Az echinakozid gátolja az emlőrák MCF{0}} sejtek rosszindulatú előrehaladását az AKR1B10/ERK jelátvitel modulálásával

Absztrakt: Ez a tanulmány a hatását elemziechinakozid(ECH) proliferációjában, metasztázisában és adriamicin (ADR) rezisztenciájábanmellrák(BC) MCF{{0}} sejtek az aldo-keto-reduktáz család 1 tagja 10 (AKR1B10)/extracelluláris szignál-szabályozott kináz (ERK) útvonal modulációján keresztül. Az ECH kémiai szerkezetét először megerősítették. Az MCF-7 sejteket különböző koncentrációjú (0, 10, 20, 40 ug·mL-1) ECH-val kezeltük 48 órán keresztül. Western blottingot használtunk az AKR1B10/ERK útvonalhoz kapcsolódó fehérjék expressziójának elemzésére, valamint a sejtszámláló kit-8 (CCK-8) tesztet a sejtek életképességének meghatározására. Az MCF-7 sejteket összegyűjtöttük, és a kontrollcsoportba, az ECH csoportba, az ECH plusz Ov-NC csoportba és az ECH plusz OvAKR1B10 csoportba soroltuk. Ezután Western blottingot alkalmaztunk az AKR1B10/ERK útvonalhoz kapcsolódó fehérjék expressziójának elemzésére. A sejtproliferáció vizsgálatára CCK-8 és 5-etinil-2'-dezoxiuridin (EdU) tesztet használtunk. A sejtvándorlást scratch assay-vel, transwell vizsgálattal és Western blottal értékeltük. Végül az MCF-7 sejteket ADR-rel kezelték 48 órán keresztül, hogy ADR-rezisztenciát váltsanak ki. A sejtek életképességét CCK-8 teszttel tesztelték, a sejtapoptózist pedig terminális dezoxinukleoitidil-transzferáz által közvetített nick end labeling (TUNEL) vizsgálat és Western blotting alapján becsülték meg. A Protein Data Bank (PDB) és a molekuláris dokkolás alapján az ECH AKR1B10-hez való kötődési affinitását értékeltük. Az ECH különböző dózisai dózisfüggő módon csökkentették az AKR1B10/ERK útvonalhoz kapcsolódó fehérjék expresszióját, és csökkentették a sejtek életképességét a kontrollcsoporthoz képest. A kontrollcsoporthoz képest 40 ug·mL-1 ECH blokkolta az AKR1B10/ERK útvonalat MCF-7 sejtekben, és gátolta a sejtek proliferációját, metasztázisát és ADR rezisztenciáját. Az ECH plusz Ov-NC csoporttal összehasonlítva az ECH plusz Ov-AKR1B10 csoport az MCF-7 sejtek bizonyos biológiai viselkedésének helyreállítását mutatta. Az ECH az AKR1B10-et is célba vette. Az ECH gátolja a BC sejtek proliferációját, metasztázisát és ADR rezisztenciáját az AKR1B10/ERK útvonal blokkolásával.

Kulcsszavak:echinakozid; AKR1B10/ERK jelzés; mellrák; adriamicin rezisztencia

Az emlőrák (BC) messze a leggyakoribb női rosszindulatú daganat, a diagnózis medián életkora körülbelül 60 év [1]. Az új BC megbetegedések Kínában a globális arány 12,2 százalékát teszik ki, a BC halálozások aránya pedig a világon 9,6 százalékot [2]. A genetikai és környezeti tényezők, mint például a magas zsírtartalmú étrend, az alkoholfogyasztás és az elégtelen fizikai aktivitás a mellrák kockázati tényezői [3-4]. A modern kezelések közé tartozik még a sebészet, a sugárterápia és a gyógyszeres terápia [1]. A gyakori klinikai gyógyszerek közé tartozik a ciklofoszfamid, 5-fluorouracil, pirarubicin, tamoxifen-citrát stb. [5], és a BC-sejtek gyógyszerrezisztenciája bizonyos mértékig a BC kezelését is lehetővé teszi. nagy kihívás [6]. Ugyanakkor heterogén daganatként a BC nagyobb valószínűséggel ad áttétet olyan szervekben, mint a csont, a tüdő, a máj és az agy, ami az áttétes emlőrákot nagyrészt gyógyíthatatlanná teszi [7]. Hazámban a Cistanche hagyományos gyógyászati ​​anyag. A növények családjába tartozik, és "sivatagi ginzeng" néven ismert [8].Echinakozid(ECH) egy Cistanche deserticolából kivont fenil-etanol-glikozid. A legújabb tanulmányok ezt hangsúlyoztákechinakoziderős antioxidáns, gyulladásgátló és rákellenes tulajdonságokkal rendelkezik. Például az mTOR/STAT3 útvonal gátlásával az ECH enyhítheti a gyulladásos választ és az oxidatív stresszt a paracetamol által kiváltott májkárosodásban [9]. Számos bizonyíték igazolta, hogy az ECH főként tumorszuppresszor szerepet játszik a BC-ben, és mechanizmusa a miR-4306 és miR-4508 [10] expressziójának csökkenésével vagy a Wnt/-catenin blokkolásával hozható összefüggésbe. jelzés [11].

Az aldo-keto-reduktáz 1B10 (AKR1B10), az aldo-keto-reduktáz szupercsalád tagja, redox reakciók révén képes toxikus anyagokat nem toxikus anyagokká alakítani és megfelelő alkoholokat termelni, így védő hatást fejt ki a gazdasejtekre [12]. A vizsgálatok azt sugallják, hogy az AKR1B10 főként normális emberi szövetekben, például vastag- és vékonybélben expresszálódik [13]. További tanulmányok kimutatták, hogy az AKR1B10 főként onkogénként hat az emlőrákban, és az emlőrák potenciális biomarkere lehet [14-16]. A MAPK család kulcsfontosságú tagjaként az extracellulárisan szabályozott protein kinázok (ERK-k) különféle evolúciósan konzervált sejtfolyamatokat szabályoznak a metazoánokban, és az ERK diszregulációja különféle betegségekhez vezethet [17]. LI J és munkatársai [18] kimutatták, hogy az AKR1B10 az ERK jelátvitel aktiválásával elősegítheti a mellrák progresszióját. Még érdekesebb, hogy a SwissTargetPrediction webhely az AKR1B10-et jósolta az echinacea potenciális célpontjaként. Nem ismert azonban, hogy az ECH részt vesz-e az emlőrák progressziójában az AKR1B10/ERK jelátvitel közvetítésével.

Ez a tanulmány az ECH specifikus hatásainak feltárására összpontosított a BC rosszindulatú sejtek fenotípusára, valamint az ECH és az AKR1B10/ERK útvonal közötti kapcsolat tisztázására a BC sejtekben.

1 anyag

Az MCF{0}}A humán emlőhámsejtvonalat és az MCF-7 emberi mellrák sejtvonalat a Kínai Tudományos Akadémia Sanghaji Biológiai Tudományok Intézetének Sejtforrásközpontja biztosította; Az MCF-7 ADR-rezisztens sejteket a Shanghai Huzhen Industrial Co., Ltd.-től vásároltuk. DMEM/F1 táptalajt (sz. PM150310), lószérumot (164215. tételszám) és szarvasmarha magzatszérumot (164210. tételszám) vásároltunk. a Wuhan Proceeds Life Technology Co., Ltd.-től; Az ECH-t (tételszám: 07668) a Sigma-Aldrich, USA-tól vásároltuk; Az ADR-t (tételszám: KGA8181) a Jiangsu Kaiji Biotechnology Co., Ltd.-től vásárolták; A RIPA lízisoldatot (tételszám: R0020) a Beijing Soleibao Technology Co., Ltd.-től vásároltuk; A BCA fehérje kvantitatív reagensét (tételszám: CX0013S) a Kangwei Century Biotechnology Co., Ltd.-től vásároltuk; A CCK-8 reagenst (tételszám: C0037) a Shanghai Biyuntian Biotechnology Co., Ltd.-től vásároltuk; A Lipofectamine 2000 transzfekciós reagenst (11668019 tételszám) a Thermo Fisher Scientific Co., Ltd.-től vásároltuk.

Az Ov-AKR1B10 és Ov-NC plazmidokat a Chongqing Youbao Biotechnology Co., Ltd. biztosította; Az EdU reagenst (tételszám: C00003) és a TUNEL készletet (tételszám: C11026-1) a Guangzhou Ribo Biotechnology Co., Ltd.-től vásároltuk; A DAPI-t (tételszám: 40727ES10) a Guangzhou Ribo Biotechnology Co., Ltd.-től vásárolták a Shanghai Yisheng Biotechnology Co., Ltd.-től; A Matrigelt (354230. tételszám) és a transzwell kamrát (3450. tételszám) a Corning Company-tól (USA) vásároltuk; A paraformaldehidet (158127 tételszám), a Crystal Violet (tételszám: C0775) és a Triton X-100 oldatot (tételszám: T8787) a Sigma Company biztosította az Egyesült Államokban; nyúl AKR1B10 (tételszám: ab192865), foszforilált ERK1/2 (p-ERK1/2, tételszám: ab278538), ERK1/2 (tételszám: ab184699), E-cadherin (E-cadherin, tétel ab212059), (N-cadherin) -cadherin, ab76011 tétel), csiga (ab216347 tétel), B-sejtes limfóma-2 (Bcl-2, ab182858 tétel), Bcl-2 rokon X-fehérje (Bcl-2- kapcsolódó X, Bax, gyártási szám ab182733) antitestet és HPR-jelölt kecske nyúl elleni másodlagos antitestet (sz. ab6702) az Abcamtól (USA); Az ECL lumineszcencia készletet (SL1350 tételszám) a Beijing Cool Lamb Technology Co., Ltd.-től vásároltuk. Az Image-Pro Plus szoftvert a Media Cybernetics-től (USA); A Leica DM1000 fluoreszcens mikroszkópot és a Leica DM ILLED fordított mikroszkópot a Leica Microsystems-től (Németország) vásároltuk; Az SPSS 22.0 szoftvert az IBM-től (USA) vásároltuk.

2 módszer

2.1 Sejttenyésztés és -kezelés

Az MCF{{0}}A sejteket DMEM/F12-ben tenyésztettük, amely 5% lószérumot, 20 ng·mL-1 epidermális növekedési faktort, 0,5 ug·mL-1 kortizolt, 10 ng tartalmazott. ·mL-1 inzulin, 100 ng·mL-1 koleratoxin táptalaj; MCF-7 és MCF-7/ADR sejtek voltak

DMEM/F12 táptalajban tenyésztett 10 százalék FBS-sel. Minden tápközeget 1 százalék kettős antitesttel egészítettünk ki, és 37 °C-on, 5 százalék CO2-t tartalmazó, párásított atmoszférában tároltuk. Ezt követően az MCF-7 sejteket különböző koncentrációjú ECH-val (0, 10, 20, 40 ug·mL-1) 48 órán keresztül avatkoztuk be; és 1,0 mg·L-1 ADR-t alkalmaztunk az MCF-7/ADR sejtek gyógyszerrezisztenciájának fenntartásához. szex. 2.2 Western blot módszer Az MCF-7 sejtekben lévő fehérjét RIPA lizátummal extraháltuk, és a fehérjekoncentrációt BCA reagenssel határoztuk meg. A 10%-os SDS-PAGE-val elválasztott fehérjéket PVDF membrán segítségével vittük át; 2 órás szobahőmérsékleten 5 százalékos fölözött tejjel való blokkolást követően a membrán /10 000), E-cadherin (1/10 000), N-kadherin (1/5 000) , Csiga (1/1 000), Bcl-2 (1/1 000), Bax (1/1 000) Az elsődleges antitestet egy éjszakán át 4 fokon inkubáltuk, majd HPR-vel jelölt kecske anti-nyúl másodlagos antitest (1/2 000) hozzáadása 1 órán át szobahőmérsékleten. A célfehérjét ECL lumineszcencia kit hozzáadásával detektáltuk, és a fehérje mennyiségét Image-Pro Plus szoftverrel elemeztük.

Echinacoside Cistanche kávéban gazdag, mellrák kezelésére

2.3 CCK-8 vizsgálat a sejtek életképességére

Az MCF{{0}}A és MCF-7 sejteket 96-lyukú lemezekre oltottuk a tenyésztéshez (5×103 sejt/lyuk), majd 24 óra elteltével , különböző koncentrációjú (0, 10, 20, 40 ug·mL{10}}) ECH-t alkalmaztak. A beavatkozást követően, 48 órával később, 10 térfogatszázalékos CCK-8 reagenssel kezeltük, és a sejtet. életképességét 2 órával később észlelték. Az ECH MCF-7 sejtek életképességére gyakorolt ​​hatásának további feltárása érdekében a transzfektált vagy nem transzfektált MCF-7 sejteket 24 órán keresztül tenyésztettük, és különböző koncentrációkban (0, 10, 20, 40 ug·) ml-1) ECH-t használtunk a beavatkozáshoz. , a CCK-8 reagens 10 térfogatszázalékát 24, 48 és 72 óra elteltével adtuk hozzá, és a sejtéletképesség kimutatási módszere megegyezett a fentiekkel. Az ECH MCF-7 sejtek doxorubicin rezisztenciájára gyakorolt ​​hatásának feltárására az MCF-7/ADR-rezisztens sejteket ECH-val együtt tenyésztettük 48 órán keresztül, majd CCK-8 munkaoldatot készítettünk. hozzáadva a sejtek életképességének kimutatására.

2.4 Plazmid transzfekció

Az MCF-7 sejteket beoltottuk és 6-lyukú lemezeken tenyésztettük (5×104/lyuk). Amikor a sejtek elérték a 60-70 százalékos konfluenciát, az Ov-AKR1B10-et és az Ov-NC-t átmenetileg transzfektáltuk a Lipofectamine 2000 transzfekciós reagens utasításainak megfelelően. Mindegyik csoport sejtjeit transzfektáltuk, és a transzfekció 48 óra elteltével befejeződött.

2.5 EdU festés a sejtproliferáció kimutatására

Miután az MCF{{0}} sejteket ECH-val kezeltük és plazmidokkal transzfektáltuk, 20 µmol·L-1 EdU-t adtunk minden egyes lyukba, és 37 °C-on 2 órán át inkubáltuk. Ezt követően a sejteket 4% paraformaldehiddel és 0,5% Triton X{8}}-dal rögzítettük és permeabilizáltuk. Végül a DAPI-val festett EdU-pozitív sejteket fluoreszcens mikroszkóp alatt detektáltuk.

2.6 Sebgyógyulási vizsgálat a sejtmigráció kimutatására

A növekedés logaritmikus fázisában lévő MCF{{0}} MCF{{0}} sejteket hozzáadtuk a 6-üregű lemezekhez, és amikor a sejtek elérték a 90 százalékos konfluenciát, egy 200 µl-es steril pipettahegy segítségével csíkot készítünk, és lemossuk. alkalommal PBS-sel. A seb szélességét 0 és 48 órában mértük fordított mikroszkóp alatt, és meghatároztuk az átvitt sejtek számát.

2.7 Transwell vizsgálat a sejtinvázió kimutatására

Az ECH-val kezelt és plazmiddal transzfektált MCF-7 sejteket egy Matrigelt tartalmazó transzwell felső kamrájába oltottuk, és 500 µl 10% FBS-t tartalmazó DMEM táptalajt adtunk a transzwell alsó kamrájába. 24 óra elteltével a felszíni sejteket vattacsomóval letöröltük, majd a sejteket fixáltuk és paraformaldehiddel, illetve kristályibolyával megfestettük, majd az invazív sejteket mikroszkóp alatt megszámoltuk.

2.8 TUNEL festés az apoptózis kimutatására

15 µmol L-1 ADR-rel végzett beavatkozás után az ECH-val kezelt és plazmiddal transzfektált MCF-7/ADR-rezisztens sejteket 96-lyukú lemezekre oltottuk, és 4 százalékos paraformaldehiddel és {{ 8}},5 százalék Triton X-100 A permeabilizációs kezelés után TUNEL detektáló oldatot adtunk hozzá, és a reakciót 37 fokon 45 percig végeztük a kit utasításai szerint, majd megfestettük a DAPI sejtmagokat. . Véletlenszerűen öt látómezőt választottunk ki, hogy megfigyeljük a sejt apoptózisát fluoreszcens mikroszkóp alatt.

2.9 Molekuláris dokkolás

Az AKR1B10 fehérje (PDB ID: 1ZUA) háromdimenziós szerkezetét a PDB adatbázisból szereztük be (https://www.rcsb.org/). A PyMOL 2.2.0 szoftverrel távolítsa el a vizet a hatóanyagokból és távolítsa el az irreleváns eredeti ligandumokat, majd konvertálja az ECH kémiai szerkezetét mol2 formátumba az OpenBabel 2.2.1 szoftverrel (http://openbabel.org/wiki), végül használja az Autodockot A 4.2 molekuláris dokkolást végez, és kiválasztja a legalacsonyabb szabadenergiájú pózt (-10,8 kcal·mol-1) a megjelenítéshez.

2.10 Statisztikai elemzés

Ebben a vizsgálatban az SPSS 22.{1}} szoftvert használtuk a kísérleti adatok elemzésére és feldolgozására, amelyet átlag ± szórásban (x ± s) fejeztünk ki. A csoportok közötti összehasonlításhoz egyirányú varianciaanalízist alkalmaztunk. Amikor P<0.05, the difference was statistically significant.

3 eredmény

3.1 Az ECH gátolja az AKR1B10/ERK jelátvitelt MCF-7 sejtekben Először is a Western blotting eredményei azt mutatták ki, hogy az ECH expozíciós dózis növelésével az AKR1B10 és a pERK1/2/ERK1/2 fehérjeszintek MCF-ben{11 }} sejt csökkent, és a csökkenő tendencia dózisfüggő volt<0.001) (Fig. 1). It can be speculated that ECH may participate in the malignant progression of BC by regulating AKR1B10/ERK signaling.

1. ábra HatásechinakozidAKR1B10/ERK jelátvitelen MCF-7 cellákban (x̄  s, n=3)

3.2 Az AKR1B10 túlzott expressziója megfordította az ECH gátló hatását az MCF-7 sejtproliferációra

A CCK{{0}} kísérleti adatai azt mutatták, hogy az MCF-10A normál sejtekkel összehasonlítva a különböző koncentrációjú ECH-nak való kitettség (0, 10, 20, 40 ug·mL{{6} }) koncentrációfüggő csökkenést eredményezett az MCF-7 rákos sejtek aktivitásában (P< 0.05), and when the mass concentration of ECH was 40 μg·mL-1, the cell activity decreased most significantly, so 40 μg·mL-1 ECH was used for subsequent experiments. To further verify whether ECH regulates BC development by regulating AKR1B10/ERK signaling, MCF-7 cells were first transfected with the Ov-AKR1B10 plasmid. After transfection of Ov-AKR1B10, the expression level of AKR1B10 was significantly increased (P<0.001). Western blotting results showed that transfection of Ov-AKR1B10 plasmid induced ECH exposure-induced reduced AKR1B10 and p-ERK1/2 protein levels again increased (P<0.001). In addition, the experimental data of CCK-8 and EdU demonstrated that the inhibitory effect of ECH treatment on the proliferation of MCF-7 cells could be alleviated by the up-regulation of AKR1B10 (P<0.05) (Fig. 2). Thus, overexpression of AKR1B10 rescued the inhibitory effect of ECH on the proliferative capacity of BC cells.

2. ábra Az echinozid hatása az MCF-7 sejtek proliferációjára az AKR1B10 expresszió szabályozásával (fluoreszcens festés, ×200; x̄  s, n=3)

3.3 Az AKR1B10 túlzott expressziója megfordította az ECH MCF-7 sejtmigrációt gátló hatását. Hasonlóképpen, a kontrollcsoporthoz képest az ECH beadása a sejtmigráció és -invázió számának szignifikáns csökkenését eredményezte (P<0.001); In contrast, increased expression of AKR1B10 resulted in enhanced cell migration and invasion (P<0.05). In addition, compared with the control group, the protein levels of N-cadherin and Snail were significantly decreased after ECH treatment, while the level of E-cadherin was significantly increased (P<0.001); The protein levels of cadherin and Snail increased, while the level of E-cadherin decreased (P<0.001) (Fig. 3). In conclusion, up-regulation of AKR1B10 expression rescued the inhibitory effect of ECH administration on BC cell migration and invasion.

4. ábra Az echinozid hatása az MCF-7 sejtek ADR rezisztenciájára az AKR1B10 expresszió szabályozásával (fluoreszcens festés, ×200; x̄  s, n=3)

4. Megbeszélés

Az emlőrák az emlőhámsejtek ellenőrizetlen szaporodását jelenti különböző rákkeltő tényezők hatására, és ez a nők daganatos elhalálozásának fő oka [1]. A tumor áttét a daganatok egyik legveszélyesebb jellemzője, és a daganatok hosszú távú gyógyulásának is kiváltó oka [19]. A kemoterápia az emlőrák klinikai kezelésének általános módszere [20]. Az emlőrák kezelési módszereinek és koncepcióinak folyamatos fejlődésével és frissítésével az emlőrák prognózisa jelentősen javult [20]. A gyógyszerrezisztencia kialakulása azonban nagymértékben korlátozza a gyógyszerek klinikai hatékonyságát [21]. Tanulmányok kimutatták, hogy az áttétes emlőrákos betegek körülbelül 90 százalékánál és az előrehaladott emlőrákos betegek 50 százalékánál alakul ki gyógyszerrezisztencia [22]. Az ADR egy antraciklin antibiotikum, amelyet széles körben alkalmaznak áttétes vagy visszatérő emlőrák klinikai kezelésében a DNS kémiai szerkezetére hatva, és hatékonyan csökkentheti az emlőrákos betegek kiújulási arányát és mortalitását [23]. Ezért ez a tanulmány a BC-sejtek proliferációjára, metasztázisára és ADR-rezisztenciájára összpontosított, hogy mélyrehatóan feltárja a BC progressziójának szabályozó mechanizmusát, és keressen potenciális molekuláris célpontokat a beavatkozáshoz.

Az echinacea egy feniletanoid vegyület, amely a Cistanche deserticola és az Echinacea purpurea természetes gyógynövények rizómáiból származik. Különféle farmakológiai hatásai vannak, például antioxidáns, antidepresszáns, gyulladáscsökkentő, vírusellenes, daganatellenes és antibakteriális [24-25]. A legújabb tanulmányok szerint az ECH gátolja a petefészekráksejtek proliferációját, metasztázisát és angiogenezisét a PI3K/Akt útvonal szabályozásával [26]; Az ECH a TGF-1/Smad útvonal aktiválásával fejtheti ki rákellenes hatását májrákban [27]. Az ECH gátolja a BC tumor növekedését a Wnt/-catenin jelátviteli útvonal inaktiválásával [11]. Ebben a tanulmányban a SwissTargetPrediction először az AKR1B10-et jósolta meg az ECH potenciális célpontjának. Ezért a szerzők azt feltételezik, hogy az ECH részt vehet a BC-betegség progressziójában az AKR1B{11}}kapcsolódó jelátviteli útvonalak szabályozása révén. Eddig azt találták, hogy az AKR1B10 expressziója megnövekedett különféle rákos megbetegedések esetén, és szerepet játszik a rák kialakulásában [28]. Ezenkívül az AKR1B10 az ERK jelátvitel aktiválásával súlyosbíthatja a hólyagrák, a tüdő adenokarcinóma és a BC kialakulását [18, 29-30]. Az AKR1B10 ektópiás expressziója emlőráksejtekben elősegíti az ERK 1/2 foszforilációját, hogy aktiválja az ERK jelátviteli útvonalat [18]. Az ERK jelátviteli útvonal az MMP-k, különösen az MMP2 aktiválásával elősegíti az extracelluláris mátrix lebomlását, ezáltal elősegíti a tumorsejtek invázióját és a tumor áttét képződését [31-33]. A kísérlet eredményei azt is kimutatták, hogy az AKR1B10/ERK útvonalhoz kapcsolódó fehérjék expressziója dózisfüggő módon csökkent a különböző koncentrációjú ECH kezelés után, ami azt jelzi, hogy az ECH részt vehet a BC szabályozási mechanizmusában az AKR1B10/ERK gátlásával. útvonalat. Ezenkívül az ECH-expozíció a BC-sejtek életképességének különböző mértékű csökkenését is eredményezte. Ennek további bizonyítására ez a tanulmány az AKR1B10 túlexpressziós plazmidot MCF-7 BC sejtekbe transzfektálta, és megállapította, hogy az ECH-kezelés gátló hatásai az AKR1B10/ERK útvonalra és a sejtproliferációra, a migrációra és invázióra, valamint az epiteliális-mezenchimális átmenetre túlzott mértékben kifejeződnek. által AKR1B10 megmentette. Továbbá az MCF-7/ADR-rezisztens sejtekben az ECH-expozíció az IC50 csökkenését és az apoptotikus sejtek számának növekedését eredményezte; mivel az AKR1B10 túlzott expressziója ebben a helyzetben ismét növelte az IC50-et és csökkentette az apoptotikus sejttermelést. A kísérlet végén az ECH és az AKR1B10 közötti célzási kapcsolat is teljes mértékben igazolódott. A fenti kísérleti eredmények azt mutatják,

Az AKR1B10 túlzott expressziója antagonista hatást fejt ki az ECH-elnyomott BC fejlődésére.

Összefoglalva, az ECH beadása gyengítheti a BC sejtek proliferációját, migrációját, invázióját, EMT- és ADR-rezisztenciáját, és a mechanizmus összefüggésben állhat az AKR1B10 célzásával és az AKR1B10/ERK jelátviteli útvonal gátlásával. Ez a tanulmány kezdetben tisztázta az ECH lehetséges mechanizmusát BC-ben, és értékes kísérleti alapot és elméleti támogatást nyújtott az ECH anti-BC gyógyszerekben történő alkalmazásához. Ennek a tanulmánynak azonban még vannak hiányosságai. Először is, ez a kísérlet nem tartalmazta az ECH hatásának elemzését a BC betegek túlélési arányára és prognózisára; másodszor, ebből a vizsgálatból hiányoztak az in vivo állatkísérletek az ECH BC daganatok növekedésében betöltött szerepének további igazolására. A jövőbeni tanulmányok során tovább vizsgálják az ECH klinikai jelentőségét az emlőrák kezelésében.

Támogatás:

wallence.suen@wecistanche.com 0015292862950