Miért használható a Herba Cistanches a vesehiányos szindróma kezelésére?

A metabolikus profilalkotás feltárja a Herba Cistanches terápiás hatásait a hidrokortizon által kiváltott „vesehiányos szindróma” állatmodelljében

Kapcsolatfelvétel: emily.li@wecistanche.com

Yunping Qiu, Minjun Chen, Mingming Su, Guoxiang Xie, Xin Li, Mingmei Zhou, Aihua Zhao, Jian Jiang és Wei Jia

Absztrakt

Háttér

Herba Cistanches(Roucongrong) hatékony a Shenxu Zheng ('vesehiányos szindróma'). A növényi beavatkozásra adott mechanizmusok és szisztémás metabolikus válaszok azonban nem tisztázottak.

Mód

GC-MS alapú metabolikus profilozás segítségével vizsgáltuk a metabolikus válaszokatHerba Cistanchesbeavatkozás a hidrokortizon által kiváltott patkánymodellbevesehiányos szindróma'.

Eredmények

A hidrokortizon injekció beadása után a patkányok metabolikus profilja különböző időpontokban különbözött az adagolás előtti metabolikus állapottól, az 1. naptól a 10. napig, míg a hidrokortizonnal és vízkivonattal kezelt patkányok metabolikus profiljaHerba Cistanchesa 10. napon visszatért az adagolás előtti állapotba.

Következtetés

A beavatkozás aHerba Cistanchesszisztémás felépülést okozott a hidrokortizon által kiváltott metabolikus zavarból patkányokban. Ez a tanulmány azt is bizonyítja, hogy a metabolikus profilalkotás hasznos a növényi gyógyszerek terápiás mechanizmusainak tanulmányozásában.

Háttér

A biokémiai reakciók, a szabályozási mechanizmusok és az enzimaktivitások modulálása révén számos gyógyszer vagy vegyi anyag az egyes sejtekben, szövetekben vagy testnedvekben jelenlévő metabolitok fluktuációját okozza [1]. A metabolikus profilalkotás, azaz az alacsony molekulatömegű (MW < 1000="" da)="" metabolitok="" szondázása="" egy="" fejlett="" analitikai="" eszközzel,="" amely="" többváltozós="" statisztikákkal="" párosul,="" megmutathatja="" az="" élő="" rendszerek="" xenobiotikumokra="" adott="" szisztémás="" válaszait.="" technikailag="" megvalósítható="" továbbá="" egy="" szervezet="" összes="" multifaktoriális="" öröklődő="" és="" környezetileg="" befolyásolt="" anyagcsereprofiljának="" katalogizálása,="" beleértve="" a="" toxinok="" és/vagy="" betegségek="" által="" kiváltott="" zavarok="" vagy="" egyensúlyhiányok="" fiziopatológiai="" következményeit="" az="" anyagcsere-szabályozó="" hálózatban="" szisztémás="" szinten.="" a="" mai="" napig="" a="" metabolikus="" profilalkotást="" a="" szűrés,="" a="" diagnosztika,="" a="" betegségek="" prognózisa="" [2–4],="" valamint="" bizonyos="" gyógyszerek="" és="" vegyszerek="" biztonságossági="" értékelése="" terén="" alakították="" ki="">

A magmágneses rezonanciát (NMR) [12] és a tömegspektrometriát (MS) [13] önmagukban vagy kombinációban alkalmazták a toxinok és/vagy betegségek által kiváltott zavarok metabolikus következményeinek profilálására és jellemzésére. Az NMR, amely nem igényel fáradságos minta-előfeldolgozást, egy gyors és egyszerű módszer az összetett és érintetlen biológiai minták belső információinak megszerzésére. Másrészt a kötőjeles SM széleskörű alkalmazása a metabolikus profilalkotásban nagy érzékenységének és elérhetőségének köszönhető [14, 15]. Nevezetesen, a GC-MS-alapú metabolikus profilalkotást a gyógyszerek és gyomirtó szerek in vivo mechanizmusainak, a betegségek biomarkereinek [16] és a megváltozott génexpresszió metabolizmusra gyakorolt ​​hatásainak feltárására, valamint az organizmusok teljesítményének nyomon követésére használták a biotechnológiai alkalmazásokban [17–20]. .

Herba Cistanches(Roucongrong), egy gyakori kínai tónusos gyógynövény, amely a sivatagban növekszik, jelentős aktivitást mutat a memória [21] és/vagy a szexuális potencia [22] javításában, a szabad gyökök megkötésében, az öregedésgátlásban [23–26] és a neuroprotekcióban [27]. , 28]. Évszázadokig,Herba Cistancheshatékonyan alkalmazták Shenxu Zheng ('vesehiányos szindróma') [29]. NemrégHerba Cistancheskimutatták, hogy javultak a hidrokortizon által kiváltott vesebetegségek [30]; metabolikus következményei azonban nem tisztázottak. Korábbi tanulmányunk [31] azt találta, hogy a nagy dózisú hidrokortizon hatásának kitett patkányok metabolikus profilja (azaz állatmodell avesehiányos szindróma') [32], az endogén metabolitok egyedi biokémiai mintázatát mutatta ki a vizeletben. Ezek az eredmények arra inspiráltak bennünket, hogy tanulmányozzuk a hidrokortizon módosítását követő konzisztens biokémiai változások mechanizmusait, GC-MS alapú metabolikus profilozás segítségével annak vizsgálatára, hogy a Herba Cistanches képes-e visszafordítani vagy ellensúlyozni a hidrokortizon aberrált metabolikus hatásait.

A Cistanche javíthatja a veseműködést

Mód

Anyagok és műszer

Herba Cistanchesa Shanghai Leiyunshang Pharmaceutical Co Ltd-től (Kína) vásárolta, és Dr. Mengyue Wang (Farmakognosztikai Laboratórium, Gyógyszerészeti Iskola, Shanghai Jiao Tong Egyetem) Cistanche deserticola YC Ma-ként azonosította egy szabványos protokoll szerint [33]. A hidrokortizon oldatos injekció (0,5 százalék) a Shanghai Xinyi Pharmaceutical Co-tól (Kína) vásárolt. A származékképző reagensek N-metil-N-trimetil-szilil-trifluor-acetamid (MSTFA) (Sigma-Aldrich Inc, USA) és trimetil-jodosilán (TMSI) (Sigma-Aldrich Inc, USA) voltak, 1000:1 arányban keverve. A kísérletben használt összes reagens analitikai minőségű volt. Ultratiszta vizet Millipore tisztítórendszerrel (18,2 MΩ, USA) állítottunk elő. A metabolikus ketreceket a Suzhou Fengshi Laboratory Animal Experiment Co Ltd-től (Kína) vásároltuk.

Herba Cistanches kivonat készítése

Ötszáz gramm durván porított növényi anyagot 2 liter ultratiszta vízzel visszafolyató hűtő alatt forraltunk 2 órán át. Szűrés után az extraktumot az eredeti térfogat körülbelül egytizedére pároljuk be Buchi rotációs bepárlón, és egy mérőlombikban ultratiszta vízzel 250 ml-re hígítjuk. A nyersanyag végső koncentrációjaHerba CistanchesA kivonat 2 g/ml volt.

Adagolás és mintavétel

Ebben a vizsgálatban az összes állat kezelése megfelelt a nemzeti irányelveknek, és a Sanghaji Hagyományos Kínai Orvostudományi Egyetem Laboratóriumi Állatok Központjában, Sanghajban, Kínában végezték. Összesen 19, kilenc hetes hím Wistar patkányt vásároltunk a Shanghai Laboratory Animal Co Ltd-től (Kína). Valamennyi állatot szabályozott hőmérséklettel (20–22 fok) és páratartalommal (60 ± 10 százalék), valamint 12 órás sötét/világos ciklusban tartottunk, reggel 8:00 világítással. A patkányok ad libitum táplálékot és vizet kaptak. Kéthetes akklimatizáció után az állatokat egyéni metabolikus ketrecekbe helyezték, és véletlenszerűen három csoportra osztották: (1) kezelési csoport (n=7), amelyben 1,5 mg/100 g hidrokortizont (5 százalék) ip. a testtömeg, majd a szájon át történő beadásaHerba Cistancheskivonat 10 napra; (2) modellcsoport (n=7), amelyben hidrokortizont (5 százalék) ip-ben injektáltak 1,5 mg/100 g dózisban naponta egyszer 10 napon keresztül; és (3) kontrollcsoport (n=5), amelyben a vivőanyagot körülbelül 0,6 ml-ben intraperitoneálisan fecskendezték be 10 napig [31].Herba Cistanchesa kezelt csoportnak 20 g/kg dózisban adták be Shen és munkatársai ajánlása szerint. [30]. Huszonnégy órás vizeletmintákat vettünk meghatározott időközönként: adagolás előtt (-24 – 0 óra), 1. napon (0–24 óra), 3. napon, 7. napon és 10. napon. Az összes vizelet A mintákat centrifugáltuk (6383 × g, LG 16-W, Beijing Jingli Centrifuge Co Ltd, Kína) 10 percig a lebegő törmelék eltávolítására, és azonnal tároltuk -80 fokon a további GC-MS elemzéshez.

Mintaelőkészítés és GC-MS

A GC-MS-t korábbi vizsgálatunk szerint végeztük kisebb módosításokkal [31]. Röviden összefoglalva, a trimetilszilil- (TMS) derivatizált analit minden egyes 0,5 μl-es aliquot részét egy fuzionált szilícium-dioxid kapilláris oszlopba fecskendeztük (17 m × 220 μm belső átmérő, 0,11 μm filmvastagság; HP Ultra{ {9}}, Agilent J&W Scientific, USA). A GC-MS-t kötőjeles PerkinElmer gázkromatográfiával és TurboMass-Auto rendszerű XL tömegspektrométerrel (PerkinElmer Inc, USA) végeztük.

Adatfeldolgozás és többváltozós elemzés

A GC-MS adatokat a DataBridge (PerkinElmer Inc, USA) segítségével NetCDF formátumba konvertáltuk. Egyéni szkriptek futottak a MATLAB 7.0 (The MathWorks Inc, USA) programban az alapvonal-korrekció, a csúcsdekonvolúció és -igazítás, a belső standard kizárása és a kromatogram teljes összegére történő normalizálás érdekében. Az eredményül kapott 3-dimenziós mátrix, amely tetszőleges csúcsindexet (páros retenciós idő-m/z), mintákat (megfigyeléseket) és normalizált csúcsterületeket (változókat) tartalmaz, a SIMCA-P 11.{7}} szoftverbe importálva lett. csomag (Umetrics, Svédország) többváltozós elemzéshez.

Az átlag-központosítást oszloponként végeztük az eltolások eltávolítása érdekében. Az összes mért metabolitot azonos szinten kezeltük automatikus skálázással (egységvarianciára skálázva) a többváltozós elemzés előtt. A főkomponens-elemzést (PCA) a SIMCA-P 11.{5}} szoftverrel végeztük, hogy feltárjuk az általános klaszterezést, csoportosítást és trendeket az előzetes ismeretek nélküli alanyok között. Az első főkomponens (PC1) jelenti a legnagyobb eltérést az adatokban. A második főkomponens (PC2) ortogonális a PC1-re, és a PC1 által nem magyarázott maximális variancia mértékét jelenti. A többi fő alkotóelemet ugyanilyen módon építették fel. Eközben a PCA-pontszámok átlagos pályáját használták, hogy dinamikus indikációt adjanak a szindróma kialakulására, progressziójára és/vagy felépülésére az idő múlásával. A részleges legkisebb négyzetek – diszkriminancia analízis (PLS-DA) korrelációs együtthatóit használtuk az egyes változók fontosságának rangsorolására, hogy tovább ragadhassuk a csoportok közötti elválasztásért felelős, eltérően expresszált metabolitokat. A PLS-DA a részleges legkisebb négyzetek (PLS) módszeréből származik, amely egy általánosított többszörös regressziós módszer, amely több kollineáris előrejelzővel és válaszváltozóval foglalkozik [34]. A PLS-DA a SIMCA-P 11.{16}} szoftverrel [35] történt. Egy tipikus 7-körös keresztellenőrzést hajtottak végre. A minták egyhetedét minden körben kizártuk a modellből a modell validálása érdekében. Ezt az eljárást iteratív módon megismételtük a keresztellenőrzés érdekében, amíg minden mintát egyszer kizártak.

A Herba Cistanches a vesehiányos szindróma kezelésére használható

Egyváltozós elemzés

A többváltozós analízis során azonosított, differenciálisan expresszált metabolitokat a MATLAB 7.0 szoftverben (The MathWorks Inc, USA) is ellenőriztük nemparaméteres Kruskal-Wallis teszttel P < 0.05 szignifikancia szinttel. .

Eredmények és megbeszélés

GC-MS spektrumok értelmezése

A kezelt csoportból, modellcsoportból és kontrollcsoportból származó patkányvizelet tipikus GC-MS összionáram- (TIC) kromatogramja a 10. napon az 1. ábrán látható. A dekonvolúciós eljárás során összesen 117 egyedi metabolitot mutattak ki következetesen a vizeletminták legalább 90 százalékában. Az érdeklődésre számot tartó csúcsok összetett azonosítását a tömegspektrum-fragmensnek a NIST (Nemzeti Szabványügyi és Technológiai Intézet) referenciakönyvtáraival, Wiley-könyvtáraival és referenciastandardjaival való összehasonlításával végeztük. A 117 metabolitból 23-at sikerült igazolnunk (20 százalék), amelyek többsége aminosavak, poliaminok, zsírsavak, purinok és mellékvese hormonok voltak, amelyek főként az energia-, lipid- és aminosav-anyagcserében vesznek részt.

1. ábra A vizelet tipikus GC-MS összionáram- (TIC) kromatogramja a 10. napon a kezelési csoportból (A), modellcsoportból (B) és kontrollcsoportból (C).

Időfüggő változások a vizeletmintákban

A modellcsoportból és a kezelt csoportból származó PCA pontszámok átlagos pályáit a 2. ábra szemlélteti. A trajektóriadiagram tranziens eltolódása megmutatta a 'vesehiányos szindrómahidrokortizon önmagában vagy azzal kombinálva indukáljaHerba Cistancheskezelés. A modellcsoportban a metabolikus mintázatok az 1. és a 3. napon eltértek a 7. és 10. napon tapasztaltaktól, ami arra utal, hogy az anyagcsere-szabályozó hálózat az 1. és a 3. napon átmenhetett egy átmeneti perióduson, nagy fluktuációkkal, és hogy a zavart hálózat a 7. és a 10. napon helyreállhatott, ami végül az adagolás előtti állapothoz közeli stabil mintázathoz vezetett. Hasonlóképpen, az a tény, hogy az 1. és 3. napon a metabolikus mintázat nyilvánvalóan eltért az adagolás előttiétől a kezelési csoportban, a dominánsvesehiányos szindróma' állapot. Ebben az időszakban a hidrokortizon hatása valószínűleg domináns volt aHerba Cistancheskivonat. Ezek a megállapítások összhangban voltak azzal az általános megfigyeléssel, hogy mindkét csoport patkányai az 1. és a 3. napon kisebb aktivitást mutattak. Érdekes módon a 7. és 10. napon a metabolikus mintázatok fokozatosan és jelentősen megközelítették az adagolás előtti állapotot, ami arra utal, hogyHerba Cistanchesellentétes vagy terápiás hatást fejtett ki a hidrokortizonnak kitett patkányokon. Ezek az eredmények alátámasztják azokat a klinikai eredményeket, amelyekHerba Cistancheshatékonyan kezeli avesehiányos szindróma'. Általában mindkét pálya vizuális, átfogó és dinamikus képet ad a 'vesehiányos szindróma'.

2. ábra A PC1 és PC2 pontszámok átlagos pályája a modellcsoportból (-●-) és a kezelési csoportból (--●--) származó vizeletminták esetében. Minden pont egy átlagos pontszámot jelöl különböző időpontokban, azaz az adagolás előtt, az 1., 3., 7. és 10. napon. A hibasáv az első főkomponens által kapott minden egyes időpont szórását jelenti.

Vizeletminták összehasonlító metabolikus elemzése

A hidrokortizon metabolikus hatásainak jobb megértése érdekében összehasonlítottuk a kontroll-, a modell- és a kezelési csoportból nyert metabolikus profilokat. A három csoport általános csoportosítása könnyen megfigyelhető különböző időpontokban, azaz a beadás előtt, a 3. napon és a 10. napon (3. ábra). Míg az adagolás előtti vizeletprofilokban nincs elválasztási tendencia, a metabolikus profilok eltértek a kontrollcsoport profiljaitól a hidrokortizon expozíciót követő 3. napon. A hidrokortizon okozta metabolikus perturbáció mind a modell-, mind a kezelési csoportban megjelent. Azonban egy egymást követő 7-napos kezelés utánHerba Cistanches, a kezelt csoport metabolikus profilja ismét összehasonlíthatóvá vált a kontrollcsoportéval, ami arra utal, hogyHerba Cistancheshatékonyan helyreállította a megzavart anyagcserét.

3. ábra A kontrollcsoport (fekete gyémánt), a modellcsoport (piros gyémánt) és a kezelési csoport (kék gyémánt) metabolikus profiljának összehasonlítása különböző időpontokban: adagolás előtt (A), 3. napon (B) és 10. napon (C). A PCA pontszámok diagramján minden egyes pont a patkánytól kapott adatokat reprezentálja.

A metabolikus profilok differenciális azonosítása

Egy keresztellenőrzött PLS-DA modellt használtunk a kulcsfontosságú metabolitok azonosítására a különböző metabolikus profilokban, hogy könnyebb legyen megkülönböztetni a kontrollcsoport patkányait és a modellcsoport patkányait (azaz hidrokortizonnal indukált) patkányokkal vagy anélkül.Herba Cistancheskezelés a 3. napon (1. táblázat). Meghatároztuk az egyes kulcsfontosságú metabolitok relatív koncentrációjában a csoportok közötti változást, és a csoportok közötti változások megfelelő megjelenítését a beadás előtt, a 3. napon és az 1. napon 0 készítettük (4. ábra). Amint a 4. ábrán és az 1. táblázatban látható, míg a legtöbb endogén metabolit szignifikánsan növekedett vagy csökkent a modellcsoportban, a kezelt csoportban az 1. és 3. napon megfigyelhető átmeneti perióduson mentek keresztül, és fokozatosan megközelítették a kontroll (normál) szintet. . Például a 10. napon a kezelt csoportban a metabolitok enyhe (1,1-1,5-szeres) változásához képest a vizelet tirozin, tiramin, dopamin és noradrenalin nagymértékben megnövekedett (1,7-3,0-szeres) szintjét figyelték meg a modellcsoport a kísérlet során. Korábbi vizsgálatunk kimutatta, hogy a glükokortikoidok által kiváltott fokozott katekolamin-anyagcsere az immunfunkciók túlzott fogyasztását eredményezte, ezáltalvesehiányos szindróma' [31]. Herba Cistanches, egy tonizáló gyógynövény, amely javítja az immunrendszert [36], ellensúlyozhatja a hidrokortizon egyes hatásait.Herba Cistanchesképes lehet a normál anyagcsere-szabályozó hálózat helyreállítására is. További kísérletekre van szükség különböző megközelítésekkel, például molekuláris biológiával, sejtbiológiával és növénykémiával, hogy felvázoljuk a hatását.Herba Cistanches(és összetevői) a "vesehiányos szindróma'.

1. táblázat A jelen vizsgálat metabolikus profiljában szereplő metabolitok listája

Feladó: A metabolikus profilalkotás felfedi a terápiás hatásaitHerba Cistanchesa hidrokortizon által kiváltott állatmodellbenvesehiányos szindróma'

Megjegyzés: Az összes vegyület korrelációs együtthatóját (korrelációs együtthatóját) egy kereszt-validált PLS-DA modellből (Q2Ycum=0.899, két komponensből álló kielégítő modell) számítottuk ki a 3. napon a kontrollcsoport és a modellcsoport között. vele vagy nélküleHerba Cistancheskezelés. Ezenkívül a hajtásváltozásokat a nem paraméteres Kruskal-Wallis teszttel teszteltük. Kw (P) a teszt P értékeit jelöli. H=kontrollcsoport, M=modellcsoport, D=kezelési csoport. Például a H/M/0 a relatív hajtásváltozásokat jelöli (a modelltől a kontrollig) az adagolás előtti állapotban.

4. ábra A kulcsfontosságú metabolitok hajtásváltozásai. A piros szín a relatív megnövekedett koncentrációkat jelöli (szeres változások > 1,5), míg a zöld szín a relatív csökkent koncentrációkat (szeres változások < -1,5).="" a="" -1,5="" és="" 1,5="" közötti="" hajtásváltozásokat="" fiziológiai="" eltéréseknek="" tekintjük.="" a="" szoros="" változás="" (m/h,="" d/h)="" a="" modellcsoport="" vagy="" a="" kezelt="" csoport="" koncentrációaránya="" a="" kontrollcsoporthoz="">

Következtetés

A jelen anyagcsere-profilozó vizsgálat GC-MS alkalmazásával azt mutattaHerba Cistanchesszisztémás felépülést idézett elő a hidrokortizon által kiváltott metabolikus zavarból patkányokban, amely állatmodell a 'vesehiányos szindróma'. Ez a tanulmány azt is bizonyítja, hogy a metabolikus profilalkotás hasznos módszer a növényi gyógyszerek terápiás hatásainak tanulmányozására.

Rövidítések

MS: tömegspektrometria

GC-MS: gázkromatográfia-tömegspektrometria

NMR: mágneses magrezonancia

PCA: főkomponens-elemzés

PLS-DA: részleges legkisebb négyzetek – diszkriminancia analízis

Hivatkozások

1. Nicholson JK, Lindon JC, Holmes E: „Metabonomics”: Élő rendszerek patofiziológiai ingerekre adott metabolikus válaszainak megértése biológiai NMR spektroszkópiai adatok többváltozós statisztikai elemzésén keresztül. Xenobiotica. 1999, 29 (11): 1181-1189. 10.1080/004982599238047.

2. Brindle JT, Antti H, Holmes E, Tranter G, Nicholson JK, Bethell HWL, Clarke S, Schofield PM, McKilligin E, Mosedale DE, Grainger DJ: A szívkoszorúér-betegség jelenlétének és súlyosságának gyors és nem invazív diagnózisa 1H segítségével -NMR alapú metabonómia. Nat Med. 2002, 8 (12): 1439-1444. 10,1038/nm802.

3. Constantinou MA, Papakonstantinou E, Benaki D, Spraul M, Shulpis K, Koupparis MA, Mikros E: A mágneses magrezonancia spektroszkópia alkalmazása főkomponens-analízissel kombinálva az anyagcsere veleszületett hibáinak kimutatására vérfoltok segítségével: A metabonómikus megközelítés. Anal Chim Acta. 2004, 511 (2): 303-312. 10.1016/j.aca.2004.02.012.

4. Beckonert O, Monnerjahn J, Bonk U, Leibfritz D: Metabolikus változások vizualizálása emlőrákszövetben 1H-NMR spektroszkópia és önszervező térképek segítségével. NMR Biomed. 2003, 16 (1): 1-11. 10.1002/nbm.797.

5. Mortishire-Smith RJ, Skiles GL, Lawrence JW, Spence S, Nicholls AW, Johnson BA, Nicholson JK: A metabonomika használata a károsodott zsírsav-anyagcsere azonosítására, mint a gyógyszer által kiváltott toxicitás mechanizmusára. Chem Res Toxicol. 2004, 17 (2): 165-173. 10.1021/tx034123j.

6. Waters NJ, Holmes E., Williams A., Waterfield CJ, Duncan Farrant R., Nicholson JK: NMR és mintázatfelismerési vizsgálatok a -naftilizotiocianát időfüggő metabolikus hatásairól patkányban a májra, vizeletre és plazmára: Integratív metabonomic megközelítés. Chem Res Toxicol. 2001, 14 (10): 1401-1412. 10.1021/tx010067f.

7. Coen M, Lenz EM, Nicholson JK, Wilson ID, Pognan F, Lindon JC: Az acetaminofen toxicitás integrált metabonómiai vizsgálata egérben NMR spektroszkópiával. Chem Res Toxicol. 2003, 16 (3): 295-303. 10.1021/tx0256127.

8. Small-Howard A, Turner H: A dohányból származó anyagoknak való kitettség a szekretált proteinázok túltermelését idézi elő a hízósejtekben. Toxicol Appl Pharmacol. 2005, 204 (2): 152-163. 10.1016/j.taap.2004.09.003.

9. Waters NJ, Waterfield CJ, Farrant RD, Holmes E, Nicholson JK: A beágyazott toxicitás metabonómiai dekonvolúciója: Alkalmazás a tioacetamid hepato- és nefrotoxicitására. Chem Res Toxicol. 2005, 18 (4): 639-654. 10.1021/tx049869b.

10. Robertson DG: Metabonomics in toxicology: A Review. Toxicol Sci. 2005, 85 (2): 809-822. 10.1093/toxic/kfi102.

11. Robertson DG, Bulera SJ: Nagy áteresztőképességű toxikológia: gyakorlati megfontolások. Curr Opin Drug Discovery Dev. 2000, 3 (1): 42-47.

12. Nicholson JK, Connelly J, Lindon JC, Holmes E: Metabonomics: A platform for studying drug toxicity and gene function. Nat Rev Drug Discov. 2002, 1 (2): 153-161. 10.1038/nrd728.

13. Taylor J, King RD, Altmann T, Fiehn O: Metabolomika alkalmazása a növényi genotípusok megkülönböztetésére statisztikák és gépi tanulás segítségével. Bioinformatika. 2002, 18 (SUPPL 2): S241-S248.

14. Wilson ID, Nicholson JK, Castro-Perez J, Granger JH, Johnson KA, Smith BW, Plumb RS: Nagy felbontású "ultra-teljesítményű" folyadékkromatográfia oa-TOF tömegspektrometriával összekapcsolva, mint eszköz a metabolikus útvonalak differenciális profilozására funkcionális genomikai vizsgálatok. J Proteome Res. 2005, 4 (2): 591-598. 10.1021/pr049769r.

15. Jonsson P, Gullberg J, Nordstrom A, Kusano M, Kowalczyk M, Sjostrom M, Moritz T: Stratégia különbségek azonosítására GC/MS módszerrel elemzett metabolomikus minták nagy sorozatában. Anal Chem. 2004, 76 (6): 1738-1745. 10.1021/ac0352427.

16. Ohdoi C, Nyhan WL, Kuhara T: A Lesch-Nyhan szindróma kémiai diagnosztikája gázkromatográfiás-tömegspektrometriás detektálással. J Chromatogr, B: Anal Technol Biomed Life Sci. 2003, 792 (1): 123-130. 10.1016/S1570-0232(03)00277-0.

17. Fiehn O, Kopka J, Dormann P, Altmann T, Trethewey RN, Willmitzer L: Metabolite profiling for plantfunctional genomics. Nat Biotechnol. 2000, 18 (11): 1157-1161. 10.1038/81137.

18. Lafaye A, Junot C, Pereira Y, Daniel G, Tabet JC, Ezan E, Labarre J: A kombinált proteom- és metabolitprofilozási elemzések meglepő betekintést engednek az élesztőkén-anyagcserébe. J Biol Chem. 2005, 280 (26): 24723-24730. 10.1074/jbc.M502285200.

19. Schauer N, Steinhauser D, Strelkov S, Schomburg D, Allison G, Moritz T, Lundgren K, Roessner-Tunali U, Forbes MG, Willmitzer L, Fernie AR, Kopka J: GC-MS könyvtárak metabolitok gyors azonosításához komplex biológiai mintákban. FEBS Lett. 2005, 579 (6): 1332-1337. 10.1016/j.febslet.2005.01.029.

20. Willse A, Belcher AM, Preti G, Wahl JH, Thresher M, Yang P, Yamazaki K, Beauchamp GK: A főbb hisztokompatibilitási komplexen szabályozott testszagok azonosítása összehasonlító gázkromatográfiás/tömegspektrometriás kísérlet statisztikai elemzésével. Anal Chem. 2005, 77 (8): 2348-2361. 10.1021/ac048711t.

21. Wang XW, Wang XF, Wu LY: Az egerek emlékezetének javítása a Cistanche deserticola feniletanoid-glikozidjaira. Rep Chin Pharm. 2002, 19: 41-42.

22. Xie JH, Wu CF: A Cistanche deserticola etanolos kivonatának hatása a monoamin neurotranszmitterek tartalmára patkányagyban. Zhongcaoyao. 1993, 24: 417-419.

23. Li LL, Wang XW, Wang XF: A glikozidok lipid-peroxidációja és sugárzás elleni hatásaherba Cistanches.Chin J Chin Mater Med. 1997, 22 (6): 364-367.

24. Shahat AA, Nazif NM, Abousetta LM, Ibrahim NA, Cos P, Van Miert S, Pieters L, Vlietinck AJ: A Duranta repens fitokémiai vizsgálata és antioxidáns aktivitása. Phytother Res. 2005, 19 (12): 1071-1073. 10.1002/ptr.1766.

25. Gao J, Igarashi K, Nukina M: Három új fenil-etanol-glikozid a Caryopteris incana-ból és antioxidáns hatásuk. Chem Pharm Bull. 2000, 48 (7): 1075-1078.

26. Kyriakopoulou I, Magiatis P, Skaltsounis AL, Aligiannis N, Harvala C: Samioside, a Phlomis samia szabadgyökfogó és antimikrobiális aktivitású új feniletanoid glikozidja. J Nat Prod. 2001, 64 (8): 1095-1097. 10.1021/np010128 plus .

27. Deng M, Zhao JY, Ju XD, Tu PF, Jiang Y, Li ZB: Protective effect of tubuloside B on TNF alfa-induced apoptosis in neuron cells. Acta Pharmacol Sin. 2004, 25: 1276-1284.

28. Geng XC, Song LW, Pu XP, Tu PF: A Cistanches salsából származó fenil-etanol-glikozidok neuroprotektív hatásai a 1-metil-4-fenil-1, 2, 3, 6- ellen tetrahidropiridin (MPTP) dopaminerg toxicitást indukált C57 egerekben. Biol Pharm Bull. 2004, 27: 797-801. 10.1248/bpb.27.797.

29. He W, Shu X, Zong G, Shi M, Xiong Y, Chen M: A vese erősítése és a yang támogatja a cistanche deserticola YC Ma hatását az előkészítés előtt és után. Zhongguo Zhong Yao Zazhi. 1996, 21 (9): 534-537. 575

30. Shen LZ, Zhong XY, Wang SX: A Cistanche deserticola hatása normál és hiányos Shen-yang patkányokra. Zhongyao Yaoli Yu Linchuang. 2001, 17 (1): 17-18.

31. Chen M, Zhao L, Jia W: Metabonómiai vizsgálat egy hidrokortizonnal indukált állatmodell biokémiai profiljairól. J Proteome Res. 2005, 4 (6): 2391-2396. 10.1021/pr050158o.

32. Chen Q, Yi NY: Állatmodellek és gyógyszerek Yin-hiányra és Yang-hiányra. A farmakológiai kutatások kísérleti módszertana a hagyományos kínai orvoslásban. Szerkesztette: Chen Q. 1993, Peking: People's Health Publishing House, 982-984.

33. National Committee of Pharmacopoeia: A Kínai Népköztársaság Gyógyszerkönyve. 2005, Peking: Press of Chemical Industry, 1: 90-

34. Több- és megaváltozós adatelemzés I. rész: Alapelvek és alkalmazások, Második átdolgozott és bővített kiadás. [http://www.umetrics.com/default.asp/pagename/training_literature/c/5]

35. SIMCA-P és SIMCA-P plus 11 Felhasználói kézikönyv. [http://www.umetrics.com/default.asp/pagename/downloads_userguide/c/3]

36. Chin HL, Su YC: Tanulmány a Cistanche deserticola Ma farmakológiai hatásairól. Zhongguo Zhong Yao Zazhi. 1993, 19: 143-146.

Feladó: Kínai orvoslás 3. kötet, Cikkszám: 3 (2008)