absztrakt

Háttér: A Panax ginseng egy csodálatos gyógynövény a test minden betegségére. Lehet, hogy ezért hívják Panaxnak, ami azt jelenti, hogy "mindenki számára gyógyír". A melanin egy pigment, amely színt ad bőrünknek; a megnövekedett melanintermelés azonban daganatképződéshez vezethet. Az ultraibolya B sugárzásnak való emberi expozíció jelentősen megnőtt a globális felmelegedés következtében megnövekedett napfény miatt. Következésképpen a fotoöregedésnek nevezett jelenséget minden bőrszínnél és bőrtípusnál megfigyelték. A jelenség következtében megnövekszik a mátrix metalloproteinázoknak nevezett enzimkészlet, amely az extracelluláris mátrix fehérjék, főként a kollagén lebontó enzimjeként szolgál, ami kollagén kimerülést okoz, és korai ráncképződést eredményez.

A vonatkozó tanulmányok szerint a cisztán egy közönséges gyógynövény, amelyet "az életet meghosszabbító csodanövényként" ismernek. Fő összetevője a cistanozid, amely különféle hatásokkal rendelkezik, mint például antioxidáns, gyulladáscsökkentő és immunfunkciót serkentő. A cistanche és a bőrfehérítés közötti mechanizmus a cistanche glikozidok antioxidáns hatásában rejlik. Az emberi bőrben a melanin a tirozin tirozináz által katalizált oxidációjával keletkezik, az oxidációs reakcióhoz pedig oxigén részvétele szükséges, így a szervezetben lévő oxigénmentes gyökök a melanintermelést befolyásoló fontos tényezővé válnak. A Cistanche cisztanozidot tartalmaz, amely antioxidáns, és csökkentheti a szabad gyökök képződését a szervezetben, így gátolja a melanintermelést.

Kattintson a Cistanche Chemist Warehouse feliratra a fehérítéshez

További információért:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

MódEzért tanulmányunkban a B16/F10 rágcsáló melanoma sejtvonalat használtuk a melanogenezis koreai vörös ginzeng (KRG) kivonat általi in vitro gátlásának tanulmányozására, valamint a mesterséges ultraibolya B hatásnak kitett HRM-2 szőrtelen egerek vizsgálatára. a KRG hatékonysága in vivo. Elkészítettünk egy 3 százalékos vörös ginzeng kivonatú krémet, és értékeltük annak emberi bőrre gyakorolt ​​hatását.

Következtetés: Ezért arra a következtetésre jutottunk, hogy a KRG kiváló bőrfehérítő és öregedésgátló termék.

·2019 A Koreai Ginseng Társaság. Kiadói szolgáltatások: Elsevier BV Ez egy nyílt hozzáférésű cikk

1. Bevezetés

A melanin a bőr pigmentációjáért felelős vegyület, és az emberi faj bőrszínének változatossága a bőrben jelen lévő melanint termelő sejtek mennyiségének tulajdonítható [1]. A melanin képződéséért felelős folyamatot melanogenezisnek nevezik. Ebben a folyamatban az a-melanocita-stimuláló hormon (a-MSH) a receptorához (azaz a melanocortin 1 receptorhoz) kötődik, ami megemelkedik a cAMP szintjének növekedéséhez, ami viszont különböző utakon, például ciklikusan aktiválja a mikroftalmiával összefüggő faktort (MITF). Az adenozin-monofoszfát (cAMP) válaszelem-kötő fehérje, extracellulárisan szabályozott kináz és protein kináz B (AKT) lebomlását okozza. Ennek a degradációnak köszönhetően a melanogenezis folyamatának sebességkorlátozó lépése (azaz a tirozináz enzim, a TYR működése) befolyásolja és aktiválódik. A TYR felelős a tirozin L-3,4-dihidroxifenilalaninná (L-DOPA) történő átalakulásáért, amely melanint képez. A tirozinázzal rokon protein 1 (TRP-1) és a tirozinázzal rokon protein 2 (TRP-2) a TYR és MITF további downstream faktorai, amelyek aktiválódnak és részt vesznek a melanin képződésében. Következésképpen az egész folyamat során a TYR a bőrsejtek melanintermelésének szabályozásának legfontosabb összetevője [2-4].

A Panax ginseng egy csodanövény, amelyet Kelet-Ázsiában már több mint 1,000 éve széles körben fogyasztanak, mivel számos jótékony egészségügyi hatása van. Különféle formában kapható, beleértve az italokat, kapszulákat és tablettákat [5,6]. Korábbi tanulmányok feltárták a ginzeng figyelemre méltó hatásait, amikor különböző típusú daganatok, számos mentális anomália, cukorbetegség, magas vérnyomás, hiperlipidémia és gyulladások előfordulásának csökkentésére alkalmazták [7-13]. Különösen a Koreai-félszigeten a ginzeng-kiegészítők a normál étrend részét képezik. Kereskedelmi forgalomban a ginzeng teljes ginzeng gyökér kivonat, egyedi ginzenozid kivonat vagy kapszula formájában kapható. A ginzenozidok a teljes ginzenggyökérben jelen lévő aktív vegyületek, amelyek felelősek a ginzeng hatékony egészségjavító tulajdonságaiért [14].

Számos tanulmány készült az egyetlen ginsenozid melanintermelésre és melazmára gyakorolt ​​hatásairól [15]. Jelenleg azonban egyetlen tanulmány sem számolt be a koreai vörös ginzeng (KRG) kivonat melanogén hatásáról a melanintermelésre, és nem vizsgálta bőrfehérítő és öregedésgátló hatásait, különösen emberben. Ezért a B16/F10 melanoma sejtvonalban in vitro vizsgáltuk a KRG által okozott TYR gátlást és melanintermelés gátlást a folyamatban részt vevő útvonalak mechanikus vizsgálatával. Eredményeink azt mutatták, hogy a KRG jelentősen gátolta a TYR aktivitást és csökkentette a melanin tartalmat a MITF lebomlási útvonalon keresztül. Ezen túlmenően az ultraibolya B-vel (UVB) besugárzott szőrtelen egér (HRM-2) fotoöregedés és hiperpigmentáció modelljével végzett in vivo vizsgálatunk azt mutatta, hogy a HRM{5}} egerek melanintermelése lényegesen és jelentősen csökkent a KRG (150 és 300 mg/kg) alkalmazása. Ezenkívül a 3 százalékos vörös ginzeng kivonatot tartalmazó krém kiváló ránctalanító és bőrfehérítő tulajdonságokat mutatott az emberekben. Így arra a következtetésre jutottunk, hogy a KRG és KRG készítmények krémként hasznosak lehetnek a kozmetikai iparban, mint bőrfehérítő és öregedésgátló szerek.

2. Anyagok és módszerek

2.1. Vegyszerek és reagensek

Dulbecco módosított Eagle-médiuma (WelGene Co, Korea); magzati szarvasmarha-szérum (WelGene Co., Korea); sztreptomicin és penicillin (Lonza, MD, USA); TRIzol reagens (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA); Az oligodT, MITF, TYR, TRP-1, TRP-2 és b-aktin primereket (Bioneer, Daejeon, Korea) szereztük be. A 3-(4,5-dimetil-tiazol-2-il)-2,5-difenil-tetrazoliumbromidot a Sigma-Aldrich cégtől vásároltuk. MITF, TYR, TRP-1 és TRP-2 ellenanyagokat szereztek (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, Inc., TX, USA). A Mushroom TYR-t és az L-DOPA-t a Sigmától (St. Louis, MO, USA) vásároltuk. Az összes többi reagens helyi analitikai minőségű volt.

2.2. Minta előkészítés

2.3. A vörös ginzeng krém stabilitásának értékelése

(1) pH-teszt

A vörös ginzeng krém pH-értékét a 30-napos kísérlet 1., 7., 15. és 30. napján mérték. A vörös ginzeng krém pH-ja enyhén savas volt, és szinte nem változott a 30 nap alatt (2. táblázat).

(2) Elszíneződési teszt

A vörös ginzeng krém elszíneződésének mértékét az 1., 7., 15. és 30. napon mérték. A 30-napos kísérleti időszakban nem figyeltek meg színváltozást (1. kiegészítő ábra).

(3) Patch teszt

A ginseng krémre adott allergiás reakció ellenőrzésére 1 ml vörös ginzeng krémet kentek az önkéntesek hátoldali középső területére (1 cm × 1 cm), és 24 óra elteltével értékelték a bőrreakciót. Különféle típusú bőrreakciókat értékeltek, amint az a kiegészítő táblázatban látható. 3A-B, és nem figyeltek meg bőrpírt, ödémát vagy nemkívánatos reakciót. Ezért ezt a krémet tovább tesztelték a bőr egyéb paraméterei tekintetében. Ezenkívül értékelték a bőrirritáció mértékét, amint az a kiegészítő táblázatban látható. 4, hogy megkapja az elsődleges bőrirritációs indexet.

2.4. A vörös ginzeng krém kezelési rendje és a bőr olaj- és nedvességtartalmára, rugalmasságára és fehéredésére gyakorolt ​​hatás értékelése

A vörös ginzeng krémnek a bőr olajtartalmára, nedvességtartalmára, rugalmasságára és fehéredésére gyakorolt ​​hatásának felmérésére 1 0 nő (kb. 40 éves, nemdohányzó, bőrbetegség vagy arckezelés nélkül) két csoportra osztották, amelyek mindegyike öt egyedből állt: a kontrollcsoportba, amelyben vörös ginzeng kivonat nélküli krémet alkalmaztak (nem KRG), és a kísérleti csoportba, amelyben vörös ginzeng kivonatú krémet alkalmaztak (KRG-vel kezelt csoport). Az egyedek számát a G*Power 3.1 omicX statisztikai szoftverrel számítottuk ki; a szignifikancia együttható 0,05, a hatvány 80, a csoportok száma 2, az ismételt mérések száma 6 volt.

A krémet az arc T-zónája (1) területére vittük fel, amely 1 cm-rel a T középső felső része felett helyezkedik el a homlokon a szemöldökök között, valamint a jobb és a bal oldalon 3e5 másodpercig. Az U-zónát (2) vízszintesen az orrtól és függőlegesen a szem farkától lefelé rajzoltuk, amint az a 2. kiegészítő ábrán látható. A mérési körülmények szabványosítása érdekében a kutatást 24 C ±1 C-on és 55 százalékon végeztük. ± 10 százalék relatív páratartalom.

2.5. Sejttenyésztés

2.6. Sejtmentes TYR gátlási vizsgálat

A vizsgálatot a korábban leírtak szerint kissé módosított protokoll szerint végeztük [3]. Röviden, 10 ml KRG-t helyeztünk három párhuzamosban egy 96-lyukú lemezre, és jégen (pH 6,8) 60 ml 50 mmol/l foszfátpufferrel kevertük össze. Ezt követően 20 ml 0,9 mg/ml L-DOPA-t adtunk minden egyes mérőhelyhez. Végül minden lyukba 10 ml gomba TYR-t adtunk, és a lemezt 27 °C-on 10 percig inkubáltuk. Inkubálás után a dopakróm termelést spektrofotometriásan mértük 450 nm-en mikrolemez-leolvasóval (Versamax; Molecular Devices, LLC, CA, USA); ebben a kísérletben kojsav volt pozitív kontroll [16].

2.7. Melanin gátlási vizsgálat

2.8. Állatkísérlet és csoportosítás

2.9. UVB besugárzás és fotoöregedés kiváltása

2.10. Hatás a melanintermelésre HRM-2 egerekben

2.11. A bőr ráncainak mérése 

Az UVB által kiváltott bőröregedés mértékét a ráncképződés megfigyelésével mérték. A ráncok kialakulásának értékelése érdekében a HRM{0}} egereket klorálhidrát intraperitoneális injekciójával (0,1 ml 7%-os klorálhidrát/25 g egér) érzéstelenítettük az 5. héten. Az UVB-nek való kitettséget és a mintakezelést az előző részben ismertettük. A bőr ráncait a 3., 4. és 5. héten DETAX System II (MIXPAC) és Double-Stick Disc (3M Healthcare, Németország) segítségével értékelték ki UVB besugárzás után. A Double-Stick Disc-t (DETAX System II-vel permetezve) az egér bőrére rögzítettük, és 2-3 perc múlva eltávolították. A korongráncokat Bissett [17] pontozási rendszerével értékelték: 0. fokozat, ráncok hiánya; 1. fokozat, több sekély ránc; 2. fokozat, néhány ránc; és 3. fokozat, néhány mély ránc. A lemez eltávolítása és a bőr 70 százalékos etanollal történő megtisztítása után a bőrt USB digitális mikroszkóppal (× 400; CE FOROHS, Kína) lefényképeztük, és elvégeztük a bőr ráncainak vizuális elemzését.

2.12. Enzimhez kötött immunszorbens vizsgálat

2.13. A bőr szövettani megfigyelése

Az egyes kísérleti csoportokból kivont bőrszöveteket 10%-os formalinoldatban fixáltuk 48 órán át, majd hematoxilinnel és eozinnal festettük Cardiff [18] módszerével, hogy meghatározzuk az epidermális vastagságot. A kollagén vizualizálásához a Masson-féle trichoma festést a megállapított protokollok szerint végezték [19].

2.14. RNS extrakció és valós idejű polimeráz láncreakció

A teljes RNS-t a B16/F10 sejtekből és az UVB-ira-tágított egérbőrből extraháltuk, miután azokat KRG-vel kezeltük, és a-MSH-val stimuláltuk TRIzol alkalmazásával a gyártó utasításai szerint. Az RNS-t (2 mg) oligodT-vel (Bioneer Co., Daejeon) 10 percig 70 °C-on hűtöttük, majd 5 percig jégen hűtöttük, majd reverz transzkriptáz premix (Bioneer Co., Daejeon) alkalmazásával 20 ml reakcióelegyben reverz transzkripciót végeztünk. és futtassuk 90 percig 42,5 fokon termikus ciklusban. A reverz transzkriptáz inaktiválására a reakciót 95 fokon 5 percig leállítjuk. A reverz transzkripciós polimeráz láncreakciót (PCR) a PCR premixben (Bioneer Co, Daejeon) reverz transzkriptáz (RT) reakcióból nyert cDNS aliquot részein végeztük. A PCR-termékeket ezután 1%-os agarózgélen elektroforézisnek vetjük alá, etidium-bromiddal megfestjük, és ImageQuant LAS 500 (GE Healthcare Life Sciences, Szöul, Dél-Korea) segítségével tettük láthatóvá. A sávsűrűség intenzitását a gliceraldehid 3- foszfát-dehidrogenázéra (GAPDH) normalizáltuk, és a primer szekvenciákat a kiegészítő táblázat tartalmazza. 1. Az MMP-2, MMP-9 és az interleukin (IL)-1b expresszióját valós idejű kvantitatív PCR-rel elemeztük Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR rendszer segítségével ( Applied Biosystems, USA).

2.15. Western blot analízis

2.16. Statisztikai analízis

További információ: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501