2. rész: Az echinakozid gátolja a glutamát felszabadulását azáltal, hogy elnyomja a feszültségfüggő Ca2 plusz belépést és a protein kináz C patkány agykérgi idegvégződéseiben

Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com

Cheng Wei Lu 1,2, Tzu Yu Lin 1,2, Shu Kuei Huang 1 és Su Jane Wang 3,*

Kattintson ide, és térjen vissza az 1. részhez

3.2 Terápiás vonatkozások

Az excitotoxicitás, a túlzott glutamát-felszabadulás és a glutamátreceptor aktiválódása által okozott kóros folyamat, a neuronok halálának fő oka akut és krónikus agyi rendellenességekben, mint például a stroke, traumás agysérülés, Parkinson- és Alzheimer-kór [13,41], valamint terápiás stratégiák A glutamát-felszabadulás gátlásával kapcsolatos megoldások ígéretes neuroprotektív stratégiák lehetnek az ilyen betegségek kezelésére. Az echinakozidról bebizonyosodott, hogy áthatol a vér-agy gáton (BBB), és neuroprotektív hatást fejt ki a neurotoxicitás különböző in vivo modelljeiben [8,10–12,42]. Bár ezen neuroprotektív hatások mechanizmusa nem teljesen ismert, számos lehetséges mechanizmusról számoltak be, köztük a gyulladásos válasz gátlásáról, a mitokondriális funkció stabilizálásáról, az antioxidációról, a szabad gyökök megkötéséről és a neurotróf funkció utánzásról [5,9,12,42]. A jelenlegi vizsgálatban az a képesség,echinakozidAz idegvégződések glutamát felszabadulásának csökkentése részben magyarázatot adhat neuroprotektív mechanizmusára. Azonban, hogy ez a hatás hozzájárul-e a látszólagos terápiás potenciálhozechinakozida glutamát excitotoxicitással összefüggő agyi rendellenességekben további kutatást igényel.

Neuroprotektív hatásaicistancő echinakozid

4.Anyagok és metódusok

4.1. Vegyszerek

A fura-2-acetoxi-metil-észtert (Fura-2-AM) és a 3',3',3'-dipropil-tiadikarbocianin-jodidot [DiSC3(5)] az Invitrogentől (Carlsbad, CA, USA) vásároltuk. o-conotoxin MVIIC, rottlerin, 2-[1-(3-dimetilaminopropil)indol-3-il]-3-(indol-3-il)-maleimid ( GF109203X), 5,6,7,13-tetrahidro- 13-metil-5-oxo-12H-indolo[2,3-a]pirrolo[3,{ A {27}}c]karbazol-12-propánnitrilt (Go6976) és az N-[2-(p-bróm-cinnamilamino)etil]-5-izokinolinszulfonamidot (H89) a Tocris Bioscience-től (Bristol, Egyesült Királyság) vásároltuk. ).Echinakozid, dantrolén, DL-treo-béta-benzil-oxiaszpartát (DL-TBOA), 7-klór-5- (2-klórfenil)-1, 5-dihidro{ {10}},1-benzotiazepin-2(3H)-on (CGP37157), 2-(2-amino-3- metoxifenil)-4H A -1-benzopirán-4-one) (PD98059), az etilénglikol-bisz(-amino-etil-éter)-N,N,N/,N/-tetraecetsav (EGTA) és az összes többi reagens a Sigma-tól vásárolt. Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA).

4.2. Állatok

Két hónapos hím Sprague–Dawley patkányokat használtunk. Az állatokat szabványos környezeti körülmények között tartottuk (22 ± 1 oC; 50 százalék relatív páratartalom; 12 órás fény/sötét ciklus), és korlátlan hozzáférést biztosítottak táplálékhoz és vízhez. Az állatokat lefejezéssel leöltük, és az agykérget 4 oC-on gyorsan eltávolítottuk. A kísérleti eljárásokat a Fu Jen Intézményi Állatgondozói és Felhasználási Bizottság (A10259) hagyta jóvá, összhangban a National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals című dokumentumával. Minden erőfeszítést megtettek az állatok szenvedésének minimalizálása és a megbízható eredmények eléréséhez szükséges minimális számú állat felhasználása érdekében.

4.3. Szinaptoszomális készítmények

A szinaptoszómákat patkányok agykéregéből nem folytonos Percoll gradiensekkel tisztítottuk a korábban leírtak szerint [43,44]. Röviden, a szövetet homogenizáltuk 0,32 M szacharózt (pH 7,4) tartalmazó tápközegben, és a homogenizátumot 10 percig centrifugáltuk 3000 × g-vel (5{{25}). }00 fordulat/perc JA 25.5 rotorban; Beckman Coulter, Inc., Miami, FL, USA) és 4 oC-on, és a felülúszót ismét 12 percig centrifugáltuk 14 500 × g-vel (11, 000 fordulat/perc JA 25.5 rotorban). A pelletet óvatosan újraszuszpendáltuk 0,32 M szacharózban (pH 7,4), és ebből a szinaptoszómális szuszpenzióból egy aliquot részt (2 ml) egy 0,32 M szacharózt, 1 mM EDTA-t, 0,25 mól/l és dl/mól/l-t tartalmazó 3 ml-es Percoll nem folytonos gradiensre helyeztünk. 3 százalék, 10 százalék és 23 százalék Percoll (pH 7,4). 32 500 × g-vel (16 500 fordulat/perc JA 20.5 rotorban) 7 percig 4 oC-on végzett centrifugálás után a szinaptoszómákat a 10 százalék és a 23 százalék közötti Percoll sávból kinyertük, és 30 ml végtérfogatban hígítottuk. HEPES puffer tápközeg (140 mM NaCl, 5 mM KCl, 5 mM NaHC03, 1 mM MgCl2+6H2O, 1,2 mM Na2HPO4, 10 mM glükóz és 10 mM HEPES (pH 7,4)). 27,{66}}×g-vel (15 000 fordulat/perc JA 25.5-ben) 10 percig tartó további centrifugálást követően a szinaptoszóma pelletet 3 ml HEPES puffertápközegben újraszuszpendáltuk, és a fehérjetartalmat Bradford assay segítségével határoztuk meg. Végül 0,5 mg szinaptoszóma szuszpenziót 10 ml HEPES puffer tápközegben hígítottunk, és 3000 x g-vel (5000 fordulat/perc JA 20.1 rotorban) centrifugáltuk 10 percig. A felülúszót eldobtuk, és a szinaptoszómákat tartalmazó pelleteket jégen tároltuk, és 4-6 órán belül felhasználtuk.

cistanche gyógynövény

4.4. Glutamát felszabadulás

A glutamát felszabadulást online fluorimetriával vizsgáltuk a korábban leírtak szerint [45,46]. A szinaptoszómális pelleteket HEPES puffer tápközegben (0,5 mg/mL) reszuszpendáltuk, és 37 oC-on 10 percig előinkubáltuk 16 uM szarvasmarha szérumalbumin jelenlétében, hogy megkössük a szinaptoszómákból az előinkubáció során felszabaduló szabad zsírsavakat. A szinaptoszómák egy 2- ml-es aliquot részét átvittük egy kevert küvettába, amely 2 mM NADP pluszt, 50 egység glutamát-dehidrogenázt és 1,2 mM CaCl2-t tartalmazott, és a NADPH fluoreszcenciáját Perkin-Elmer LS{14-ben mértük. }} spektrofluoriméter (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Waltham, MA, USA) 340, illetve 460 nm-es gerjesztési és emissziós hullámhosszon. Mivel a szinaptoszómák nem alkalmasak elektromos stimulációra, a káliumcsatorna-blokkoló 4-aminopiridint használták a glutamát felszabadulás stimulálására. Az 4-aminopiridin destabilizálja a membránpotenciált, és úgy gondolják, hogy ismétlődő spontán Na plusz csatorna függő depolarizációt okoz, ami közel áll a szinaptikus terminális in vivo depolarizációjához, ami feszültségfüggő Ca2 plusz csatornák aktiválásához és neurotranszmitter felszabaduláshoz vezet [47] ]. Az adatokat 2 másodperces időközönként vettük. Minden kísérlet végén egy standard exogén glutamátot (5 nmol) adtunk hozzá. A standard addícióval előidézett fluoreszcencia változás értékét használtuk a felszabaduló glutamát nanomol glutamát per milligramm szinaptoszomális fehérje (nmol/mg) értékének kiszámításához. A szövegben idézett kibocsátási értékek 5 perces depolarizáció után egyensúlyi állapotban elért szintek (nmol/mg/5 perc). Az összesített adatokat Lotus 1-2-3 táblázatok (IBM, White Plains, NY, USA) és MicroCal Origin (OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA) segítségével elemeztük.

4.5. Plazma membrán potenciál

A plazmamembránpotenciált egy membránpotenciál-érzékeny festékkel, DiSC3(5) határoztuk meg [48]. A szinaptoszómákat HEPES puffertápközegben újraszuszpendáltuk, és 2 ml-es alikvot részeket egy 5 uM DiSC3(5)-et tartalmazó, kevert küvettába vittünk 37 oC-on Perkin–Elmer LS{10}} spektrofluorométerben (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Waltham, MA, Waltham). , USA). Miután az elegyet 3 percig hagytuk egyensúlyba kerülni, a fluoreszcenciát 646, illetve 674 nm-es gerjesztési és emissziós hullámhosszon határoztuk meg. Az adatokat 2 másodperces időközönként gyűjtöttük. A kumulatív adatokat MicroCal Origin (OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA) segítségével elemeztük, és fluoreszcencia egységekben fejeztük ki.

4.6. Citoszol Ca2 plusz koncentráció ([Ca2 plusz ]C)

A [Ca2 plusz ]C-t a Ca2 plusz indikátor fura-2 segítségével mérték. A szinaptoszómákat (0,5 mg/ml) 5 uM fura-2-ot és 0,1 mM CaCl2-t tartalmazó HEPES puffertápközegben előinkubáltuk 30 percig 37 oC-on kevert kémcsőben. . A fura-2 betöltés után a szinaptoszómákat mikrocentrifugában centrifugáltuk 30 másodpercig 3000 × g-vel (5000 fordulat/perc). A szinaptoszómális pelleteket HEPES puffertápközegben újraszuszpendáltuk, és a szinaptoszómális szuszpenziót termosztált küvettában kevertük Perkin-Elmer LS-55 spektrofluorométerben (PerkinElmer Life and Analytical Sciences, Waltham, MA, USA). CaCl2-t (1 mM) adtunk hozzá 3 perc múlva, majd további 10 perc elteltével további adagolást végeztünk. A fluoreszcencia adatokat 340 és 380 nm-es gerjesztési hullámhosszon (505 nm emissziós hullámhosszon) gyűjtöttük 2 másodpercenként. A [Ca2 plusz ]C (nM) értéket kalibrációs eljárásokkal [49] és a korábban leírt egyenletekkel [50] számítottuk ki. A kumulatív adatokat MicroCal Origin (OriginLab Corporation, Northampton, MA, USA) segítségével elemeztük.

4.7. Western blottolás

A szinaptoszómákat lízispufferben (10 mM HEPES puffer, pH 7,4), 1% Triton X-100 és proteáz inhibitor keverékben homogenizáltuk. A lizátumokat centrifugálással derítettük, és a fehérjekoncentrációt protein assay kit (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA) segítségével határoztuk meg. Egyenlő mennyiségű fehérjét választottunk el nátrium-dodecil-szulfát-poliakrilamid gélelektroforézissel (SDS-PAGE) és vittük át a nitrocellulóz membránra. A membránokat 5% alacsony zsírtartalmú tejet tartalmazó Tris-pufferolt sóoldattal blokkoltuk, és megfelelő elsődleges antitesttel (foszfo-protein-kináz C (pan), 1:3000, NOVUS Biologicals Inc., Beverly, MA, USA) inkubáltuk egy éjszakán át 4 oC. Három trisz-pufferolt sóoldattal történő mosás után a membránt a másodlagos torma-peroxidázzal konjugált antitesttel (1:3000) kezeltük 1 órán át szobahőmérsékleten. A membránokat ezután legalább háromszor mostuk Tris-pufferolt sóoldattal, és a fokozott kemilumineszcenciás rendszerrel (Amersham, Buckinghamshire, Egyesült Királyság) tettük láthatóvá. A minták egy alikvot részét betöltöttük, és PKC-ellenes antitesttel szondáztuk a PKC mint terhelési kontroll kimutatására. Az expresszió vagy foszforiláció szintjét a sávsűrűséggel határoztuk meg, amelyet denzitometriával határoztunk meg. A sávok denzitometriás kvantifikációját Syngene szoftverrel (Synoptics, Cambridge, UK) elemeztük.

4.8. Statisztikai analízis

Az adatokat egyetlen szinaptoszomális készítményből nyertük, és nem voltak függetlenek egymástól. A gyógyszer és a kontroll hatásának tesztelésére kétirányú Student-féle t-tesztet alkalmaztunk. Ha további összehasonlításra volt szükség (például, hogy a második kezelés befolyásolta-e az echinakozid hatását), egyutas ANOVA-t, majd Tukey-tesztet alkalmaztunk. Az elemzést az SPSS szoftverrel (17.0; SPSS Inc., Chicago, IL, USA) végezték el. Az adatokat átlag ± SEM-ben fejezzük ki; a szignifikanciát p < 0,05="" értékkel="" értékeltük="" minden="" statisztikai="">

cistanche

5. Következtetések

Ez az első vizsgálat, amely bizonyítja, hogy az echinakozid gátolja a glutamát felszabadulását patkány agykérgi szinaptoszómáiból a Ca2 plusz Cav2.2 és Cav2.1 csatornákon keresztül történő beáramlás csökkentésével, és ez a felszabadulás gátlása valószínűleg a protein kináz C útvonal elnyomásától függ, legalábbis rész. A jelen felfedezés azért értékes, mert újszerű betekintést nyújt az echinakozid agyi hatásmechanizmusaiba.

Köszönetnyilvánítás: Ezt a munkát a Tudományos és Technológiai Minisztérium támogatásával támogatták (MOST 103-2320-B-030-001 MY3).

A szerző közreműködése: Tzu Yu Lin és Su Jane Wang kigondolták és megtervezték a kísérleteket; Cheng Wei Lu végezte a kísérleteket; Cheng Wei Lu és Shu Kuei Huang elemezte az adatokat; Su Jane Wang írta az újságot.

Összeférhetetlenség: A szerzők nem nyilatkoznak összeférhetetlenségről.

cistanche gyógynövény kivonat

Hivatkozások

1. Tu, PF; Wang, B.; Deyama, T.; Zhang, ZG; Lou, ZC A Herba cistanchis fenil-etanol-glikozidjainak elemzése RP-HPLC-vel. Acta Pharm. Bűn. 1997, 32, 294–300.

2. Dalby-Brown, L.; Barnett, H.; Landbo, AK; Meyer, AS; Molgaard, P. Az Echinacea purpurea-ból származó alkamidok, kávésav-származékok és poliszacharid-frakciók szinergikus antioxidáns hatásai humán alacsony sűrűségű lipoproteinek in vitro oxidációjára. J. Agric. Food Chem. 2005, 53, 9413–9423. [CrossRef] [PubMed]

3. Dapas, B.; Dall'Acqua, S.; Bulla, R.; Agostinis, C.; Perissutti, B.; Invernizzi, S.; Grassi, G.; Voinovich, D. Szabványos Echinacea gyökérkivonatot tartalmazó gyógynövényszirup által közvetített immunmoduláció: kísérleti vizsgálat egészséges embereken a citokin génexpresszióról. Fitomedicina 2014, 21, 1406–1410. [CrossRef] [PubMed]

4. Ő, WJ; Fang, TH; Tu, PF Az echinakozid farmakológiai hatásaival kapcsolatos kutatási eredmények. Kína J. Chin. Mater. Med. 2009, 34, 476–479.

5. Deng, M.; Zhao, JY; Tu, PF; Jiang, Y.; Li, ZB; Wang, YH Echinacoside megmenti az SHSY5Y neuronális sejteket a TNFalpha által kiváltott apoptózistól. Eur. J. Pharmacol. 2004, 505, 11–18. [CrossRef] [PubMed]

6. Koo, KA; Sung, SH; Park, JH; Kim, SH; Lee, KY; Kim, YC A Callicarpa dichotoma feniletanoid-glikozidjainak in vitro neuroprotektív hatásai. Planta Med. 2005, 71, 778–780. [CrossRef] [PubMed]

7. Wang, YH; Xuan, ZH; Tian, ​​S.; A Du, GH echinakozid véd a 6-hidroxidopamin által kiváltott mitokondriális diszfunkció és a PC12-sejtek gyulladásos reakciói ellen a ROS-termelés csökkentésével. Evid. alapú kiegészítés. Altern. Med. 2015, 2015, 189239. [CrossRef] [PubMed]

8. Zhu, M.; Lu, C.; Li, W. Az echinakozid átmeneti expozíciója elegendő a Trk jelátvitel aktiválásához és az idegsejtek rotenon elleni védelméhez. J. Neurochem. 2013, 124, 571–580. [CrossRef] [PubMed]

9. Geng, X.; Tian, ​​X.; Tu, P.; Pu, X. Az echinacoside neuroprotektív hatásai a Parkinson-kór egér MPTP-modelljében. Eur. J. Pharmacol. 2007, 564, 66–74. [CrossRef] [PubMed]

10. Wei, LL; Chen, H.; Jiang, Y.; Tu, PF; Zhong, M.; Du, J.; Liu, F.; Wang, L.; Liu, CY Az echinakozid hatása az aktív tömeg histio-centrális szintjére középső agyi artéria elzáródású patkányokban. Biomed. Environ. Sci. 2012, 25, 238–244. [PubMed]

11. Wu, CR; Lin, HC; Su, MH. A Cistanche tubulosa vizes kivonatának megfordítása viselkedési hiányosságokból Alzheimer-kór-szerű patkánymodellben: Relevancia az amiloid lerakódás és a központi neurotranszmitter funkció szempontjából. BMC kiegészítés. Altern. Med. 2014, 14, 202. [CrossRef] [PubMed]

12. Zhao, Q.; Gao, J.; Li, W.; Cai, D. Az echinacosid neurotróf és idegmentő hatásai a Parkinson-kór szubakut MPTP egérmodelljében. Brain Res. 2010, 1346, 224–236. [CrossRef] [PubMed]

13. Meldrum, BS A glutamát mint neurotranszmitter az agyban: fiziológia és patológia áttekintése. J. Nutr.2000, 130, 1007S–1015S. [PubMed]

14. Lee, D.; Shim, MS; Kim, KY; Nem, YH; Kim, H.; Kim, SY; Weinreb, RN; Ju, WK Koenzim Q10 gátolja a glutamát excitotoxicitását és az oxidatív stressz által közvetített mitokondriális változásokat a glaukóma egérmodelljében. Investig. Ophthalmol. Vis. Sci. 2014, 55, 993–1005. [CrossRef] [PubMed]

15. Choi, DW Kalcium és excitotoxikus idegi károsodás. Ann. NY Acad. Sci. 1994, 747, 162–171. [CrossRef][PubMed]

16. Lau, A.; Tymianski, M. Glutamát receptorok, neurotoxicitás és neurodegeneráció. Pflugerek. Boltív. 2010, 460, 525–542. [CrossRef] [PubMed]

17. Sattler, R.; Tymianski, M. A glutamátreceptor által közvetített excitotoxikus neuronális sejthalál molekuláris mechanizmusai. Mol. Neurobiol. 2001, 24, 107–129. [CrossRef]

18. Schauwecker, PE Neuroprotection glutamát receptor antagonisták által rohamok által kiváltott excitotoxikus sejthalál ellen az öregedő agyban. Exp. Neurol. 2010, 224, 207–218. [CrossRef] [PubMed]

19. Yeganeh, F.; Nikbakht, F.; Bahmanpour, S.; Rastegar, K.; Namavar, R. Az NMDA és az I. csoportba tartozó metabotrop glutamát receptor antagonisták neuroprotektív hatásai a homocisztein által kiváltott neurodegeneráció ellen patkány hippocampusban: In vivo vizsgálat. J. Mol. Neurosci. 2013, 50, 551–557. [CrossRef] [PubMed]

20. Doble, A. Az excitotoxicitás szerepe neurodegeneratív betegségekben: implikációk a terápiára. Pharmacol. Ther.1999, 81, 163–221. [CrossRef]

21. Muir, KW Glutamát alapú terápiás megközelítések: Clinical trials with NMDA antagonists.Curr. Opin. Pharmacol. 2006, 6, 53–60. [CrossRef] [PubMed]

22. González, JC; Egea, J.; del Carmen Godino, M.; Fernandez-Gomez, FJ; Sánchez-Prieto, J.; Gandía, L.; García, AG; Jordán, J.; Hernández-Guijo, JM. A neuroprotektáns minociklin csökkenti a glutamáterg neurotranszmissziót és a Ca2 plusz jelátvitelt a hippocampalis neuronokban. Eur. J. Neurosci. 2007, 26, 2481–2495. [CrossRef] [PubMed]

23. Lu, CW; Lin, TY; Wang, SJ A memantin csökkenti a glutamát felszabadulását azáltal, hogy gátolja a feszültségfüggő Ca2 plusz belépést és a protein kináz C-t patkány agykéreg idegvégződéseiben: NMDA receptortól független mechanizmus. Neurochem. Int. 2010, 57, 168–176. [CrossRef] [PubMed]

24. Wang, SJ; Sihra, TS A nem kompetitív metabotróp glutamát 5 receptor antagonista (E)-2-metil-6- sztiril-piridin (SIB1893) csökkenti a glutamát felszabadulását azáltal, hogy gátolja a feszültségfüggő Ca2 plusz bejutását a patkány agykéreg idegvégződéseibe (szinaptoszómáiba). J. Pharmacol. Exp. Ott. 2004, 309, 951–958. [CrossRef] [PubMed]

25. Dunkley, PR; Jarvie, PE; Heath, JW; Kidd, GJ; Rostas, JA Egy gyors módszer szinaptoszómák izolálására Percoll gradienseken. Brain Res. 1986, 372, 115–129. [CrossRef]

26. Araque, A.; Li, N.; Doyle, RT; Haydon, PG SNARE fehérjefüggő glutamát felszabadulás asztrocitákból.J. Neurosci. 2000, 20, 666–673. [PubMed]

27. Dunlop, J. Glutamát alapú terápiás megközelítések: A glutamát transzportrendszer megcélzása.

Curr. Opin. Pharmacol. 2006, 6, 103–107. [CrossRef] [PubMed]

28. Zucchi, R.; Ronca-Testoni, S. A szarkoplazmatikus retikulum Ca2 plusz csatorna/ryanodin receptor: Moduláció endogén effektorok, gyógyszerek és betegségi állapotok által. Pharmacol. Rev. 1997, 49, 1–51. [PubMed]

29. Fan, Y.; Li, J.; Zhang, YQ; Jiang, LH; Zhang, YN; Yan, CQ A protein kináz C delta által közvetített 6-hidroxidopamin citotoxicitása a tartós extracelluláris szignál által szabályozott kináz 1/2 aktiváció révén PC12 sejtekben. Neurol. Res. 2014, 36, 53–64.[CrossRef] [PubMed]

30. Gschwendt, M.; Müller, HJ; Kielbassa, K.; Zang, R.; Kittstein, W.; Rinkke, G.; Marks, F. Rottlerin, egy új proteinkináz inhibitor. Biochem. Biophys. Res. Commun. 1994, 199, 93–98. [CrossRef] [PubMed]

31. Nicholls, főigazgatóság; Sihra, TS; Sanchez-Prieto, J. A glutamát kalciumfüggő és független felszabadulása szinaptoszómákból, folyamatos fluorometriával monitorozva. J. Neurochem. 1987, 49, 50–57. [CrossRef] [PubMed]

32. Nicoll, RA A neurotranszmitter receptorok kapcsolódása az agy ioncsatornáihoz. Science 1988, 241,545–551. [CrossRef] [PubMed]

33. Wu, LG; Saggau, P. A kiváltott neurotranszmitter felszabadulás preszinaptikus gátlása. Trends Neurosci. 1997, 20, 204–212. [CrossRef]

34. Turner, TJ; Dunlap, K. A preszinaptikus kalciumcsatornák farmakológiai jellemzése a synaptoszomális neuroszekréció másodperces biokémiai méréseivel. Neuropharmacology 1995, 34, 1469–1478. [CrossRef]

35. Millan, C.; Sanchez-Prieto, J. N- és P/Q-típusú kalciumcsatornák differenciális csatolása glutamát exocitózishoz patkány agykéregben. Neurosci. Lett. 2002, 330, 29–32. [CrossRef]

36. Vazquez, E.; Sanchez-Prieto, J. A glutamát felszabadulás preszinaptikus modulációja különböző kalciumcsatornákat céloz meg patkány agykérgi idegvégződésekben. Eur. J. Neurosci. 1997, 9, 2009–2018. [CrossRef] [PubMed]

37. Hosszú, P.; Mercer, A.; Begum, R.; Stephens, GJ; Sihra, TS; Jovanovic, JN idegterminális GABAA-receptorok aktiválják a Ca2 plusz/kalmodulin-függő jelzést, hogy gátolják a feszültségfüggő Ca2 plusz beáramlást és a glutamát felszabadulását. J. Biol. Chem. 2009, 284, 8726–8737. [CrossRef] [PubMed]

38. Turner, JR; Szög, JM; Fekete, ED; Joyal, JL; Sacks, DB; Madara, JL A transzepiteliális rezisztencia PKC-függő szabályozása: Roles of MLC and MLC kinase. Am. J. Physiol. 1999, 277, C554–C562. [PubMed]

39. Vaughan, PF; Walker, JH; Peers, C. A neurotranszmitter szekréció szabályozása protein kináz által C. Mol. Neurobiol. 1998, 18, 125–155. [CrossRef] [PubMed]

40. Coffey, ET; Sihra, TS; Nicholls, DG; Pocock, JM A szinapzin I és MARCKS foszforilációját az idegvégződésekben a Ca2 plusz közvetíti egy Aga-GI érzékeny Ca2 plus csatornán keresztül, amely glutamát exocitózishoz kapcsolódik. FEBS Lett. 1994, 353, 264–268. [CrossRef]

41. Obrenovics, TP; Urenjak, J. Megváltozott glutamáterg transzmisszió neurológiai rendellenességekben: A magas extracelluláris glutamáttól a túlzott szinaptikus hatékonyságig. Prog. Neurobiol. 1997, 51, 39–87. [CrossRef]

42. Zhang, D.; Li, H.; Wang, JB Az echinacoside gátolja a HEWL amiloid fibrillizációját, és véd az A-indukált neurotoxicitás ellen. Int. J. Biol. Macromol. 2015, 72, 243–253. [CrossRef] [PubMed]

43. Lin, TY; Lu, CW; Wang, CC; Lu, JF; Wang, SJ A Hispidulin gátolja a glutamát felszabadulását patkány agykérgi idegvégződésekben. Toxicol. Appl. Pharmacol. 2012, 263, 233–243. [CrossRef] [PubMed]

44. Chang, CY; Lin, TY; Lu, CW; Huang, SK; Wang, YC; Chou, SS; Wang, SJ A heszperidin gátolja a glutamát felszabadulását és neuroprotektív hatást fejt ki a káinsav által kiváltott excitotoxicitás ellen patkányok hippokampuszában. Neurotoxicology 2015, 2015, 157–169. [CrossRef] [PubMed]

45. Nicholls, főigazgatóság; Sihra, TS A Synaptosomes exocitotikus glutamátkészlettel rendelkezik. Nature 1986, 321, 772–773.[CrossRef] [PubMed]

46. ​​Wang, CC; Kuo, JR; Wang, SJ Dimebon, egy antihisztamin gyógyszer, gátolja a glutamát felszabadulását patkány agykérgi idegvégződéseiben. Eur. J. Pharmacol. 2014, 734, 67–76. [CrossRef] [PubMed]

47. Tibbs, GR; Barrie, AP; van Mieghem, FJ; Mc-Mahon, HT; Nicholls, DG Ismétlődő akciós potenciálok izolált idegvégződésekben 4-aminopiridin jelenlétében: Hatás a citoszolikus szabad Ca2 plusz és glutamát felszabadulására. J. Neurochem. 1989, 53, 1693–1699. [CrossRef] [PubMed]

48. Akerman, KE; Scott, LG; Heikkila, JE; Heinonen, E. A membránpotenciál és a glutamátreceptor-kapcsolt válaszok ionfüggősége szinaptoneuroszómákban cianin festékkel mérve, DiSC2(5).J. Neurochem. 1987, 48, 552–559. [CrossRef] [PubMed]

49. Sihra, TS; Bogonez, E.; Nicholls, DG Localized Ca2 plus belépés előnyösen befolyásolja a fehérje defoszforilációját, foszforilációját és glutamát felszabadulását. J. Biol. Chem. 1992, 267, 1983–1989. [PubMed]

50. Grynkiewicz, G.; Poenie, M.; Tsien, RY A Ca2 plus indikátorok új generációja jelentősen javított fluoreszcencia tulajdonságokkal. J. Biol. Chem. 1985, 260, 3440–3450. [PubMed]