Az echinozid hatása a monoamin neurotranszmitterekre agyi ischaemiás patkányokban a striatum extracelluláris folyadékában

Wei Lili1, Chen Hong1, Jiang Yong2, Tu Pengfei 2, Zhong Ming1, Du Juan1, Liu Fei1, Liu Chunyang1, Wang Lei1

(1. Gyógyszerészeti Iskola, Shihezi Egyetem, Xinjiang Speciális Növénygyógyászati ​​Laboratórium, Oktatási Minisztérium, Shihezi, Xinjiang 832002;2. Hagyományos Kínai Orvoslás Modern Kutatóközpontja, Pekingi Egyetem, Peking 100083)

Kínai könyv osztályozási száma: R-332; R284．1; R322．81; R338．14; R743.310.531

Dokumentumazonosító: Cikkszám: 1001-1978 (2011) 02-0174-04

Absztrakt: Cél A hatás tanulmányozásaEchinoside(ECH) a striatum extracelluláris folyadékában található monoamin neurotranszmitterek vizsgálatára fokális agyi ischaemiában szenvedő patkányokban, valamint feltárni az ECH agyi neuroprotektív hatásának lehetséges mechanizmusát. Módszerek Az SD patkányokat véletlenszerűen kontrollcsoportra, modellcsoportra, ECH magas és alacsony dózisú csoportokra, valamint ligustrazin (CXQ) csoportra osztottuk. Az egyes csoportok patkányai megfelelő gyógyszert vagy fiziológiás sóoldatot kaptak intraperitoneálisan naponta egyszer 7 napon keresztül. A beadás harmadik napján a szonda hüvelyét az agy striatumába ágyaztuk. Egy órával az utolsó beadás után elkészítettük a fokális agyi ischaemia (MCAO) patkánymodelljét. A modell elkészítése után azonnal elvégeztük a mikrodialízist. A dializátumot a nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás-elektrokémiai detektorba (HPLC-ECD) fecskendeztük, hogy meghatározzuk a noradrenalin (NE), dopamin (DA), 5-hidroxi-triptamin (5-HT), 3 tartalmát. ,4-dihidroxi-fenil-ecetsav (DOPAC), homovanillinsav (HVA), 5-hidroxi-indol-ecetsav (HIAA) az egyes csoportok striatumának extracelluláris folyadékában. Eredmények A kontrollcsoporthoz képest a modellcsoportban nőtt az NE, DA és 5-HT szintje, valamint emelkedett a savas metabolitok DOPAC, HVA és HIAA szintje is. A modellcsoporthoz képest az ECH (30, 15 mg · kg - 1 · d - 1) és a CXQ csoport nagy és alacsony dózisú csoportjában hat anyag tartalma csökkent. Következtetések Az ECH neuroprotektív hatása összefüggésbe hozható a monoamin neurotranszmitterek agyi ischaemia utáni növekedésével.

Cistanche por

Kulcsszavak: Echinoside; agyi ischaemia; Striatum; HPLC-ECD; Monoamin neurotranszmitterek és metabolitok

Echinaceozid(ECH) az izolált és tisztított fenil-etanol-glikozidok hatékony komponenseCistanche deserticola, egy különleges üzem Xinjiangban. Tanulmányok kimutatták, hogy az ECH neuroprotektív hatással rendelkezik, például antioxidáns [1-2], idegvédelem [3-4], öregedésgátló [5], valamint a tanulás és a memória javítása [6-8]. Chen Hong és mtsai. megerősítette, hogy az ECH védő hatással van a DA neuronokra Parkinson-kórban [9]. A monoamin neurotranszmitterek egyfajta fontos anyagok, amelyek szabályozzák a szervezet élettani tevékenységeit.A szövetben lévő tartalom tükrözheti a neurotranszmitterek bioszintézisének, felszabadulásának, felvételének és inaktiválásának folyamatait [10-11]. Jelenleg nincs releváns jelentés az ECH hatásáról a monoamin transzmitterekre agyi ischaemiás patkányok agyában. Ebben a tanulmányban agyi mikrodialízis technológiával vizsgáltuk az ECH hatását agyi ischaemiás patkányok striatumának extracelluláris folyadékának monoamin neurotranszmitterek tartalmára, valamint előzetesen feltártuk az ECH lehetséges agyi neuroprotekciós mechanizmusát.

Cistanche kivonat por

1.Anyag

1.1 Kísérleti állatok

SD patkányok, ♂, testtömeg 250–300 g (a Xinjiang Kísérleti Állatközponttól vásárolva, engedélyszám: 2009-0053).

1.2 Gyógyszerek és reagensek

Az ECH-t Tu Pengfei professzor adományozta, a Pekingi Egyetem Gyógyszerészeti Iskolája (95 százalék feletti tisztaság); Norepinefrin (NE), dopamin (DA), 5-hidroxi-triptamin (5-HT), 3,4-dihidroxi-fenil-ecetsav (DOPAC), homovanillinsav (HVA)

5-hidroxi-indol-ecetsav (HIAA) a Sigma; Tetrametil-pirazin-hidroklorid injekcióhoz (CXQ, Harbin Sanlian Pharmaceutical Co., Ltd.); Cink-foszfát cement (a Shanghai Medical Instruments Co., Ltd. terméke, folyadékból és porból áll, idővel keverve); nátrium-1--alkil-szulfát (DIKMA); citromsav-hidrát (Tianjin Jinke Fine Chemical Research Institute); trinátrium-citrát (Acros); dinátrium-etilén-diamin-tetraecetsav (JTTakerChemicalco); metanol (DIKMA); acetonitril (DIKMA); Az agyi mikrodialízis perfúziós folyadék összetett nátrium-klorid injekció (Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.); Minden felhasznált víz újragőzölhető.

1.3 Eszköz

Amerikai BAS4100 patkány agy sztereotaktikus készülék; CMA/12 szonda és szondahüvely; CMA/120 eszméleténél lévő állat eszköz; CMA/402 mikroszivattyú; CMA/150 alacsony hőmérsékletű automatikus mintagyűjtő. Esa 5600A infúziós pumpa; Esa 5600A infúziós pumpa; Esa 542 automatikus mintainjektáló készülék; az ESA CoulArray elektrokémiai detektora; Üveges szén munkaelektróda és Ag/AgCl referenciaelektróda; C18 oszlop (DIKMA, ODS5 μm, 150 mm × 4,6 mm); CoulArraywin kromatográfiás munkaállomás (ESa cég); Vortex keverő (QL-861 típusú); Asztali savasságmérő (HANNA-211); Asztali nagy sebességű centrifuga (XYJ-2 típusú).

2.Módszer

Sírüreganche kiegészítő a közelemben – Imbizonyítsa emlékét

Kattintson ide a Cistanche Improve Memory termékek megtekintéséhez

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

2.1 Az állatok csoportosítása és adminisztrációja

Harminc patkányt véletlenszerűen öt csoportra osztottak: ① Kontroll csoport: 1 ml · kg-1 · d-1 normál sóoldat; ② Modellcsoport: normál sóoldat 1 ml · kg-1 · d-1; ③ Model plusz ligustrazin (CXQ) 30mg · kg-1 · d-1; ④ - ⑤ Modell plusz ECH magas és alacsony dózisú csoportok (ECHB, ECHS): 30, 15 mg · kg-1 · d-1; Mindegyik csoportban minden állatot intraperitoneálisan injekcióztunk 7 napig.

2.2 Modellezési módszer és mikrodialízis

A beadás harmadik napján minden patkányt kanüllel temettek el: a patkányokat 10 százalékos klorálhidráttal (3,5 ml · kg-1) érzéstelenítettük, amelyet a BAS4100-ra rögzítettek. agyi sztereotaktikus készüléket, és a szonda katétert a bal striatumba ültettük be (AP koordináták: plusz 0,2 mm; ML: - 3,0 mm; DV: - 3,5 mm) GeorgePaxinos „A patkányagy sztereotaktikus térképe” kapcsán. ". Az utolsó adagolást követően a patkányokat 1 órával később elaltattuk, és a patkányoknak fokális agyi ischaemia modellt (MCAO modell) készítettek Yang Zanzhang [12] továbbfejlesztett Longa varrat módszerével. A kontrollcsoportban a damil csak 10 mm-re került behelyezésre, a többi lépés megegyezett a műveleti csoportéval. A modellezés után helyezzük be a mikrodializáló szondát tudatos és szabad mozgás állapotában, és használjunk Ringer-oldatot μ-ig. Az agyi mikrodializátumot 4 fokon gyűjtöttük össze, és egy tubus dializátumot gyűjtöttünk 20 percnél. A dializátum minden tubusának összegyűjtése után azonnal - 20 fokos hűtőszekrényben kell tárolni, és dialízis után át kell vinni egy - 70 fokos hűtőszekrénybe. Használat előtt megmértük a szonda visszanyerési sebességét, amelyet a dializátumban lévő monoamin neurotranszmitterek koncentrációjának átalakítására használtunk.

mit csinál a cistanche – Javítja a memóriát

2.3 HPLC-ECD elemzés

Mozgófázisú konfiguráció: a mozgófázis literenként 829 ml 0,15 mol · L-1 citromsav-nátrium-citrát puffert tartalmaz; 0,1 mol · L-1 dinátrium-EDTA 1 ml; Metanol 15{11}}ml; Nátrium-{{10}}alkil-szulfát 0.283g. Állítsa be a mozgófázis áramlási sebességét 0,7 ml · min-1 értékre, az oszlopos sütő hőmérsékletét pedig 28 fokra. Az elektrokémiai detektor üzemi feszültsége 200mV, 400 mV és 600 mV, 2, 3, illetve 4 csatornával; Az erősítés 2nA. A befecskendezési térfogat 25 μl. A standard görbét 0,025, 0,05, 0,1, 0,2, 0,5 mg · L-1 gradiens kevert standardoldattal rajzoljuk meg.

2.4 Statisztikai feldolgozás

A kísérleti adatokat x mező ± s-ban fejezzük ki, az ismételt mérési adatokat pedig SPSS13.{1}} statisztikai szoftverrel elemezzük.

A 1-6. ábra a NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA és 5-HT szintek változásait mutatja be a patkány striatum extracelluláris folyadékában. Az ábrán látható, hogy agyi ischaemia után a striatum extracelluláris folyadékában a monoamin neurotranszmitterek anyagcserezavarban szenvednek, és az egyes neurotranszmitterek tartalma megnőtt. Egy bizonyos tartományon belül a növekedés szembetűnőbb az ischaemia idejének megnyúlásával. Az ischaemia 90. percében a DA és NE koncentrációja a striatum extracelluláris folyadékában több mint háromszorosa volt a kontrollcsoport szintjének. A NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA és 5-HT szintjei a kontrollcsoportban magasról alacsonyra csökkentek, ami összefüggésben lehet a bal agyi ütőér elkötése után kialakult átmeneti ischaemiával. és a szonda behelyezése által okozott károkat. A változási görbéből az ECH és a CXQ csökkentheti a DA, DOPAC, HIAA, HVA és 5-HT csúcskoncentrációját agyi ischaemia után, a CXQ és a nagy dózisú ECH pedig nyilvánvalóbb. Az egyes neurotranszmitterek időbeli lefutási görbéjének lefelé történő eltolódása azt jelzi, hogy az ECH gátolja a neurotranszmitterek és metabolitjaik növekedését agyi ischaemiás patkányok agyában.

                                                                           2. ábra Az echinozid hatása a DA extracelluláris szintjére patkányok striatumában

3. ábra HatásEchinosideA DOPAC extracelluláris szintjén patkányok striatumában Fig4Echinosidea HIVV extracelluláris szintje patkányok striatumában

5. ábra HatásEchinosideA HVA extracelluláris szintjén patkányok striatumában Fig6 Effect ofEchinosidepatkányok 5-HT instriatumának extracelluláris szintjén

4.Vita

Superman herbs cistanche – Improve memória

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Az agyi ischaemia által okozott agysérülés mechanizmusa összetett. Agyi ischaemia esetén az agyban a monoamin neurotranszmitterek zavarosak, az NE, DA és 5-HT tartalom jelentősen csökken. Minél súlyosabb az agyi ischaemia, annál alacsonyabb az NE, DA és 5-HT tartalom az agyszövetben [13]. Az intracerebrális mikrodialízis módszerrel bebizonyosodott, hogy a monoamin neurotranszmitterek tartalma az extracelluláris folyadékban az agyi ischaemia során megnőtt, az ischaemiás periódus teljes időtartama alatt kitartott, majd az ischaemiás idő megnyúlásával tovább nőtt. A kísérleti eredmények összhangban voltak a jelentéssel [14].Echinosidea Cistanche deserticolából, egy különleges Xinjiang-i növényből izolált és tisztított fenil-etanol-glikozidok hatékony összetevője. Számos neuroprotektív hatása van, például öregedésgátló, tanulási és memóriajavító, valamint neuronális apoptózis elleni. Ebben a tanulmányban hazai fejlett agyi mikrodialízist használtak HPLC-ECD detektálási technológiával kombinálva a hatás előzetes feltárására.Echinosidemonoamin neurotranszmittereken és metabolitjain agyi ischaemiás kísérleti patkányok striatumának extracelluláris folyadékában. Az eredmények azt mutatták, hogy az ECH képes csökkenteni az agyi ischaemia okozta monoamin neurotranszmitterek növekedését a striatum extracelluláris folyadékában, és jobban javítja az agyi ischaemiás szövet károsodását.

referencia:

［1］ Pellati F, Benvenuti S, Magro L, et al. Az Echinacea spp［J］． fenolos vegyületeinek és gyökfogó aktivitásának elemzése JPharm Biomed Anal, 2004, 35(2): 289.

［2］ Kuang R, Sun YG, Deng TL, Zheng XX. Az echinakozid védő hatása és mechanizmusai a H2O2 -sérült PC12-sejteken［J］． Chin Pharmacol Bull, 2009, 25(4): 515–8.

［3］ Zhao X, Pu XP, Geng XC. Az echinakozid hatásai a substanti anigrából és a striatális szövetből származó fehérjeexpresszióra a Parkinson-kór egér MPTP-modelljében dimenziós elektroforézis analízissel［J］． Chin Pharmacol Bull, 2008, 24(1): 28-32.

［4］ Koo KA, Sung SH, Park JH stb. Callicarpa dichotoma［J］． feniletanoid-glikozidok in vitro neuroprotektív hatásai Planta Med, 2005, 25(4): 356.

［5］ Li Y, Song YY, Zhong HQ. Az echinakozid hatása az öregedő egerek immunfunkciójára és mitokondriális DNS-tartalmára ［J］． Chin Pharmacol Bull, 2010, 26(6): 810–3.

［6］ GLNE, Lei L, Tu PF, et al. Tanulmány az echi nacoside molekuláris mechanizmusáról az öregedés ellen［J］． Acta Biophysica Sitica, 2004, 20 (3): 184.

［7］ Gao C, Wang CS, Wu GZ stb. A Cistanche-glikozidok hatása a tanulási és memóriazavarokra vaszkuláris demenciában patkányban［J］． Chin Tradit Herb Drugs, 2005, 36(12): 1852.

［8］ Tian F, Zhang K, Kang AJ stb. Az echinakozid hatása és mechanizmusa a SAM-P /8 tanulási és memóriaképességére［J］． Lab orat Anim Sci Manag, 2006, 2( 23): 510.

［9］ Chen H, Jing FC, Li CL stb. Az echinakozid megakadályozza, hogy a monoamin neurotranszmitterek striatális extracelluláris szintje csökkenjen 6-hidroxidopamin léziójú patkányokban［J］． J Ethnopharmacol, 2007, 114(3): 285.

［10］ Amara SG. A neurotranszmitter transzporterek legújabb fejlődése［J］． Annu Rev Neurosci, 1993, 16(1): 73-93.

［11］ Wu GX, Su RB, Li J. A dopamin transzporter szerepe a pszicho-stimuláns-függőségben (J］). Chin Pharmacol Bull, 2010, 26 ( 2 ): 141–3.

［12］ Yang ZZ, Chen H. A fokális agyi ischaemia patkánymodelljének varrásmódszereinek fejlesztése és tapasztalata［J］． Lishlzhen Med Mat Med Res, 2008, 19(9): 2189–90.

［13］ Tanaka K, Wada N, Ogawa N. Krónikus agyi hipoperfúzió tranziens, reverzibilis monoaminerg változásokat idéz elő a patkány agyában ［J］． Neurochem Res, 2000, 25(2): 313.

［14］ Li H. A Puerarin hatása a monoamin neurotranszmitterekre patkányok striatumában［J］． J Zhejiang Univ Sci Technol, 2005, 17(1): 13-7.