Az antioxidáns aktivitás változásai az enzim fermentációja során

4. fejezet Az antioxidáns aktivitás változásai az enzim fermentációja során

A gyümölcsök gazdag tápanyagokban vannak, és sokféle fajtában vannak. Az anyagok termelése a fermentáció során összetett és változatos, és sok tanulmány van ezekrőlantioxidáns aktivitás- Az emberek mindig feltárják és felfedezik, olyan ételeket keresnek, amelyek előnyösekemberi egészség, tehát az enzimek az utóbbi években forró témává váltak. A hagyományos enzimtermelési folyamat az enzimek előállítása a gyümölcsök és zöldségek természetes fermentációjával. A korábbi kutatások alapján ez a cikk 4 jótékony erjesztési baktériumot ad hozzá. Maga ez a baktérium létezik az enzimben is. A baktériumok további hozzáadása után megváltoznak a mikroorganizmusok száma és típusa a fermentációs folyamatban. Milyen hatással lesz ez a változás antioxidáns aktivitására? Az előző fejezetben az almát példaként vettük a részletes magyarázathoz. A kísérleti csoport és a kontrollcsoport antioxidáns aktivitásának összehasonlítása különböző enzimkoncentrációban azt mutatta, hogy az enzim antioxidáns aktivitása a kísérleti csoportban nagyobb volt, mint a kontrollcsoporté. Az antioxidáns aktivitás intenzitása bizonyos módon tükrözi az enzim megbízhatóságát.

Új gyógynövények ciszta, erős antioxidáns erővel

 

A Wecistanche-a Kína legnagyobb cistanche exportőre támogató szolgáltatása:
E -mail: wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/tel: +86 15292862950

 

Ez a fejezet az eredeti kísérlethez hozzáadja a közös gyümölcsöket és a citrusféléket, és felismeri a változásokatantioxidáns aktivitásAz erjedés során. A költségek csökkentése alapján a kísérletek reméljük, hogy a baktériumok hozzáadása után átfogóbb módon tükrözik az enzimek biológiai aktivitását, és bizonyos elméleti alapokat és adat -támogatást nyújtanak a B mikrobiális enzimek előállításához.y A törzsek mesterséges oltása.

 

 

 

4.1 Anyagok és módszerek

4.1.1 Anyagok

(1) Kísérleti anyagok

Mossa meg a friss almát, körtét és citrusféléket steril vízzel steril körülmények között, természetesen szárítsa meg egy steril operációs asztalon, hámozza meg és szeletelje őket későbbi használatra. Adjunk hozzá fehér cukrot és gyümölcsöt egy sterilizált üvegedényhez, 1: 1 tömeg arányban. Aktiválja a kísérlethez szükséges baktériumokat, és oltja be őket az enzimbe az optimális séma szerint (ezt a műveleti lépést a kontrollcsoport számára kihagyják), lezárja, és helyezze egy hűvös és száraz helyre. Vegyen be mintákat különböző fermentációs időtartamon belül szobahőmérsékleten, hogy megkapja az összes gyümölcspépű enzim folyadékot, és szűrje azt. Vegye ki a felülúszót a kísérleti mintaként, és használja azt a releváns adatok mérésére, miután 10 percig nagysebességű centrifugában centrifugáljuk, 000 RPM. Érdemes megjegyezni, hogy az enzimek készítésének folyamatában a felesleges szennyeződés elkerülése érdekében minden műveletünket steril körülmények között hajtjuk végre.

(2) Fő eszközök

A kísérlethez szükséges eszközök megegyeznek a 3.1.1 (2) -es.

 

4.1.2 Módszerek

(1) A teljes fenoltartalom fermentáció során bekövetkező változásai

450 μl minta oldatot adtunk desztillált vízzel, hogy a térfogat 46 ml, majd 1 ml folin-fenol reagenst adjunk hozzá. Keverje össze jól és reagáljon 3 percre. Ezután 3 ml 20% NACO3 -t adunk hozzá. Az elegyet állandó hőmérsékletű vízfürdőben ráztuk 25 fokos 2 órán át. Desztillált vizet használtunk üres kontrollként. Az A abszorbanciát spektrofotométerrel 760 nm -en mértük. Mindegyik kezeléshez három ismétlést végeztünk. A teljes fenoltartalmat a standard görbe egyenlet szerint számítottuk ki.

(2) Az erjesztés során az energia csökkentésének változásai

Adjunk hozzá 45 0 μl mintát 2,5 ml foszfátpufferhez, 0. (tömeg/térfogat) 10%-os tömegkoncentrációval, centrifugával 3000 fordulat/perc sebességgel, vegye ki és azonnal húzza ki 2,5 ml felülúszót egy térfogati lombikba, adjon hozzá 2,5 ml desztillált vizet és 0,5 ml vas -kloridot (tömeg/térfogat), tömegkoncentrációval 0,1%. Használjon desztillált vizet üres kontrollként, és mérje meg az A abszorbanciát 700 nm hullámhosszon spektrofotométerrel. Végezzen el 3 ismétlést minden egyes kezeléshez. A redukáló teljesítmény erősségét az abszorbancia érték alapján határozzuk meg.

 

(3) A szuperoxid anion radikális megsemmisítő képességének változásai az erjedés során
Helyezzen 4,5 ml 0. 20 perc elteltével adjunk hozzá 1 ml enzimminta -oldatot és 0,4 ml pirogálol -oldatot, 25 mmol/L moláris koncentrációval. Keverje össze jól, és helyezze egy 25 fokos vízfürdőbe 5 percig. Adjon hozzá 1,0 ml 8 mol/l sósavat a reakció befejezéséhez. Használja a Tris-HCl puffert referenciaként, és spektrofotométerrel mérje meg az A abszorbanciát 299 nm-en a kiszámítási sebesség kiszámításához. Az üres kontrollcsoport minta helyett 1 ml oldószert használ. A szuperoxid -aniongyökök -megsemmisülési sebességet a 4.1 képlet szerint kell kiszámítani: szuperoxid anion radikális kioldási sebesség (%)=(A 1- A2)/A1 × 100 (4.1), ahol: A1 az üres kontrollcsoport abszorpciója; Az A2 a kísérleti csoport enzimminta -oldatának abszorbanciája.

 

(4) A hidroxil -gyökök megsemmisülési képességének változásai az erjedés során

 

Add water to 450μL sample solution to 2mL, then add it to 1.4mL of hydrogen peroxide with a molar mass concentration of 6mmol/L, then add 0.6mL of sodium salicylate with a molar mass concentration of 20mmol/L and 2mL of ferrous sulfate with a molar mass concentration of 1.5mmol/L, and heat in a constant temperature water bath at 37 degree for 1H. Nulla desztillált vízzel, és mérje meg az A abszorbanciát 562 nm hullámhosszon spektrofotométerrel. Mindegyik kezeléshez három ismétlést végeztünk. A hidroxil -gyökök megsemmisülési sebességét a 4.2 képlet szerint számítottuk: hidroxil -gyökök megsemmisülési sebessége (%)=[(a 1- a2)/a1] × 100 (4.2), ahol: A1 az üres átlagos abszorpciója; Az A2 a mintaoldat átlagos abszorbanciája.

 

(5) A DPPH szabad radikális megsemmisülési képességének változásai az erjedés során
Pontosan transzfer 2 ml enzimminta -oldatot egy 1 0 ml térfogat lombikra, majd adjon hozzá 2 ml 80% DPPH etanol vizes oldatot a térfogati lombikhoz, 2 × × 10-4 mol/l moláris tömegkoncentrációjával. Keverje össze alaposan, és hagyja állni szobahőmérsékleten 30 percig. Vegye ki a 80% -os etanol oldatot referenciaként, és mérje meg a minta abszorbanciáját 517 nm hullámhosszon, amelyet A1 -ként rögzítenek. Keverje össze 2 ml DPPH -oldatot és 2 ml 80% -os etanol -oldatot, és mérje meg abszorbanciáját ugyanabban a hullámhosszon, amelyet A0 -ként rögzítünk. Keverje össze 2 ml enzimoldatot és 2 ml 80% -os etanololdatot, és mérje meg abszorbanciáját ugyanazon a hullámhosszon, amelyet A2 -ként rögzítünk. Mindegyik kezeléshez három ismétlést végeztünk. Számítsa ki a DPPH szabad radikális megsemmisülési sebességét a 4.3 képlet szerint:
A DPPH szabad gyökér -megsemmisülési sebesség (%) {{0}} [1- (a 1- a2)/a 0] × 100 (4.3), ahol: A1: A1 a 2 ml DPPH 80% -os etanol -Aque -que -os oldat átlagos abszorbanciája; Az A2 a 2 ml enzim oldat és 2 ml 80% etanol vegyes oldat abszorbanciája; Az A0 a 2 ml DPPH oldat és 2 ml 80% etanol vegyes oldat abszorbanciája.

(6) Az ABTS szabad gyökök megsemmisülési képességének változásai az erjedés során
A 8 μl -es minta oldatot 10 μl -re adtuk foszfátpufferrel (5 mmol/L pH 7,4), majd egyenletesen keverjük össze 10 ml kálium -szulfáttal és az ABTS vegyes oldattal, hogy reagáljunk 30 fokos reakcióhőmérsékleten és 5 perc reakcióidővel. Nulla az oldat desztillált vízzel, és mérje meg az A abszorbanciát 734 nm hullámhosszon spektrofotométerrel. Mindegyik kezeléshez három ismétlést végeztünk. Az ABT -k szabad gyökök megsemmisülési sebességét a 4.4 képlet szerint számítottuk:
Abts szabad gyökök megsemmisülési sebessége (%)=[(a 1- a2)/a1] × 100 (4.4), ahol: A1 az üres kontrollcsoport abszorbanciája; Az A2 a minta kísérleti csoport abszorbanciája.