Az 4-aminopiridin neuroprotektív tulajdonságai

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Michael Dietrich, PhD, Hans-Peter Hartung, MD, PhD, FRCP és Philipp Albrecht, MD

Absztrakt

A feszültségfüggő kálium (Kv) csatornák antagonistájaként az 4-aminopiridint (4-AP) számos neurológiai rendellenesség tüneti terápiájaként alkalmazzák. Az SM-ben szenvedő betegek vizuális funkcióinak és motoros készségeinek javulását, valamint a fáradtság enyhítését az 4-AP-nak tulajdonítják. Elnyújtott hatóanyag-leadású készítményét (fampiridin) SM-ben szenvedő járászavar tüneti kezelésére engedélyezték. A jótékony hatásokat az axonális Kv csatornák blokkolásával magyarázták, ezáltal fokozva a demyelinizált axonok mentén történő vezetést. Azonban egyre több bizonyíték utal arra, hogy az 4-AP-nak a tüneti hatásmódon túl további tulajdonságai is lehetnek. Ebben az áttekintésben összefoglaljuk a preklinikai és klinikai adatokat az 4-AP lehetséges neuroprotektív jellemzőiről.

4-Aminopiridin neurológiai betegségekben

Az aminopiridinek a piridin monoamin- és diamino-származékainak egy csoportja, amelyek gátolják a feszültségfüggő kálium (Kv) csatornákat. Különösen a 2 széles spektrumú káliumcsatorna-blokkolót, az 4-aminopiridint (4-AP) és a 3,4-aminopiridint (3,4- DAP) használták új vizsgálati anyagként. különböző neurológiai betegségekben. Annak ellenére, hogy 3,4-A DAP a káliumcsatornák erősebb antagonistája, az 4-AP könnyebben átjut a vér-agy gáton1, és klinikailag jobb volt az SM-ben szenvedő betegeknél, különösen a látásfunkció javítása és a fáradtság terén. ,3 kogníció,4 és járási sebesség.1 Ezenkívül az 4-AP-ról számoltak be, hogy elősegíti az idegi vezetést az SM-től eltérő neurológiai betegségekben.5,6

A cistanche hatásai: Védje a neuronokat

Az egészséges axonokban a Kv1.1 és Kv1.2 csatornák a Ranvier csomópontjaihoz közel helyezkednek el.7 Ezek a csatornák a demyelinizáció után szabaddá válnak, és átvándorolnak a demyelinizált szegmensen. Ugyanakkor ezeknek a csatornáknak a kifejeződése többszörösére nő.8 A Kv csatornák téves újraelosztása rontja az akciós potenciálok átvitelét, ami maradandó fogyatékossághoz vezet. 4-Az AP blokkolja ezeket a szabaddá vált káliumcsatornákat, és ezáltal fokozza a jelátvitelt.9,10A Kv1.3 csatornát humán T-sejtekben fedezték fel,11 azt találták, hogy erősen expresszálódik az SM agyában lévő gyulladásos infiltrátumokon,12 és makrofágokon, mikroglián és effektor memória T-sejteken expresszálódnak.13 A szelektív és nem szelektív Kv1.3 csatorna blokkolók ezáltal immunmoduláló tulajdonságokat biztosíthatnak azáltal, hogy gátolják a sejtproliferációt és a proinflammatorikus citokinszekréciót.14 A 2009 előtti vizsgálatok nem tudták megállapítani az 4-AP-t Az SM tüneti kezelése, mivel a betegek vérszintje kiszámíthatatlan volt, a túlzott dózisok pedig az epilepsziás rohamok kockázatával és a tudatzavarral jártak együtt.15–18 Ezért fejlesztették ki a fampridint, a 4-AP elnyújtott felszabadulású készítményét, és ezt követően jóváhagyták az SM-ben szenvedő gyaloglási zavarok tüneti kezelésére.19–23 Érdekes módon az utóbbi időben egyre több bizonyíték utal arra, hogy ezeken kívül Az elismert tüneti hatások miatt az 4-AP további védő tulajdonságokkal rendelkezhet.

Az 4-AP értékelése in vitro modellek használatával

In vitro az 4-AP neuroprotektív hatásait számos modellben figyelték meg. Amikor a FUS és SOD1 gén mutációit hordozó, amiotrófiás laterális szklerózisban szenvedő betegek indukált pluripotens őssejtjeitől differenciált motoros neuronokat (MN-eket) 4-AP hatásnak tették ki, az ioncsatorna egyensúlyhiányok helyreálltak, a neuronális aktivitás szintje megemelkedett, az endoplazmatikus retikulum a stressz csökkent, a kaszpázaktiváció pedig gyengült. A mutáns MN-ek alacsonyabb nátriumáramot és Na plus /K plus arányt mutattak, ami legalábbis részben oka lehet a túlzott ingerlékenységüknek. Ez az 4-AP-kezelés után megfordult, ami csökkent káliumáramokhoz, valamint a spontán aktivitási minták és szinaptikus bemenet helyreállításához vezetett az MN-ekben.24 4-Az AP-kezelés csökkentette a proinflammatorikus mediátorok felszabadulását az amiloiddal provokált humán mikrogliákból. béta- és védett tenyésztett patkány hippocampalis neuronok, amelyek az amiloid-béta-kezelt mikroglia felülúszójában fürödtek.25 Egy 4-AP-származék állítólag csökkentette a szinuklein felhalmozódását, az oxidációt, a gyulladást és a Rho-kináz aktivációt a Parkinson-kór in vitro modelljében.26 Más in vitro vizsgálatok arról számoltak be, hogy az 4-AP fokozta a cAMP-válasz elemkötő fehérje foszforilációját, amelyet a glutamát, az NMDA és a 3-nitropropionsav a patkányok újszülött kisagyszemcse-neuronjain fejt ki a celluláris stressztől. A glutamát az 4-AP-val előkondicionált sejtekben is csökkent életképességhez vezet, de a kaszpáz jelentős aktiválása nélkül{16}}. Ezek a megfigyelések arra utalnak, hogy az 4-AP elsősorban a nekrotikus excitotoxicitás ellen hatékony.27 Azt is kimutatták, hogy megvédi az elsődleges neuronális tenyészeteket az oxigén-glükóz-megvonástól vagy az ouabain/DL-három{21}}benzil-oxi-aszparaginsav-toxicitástól.28

A Cistanche neuroprotektív hatása

Preklinikai in vivo vizsgálatok az 4-AP-ról

Számos tanulmány vizsgálta az 4-AP védő hatásait különböző betegségmodellekben (1. táblázat). A perifériás idegkárosodás idegzúzós modelljeiben a profilaktikus és korai 4-AP-kezelés az idegvezetési sebesség helyreállításához, elősegítette a remyelinizációt és megnövelte az axonális területet. Ez utóbbi megfigyeléseket az elektromos stimuláció után megjelenő hatásokhoz hasonló hatásokkal magyarázták, például a neuronális agyból származó neurotróf faktor (BDNF) szintjének emelkedésével.29 Az Alzheimer-kór modelljében béta-amiloid injekciót Sprague Dawley hippokampuszába patkányok neuronális károsodást és fokozott mikroglia aktivációt okoztak. Napi 1 mg/ttkg 4-AP adagolása elnyomja a mikroglia aktivációt és neuroprotektív hatást biztosít. Ez az 4-AP azon képességének tulajdonítható, hogy blokkolja a nem inaktiváló, kifelé kiegyenlítő K+ áramot az aktivált mikrogliákban, és csökkenti a proinflammatorikus citokinek sejttermelését.25 A kainát által kiváltott hippocampalis neurotoxicitás in vivo modelljét használó vizsgálatok a { erős neuroprotektív hatásait mutatták ki. {11}}AP, amelyet a nem kompetitív NMDA receptor antagonista MK-801 és az adenozin A1 antagonista 8-ciklopentil-teofillin megszüntethet. Ezek a megfigyelések arra utalnak, hogy az NMDA receptorok fontosak az 4-AP által közvetített védelem szempontjából ebben a modellben.30 A Lewis-patkányok autoimmun neuropátiájának állatmodelljében az 4-AP javította a klinikai súlyosságot és a patológiás elektrofiziológiai eredményeket. A szerzők azt javasolták, hogy az axonális védelmet a nátrium által közvetített befelé irányuló áramok blokkolásával biztosítják a korai fázisban, mivel a gyulladás akut fázisában a magas membránpotenciálok neurotoxikusak lehetnek. A krónikus fázisban az idegvezetés potenciálisan javult a kálium által közvetített kifelé irányuló áram blokkolásával.

Kísérleti autoimmun encephalomyelitisben (EAE), az immun-mediált központi idegrendszeri gyulladás modelljében, amely az SM fő jellemzőit replikálja, a Kv-csatorna blokádról beszámoltak arról, hogy gátolja a T-sejtek aktivációját, potenciálisan a Kv1.3 alcsalád csatornáinak blokkolásával és az axonális demielinizáció gyengítésével. és az asztroglia K.3.1 csatornájára ható degeneráció, ami potenciálisan indukálja a BDNF jelet. ling. SJL egerekben a proteolipid fehérje által indukált EAE-ben az AP kezelés szignifikánsan javította a digitális pontszámokat, amit kórosan megerősítettek. Megfigyelték, hogy a gliafibrilláris savas fehérje expressziója csökkent az 4-AP-kezelt egerekben, és mérséklődött a T-sejt aktiváció és a Th1/17 polarizáció. Azonban a krónikus, myelin oligodendrocita glikoprotein (MOG) peptid által kiváltott EAE modellben C57BL/6 egerekben az AP nem változtatta meg az EAE lefolyását.5 Egy másik tanulmány szintén a {{19} } AP MOG-EAE modellben C57BL/6 egerekben, és tüneti, de betegségmódosító hatásról számoltak be. Sem a profilaktikus, sem a terápiás 4-AP-kezelés nem csökkentette a digitális EAE lefolyásának súlyosságát, míg az 4-AP-val kezelt állatok jobb mobilitást mutattak lábnyom- és rotarodanalízis alapján. A gerincvelő demyelinizációja, az idegsejtek károsodása és az agytérfogat-változások MRI-képe változatlan maradt. A CD4* T-sejtek proliferációja, IL17 vagy IFN-y termelődése szintén nem változott.

A közelmúltban kimutattuk, hogy az idegi vezetést fokozó tüneti hatásai mellett az 4-AP megakadályozhatja a retina neurodegenerációját a MOG peptid által kiváltott kísérleti látóideggyulladás (EAEON) során C5BL6 egerekben.'In vivo optikai koherencia tomográfia ( OCT) képalkotó vizsgálatok, vizuális funkciók tesztelése és szövettani értékelése során az EAEON modellekben a belső retinarétegek degenerációjának mértékének csökkenését figyeltük meg, mind profilaktikus, mind terápiás 4-AP beadás esetén. Ebben a modellben az 4-AP potencírozta a fingolimod szfingozin-1-foszfát receptor modulátorral végzett immunmoduláns kezelés hatásait, független hatásmódokra utalva. Ésszerű feltételezni, hogy ez a hatás nem korlátozódik a fingolimodra önmagában, és alkalmazható az 4-AP-ra más SM immunmoduláló gyógyszerekkel kombinálva. Vizsgálatunk során a látóideg-szövettan kimutatta, hogy a fingolimoddal ellentétben az 4-AP-nak nem volt jelentős hatása a mikroglia aktivációjára és/vagy a limfociták vagy makrofágok infiltrációjára, ami arra utal, hogy a védőhatások nem kapcsolódnak a gyulladásgátló hatáshoz. cselekvés. Ezzel összhangban az 4-AP-kezelés nem befolyásolta az EAE-indukciót, amelyet T-sejt-restimulációs vizsgálattal igazoltak. Ezen túlmenően az 4-AP-kezelés alatt is jelentős védelmet figyeltünk meg a retina neurodegenerációjával szemben a nem gyulladásos látóideg összetörési modellben is, míg itt a fingolimodnak nem volt hatása. Érdekes módon az in vitro 4-AP-kezelés nem tudta közvetlenül megvédeni a retina ganglion sejtjeit. Ehelyett a szövettan és az in vitro kísérletek a mielin és oligodendrocita prekurzor sejtek 4-AP által közvetített stabilizálását jelezték. Ez a hatás a megnövekedett kalcium beáramlással és az aktivált T-sejtek nukleáris faktorának (NFAT) nukleáris transzlokációjával volt összefüggésben. Korábban kimutatták, hogy az 4-AP szabályozza a kalcium homeosztázist azáltal, hogy megemeli az inozit-trifoszfát szintjét, és ezáltal kalcium felszabadulását idézi elő az intracelluláris kalciumraktárakból. Azonban az 4-AP-vel kapcsolatos további vizsgálatok demielinizációs modellekben, például cuprizon-kezelés vagy indukálható oligodendrocita ablációval rendelkező transzgenikus egérmodellek hasznosak lehetnek ezen állapotok megerősítésében. A demyelinizáció állatmodelljeivel kapcsolatos jelenlegi tanulmányok főként az 4-AP akciós potenciál helyreállítására való képességére összpontosítanak, de az oligodendrogliasejtek további vizsgálatai hiányoznak (ábra).

Fontos megemlíteni, hogy az in vitro hatások eléréséhez szükséges dózisok körülbelül 100-1,000x magasabbak, mint a betegeknél elért koncentráció. Ezért további vagy más mechanizmusok relevánsak lehetnek az in vivo és in vitro megfigyelésekhez. Ezek közé tartozik, de nem kizárólagosan, a demyelinizált axonok csökkent energiadisszipációja a káliumszivárgás elzáródása miatt, valamint az agy erősebb védő- és helyreállító képessége, amely közvetve a fokozott mobilitásból és a nagyobb testmozgásból ered.

Ezenkívül nem zárható ki az 4-AP immunmoduláló mechanizmusa, különösen azért, mert csökkent T-sejt-aktivációt és Th1/17 polarizációt mutattak ki SJL egerekben a PLP által kiváltott EAE-ben.3 Ezenkívül más betegségmodellek preklinikai vizsgálatai is kimutatták a proinflammatorikus mediátorok mikroglia általi legyengített aktivációja és csökkent felszabadulása. Ezek az ellentmondásos eredmények rávilágítanak a különböző állatmodellek eltérő patológiai mechanizmusaira, ahol az immunsejtek többé-kevésbé érzékenyek a kezelési stratégiákra. Az eredményeink és a C57BL6 egerekben a MOG peptid által kiváltott EAE tüneti hatásáról szóló korábbi jelentések közötti eltérések legalább részben az (1) adagolási különbségekkel magyarázhatók, mivel mások 100 ug és 600 ug/egér/nap adagokat alkalmaztak, mivel 250 ug/egér/nap adagot adtunk be;(2) a kezelés időtartama (40, 60 és 90 nap Göbel és munkatársai*, Moriguchi et al,3 és Dietrich et al.); és (3) az immunizáláshoz használt MOG mennyisége, mivel mi 200 ug MOG-ot használtunk egérenként, míg mások csak 100 ug MOG-ot használtak egérenként. A legújabb kutatások a bélmikrobióta szerepére összpontosítanak az EAE indukciójának és súlyosságának befolyásolásában az effektor és a szabályozó T- és B-sejtek egyensúlyának megváltoztatásával. A rágcsálók mikrobiomája eltérhet az állatlétesítmények között, ami különbségeket eredményezhet az EAE súlyosságában, lefolyásában és esetleg még a terápiára adott válaszban is. Összességében ezek a tényezők felelősek lehetnek a tanulmányi eredmények heterogenitásáért.

A Cistanche neuroprotektív hatása

Az 4-AP klinikai megközelítése SM-ben szenvedő betegeknél

Az 1980-as évek óta számos klinikai vizsgálat utalt már az 4-AP jótékony hatásaira SM-ben szenvedő betegeknél. Többek között a motoros40-2 és a vizuális funkciók-44 javulását, valamint a fáradtságot azonosították.5-7 A vizsgálati korlátok, a homogén vizsgálati terv hiánya és a betegek kis száma azonban megtiltotta a {{ 5}}Az AP a reguláris hatóságok által, és több mint 3 évtizeden át a megjelölésen kívüli használathoz vezetett.4 Másrészt e vizsgálatok némelyike ​​elősegítette a késleltetett hatóanyag-leadású készítmény (SR-4-AP vagy fampridin) kifejlesztését, mivel azt találták, hogy az eredeti azonnali hatóanyag-leadású vegyület plazmaszintje inkonzisztens és kiszámíthatatlan. Az SR-4-AP-vel végzett első klinikai vizsgálatot 1997-ben Schwid és munkatársai49 végezték, amely a járási sebesség jelentős javulását és az izomerő javulásának tendenciáját mutatta be.

A kiterjesztett kibocsátású technológiai rendszert az Elan Pharmaceuticals fejlesztette ki. Egy úgynevezett mátrix gyógyszerabszorpciós rendszert használt, amely egy szabadalmaztatott polimer mátrixból állt, amely szabályozza a diffúzió és a gyomor-bélrendszeri enzimek általi erózió általi felszabadulást. Ez alacsonyabb plazma hatóanyag-csúcsszintet és hosszabb hatástartamot eredményezett.1 Kezdetben az SR-4-AP-t 4 vizsgálatban tesztelték. 2007-ben Goodman és munkatársai 36 SM-ben szenvedő betegnél 5 mg-os, napi kétszeri 10 mg-ról 40 mg-ra emelt dózist hajtottak végre. A Timed 25 Foot Walk Test (T25FW) során nem figyeltek meg jelentős változást, míg az adatokat járási sebességre (ft/s) konvertáló post hoc elemzés elérte a szignifikanciát. Ezen kívül javulást figyeltek meg a saját bevallásában szereplő fáradtságban. Egy 2008-as dózis-összehasonlító vizsgálatban (randomizált, kettős vak, placebo-kontrollos) Goodman és munkatársai 206 beteget vontak be, akik placebót vagy napi kétszer 10, 15 vagy 20 mg-os adagokat kaptak. A járássebesség javulását összehasonlító post hoc elemzés ismét szignifikánsan jobb eredményeket mutatott az összes kezelési csoport külön-külön, valamint az összes SR-4-AP-kezelt beteg esetében a placebóval összehasonlítva. A múzsa ereje javult a 10-mg-mal és 15-mg-mal kezelt csoportokban, de nem a 20 mg-mal kezelt csoportokban a placebóval kezelt alanyokhoz képest. A két egymást követő Ⅲ fázisú klinikai vizsgálatban (21-hetes kettős-vak, placebo-kontrollos randomizált vizsgálat, 301 beteg és 14-hetes kettős-vak, placebo-kontrollos vizsgálat, 239 beteg) naponta kétszer 10 mg-mal a betegeket válaszadó csoportra és nem reagáló csoportra osztották, amelyet a T25FW következetes javulása határoz meg. Mindkét vizsgálatban a járássebesség növekedése szignifikáns volt a nem reagáló vagy a placebo csoporthoz képest. Ezenkívül javult a válaszadók 12-Elem MS Walking Scale (MSWS-12) pontszáma.2122

E vizsgálatok nyílt kiterjesztésű vizsgálata során kimutatták, hogy a klinikai javulás elveszett a gyógyszer megvonása után, de 2 héttel az SR-4-AP.Ampyra/Fampyra, az SR{ tabletta formájának újraindítása után visszatért. {3}}Az AP 2010 januárjában kapott teljes jóváhagyást az Élelmiszer- és Gyógyszerügyi Hatóságtól az SM-ben szenvedő betegek járásának javítására, de 2011-ben csak feltételes forgalomba hozatali engedélyt kapott az Európai Gyógyszerügynökségtől (EMA). Az említett vizsgálatok alapján a jóváhagyás feltétele volt, hogy több hosszú távú hatékonysági és biztonságossági adatot biztosítsanak. Ezért egy II. fázisú feltáró (MOBIL) és egy I. fázisú megerősítő vizsgálatot (ENHANCE) kezdeményeztek.

A 132 résztvevővel végzett feltáró MOBLE-tanulmányban javulást találtak a betegek globális változási benyomásaiban (PGIC), az MSWS-12 és az időzített fel és indulás (TUG) sebességében23 A kezelés hosszú távú hatékonyságának és biztonságosságának értékelése SR-4-AP, a megerősítő ENHANCE vizsgálatot (napi kétszer 10 mg 646 SM betegen) végezték el. A MOBILE-vizsgálatban közölt javulásokon túlmenően a szerzők jelentős javulást tapasztaltak az SR-4-AP-val kezelt betegeknél az 29-Item MS Impact Scale-n5. Az EMA ezt követően feltétel nélkül jóváhagyta az SR{ {11}}AP járásban akadályozott SM-es betegek kezelésére. Az ENABLE fázisú megfigyeléses vizsgálat 901 beteggel kimutatta, hogy az SR-4-AP-kezelés előnyös az SM-ben szenvedő betegek számára azáltal, hogy valós körülmények között észleli a fizikai működést és a pszichológiai egészséget2 (2. táblázat).

A fent leírt, a retina neurodegenerációjával szembeni védelemre vonatkozó ígéretes preklinikai adatok alapján csoportunk retrospektív, többközpontú OCT-vizsgálatot végzett, hogy longitudinálisan összehasonlítsa a retina neurodegenerációját 52, folyamatos 4-AP terápiában részesülő beteg és 51 kontroll között, amelyek minden releváns kovariánsra illeszkedtek. előre meghatározott illesztési algoritmus segítségével. A kísérleti adatokkal összhangban az egyidejű 4-AP terápia során a makula retina idegrostrétegének degenerációja 2 év alatt csökkent. Ezeket a megállapításokat azonban független és ideális esetben prospektív kohorsz vizsgálatokban meg kell erősíteni, különösen azért, mert a hatás mérete alacsony volt, és a peripapilláris retina idegrostréteg és a makula ganglion sejt/belső plexiform réteg elvékonyodása nem különbözött szignifikánsan a csoportok között. . A 4AP védő hatásának ezen eltérései csak az mRNFL-re, de sem a pRNFL-re, sem a McGillre nem magyarázhatók könnyen. Fontos megemlíteni, hogy mivel a 4AP csak az EDSS 3-ban szenvedő betegek járászavarának javítására engedélyezett.5-5, az elemzett változási arányokat a betegség későbbi szakaszaiban, akut látóideggyulladás nélkül vizsgálták. Ilyen környezetben csak nagyon finom retinaelváltozások fordulnak elő, és nagy kohorszok kellenek a kezelési hatások kimutatásához. Ezért a betegeken végzett retrospektív vizsgálat minden bizonnyal nem volt elég erős ahhoz, hogy megbízhatóan észlelje a protektív kezelési hatásokat, és nem meglepő, hogy az eredmények közül csak egy lett pozitív. Valószínűleg az mRNFL volt a legérzékenyebb réteg a kezelési hatások kimutatására.5"

Összefoglalva, egyre több in vivo bizonyíték utal arra, hogy az 4-AP jól ismert tüneti hatásai mellett a neurodegeneráció megelőzésével módosíthatja az EAEON betegség lefolyását, és esetleg még az SM-ben szenvedő betegeket is. Az előzetes in vitro bizonyítékok a sejt kalciumszintjének és az NFAT-útvonalnak az érintettségére utalnak, de további vizsgálatokra van szükség az 4-AP neuroprotektív hatásának hátterében álló pontos molekuláris mechanizmusok tisztázására az immunmediált gyulladásos demielinizációban. Ezek az eredmények jelentős hatással lehetnek az SM kezelési stratégiáira, ha egy prospektív randomizált, kontrollált klinikai vizsgálat megerősíti.

Cistanche hatása

Hivatkozások

1. Leussink VI, Montalban X, Hartung HP. Az axonfunkció helyreállítása 4-aminopiridinnel: klinikai hatékonyság sclerosis multiplexben és azon túl. CNS-gyógyszerek, 2018; 32:637–651.

2. Horton L, Conger A, Conger D és mtsai. Az 4-aminopiridin hatása a látásra optikai neuropátiában szenvedő sclerosis multiplexben szenvedő betegeknél. Neurology 2013;80:1862–1866.

3. Morrow SA, Rosehart H., Johnson AM. A Fampridine-SR hatása a kognitív fáradtságra egy randomizált kettős-vak keresztezett vizsgálatban SM-ben szenvedő betegeknél. Mult Scler Relat Disord 2017;11:4–9.

4. Brother SD, Filli L, Geissler O et al. A fampridin pozitív hatásai a kognitív képességre, a fáradtságra és a depresszióra 2 évnél idősebb szklerózis multiplexben szenvedő betegeknél. J Neurol 2018; 265:1016–1025.

5. Hayes KC, Blight AR, Potter PJ és mtsai. Az 4-aminopiridin preklinikai vizsgálata krónikus gerincvelő-sérülésben szenvedő betegeknél. Paraplegia 1993;31:216–224.

6. Iaci JF, Parry TJ, Huang Z és mtsai. A dalfampridin javítja a szenzomotoros funkciót olyan patkányokban, akiknek krónikus hiánya van a középső agyi artéria elzáródása után. Stroke 2013;44: 1942–1950.

7. Trimmer JS, Rhodes KJ. A feszültségfüggő ioncsatornák lokalizációja az emlősök agyában. Annu Rev Physiol 2004;66:477–519.

8. Rodr´ıguez-Rangel S, Bravin AD, Ramos-Torres KM, Brugarolas P, S´anchez Rodr´ıguez JE. Négy új 4-aminopiridin K( plusz ) csatorna blokkoló szerkezet-aktivitás kapcsolati vizsgálata. Sci Rep 2020;10:52.

9. Bostock H, Sears TA, Sherratt RM. Az 4-aminopiridin és a tetraetil-ammónium ionok hatása a normál és demyelinizált emlős idegrostokra. J. Physiol 1981;313:301–315.

10. Huynh W, Pickering H, Howells J és mtsai. A fampridin hatása az axonális ingerlékenységre sclerosis multiplexben. Clin Neurophysiol 2016;127:2636–2642.

11. DeCoursey TE, Chandy KG, Gupta S, Cahalan MD. Feszültségfüggő K plusz csatornák humán T-limfocitákban: szerep a mitogenezisben? Nature 1984;307:465–468.

12. Rus H, Pardo CA, Hu L, et al. A Kv1.3 feszültségfüggő káliumcsatorna erősen expresszálódik a sclerosis multiplexben szenvedő agy gyulladásos infiltrátumain. Proc Natl Acad Sci USA 2005;102:11094–11099.

13. Wang X, Li G, Guo J és munkatársai. A Kv1.3 csatorna, mint a neurogyulladásos betegségek kulcsfontosságú terápiás célpontja: a technika jelenlegi állása és azon túl. Front Neurosci 2019;13:1393.

14. Wulffff H, Calabresi PA, Allie R és munkatársai. A feszültségfüggő Kv1.3 K( plus ) csatorna az effektor memória T-sejtekben, mint új célpont az MS számára. J Clin Invest 2003;111:1703–1713.

15. Burton JM, Bell CM, Walker SE, O'Connor PW. 4-aminopiridin toxicitás nem szándékos túladagolással négy sclerosis multiplexben szenvedő betegnél. Neurology 2008;71: 1833–1834.

16. Johnson NC, Morgan MW. Az 4-aminopiridin toxicitás szokatlan esete. J Emerg Med 2006;30:175–177.

17. Schwam E. 4-aminopiridin súlyos véletlen túladagolása gyógyszertári hiba miatt. J Emerg Med 2011;41:51–54.

18. Etemadifar M, Saboori M, Chitsaz A et al. A fampidin hatása a rohamok kockázatára szklerózis multiplexben szenvedő betegeknél. Mult Scler Relat Disord 2020;43:102188.

19. Goodman AD, Cohen JA, Cross A et al. Fampridine-SR sclerosis multiplexben: randomizált, kettős-vak, placebo-kontrollos, dózistartományos vizsgálat. Mult Scler 2007; 13:357–368.

20. Goodman AD, Brown TR, Cohen JA et al. A nyújtott hatóanyag-leadású fampridin dózis-összehasonlító vizsgálata sclerosis multiplexben. Neurology 2008;71:1134–1141.

21. Goodman AD, Brown TR, Krupp LB, et al. Elnyújtott felszabadulású orális fampridin sclerosis multiplexben: randomizált, kettős vak, kontrollált vizsgálat. Lancet 2009;373: 732–738.

22. Goodman AD, Brown TR, Edwards KR et al. A nyújtott hatóanyag-leadású orális dalfampridin 3. fázisú vizsgálata sclerosis multiplexben. Ann Neurol 2010;68:494–502.

23. Hupperts R, Lycke J, Short C, et al. Elnyújtott felszabadulású fampridin és járás és egyensúly SM-ben: randomizált, kontrollált MOBILE vizsgálat. Mult Scler 2016;22:212–221.

24. Naujock M, Stanslowsky N, Buflfler S et al. 4-Az aminopiridin által kiváltott aktivitás megmenti a hipoexcitálható motoros neuronokat az amiotróf laterális szklerózisban szenvedő betegek által indukált pluripotens őssejtekből. Stem Cells 2016;34:1563–1575.

25. Franciosi S, Ryu JK, Choi HB, Radov L, Kim SU, McLarnon JG. Az 4-aminopiridin széles spektrumú hatásai az amiloid béta1-42- által kiváltott sejtjelátvitelre és a funkcionális válaszokra humán mikrogliában. J Neurosci 2006;26:11652–11664.

26. Li S, Wei D, Mao Z és mtsai. Számos 4-aminopiridin-származék tervezése, szintézise, ​​immuncitokémiai értékelése és molekuláris dokkolási vizsgálata, mint potenciális neuroprotektív szerek a Parkinson-kór kezelésében. Bioorg Chem 2017;73:63–75.

27. Smith AJ, Tauskela JS, Stone TW, Smith RA. Az 4-aminopiridinnel való előkondicionálás megvédi a kisagyi szemcse neuronjait az excitotoxicitástól. Brain Res 2009; 1294: 165–175.

28. Tauskela JS, Aylsworth A, Hewitt M, Brunette E, Blondeau N. Failure and recovery of preconditioning-induced neuroprotection in súlyos stroke-like inzultations. Neurophar mycology 2016;105:533–542.

29. Tseng KC, Li H, Clark A et al. 4-Az aminopiridin elősegíti a funkcionális helyreállítást és a remielinizációt akut perifériás idegsérülés esetén. EMBO Mol Med 2016;8:1409–1420.

30. Ogita K, Okuda H, Watanabe M, Nagashima R, Sugiyama C, Yoneda Y. A K plusz csatorna blokkoló 4- aminopiridinnel végzett in vivo kezelés az NMDA receptorok aktiválása révén véd a kainát által kiváltott neuronális sejthalál ellen egérben hippokampusz. Neurofarmakológia 2005;48:810–821.

31. Moriguchi K, Miyamoto K, Kusunoki S. 4-Az aminopiridin javítja a kísérleti autoimmun ideggyulladást Lewis patkányokban. J Neuroimmunol 2017;305:72–74.

32. Schmalhofer WA, Bao J, McManus OB és mtsai. A feszültségfüggő káliumcsatorna inhibitorainak új osztályának, a Kv1.3-nak az azonosítása, immunszuppresszív tulajdonságokkal. Biochemistry 2002;41:7781–7794.

33. Varga Z, T cég, Papp F, et al. Káliumcsatorna-expresszió humán CD4-ben, valamint szabályozó és naív T-sejtekben egészséges alanyokból és sclerosis multiplexben szenvedő betegekből. Immunol Let 2009;124:95–101.

34. Jukkola P, Gu Y, Lovett-Racke AE, Gu C. A gyulladásos demyelinizáció és az axon degeneráció elnyomása a Kv3 csatornák gátlásával. Front Mol Neurosci 2017;10:344.

35. Moriguchi K, Miyamoto K, Fukumoto Y, Kusunoki S. 4-Az aminopiridin javítja a visszaeső-remittáló kísérleti autoimmun encephalomyelitist SJL/J egerekben. J Neuroimmunol 2018;323:131–135.

36. Gobel K, Wedell JH, Herrmann AM et al. 4-Az aminopiridin javítja a mobilitást, de nem a betegség lefolyását a sclerosis multiplex állatmodelljében. Exp Neurol 2013;248: 62–71.

37. Dietrich M, Koska V, Hecker C, et al. Az 4-aminopiridin védő hatása kísérleti látóideggyulladásban és sclerosis multiplexben. Brain 2020;143:1127–1142.

38. Grimaldi M, Atzori M, Ray P, Alkon DL. A kalcium mobilizálása az intracelluláris raktárakból, a neurotranszmitterek által kiváltott kalciumtranziensek potencírozása és a kapacitív kalcium bejutása 4-aminopiridin által. J Neurosci 2001;21:3135–3143.

39. van Diemen HA, Polman CH, Koetsier JC, van Loenen AC, Nauta JJ, Bertelsmann FW. 4-Aminopiridin szklerózis multiplexben szenvedő betegeknél: az adagolás és a szérumszint a hatékonyságtól és a biztonságosságtól függ. Clin Neuropharmacol 1993;16:195–204.

40. Davis FA, Stefoski D., Rush J. Az orálisan beadott 4-aminopiridin javítja a sclerosis multiplex klinikai tüneteit. Ann Neurol 1990;27:186–192.

41. Stefoski D, Davis FA, Faut M, Schauf CL. 4-Az aminopiridin javítja a szklerózis multiplex klinikai tüneteit. Ann Neurol 1987;21:71–77.

42. Stefoski D, Davis FA, Fitzsimmons WE, Luskin SS, Rush J, Parkhurst GW. 4- Aminopiridin sclerosis multiplexben: hosszan tartó adagolás. Neurology 1991;41: 1344–1348.

43. Jones RE, Heron JR, Foster DH, Snelgar RS, Mason RJ. Az 4-aminopiridin hatása sclerosis multiplexben szenvedő betegeknél. J. Neurol Sci 1983;60:353–362.

44. van Diemen HA, Polman CH, van Dongen TM, et al. Az 4-aminopiridin hatása a szklerózis multiplex klinikai tüneteire: randomizált, placebo-kontrollos, kettős-vak, keresztezett vizsgálat. Ann Neurol 1992;32:123–130.

45. Polman CH, Bertelsmann FW, van Loenen AC, Koetsier JC. 4-aminopiridin a sclerosis multiplexben szenvedő betegek kezelésében. Hosszú távú hatékonyság és biztonság. Arch Neurol 1994;51:292–296.

46. ​​Romani A, Bergamaschi R, Candeloro E, Alfonsi E, Callieco R, Cosi V. Fáradtság sclerosis multiplexben: többdimenziós értékelés és válasz a tüneti kezelésre. Mult Scler 2004;10:462–468.

47. Rossini PM, Pasqualetti P, Pozzilli C és mtsai. Fáradtság progresszív sclerosis multiplexben: az orális 4-aminopiridin randomizált, kettős-vak, placebo-kontrollos, keresztezett vizsgálatának eredményei. Mult Scler 2001;7:354–358.

48. Hauser SL, Johnston SC. 4-aminopiridin: új élet egy régi gyógyszernek. Ann Neurol 2010; 68:A8–A9.

49. Schwid SR, Petrie MD, McDermott MP, Tierney DS, Mason DH, Goodman AD. A nyújtott hatóanyag-leadású 4-aminopiridin mennyiségi értékelése a sclerosis multiplex tüneti kezelésére. Neurology 1997;48:817–821.

50. Goodman AD, Bethoux F, Brown TR és társai. A dalfampridin hosszú távú biztonságossága és hatékonysága sclerosis multiplexben szenvedő betegek járászavarában: két 3. fázisú klinikai vizsgálat nyílt kiterjesztésének eredményei. Mult Scler 2015;21:1322–1331.

51. Hobart J, Ziemssen T, Feys P és mtsai. A sclerosis multiplexben szenvedő résztvevők saját bevallása szerinti járási képességének klinikailag jelentős javulásának értékelése: a retardizált, kettős-vak, fázis III ENHANCE vizsgálat eredményei a retard fampridinnel. CNS-gyógyszerek 2019;33:61–79.

52. Macdonell R, Nagels G, Lapland DA és mtsai. A sclerosis multiplex betegek által bejelentett egészségügyi hatásai: a PR-fampidin ENABLE vizsgálata. Mult Scler 2016;22: 944–954.

53. Noble M, Tseng K-CC, Li H, Elfar JC. 4-Az aminopiridin, mint egyedüli diagnosztikai és kezelési szer súlyos idegzúzódásos sérülések esetén. Mil Med 2019;184 (1. melléklet): 379–385.