhatások (π- kation,π-anion,π–π T alakú, ésπ-alkil) Asp99, Arg102, Arg283, Phe279, Phe312,Leu181 és Leu210 (ábra3C). 51 hidrogén vagy szén-hidrogén kötéseket is létesítettTyr313, Ser123, Arg283, Arg102 és Asn305, más kölcsönhatásokkal együtt (π- kation,π- anion,π- szigma,π–π T alakú, ésπ-alkil) az Asp99, Arg283, Arg102, Leu181,A ghrelin receptor Phe312 és Pro200 maradékai kimutathatók (ábra3D). Összehasonlítvavegyületek45, 47, és48 val vel49, 50, és51, az előbbi csoport flflavonoiddal rendelkezettcsak a csontvázat, míg az utóbbi csoport cukor- és kumaroil-részeket tartalmazott. Azt közöltéka cukorhoz kapcsolódó kumaroilcsoport kulcsfontosságú volt a ghrelinhez való kötődési affinitás szempontjábólreceptor [34]. A GHSR résszerkezete kölcsönhatásba lép a ghrelin acilsav-részévela ghrelin receptor aktív konfigurációvá történő átalakulását eredményezte [43]. Ezenkívül a GHSR kötőzsebét kettévágja a Glu124 közötti sóhídés Arg283, és ez a régió gazdag hidrofób aminosavakban [43]. A mi szerintadatok, a dokkolási pontszámok49, 50, és51 magasabbak voltak, mint a45, 47, és48, melyikjobb kötési képességet javasolt. A fő szerkezeti jellemzők akumaroilcsoportok, nem pedig cukorrészek, és ezt tovább bizonyíthatja atöbb kumaroil funkciós csoporttal rendelkező vegyület vizsgálata. Ebben a tanulmányban ahatóanyagok49, 50, és51 nemcsak gyulladáscsökkentő bioaktivitással rendelkezik, hanema ghrelin receptor kötődési potenciál. Ez azt jelezte, hogy az állítólagos öregedésgátló hatásaa fenyőtű tea is ezeken a teaghrelin-szerű vegyületeken alapulhat.

4. Konklúziók

Összesen hetvenhét izolátum, amelyek tizenöt le nem írt vegyületet tartalmaztak, tisztítottak.metanolos kivonataiból igazolvaP. taiwanensistűket. Felépítésüket jellemeztékspektroszkópiai és spektrometriai elemzésekkel. Negyvenhárom tisztított vegyület voltmegvizsgálták az övékértgyulladáscsökkentő tevékenységvalami általa szuperoxid anion képződésének gátlásaéselasztáz felszabadulás a neutrofil modellen. Az eredmények arra utalnak45, 47, 48, 49, 50, és51 jelentősséggel rendelkeznekgyulladáscsökkentő potenciálok. További molekuláris dokkolásszámítási eredmények támogatottak49, 50, és51 kötődési affinitást mutat az aktívhoza ghrelin receptor zsebe. Ezért a nyers kivonatok és tisztított összetevőkP. taiwanensispotenciálisan új gyulladáscsökkentő ólomgyógyszerként kifejleszthetők, illHozzávalók.

Kiegészítő anyagok:Az alábbiak elérhetők online a címen, A. függelék: Teljes extrakciós és izolálási eljárások,B. függelék: Hivatkozásokismert vegyületek, S1 táblázat: A tűk előzetes bioaktivitási szűréseP. taiwanensisszuperoxidonaz emberi neutrofilek aniontermelése és elasztáz felszabadulása az fMLF/CB-re válaszul,S2 táblázat: A tisztított vegyületek gátló hatása a szuperoxid anionok képződésére és az elasztázrahumán neutrofilek felszabadulása fMLF/CB hatására, S1-S35 ábra: HRMS és NMR spektrumokúj vegyületek

1–5. A szerző hozzájárulásai:Koncepció, P.-CK és JTCT; Módszertan, P.-CK és T.-LH;Nyomozás, Y.-CL, AMK és M.-LY; Források, S.-YW; Adatkezelés, Y.-CL és G.-HY;Írás – eredeti tervezet előkészítése, P.-CK és Y.-CL; Írás – áttekintés és szerkesztés, P.-CK Összesa szerzők elolvasták és elfogadták a kézirat közzétett változatát.

Finanszírozás:A tanulmányt a tajvani Tudományos és Technológiai Minisztérium (MOST) támogatta. Akutatást részben a Felsőoktatási Sprout Project támogatta, az Oktatási Minisztérium aA National Cheng Kung University (NCKU) Egyetemfejlesztési Központja.

Az intézményi felülvizsgálati bizottság nyilatkozata:A vizsgálat az intézmény jóváhagyásával készültA Chang Gung Memorial Hospital felülvizsgálati bizottsága (IRB No. 201800369A3).Tájékozott beleegyező nyilatkozat:A nyilatkozat kérésre adható.

Adatelérhetőségi nyilatkozat:Az eredeti adatok kérésre beszerezhetők a megfelelő szerzőtől.

Köszönetnyilvánítás:A szerzők köszönetet mondanak a Chang Gung Memorial Hospitalnak (CMRPD1B0281~3,CMRPF1D0442~3, CMRPF 1F0011~3, CMRPF1F0061~3 és BMRP450 a T.-LH)jelen kutatás részleges anyagi támogatása. A szerzők hálásan köszönik az NMR használatáta Nemzeti Cheng Kung Egyetem Műszerközpontjához tartozó berendezések.

Összeférhetetlenség:A szerzők nem nyilatkoznak összeférhetetlenségről.

Hivatkozások

1. Xie, Q.; Liu, Z.; Li, Z. Hat illóolaj kémiai összetétele és antioxidáns aktivitásaPinusKínában őshonos taxonok.Molekulák2015, 20, 9380–9392. [Keresztref] 

2. Kim, KY; Chung, HJ Fenyőcsíra tea és fenyőtű tea ízvegyületei.J. Agric. Food Chem.2000, 48, 1269–1272. [Keresztref] 

3. Park, G.; Paudyal, DP; Hwang, I.; Tripathi, GR; Yang, Y.; Cheong, H. Fermentált tűkivonatok előállítása vörösfenyőből ésfunkcionális jellemzésük.Biotechnol. Bioprocess Eng.2008, 13, 256. [Keresztref]

4. Idžojti´c, M.; Kajba, D.; Franji´c, J. Differenciation of F1 hybridsP. nigraJF Arnold× P. sylvestrisL., P. nigraJF Arnold× P. densifloraSiebold et Zucc.,P. nigraJF Arnold× P. thunbergianaFranco és szülői fajaik tű illékony összetétele szerint.Biochem.Syst. Ecol.2005, 33, 427–439. [Keresztref] 

5. Kim, YS; Shin, DH A fenyőtű illékony összetevői és antibakteriális hatásai (Pinus densiflfloraS. és Z.) kivonatok.Food Microbiol.2005, 22, 37–45. [Keresztref] 

6. Dob, T.; Berramdane, T. Illóolaj összetételePinus halepensisMalom. Algéria három különböző régiójából.J. Essent. Oil Res.2007, 19, 40–43. [Keresztref] 

7. Nam, AM; Tomi, F.; Gibernau, M.; Casanova, J.; Bighelli, A. A tűolaj összetétele és kémiai változékonyságaPinus halepensisKorzikán nő.Chem. Biológiai búvárok.2016, 13, 380–386. [Keresztref] 

8. Sezik, E.; Üstün, O.; Demirci, B.; Ba¸ser, KHC Az illóolajok összetételePinus nigraArnold Törökországból.Török. J. Chem.2010, 34, 313–325.