Az akut vesekárosodás (AKI) és a krónikus vesebetegség (CKD) kapcsolata
Mar 25, 2022
Kapcsolatfelvétel: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 E-mail:audrey.hu@wecistanche.com
Ⅱ RÉSZ: A SIK1 szerepe az akut vesekárosodás krónikus vesebetegséggé való átmenetében
Jinxiu Hul, JiaoQiaot, Qun Yul, Bing Liu1 és mások.
Absztrakt
Háttér:Akut vese sérülés(AKI), magas morbiditású és mortalitású, kockázati tényezőként ismertkrónikus vesebetegség(CKD). AKI-CKD(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség) az átmenetet a vesebetegségek egyik legsürgetőbb kielégítetlen szükségletének tekintették. A közelmúltban a tanulmányok kimutattáksóval indukálható kináz 1(SIK1) szerepet játszik az epithelialis-mesenchymalis átmenetben (EMT) és a gyulladásban, amelyek az AKI-CKD jellemzői(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet. Azonban, hogy a SIK1 részt vesz-e az AKI-CKD-ben(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenetet és milyen mechanizmussal szabályozza az AKI-CKD-t(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)az átmenet ismeretlen marad.
cistanche gyógynövény
Módszerek: Először AKl-es betegek és AKI egerek veseszövetében detektáltuk a SIK1 expresszióját immunogén-kémiai állóképesség segítségével, majd létrehoztuk az arisztolochsav (AA) által indukált AK-CK) átmeneti modellt (57BI /6 egerekben és HK2 sejtekben). Ezt követően immunhisztokémiai festést, ELISA-t, valós idejű PCR-t, Western blot-ot, immunfluoreszcens festést és Transwell-vizsgálatot végeztünk, hogy feltárjuk a SIK1 szerepét és mögöttes mechanizmusát AKI-CKD-n.(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet.
Eredmények: A SIK1 expressziója csökkent volt AKI-s betegekben, AKI egerekben, AA-indukált AKI-CKD-ben(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmeneti egerek és HK2 sejtek. A funkcionális elemzés kimutatta, hogy a SIK1 túlzott expressziója enyhítette az AA-indukált AKI-CKD-t(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet és HK2 sejtek sérülése in vivo és in vitro. Mechanikusan megmutattuk, hogy a SIK1(sóval indukálható kináz 1) által közvetített AA-indukált AKI-CKD(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet a WNT/-catenin jelátvitel szabályozásával, amely az EMT-ben, a gyulladásban és a vesefibrózisban szerepet játszó kanonikus útvonal. Ezenkívül felfedeztük, hogy a WNI/-catenin útvonal és annak downstream transzkripciós faktora, az Iwist1 gátlása javította a HK2 sejtek sérülését, késleltetve az AKI-CKD progresszióját.(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet.
Következtetések: Vizsgálatunk először igazolta a SIK1 védő szerepét az AK-CKD-ben(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet a WNT/-catenin jelátviteli útvonal és annak downstream transzkripciós faktora, a Twist1 szabályozásával, amely újszerű betekintést nyújt az AKI-CKD megelőzésére és kezelésére(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet a jövőben.
Kulcsszavak:AA. SIK1.AKI-CKD(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet. Wnt/B-catenin, Twist1
cistanche tubolosa kivonat: krónikus vesebetegségek kezelése
A RÉSZÉHEZ KATTINTSON IDE Ⅰ
Vita
AKI(Akut vese sérülés) súlyos népegészségügyi probléma, magas morbiditással és halálozással. A múltban az AKI(Akut vese sérülés)reverzibilisnek és a vesefunkció átmeneti romlásának tekinthető. Azonban a közelmúltban végzett tanulmányok fokozatosan rájöttek, hogy a vesefunkció helyreállítása az AKI-t túlélő betegeknél(Akut vese sérülés)gyakran hiányos [23-25]. Egy metaanalízis arról számolt be, hogy az AKI-ban szenvedő betegek(Akut vese sérülés)nagyobb volt a CKD kialakulásának kockázata (krónikus vesebetegség) és ESDR, összehasonlítva az AKI-ben nem szenvedő betegekkel(Akut vese sérülés)[26]. A közelmúltban az AKI-CKD mechanizmusa(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)az átmenet egyre több figyelmet keltett a nefrológusok körében. Számos tényező, például a nephron elvesztése, az érrendszeri elégtelenség, az endothel sérülés, a sejtciklus zavara, az intersticiális gyulladás és a fibrózis, valamint a maladaptív javító mechanizmusok vezethetnek az AKI kialakulásához.(Akut vese sérülés)CKD-be [27]. A patofiziológiai mechanizmusok a következők:(1)Az AKI után(Akut vese sérülés), a gyulladásos sejtek gyulladásos faktorokat és kemokineket szabadítanak fel, és a folyamatos gyulladás a vesefunkció elvesztéséhez vezethet [28];(2) Nephron elvesztése, endothel sérülés, érrendszeri hibás működés, ami a vese tubuláris mikrokörnyezetének iszkémiájához és hipoxiához, valamint a tubuláris intersticiális tubuláris fibrózisához vezet. [27];(3)Az AKI után(Akut vese sérülés), a tubuláris hámsejtek EMT-n mennek keresztül, hogy miofibroblasztokat termeljenek a hámból a sérült szövetek gyógyulására. Ha a sérülés enyhe és akut, a gyógyulási folyamat reparatív fibrózisnak minősül; Folyamatos krónikus gyulladás esetén azonban a myofibroblasztok kóros képződése progresszív fibrózishoz vezethet, amely után ECM-felhalmozódás, majd a szervi parenchyma pusztulása következik be [29];(4) A G2/M sejtciklus leállt a vese tubuláris epithelialisban. sejteket az AKI után(Akut vese sérülés), amely aktiválhatja a pro-fibrotikus jelátviteli útvonalat a profibrotikus citokintermelés indukálásához [30]. Ebben a vizsgálatban az AA-t használtuk az AKI-CKD progressziójának imitálására(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet in vivo és in vitro, és megfigyeltük, hogy az AA stimuláció gyulladást, EMT-t és fibrózist válthat ki, ami az AKI-CKD sikeres létrejöttére utal.(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmeneti modell.
Bőséges bizonyíték támasztja alá a SIK1 szerepét az EMT-ben [8-10] és a gyulladásban [1, 31], amelyek az AKI-CKD jellemzői.(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet. Például arról számoltak be, hogy az LKB{0}}SIK1 jelátviteli útvonal gátolta az EMT-t azáltal, hogy szabályozta néhány kulcsfontosságú transzkripciós faktor, köztük a Snail2, Twist és a ZEB1 expresszióját [32]. Az utóbbi időben a SIK1 szerepe a vesekárosodásban jelentős figyelmet kapott. Ferrandi és munkatársai arról számoltak be, hogy a nephrin és a SIK1 együttes lokalizációja a glomeruláris podocitákban, és pozitív korreláció van a nephrin és a SIK1 fehérje expressziója között patkányokban és humán vesemintákban[12]. Ezenkívül a SIK1 részt vesz az ALK5 jelátviteli útvonal által közvetített, magas glükóz-indukált mezangiális sejtproliferációban és az extracelluláris mátrix felhalmozódásában [6]. A fentiek mind azt jelzik, hogy a SIK1 létfontosságú szerepet játszik a vesekárosodásban. A SIK1 erősen konzervált szerint (Thrl82) tartalmaz a kináz doménben. A SIK1-et Thrl82-nél foszforiláló LKB1 AMPK-aktivátor aktiválása után az aktivált SIK1 autofoszforilálja a Ser186-ot, majd fenntartja a SIK1 tartós aktivitását a Serl86-Thr182} GSK{ általi szekvenciális foszforilációja révén. [33]. Ebben a tanulmányban felfedeztük, hogy a SIK1 expressziója csökkent az AKI-ban(Akut vese sérülés)betegek és az AKI(Akut vese sérülés)egereket, felkeltve érdeklődésünket annak további vizsgálatára, hogy a SIK1 részt vett-e az AKI-CKD-ben(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet. Az AA-val kezelt HK2 sejtekben és C57BL/6 egerekben a SIK1 szintjének felmérésével azt tapasztaltuk, hogy a SIK1 és a p-SIK1(Thr182) leszabályozott az AA stimuláció hatására. A SIK1 csökkent aktivitásának és fehérjeszintjének korrelációja AA-kezelés alatt összhangban van a HBZY-1 sejtekben tapasztalt eredményekkel, amelyekben a Thr182 foszforiláció szintje korrelált a SIK1 fehérje szintjével magas glükózzal stimulálva [6]. Sőt, a jelenlegi tanulmányban feltártuk a SIK1 nukleáris újraeloszlását AA stimulációt követően HK2 sejtekben, ami a SIK1 kináz aktivitás csökkenéséből eredhet [6,34,35]. További munkára van szükség annak a mechanizmusnak a jellemzésére, amellyel az AA lokalizálja a SIK1-et a sejtmagban. Továbbá megállapítottuk, hogy a SIK1 túlzott expressziója késleltette az AA által indukált gyulladás, EMT és fibrózis progresszióját mind in vivo, mind in vitro. Így arra a következtetésre jutottunk, hogy az AA AKI-CKD-t indukál(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenetet a SIK1 és foszforilációs szintjének gátlásával.
cistanche tubulosa gyökerei
Számos intracelluláris jelátviteli útvonal vesz részt az EMT és a vesefibrózis expressziójában és aktiválásában, beleértve a TGF-jelátviteli útvonalat, a PI3K/AKT útvonalat, az Src útvonalat, a MAPK útvonalat és a WNT jelátviteli útvonalat [36-41]. , a WNT/-catenin jelátviteli útvonalat, a legklasszikusabb WNT útvonalat széles körben tanulmányozták. Bőséges adatok arra utalnak, hogy a WNT/-catenin jelátvitel létfontosságú szerepet játszik az EMT-ben [42,43], a gyulladásban [44,45] és a vesefibrózisban [46-48]. A -catenin, egy multifunkcionális fehérje, a WNT jelátviteli útvonal központi molekulája. Ha nincs WNT jel stimuláció, a -catenin főként az E-cadherin proximális C-terminális doménjéhez kapcsolódik a sejtmembránban; Amikor WNT-jel stimulálja, a -catenin a sejtmagba transzlokálódik, és a TCF/LEF transzkripciós faktorokhoz kötődik, hogy stimulálja a WNT célgének transzkripcióját [49,50]. A -catenin(Y654) foszforilációja az E-cadherin fehérjéből való felszabadulásához vezet, és növeli a TCF által közvetített transzkripciós aktivitást, kiegyensúlyozva szerepét a sejtadhézió és a WNT jelátvitel között [51]. Ezenkívül a -catenin(Y654) megnövekedett foszforilációs szintje fokozhatja a sejtmigrációt és tumorsejt-inváziót indukálhat [52]. Ebben a vizsgálatban azt találtuk, hogy az AA stimuláció aktiválta a WNT/-catenin jelátviteli útvonalat, és fokozta a TCF és a LEF transzkripciós aktivitását. Ezenkívül megfigyeltük, hogy a -catenin leütése enyhítette az AA által kiváltott gyulladásos választ, az EMT-t és a fibrózist, ami arra utal, hogy a WNT/ -catenin jelátviteli út részt vesz az AKI-CKD-ben.(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenetet, ami összhangban volt egy korábbi vizsgálattal [17]. Továbbá felfedeztük a SIK1 által szabályozott WNT/-catenin jelátviteli útvonalat mind in vivo, mind in vitro, ami tovább erősíti a SIK1 szerepét az AA-indukált AKI-CKD-ben.(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet.
Az EMT és a vesefibrózis szabályozásához erőteljes transzkripciós mechanizmusra van szükség. Az EMT-t és a fibrózist aktiváló transzkripciós faktorok alapvetően három nagy csoportra oszthatók: csiga transzkripciós faktorok, ZEB transzkripciós faktorok és bHLH transzkripciós faktorok. A csiga egy cink ujjfehérje, amely transzkripciós represszorként működik azáltal, hogy felismeri az E-boxot a célgén promóterében, és a csiga fokozott expressziója részt vesz az EMT-ben [53]. A Snail hatásához hasonlóan a Twist1 leszabályozta az epiteliális fenotípushoz kapcsolódó gének expresszióját, és indukálta a mesenchymális fenotípushoz kapcsolódó gének expresszióját [54]. A Snail és a Twist1 szerepe az AA által kiváltott AKI-CKD folyamatában(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)az átmenet még mindig nem teljesen érthető. Ebben a vizsgálatban azt találtuk, hogy az AA elősegítette a Snail és Twist fehérje és mRNS expresszióját, míg a knockdown -catenin gátolta a Snail és Twist1 AA által indukált expresszióját. Továbbá megfigyeltük, hogy az siRNS által elhallgatott Twistl enyhítette az EMT előfordulását és az AA által kiváltott vesefibrózis progresszióját, ami arra utal, hogy a Twistl fontos szerepet játszik az AA által kiváltott AKI-CKD-ben.(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet. További vizsgálatokra van szükség annak meghatározására, hogy a SIK1 szabályozhatja-e a Twistl expresszióját az AKI-CKD során(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet.
cistanche tubolosa kivonat: krónikus vesebetegségek kezelésére és veseelégtelenség megelőzésére
Következtetés
Ebben a vizsgálatban kimutattuk, hogy a SIK1 részt vett az AA által kiváltott AKI-CKD-ben(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenetet, és megmutattuk, hogy a SIK1 részt vett az AKI-CKD-ben(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet a WNT/ -catenin jelátviteli útvonalon (9. ábra). A SIK1 felszabályozása vagy a WNT/-catenin jelátviteli út gátlása enyhíti az AA által kiváltott gyulladást, EMT-t és fibrózist, késleltetve az AKI-CKD progresszióját(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet. Ezek a megfigyelések új terápiás célpontot jelentenek az AKI utáni vesefibrózis klinikai megelőzésében és kezelésében(Akut vese sérülés).
cistanche tubulosa
Hivatkozások
1. Maciel AT, Delphino Salles L, Vitorio D. Imed Research Group of I Simple blood and urinary parameters measured at ICU admission may sign for AK development in the early postoperative period: a retrospective, exploratory study. Ren Fail. 2016;38(10):1607-15.
2. Venkatachalam MA, Weinberg JM, Kriz W, Bidani AK. Sikertelen tubulus helyreállítás, AKI-CKD(Akut vesekárosodás akrónikus vesebetegség)átmenet és a vesebetegség progressziója. J Am Soc Nephrol.2015;26(8):1765-76.
3. Jones J, Holmen J, De Graauw J, Jovanovich A, Thornton S, Chonchol M. A teljes gyógyulás társulásaakut vese sérülésincidens CKD-vel(krónikus vesebetegség)3. stádium és minden ok miatti halálozás.Am J Kidney Dis.2012;60(3):402-8. 4. ChawlaLS, Kimmel PL. Akut vesekárosodás és krónikus vesebetegség: integrált klinikai szindróma. Kidney Int. 2012;82(5):516-24.
