A Cistanche Deserticolából származó fenil-etanol-glikozidok izolálása és azonosítása

Kapcsolattartó: Audrey Hu Whatsapp / hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Intro

Cistanche deserticolaa kínai gyógyszerkönyvben gyűjtött száraz húsos szárCistanche deserticola, Orobanchaceae növény, amely a hagyományos kínai orvoslásban a vese tonizálására szolgáló, általánosan használt gyógyszer. A Cistanche deserticola számos fajtája létezik, és számos kutatási jelentés van a Cistanche salsa-ról ésCistanche tubulosaa szakirodalomban, de kevés tanulmány van a Gyógyszerkönyvben gyűjtött fajtákról. Luo Shangfeng és mások mannitot, 8-epigasztrikus savat és aminosavat kaptak Cistanche deserticolából. A Cistanche továbbfejlesztése és tanulmányozása érdekében a Xinjiang Medical College Gyógyszerészeti Tanszéke kivonta és elválasztotta vízoldható komponenseit - fenil-etanol-glikozidokat. Az eredmények azt mutatták, hogy négy komponenst különválasztottak és azonosítottak, ezekechinacoside, castanoside A,aktoszid, és 2'-Acetylacteosid. A fenti komponenseknek farmakológiai hatásai vannak, mint például a vesefunkciók és aöregedésgátló.

Kísérleti rész

A kísérleti gyógyászati anyagokat az Urumqi gyógyászati anyagokat gyártó cégtől vásárolták, és Jinghe megyében gyártották. A fajtákat Li Jiazheng, a Xinjiang Etnikai Orvostudományi Intézet társkutatója azonosította. A makroporózus gyanta modellje az AB-B volt, amely a Nankai Egyetem kémiai terméke. Az oszloprétegben használt szilikagél a Qingdao tengeri vegyipari üzem terméke volt, a Stephan-dex LH-20 a Shanghai Changzheng gyógyszergyár terméke volt. Az UV spektrofotométer modellje Shimadzu UV-360 volt. Az infravörös spektrofotométer a Shimadzu IR-440 volt. A H-NMR és C-NMR műszerek modelljei Bruker MSL-300 (300 megacycles) voltak

1. Extrakció és szétválasztás

Kitermelt Cistanche deserticola10 kg háromszor az etanol-reflux mellett, egyesítsük a kivonatot, és sűrítsük be csökkentett nyomáson történő beillesztésre, adjunk hozzá kis mennyiségű vizet a szuszpenzióhoz, zsírtalanítsuk etil-acetáttal, extraháljuk n-butanollal, keverjük össze az extraktumot, sűrítsük össze, csökkent nyomáson szárítsuk, adjunk hozzá kis mennyiségű vizet az oldódáshoz, egymás után gyűjtsük össze és sűrítsük a metanol részt makroporózus gyantaoszlopon és poliamid oszlopon keresztül (először vízzel, majd metanollal mossuk). Az összes fenil-etanol-glikozidot a szilikagél oszloprétegéből nyerjük. CHCl3-MeOH (10:3-10:5) gradienselú elúcióval összesen 78 patakot (kb. 300 ml /patakot) gyűjtöttünk össze, ebből 16-23 nyers vegyület IV (2,1 g), 28-42 nyers vegyület III (5,4 g), 48-61 nyers vegyület II (3,2 g), 65-78 nyers vegyület I (5,1 g). A fenti komponenseket szilikagél oszlopkromatográfiával tisztítottuk (az elúciós körülmények megegyeztek a fentiekkel), majd az LH-20 dextrán géloszloppal tisztítottuk. Eluáljuk CH3OH-val: H20 (l:1), és gyűjtsük össze a metanol részt, hogy iv (1,3 g), III (3,5 g), II (1,8 g) és I (3,5 g) monomer vegyületeket kapjunk.

2. Azonosítás

I. vegyület: világos sárga amorf por, FeCl3 reakció és α- Naftol teszt pozitív, szilikagél vékonyréteg-kromatográfia Rf értéke 0,3 (CHCl3:MeOH:H2O=6:4:1 expanzió, 20%H2SO4 permetdetektálás), UV λ (MeOH/nm):244, 292, 333. IR γ (KBr/MAX): cm-1: 3360, 1690, 1625, 1598, 1518. H-NMR (Metanol-d1) δ: 1,08 (3H, D, J=6Hz, CH3), 2,79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4,29, 4,39 (1H, D, J=8Hz, két glükóz terminál proton), 5,18 (1H, D, J=1Hz, rhamnozil terminál protonok), 6,28 (1H, J=16Hz, Ar-CH=CH-), 6,5-7,1 (6H, aril H), 7,59 (1H, D, J=16Hz, Ar-CH=CH-) C-NMR adatok az 1. táblázatban láthatók. A fenti kémiai reakció- és spektrális adatok összhangban vannak aechinacosideaz irodalomban. Ezért az I. vegyületet echinacoside-ként azonosítják.

II. vegyület: világos sárga amorf por, FeCl3 reakció és α- Naftol teszt pozitív volt, és a szilikagél vékonyréteg-kromatográfiája Rf 0,35 (a fejlődési és kimutatási körülmények megegyeztek a fentiekkel). UV és IR spektrumai nagyon hasonlóak voltak aechinacoside, de a H-NMR megjelent δ 3,84 (3H, s) jelnél, a C-NMR δ 56,5 jelnél jelenik meg, jelezve, hogy a szerkezet 1 metoxiát tartalmaz. UV λ (MeOH/nm):246, 290, 333. IR γ (KBr/MAX)cm-1: 3350, 1655, 1620, 1596, 1508. H-NMR(metanol-d1) δ: 1,08 (3H, d, J=6Hz, metilcsoport a ramnózban), 2,86 (2H, t, J = 7Hz, Ar-CH2-CH2-), 3,84 (3H, s, OCH3), 4,28, 4,39 (1H, d, J=8Hz, két glükózvégcsoport proton), 5,18 (1H, s, rhamnóz végcsoport protonjai), 6,27 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH=CH-), 6,65-7,1 (6H, aril H), 7,60 (1H, d, J= 16Hz, Ar-CH=CH-). A C-NMR adatokhoz lásd az 1. táblázatot, a fenti spektrális adatok összhangban vannak a castanozid A szakirodalmi értékével. Ezért a II. vegyületet castanozid ACompound III-ként azonosítottuk: világos sárga amorf por, szilikagél vékonyréteg-kromatográfia Rf értéke 0,40 (a fejlődési és kimutatási feltételek megegyeznek a fentiekkel). UV és IR spektrumai is hasonlóak az echinacoside-hoz. A H-NMR-ben eggyel kevesebb glükóz terminális proton van, a C-NMR-ben pedig eggyel kevesebb glükózjel, ami arra utal, hogy ez egy diszacharid. UV λ (MeOH/nm):247, 292, 334. IR γ (KBr/MAX):3350, 1690, 1625, 1600, 1515. H-NMR(metanol-d1) δ: 1,10 (3H, d, J = 6Hz, ramnóz-metil), 2,79 (2H, t, J = 7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4,38 (1H, d, J = 8Hz, glükóz terminál proton), 5,19 (1H, d, J = 1Hz, rhamnóz terminál proton), 6,28 (1H, d, J = 16Hz, Ar-CH = CH -), 6,5-7,1 (6H, aril H), 7,59 (1H, d, J = 16Hz, Ar-CH = CH -). A C-NMR-adatokat az 1. táblázat mutatja be. A fenti spektrális adatok összhangban vannak a szakirodalmi értékekkelaktoszid, tehát a LII vegyületet úgy határozzuk meg, hogyaktoszid.

IV. vegyület: világos sárga amorf por. Szilikagél vékonyréteg-kromatográfia Rf értéke 0,42 (a fejlődési és kimutatási feltételek megegyeznek a fentiekkel). Spektrális adatai nagyon hasonlítanak aaktoszid. Az infravörös spektrumban még egy 1735 cm-1-es abszorpciós csúcs van, és a H-NMR a δ1,98(3H) acetilmátrix jeleit mutatta. S), és a C-NMR a δ171,5 és 20,9 szén- és metilcsoportjainak jeleit mutatta. A glükozilezési elmozdulás törvénye szerint az acetilezés a 2 'cukor hidroxilcsoporton helyezkedik el. λ (MeOH/nm):247, 292, 333. IR γ (KBr/MAX):3430, 1725, 1700, 1630, 1605. 1525. H-NMR(metanol-d1) δ: 1,08 (3H, d, J= 6Hz, ramnóz-metil), 1,98 (3H, s. OAc), 2,70 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4,50 (1H, d=8Hz, glükóz terminál proton), 5,19 (1H, d, rhamnóz terminál proton), 6,28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-), 6,5-7,1 (6H, árj H), 7,60 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-). A C-NMR-adatokat az 1. táblázat mutatja be. A fenti spektrális adatok összhangban vannak a 2 '- Acetillakteozid szakirodalomértékével, így a IV. vegyület 2' - acetillakteozid.