Az ellenoldali nefrektómia időzítésének és az ischaemiás állapotoknak a hatásai a vesefibrózisra egyoldali vese ischaemia-reperfúziós sérülés után Ⅱ
Oct 27, 2023
Eredmények
1. protokoll: az ellenoldali nephrectomia és az uIRI közötti intervallum hatása az AKI CKD átmenetére A túlélési arány csökkent az ellenoldali nephrectomia és az IRI közötti intervallum meghosszabbodásával
Amint az 1. kísérletben említettük, az ischaemiás időtartamot 24 percben rögzítettük 37 C-os magtesthőmérséklet mellett uIRI-ben. Megfigyeltük az ellenoldali nephrectomia uIRI utáni időzítésének hatását az egerek túlélésére. Az adatok azt mutatták, hogy a 7. napi csoportban (az ellenoldali ép vesét 7 nappal az uIRI után reszekáltuk) mind a nyolc egér túlélte. A 10. napos csoportban egy egér pusztult el az ellenoldali nefrektómia utáni napon, a túlélési arány 87,5%. A 14. napos csoportban egy egér az ellenoldali nephrectomia utáni első napon, két egér pedig két nappal az ellenoldali nephrectomia után pusztult el, a túlélési arány 62,5%. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy az egerek túlélési aránya fokozatosan csökkent az ellenoldali nefrektómia kiterjesztésével, amikor a másik két befolyásoló tényezőt rögzítették (2(A) ábra).
KATTINTSON IDE, HOGY NÖVÉNYI KÉSZÍTMÉNY CISTANCHE VESEHOZ SZEREZZE MEG
A vesefunkció csökkent az ellenoldali nephrectomia és az uIRI közötti intervallum meghosszabbodásával
Az álkontrollhoz képest az SCr és a BUN szignifikánsan magasabb volt minden egérben kontralaterális nephrectómia után (p < {0}},05), ami azt jelzi, hogy mindegyik vesekárosodást szenvedett. Ezenkívül az SCr és a BUN szintje nőtt az ellenoldali nephrectomia és az uIRI közötti intervallum meghosszabbodásával (p < 0,05) (2(B, C) ábra)
A vese szövettani sérülése súlyosbodott az ellenoldali nephrectomia és az uIRI közötti intervallum meghosszabbodásával
A HE-festés azt mutatta, hogy az ál-csoport veseszövete szerkezetileg normális volt az uIRI után 8 héttel. Az összes uIRI csoportban számos poszt-AKI kóros elváltozást észleltek a vesében (3(A) ábra), beleértve a különböző mértékű tubuláris epiteliális sejt vakuoláris degenerációt, ecsetszegély leválást, fokális dezintegrációs nekrózist, egyes tubuláris lumen tágulását és a vese Változó morfológiájú tubuláris epiteliális sejt ödéma. Emellett néhány glomerulus ráncos és szklerotikus volt, mesangiális sejtek hiperpláziával és kitágult Bowman-kapszulával. Gyulladásos sejtinfiltrációt is észleltek a vese interstitialisban. A sérült vese tubuláris és glomeruláris patológiás sérüléseinek pontszámai magasabbak voltak, mint a hamis (p < 0.05), ami arra utal, hogy az ellenoldali nephrectómiával végzett uIRI szignifikánsan károsította a vesét. A vesepatológiás sérülések pontszámai nőttek az ellenoldali nephrectomia kiterjesztésével (p < 0,05) (3(B,C) ábra). Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a vese kóros károsodás kora fokozatosan nőtt az ellenoldali nephrectomia kiterjesztésével az uIRI után.
2. ábra. Az ellenoldali nephrectomia és az egyoldali ischaemia-reperfúziós sérülés (uIRI) közötti időintervallumok hatása a túlélési arányra és a veseműködésre. A bal vesét a(z) 0. napon vetettük alá IRI-nek, és a jobb vese reszekcióját különböző időpontokban (7. nap, 1. nap0 és 14. nap) végeztük, az ischaemiás időtartamot 24 percben rögzítették. a vese ischaemia során 37 C-on rögzített mag testhőmérséklet. (A): Az egerek túlélését minden csoportban pontozták és százalékban mutatták be. (B és C): A vesefunkciót a szérum kreatinin (SCr) és a vér karbamid-nitrogén (BUN) alapján becsülték. n ¼ 5–8/csoport. p < 0,05.
3. ábra: Az ellenoldali nephrectomia és az egyoldali ischaemia-reperfúziós sérülés (uIRI) közötti időintervallumok hatása a vese szövettani károsodására. A bal vesét a 0. napon vetettük alá IRI-nek, és a jobb vese reszekcióját különböző időpontokban (7. nap, 1. nap0. és 14. nap), az ischaemiás időtartamot 24 percben rögzítették a vese ischaemia alatt 37 C-on rögzített mag testhőmérséklet. A vese szövettani sérülését hematoxilin-eozin (HE) festéssel határoztuk meg. (A): A sérült vese reprezentatív HE festése, amely az AKI utáni kóros elváltozások tipikus kórszövettani jellemzőit mutatta, beleértve a különböző mértékű tubuláris hámsejt vacuoláris degenerációt, ecsetszegély leválást, fokális dezintegrációs nekrózist, egyes tubuláris lumen dilatációját (# ), változó morfológiájú vese tubuláris hámsejt-ödéma és gyulladásos sejtinfiltráció (%). Néhány glomerulus ráncos és szklerotikus volt, mezangiális sejthiperpláziával (&) és kitágult Bowman-kapszulával (nagyítás, 400). (B): A tubuláris sérülés félig mennyiségi meghatározása. (C): A glomeruláris sérülés félig mennyiségi meghatározása. n ¼ 5–8/csoport. p < 0,05.
A vesefibrózis súlyosbodott az ellenoldali nephrectomia és az uIRI vesesúly közötti intervallum meghosszabbodásával.
Az AKI-ból CKD-vé való átalakulást jellemzően vesefibrózis jellemzi [19], és a vesetömeg csökkenése a vesefibrózis makroszkopikus indikátora [2]. Ezért megmértük a vese súlyát (testtömeg szerint kalibrált kölyöktömeg), hogy előzetesen megvizsgáljuk az uIRI és a késleltetett ellenoldali nephrectomia közötti időintervallumok hatását az AKI-CKD átmenetre. Összehasonlítva az ál-csoporttal, minden uIRI-csoport szignifikáns vesetömeg-csökkenést mutatott (p < 0,05), ami azt jelzi, hogy az uIRI-csoportokban minden egér vesefibrózisban szenvedett. A vesetömeg különbsége szignifikánsan megváltozott, amikor az ellenoldali nephrectomia és az uIRI közötti időintervallum 3 nap volt, és a vese súlya fokozatosan csökkent az intervallum időtartamának növekedésével (4(A) ábra).
Masson trikróm foltja.
Masson-féle trikróm festést végeztünk, hogy tovább figyeljük az ellenoldali nephrectomia és az uIRI közötti időintervallumok vesefibrózisra gyakorolt hatását. Nem figyeltek meg szignifikáns vese intersticiális fibrózist az ál-csoportban, míg az uIRI-t követően 8 héttel az összes uIRI-csoport veséjében különböző mértékű fibrotikus elváltozásokat figyeltek meg (4(B) ábra). A fibrotikus terület szemikvantitatív analízise azt mutatta, hogy az uIRI csoportokban a vese fibrotikus területe szignifikánsan megnőtt az ál-csoporthoz képest (p < 0.05), ami arra utal, hogy az AKI CKD átmeneti modellt sikeresen végrehajtották. Ezenkívül az ellenoldali nephrectomia késleltetésével a vesefibrózis egyre súlyosabbá vált (p < 0,05), ami arra utal, hogy a vesefibrózis mértéke jelentősen megváltozott, amikor az ellenoldali nephrectomia és az uIRI közötti intervallum 3 nap volt. Az ellenoldali nephrectomia és az uIRI közötti meghosszabbodott idővel a vesefibrózis mértéke súlyosbodott (4(C) ábra).
4. ábra: Az ellenoldali nephrectomia és az egyoldali ischaemia-reperfúziós sérülés (uIRI) közötti időintervallumok hatása a vesefibrózisra. A bal vesét a(z) 0. napon vetettük alá IRI-nek, és a jobb vese reszekcióját különböző időpontokban (7. nap, 1. nap0 és 14. nap) végeztük, az ischaemiás időtartamot 24 percben rögzítették. a vese ischaemia során 37 C-on rögzített mag testhőmérséklet. A vesefibrózist a vese súlya, a Masson-féle trikróm festés, valamint a fibronektin (FN), kollagén I (COL-I) és a-simaizom aktin (a-SMA) expressziója alapján értékelték. (A): A vese tömege a testtömeghez viszonyítva. (B): Reprezentatív Masson-féle trikróm festődés a sérült vesén, amely a fibrotikus elváltozásokra jellemzőt mutatott (%) (nagyítás, 200). (C): A Masson-féle trikróm festéssel kimutatott fibrotikus terület félig mennyiségi meghatározása. (D): Kvantitatív RT-PCR elemzések az FN expressziójára a vesében. (E): Kvantitatív RT-PCR elemzések a COL-I expressziójára a vesében. (F): Reprezentatív Western blot képek az FN, COL-I és a-SMA számára. (G): Oszlopdiagram, amely a b-aktinnal normalizált FN fehérje expressziót mutatja. (H): oszlopdiagram, amely a b-aktinnal normalizált COL-I fehérje expressziót mutatja. I: Oszlopdiagram, amely a b-aktinnal normalizált a-SMA fehérje expressziót mutatja. n ¼ 5–8/csoport. p < 0,05.
Extracelluláris mátrix (ECM) felhalmozódás.
A vese intersticiális fibrózisát az ECM [2], például az FN és a COL-I lerakódása jellemzi a vese intersticiális területén. Western blot és RT-PCR analízis azt mutatta, hogy az FN és COL-I expressziója a vesében szignifikánsan megemelkedett az összes uIRI-csoportban a hamis csoporthoz képest (p < 0.05), ami arra utal, hogy hogy az összes vese fibrózisos elváltozásokon ment keresztül. Az FN és a COL-I expressziós szintje a vesében magasabb volt az ellenoldali nephrectomia késleltetésével (p < 0,05) (4. ábra (D–H)).
Myofibroblasztok a vesében.
A vesefibrózisra a myofibroblast felhalmozódás és az ezt követő ECM termelés jellemző [20]. Az a-SMA-t használtuk a myofibroblast mennyiségének kimutatására az IRI után 8 héttel. A Western blot analízis kimutatta, hogy az a-SMA expressziója a veseszövetekben szignifikánsan megemelkedett az összes uIRI-csoportban az ál-csoporthoz képest (p < 0,05), ami azt jelzi, hogy a myofibroblasztok kifejezettebb mértékben voltak jelen a sérült veséjében. egerek. Az a-SMA expressziója magasabb volt az ellenoldali vese reszekció késleltetésével (p < 0,05) (4. ábra (F, I)). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy az uIRI veseszövetben a myofibroblasztok szignifikánsan megváltoztak az uIRI és az ellenoldali nephrectomia közötti 3 napban, és a myofibroblasztok fokozatosan növekedtek hosszabb időközönként.
2. protokoll: a magtest hőmérsékletének hatása az ischaemia során az AKI-CKD átmenetre
A túlélési arány az ischaemia alatti testmaghőmérséklet emelkedésével csökkent
Mint a 2. kísérletben említettük, annak érdekében, hogy megvizsgáljuk az ischaemia alatti maghőmérsékletnek az AKI-CKD átmenetre gyakorolt hatását, az ischaemia időtartamát 24 percben rögzítettük, és az ellenoldali ép vesét 14 nappal az uIRI után eltávolítottuk. Az adatok azt mutatták, hogy a 36 C-os csoportban (az egerek maghőmérsékletét ischaemia alatt 36 C-on tartottuk) egy egér elpusztult az ellenoldali nephrectomia utáni első napon, és a túlélési arány 87,5% volt. A 36,5 C-os csoportban két egér pusztult el az ellenoldali nefrektómia utáni első 2 napban, a túlélési arány 75%-a. A 36,5 C-os csoporthoz képest eggyel több egér pusztult el az ellenoldali nephrectómia utáni második napon, a túlélési arány 62,5% volt a 37 C-os csoportban. A 37,5 C-os csoportban az ellenoldali nefrektómia utáni első 2 napban elpusztult három egér kivételével egy egér pusztult el 3 nappal az ellenoldali nephrectomia után, 50%-os túlélési arány mellett. A 37,5 C-os csoportban történteken túlmenően, a 38 C-os csoportban egy egér elpusztult 5 nappal az ellenoldali nephrectomia után, és a túlélési arány 37,5% volt. Ezek az eredmények azt mutatták, hogy az egerek túlélési aránya fokozatosan csökkent az ischaemia alatti testmaghőmérséklet emelkedésével (5(A) ábra).
A vesefunkció hanyatlott a maghőmérséklet emelkedésével az ischaemia során
A hamis csoporthoz képest az uIRI az SCr és a BUN szignifikáns növekedését eredményezte az összes uIRI-csoportban (p < {0}}.05), ami arra utal, hogy az uIRI csoportokban lévő összes egér kifejlődött. vesekárosodás ellenoldali nephrectomia után. Két szomszédos hőmérsékletű csoport összehasonlítása azt mutatta, hogy az egerek SCr és BUN értéke 0,5 C-kal nőtt az ischaemiás testhőmérsékletben, de nem volt statisztikai különbség (p > 0,05). , ami azt sugallja, hogy a veseműködésben kevésbé kifejezett változások következtek be, 0,5 C-os maghőmérséklet-különbséggel ischaemia során. Az SCr és a BUN azonban szignifikánsan megemelkedett, ha a maghőmérséklet 1 C-kal vagy magasabbra emelkedett ischaemia során (p < 0,05), ami arra utal, hogy a vesefunkció szignifikánsan megváltozott az ischaemia során a maghőmérséklet 1 C-os különbségével. A vesefunkció szignifikánsan csökkent az ischaemiás testhőmérséklet emelkedésével (5. ábra (B, C)).
A veseszövet sérülése az ischaemia során megemelkedett testmaghőmérséklet következtében romlott
A HE-festés szerint az ál-csoportba tartozó egerek veseszöveti szerkezete normális volt. Az IRI által kiváltott kóros elváltozások minden felhasználói csoportban megfigyelhetők voltak, mint például a különböző mértékű tubulus epithelialis sejt vakuoláris degeneráció, ecsetszegély leválás, fokális diszintegrációs nekrózis, egyes tubuláris lumen kitágulása, változó morfológiájú vese tubuláris hámsejt ödéma, valamint ráncos és szklerotikus glomerulusok, mesangiális sejtek hiperplázia és kitágult Bowman-kapszula, gyulladásos sejtinfiltráció a vese interstitialisban (6(A) ábra).
A vesetubulusok és glomerulusok kóros sérülési pontszámai azt mutatták, hogy az ál-csoporthoz képest a vese kóros sérülése minden uIRI-csoportban szignifikánsan súlyosabb volt (p < {0}}.05). ), ami arra utal, hogy a vese nyilvánvaló patológiás sérülése minden uIRI-csoportban megjelent, és az AKI-CKD modellt sikeresen fejlesztették ki. Két szomszédos hőmérsékletű csoport összehasonlítása azt mutatta, hogy a vesepatológiás sérülések pontszámai növekedtek a testmaghőmérséklet 0,5 C-os emelkedésével az ischaemia során, de ennek nem volt statisztikailag szignifikáns jelentősége (p > 0,05), míg a vese a kóros sérülés szignifikánsan megnőtt a magtest hőmérsékletének 1 C-os és afeletti növekedésével ischaemia során (p < 0,05) (6(B, C) ábra). Ezek az eredmények azt mutatták, hogy a vese kórszövettani károsodása szignifikánsan megváltozott az ischaemia során 1 C-os maghőmérséklet-különbséggel, és fokozatosan nőtt a megemelkedett maghőmérséklettel ischaemia során.
A vesefibrózis a test maghőmérsékletének emelkedésével romlik az ischaemia során. Vese súlya.
A színlelt csoporthoz képest az uIRI szignifikáns vesetömeg-csökkenést okozott minden uIRI csoportban, és az eltérő ischaemiás testhőmérsékletű egerekben különböző fokú vesefibrózis alakult ki. Két szomszédos hőmérsékletű csoport összehasonlítása azt mutatta, hogy a vesetömeg csökkenése nem mutatott szignifikáns különbséget, ha a test maghőmérséklete {{0}},5 C-kal emelkedett ischaemia alatt (p > 0). 7}}5), ami azt sugallja, hogy az ischaemia során a maghőmérséklet 0,5 C-os eltérése nem volt szignifikáns hatással a vese súlyának változására. Ha az ischaemiás periódusban a maghőmérséklet 1 C-kal különbözött, a vese súlya szignifikánsan megváltozott (p < 0,05), és az ischaemiás testhőmérséklet emelkedésével fokozatosan csökkent (7(A) ábra).
7. ábra: A testmaghőmérséklet hatása ischaemia alatt a vesefibrózisra uIRI-vel és késleltetett ellenoldali neph rectomiával rendelkező egerekben. A bal vesét a(z) 0 napon IRI-nek vetettük alá, és a jobb vese reszekcióját különböző testmaghőmérsékleten (36 C, 36,5 C, 37 C, 37,5 C és 38 C) a bal ischaemiás idejével. vese 24 percnél rögzített, és a jobb vesét 14 nappal a bal vese IRI után eltávolítottuk. A vesefibrózist a vese súlya, a Masson-féle trikróm festés, valamint a fibronektin (FN), kollagén I (COL-I) és a-simaizom aktin (a-SMA) expressziója alapján értékelték. (A): A vese tömege a testtömeghez viszonyítva. (B): A sérült vese Masson-féle trikróm festése, amely a fibrotikus elváltozásokra jellemző (%) (nagyítás, 200 ). (C): A Masson-féle trikróm festéssel kimutatott fibrotikus terület félig mennyiségi meghatározása. (D): Kvantitatív RT-PCR elemzések az FN expressziójára a vesében. (E): Kvantitatív RT-PCR elemzések a COL-I expressziójára a vesében. (F): Reprezentatív Western blot képek az FN, COL-I és a-SMA számára. (G): Oszlopdiagram, amely a b-aktinnal normalizált FN fehérje expressziót mutatja. (H): oszlopdiagram, amely a b-aktinnal normalizált COL-I fehérje expressziót mutatja. (I): Oszlopdiagram, amely a b-aktinnal normalizált a-SMA fehérje expressziót mutatja. n ¼ 3–7/csoport. p < 0,05. NS: nem szignifikáns.
Masson trikróm foltja.
Az uIRI után 8 héttel Masson trikróm festési eredményei azt mutatták, hogy az ál-csoporthoz képest a veseszövetek fibrotikus területe minden uIRI-csoportban szignifikánsan megnőtt (p < 0.05), ami arra utal, hogy fibrotikus kimenetel minden uIRI csoportban előfordult. Két szomszédos hőmérsékletű csoport összehasonlítása azt mutatta, hogy a vesefibrózis területe nőtt, de statisztikailag nem szignifikánsan, amikor a test maghőmérséklete 0,5 C-kal emelkedett ischaemia alatt (p > 0).{10} }5), ami azt sugallja, hogy az ischaemia alatt a testmaghőmérséklet 0,5 C-os különbsége nem volt szignifikáns hatással a vesefibrózisra. A maghőmérséklet minden 1 C-os emelkedése esetén ischaemia alatt a vese intersticiális fibrózisának területe szignifikánsan megnőtt (p < 0,05), ami azt jelzi, hogy az ischaemia alatti testmaghőmérséklet 1 C-os emelkedése jelentős hatással volt a vese intersticiális fibrózisára és a vesefibrózisra. fokozatosan romlott az ischaemia alatti testmaghőmérséklet emelkedésével (7.(B,C) ábra).
ECM a veseszövetben. Az adatok azt mutatták, hogy az ál-csoporthoz képest az FN és a COL-I expressziója a veseszövetekben minden uIRI csoportban szignifikánsan megnövekedett (p < 0.05), ami összhangban volt a Masson-festés eredményei. Két szomszédos hőmérsékletű csoport összehasonlítása azt mutatta, hogy az FN és COL-I expressziója a veseszövetekben 0,5 C-kal nőtt a maghőmérsékletben ischaemia alatt, de statisztikailag szignifikáns különbség nem volt (p > {{8). }}.05), ami azt jelzi, hogy az ischaemia során a maghőmérséklet 0,5 C-os különbsége nem volt szignifikáns hatással az ECM-lerakódásra, míg az FN és a COL-I expressziója szignifikánsan nőtt az 1 C-os növekedéssel. ischaemia alatt a magtesthőmérséklet (p < 0,05), és a testhőmérséklet emelkedésével kifejezettebben emelkedtek. Összefoglalva, az ECM-lerakódás vagy a fibrotikus kimenetel a veseszövetekben nőtt a magasabb maghőmérséklettel ischaemia során (7. ábra (D–H)).
Myofibroblasztok a veseszövetben.
Az ál-csoporthoz képest az a-SMA expressziója a veseszövetben minden uIRI-csoportban szignifikánsan megnövekedett (p < 0.05), ami arra utal, hogy a myofibroblasztok szignifikánsan megnövekedtek az összes uIRI-csoportban . Két szomszédos hőmérsékletű csoport összehasonlítása azt mutatta, hogy az a-SMA expressziója a vesében megnőtt, ha a test maghőmérséklete 0,5 C-kal emelkedett ischaemia alatt, de nem volt szignifikáns különbség (p > 0 .05), ami azt sugallja, hogy az ischaemiás testhőmérséklet 0,5 C-os különbségének nincs szignifikáns hatása a vese myofibroblasztjainak változásaira. Ezenkívül az a-SMA expressziója a veseszövetekben szignifikánsan megnőtt az ischaemiás testhőmérséklet 1 C-os emelkedésével, és az a-SMA expresszió növekedése szignifikánsabb volt a testhőmérséklet emelkedésével (p < 0,05), ami arra utal, hogy a miofibroblasztok szignifikánsan megváltoztak, amikor a testhőmérséklet emelkedett. az ischaemia során a testmaghőmérséklet különbsége 1 C vagy több volt. Az ischaemia során a testmaghőmérséklet emelkedésével párhuzamosan a myofibroblasztok fokozatosan növekedtek a veseszövetekben (7. ábra (F, I)).
3. protokoll: az ischaemiás időtartamok hatása az AKI-CKD átmenetre
A túlélési arány az ischaemiás időtartam növekedésével csökkent Ahogy a 3. kísérletben említettük, az ischaemiás időtartamok AKI-CKD átmenetre gyakorolt hatásának vizsgálata érdekében az ischaemiás testhőmérsékletet uIRI során 37 C-on rögzítettük, és az ellenoldali vesét eltávolítottuk. nappal az uIRI után. Az eredmények azt mutatták, hogy a 21 perces csoportban (az ischaemiás időtartam 21 perc volt) egy egér az ellenoldali vese eltávolítása után 1, illetve 2 napon elpusztult, a túlélési arány 75%, és egy másik egér 2 nappal az ellenoldali nefrektómia után. a 24 perces csoportban 62,5%-os túlélési arány mellett. A 27-perces csoportban négy egér, két egér, egy egér és egy egér pusztult el 1, 3, 5 és 7 napon az ellenoldali nefrektómia után, és a túlélési arány {{ 18}}%. Hasonlóképpen, öt egér, két egér és egy egér pusztult el 1, 2 és 3 nappal az ellenoldali nefrektómia után a 30-perces csoportban, és a túlélési arány 0% volt. Ez azt jelezte, hogy a túlélési arány az ischaemiás időtartam növekedésével csökkent, mivel a 27 perces csoportban és a 30-perces csoportban 7 nappal, illetve 3 nappal az összes egér elpusztult az ellenoldali nefrektómia után (8(A) ábra).
A vesefunkció csökkent az ischaemia hosszabb időtartamával
Az adatok azt mutatták, hogy a színlelt csoporthoz képest mind a 21 perces, mind a 24 perces csoportban szignifikánsan megnőtt az SCr és a BUN (p < 0.05), ami a vesefunkció romlását jelzi. Összehasonlítva a 21 perces csoporttal, a 24 perces csoportban kifejezettebb SCr és BUN növekedés mutatkozott (p < 0,05), ami azt jelzi, hogy a vesefunkció szignifikánsan megváltozott az ischaemiás időtartam 3 perces különbségével és a vesefunkció nyilvánvalóbb csökkenésével. hosszabb ischaemiás időtartammal is megfigyelhető volt (8(B,C) ábra).
8. ábra: Az ischaemiás időtartamok hatása a túlélési arányra és a veseműködésre uIRI-vel és késleltetett ellenoldali nephrectómiával rendelkező egerekben. A bal vesét a(z) 0. napon IRI-nek vetettük alá, és a jobb vese reszekcióját különböző ischaemiás időtartamokban (21 perc, 24 perc, 27 perc és 3{10}} perc) végeztük, rögzített maghőmérséklet mellett. 37 C-on a vese ischaemia során, és a jobb vesét 14 nappal a bal vese IRI után eltávolítottuk. (A): Az egerek túlélését minden csoportban pontozták és százalékban mutatták be. (B és C): A vesefunkciót a szérum kreatinin (SCr) és a vér karbamid-nitrogén (BUN) alapján becsülték. n ¼ 5–6/ csoport. p < 0,05.
A vese kórszövettani károsodása az ischaemia hosszabb időtartamával súlyosbodott
A HE-festés szerint az ál-csoportba tartozó egerek veseszöveti szerkezete normális volt. A színlelt csoporthoz képest a 21 perces és a 24 perces csoportban különböző mértékű kóros elváltozások voltak, beleértve a tubulus epithelialis sejt vakuoláris degenerációját, ecsetszegély leválást, fokális dezintegrációs nekrózist, egyes tubuláris lumen kitágulatát, vese tubuláris epiteliális sejt ödémát változó morfológiával. , ráncos és szklerotikus glomerulusok, mesangialis sejthiperplázia és kitágult Bowman-kapszula, valamint gyulladásos sejtinfiltráció az interstitialisban (9(A) ábra). A vesetubulusok és glomerulusok kóros sérülési pontszámai szignifikánsan magasabbak voltak mind a 21 perces, mind a 24 perces csoportban, mint az ál-csoportban (p < 0.05), ami arra utal, hogy jelentős vesepatológiás sérülés alakult ki mindkét felhasználói csoport. Továbbá a 24 perces csoportban magasabb volt a vesepatológiás sérülés pontszáma és súlyosabb kóros sérülés, mint a 21 perces csoportban (p < 0,05) (9. ábra (B, C)), ami arra utal, hogy a vesepatológiás vesekárosodás szignifikáns változást mutatott a 3. min különbség az ischaemiás időtartamban. Minél hosszabb ideig tart az ischaemia, annál súlyosabb a vese kóros károsodása
A vesefibrózis rosszabbodott az ischaemia hosszabb időtartamával Vese súlya.
A színlelt csoporthoz képest mind a 21 perces, mind a 24 perces csoportban szignifikánsan csökkent a vesetömeg (p < 0.05), a 24 perces csoportban pedig jelentősebb volt a vesetömeg-csökkenés. a 21 perces csoporthoz képest (p < 0,05). Ezek azt mutatták, hogy az ischaemiás időtartam 3-perces különbsége a vese súlyának jelentős változását eredményezte, és a vesetömeg nyilvánvalóbb csökkenése látható hosszabb ischaemiás időtartam esetén (10. ábra (A)).
Masson trikróm foltja. A Masson-féle trikróm festés és a fibrotikus terület analízisének félkvantifikálása azt mutatta, hogy nem volt szignifikáns intersticiális fibrotikus változás az ál-csoportban, míg a vese interstitialisban eltérő mértékű fibrotikus elváltozások voltak láthatók mind a 21 perces, mind a 24 perces csoportban (p < { {3}}.{7}}5). A 21 perces csoporthoz képest a 24 perces csoportban magasabb volt a veseszövet fibrotikus mértéke (p < 0,05), ami azt jelzi, hogy a vesefibrózis szignifikánsan megváltozott az ischaemiás időtartam 3 perces különbségével, és hosszabb ischaemiás esetén súlyosabb vesefibrózis lesz. időtartama (10(B,C) ábra).
ECM a veseszövetben. Western blot és RT-PCR analízis azt mutatta, hogy a hamis csoporthoz képest az FN és a COL-I expressziója szignifikánsan megemelkedett mind a 21 perces, mind a 24 perces csoportban (p < 0.05) , ami azt jelzi, hogy az IRI által kiváltott ECM szignifikánsan megemelkedett az uIRI csoportokban, és a vese jelentős fibrotikus progresszión ment keresztül. A 21 perces csoporthoz képest az FN és a COL-I expressziója kifejezettebb volt a veseszövetben a 24 perces csoportban (p < 0,05), ami azt jelzi, hogy a veseszövetekben az ECM-lerakódás szignifikánsan megváltozott, 3 perces különbséggel az ischaemiás időtartam és az ECM-lerakódás az ischaemiás időtartam meghosszabbodásával nőtt (10. ábra (D–H)).
Myofibroblasztok a veseszövetben. A Western blot analízis kimutatta, hogy az ál-csoporthoz képest a vese a-SMA expressziója a 21 perces és a 24 perces csoportban szignifikánsan megnőtt (p < 0.05), ami azt jelzi, hogy a miofibroblasztok szignifikánsan megnőtt a vese az uIRI csoportokban, és jelentős fibrotikus progresszió következett be. Az a-SMA expressziója szignifikánsan megnőtt az ischaemiás időtartam 3 perces növekedésével (p < 0,05), és több myofibroblasztot találtak meghosszabbodott ischaemiás időtartammal (10. (F, I) ábra).
9. ábra: Az ischaemiás időtartamok hatása a vese szövettani károsodására uIRI-vel és késleltetett kontralaterális nefrektómiával rendelkező egerekben. A bal vesét a(z) 0. napon IRI-nek vetettük alá, és a jobb vese reszekcióját különböző ischaemiás időtartamokban (21 perc, 24 perc, 27 perc és 30 perc) végeztük, rögzített maghőmérséklet mellett. 37 C-on a vese ischaemia során, és a jobb vesét 14 nappal a bal vese IRI után eltávolítottuk. A vese szövettani sérülését hematoxilin-eozin (HE) festéssel határoztuk meg. (A): A sérült vese reprezentatív HE festése, amely az AKI utáni kóros elváltozások tipikus kórszövettani jellemzőit mutatta, beleértve a különböző mértékű tubuláris hámsejt vacuoláris degenerációt, ecsetszegély leválást, fokális dezintegrációs nekrózist, egyes tubuláris lumen dilatációját (# ), változó morfológiájú vese tubuláris hámsejt-ödéma és gyulladásos sejtinfiltráció (%). Néhány glomerulus ráncos és szklerotikus volt, mezangiális sejthiperpláziával (&) és kitágult Bowman-kapszulával (nagyítás, 400). (B): A tubulointerstitialis sérülés félig mennyiségi meghatározása. (C): A glomeruláris sérülés félig mennyiségi meghatározása. n ¼ 5–6/csoport. p < 0,05.
A Wecistanche támogató szolgáltatása – Kína legnagyobb ciszterna exportőre:
E-mail:wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/Tel.:+86 15292862950
Vásároljon további specifikációkért:
https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop
